酪氨酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1在23种肿瘤细胞系中的表达及其意义

背景与目的:酪氨酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1可能在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用。本研究探讨EphA2/EFNA1在不同肿瘤细胞中的表达及其意义。方法:用RT-PCR方法,检测了23种人类肿瘤细胞系中EphA2/EFNA1在mRNA水平上的表达。并用Western blot方法检测了EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中的表达水平。结果:RT-PCR结果显示,除白血病细胞K562和HL60,以及视网膜母细胞瘤RB几乎检测不到EphA2/EFNA1外,EphA2/EFNA1高表达于肝癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、胃腺癌、脑胶质瘤、膀胱癌、成骨肉瘤及恶性黑色素瘤等20种细胞系中。Western blot结果显示,除K562外,EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中均有表达。结论:EphA2/EFNA1高表达于人类多种肿瘤细胞中,并且EFNA1的表达水平相对低于EphA2的表达。E-phA2/EFNA1可作为一个较为广谱的肿瘤标记,并有可能成为肿瘤治疗的靶点。

EphA2/ephrinA1与人脑胶质瘤发生的关系及靶向治疗潜能探讨

恶性脑胶质瘤发生发展同酪氨酸蛋白激酶(receptor tyrosine kinases,RTK)受体EphA2及其配体ephrinA1的表达功能与肿瘤细胞中的信号转导密切相关,EphA2和ephrinA1的表达受肿瘤细胞种类和微环境的影响,进而诱导肿瘤细胞及相关细胞信号转导,产生相应的生物学行为。EphA2、ephrinA1系统有望成为恶性脑胶质瘤药物治疗的新靶点。

卵巢癌组织中EphA2与ERβ的表达

目的:探讨卵巢癌组织中EphA2与雌激素受体ERβ的表达及相关性。方法:应用免疫组化法对118例卵巢癌组织进行EphA2、ERβ检测,对其中10例EphA2及ERβ阳性表达的冰冻组织标本,应用激光捕获显微切割技术(LCM)捕获卵巢癌细胞,应用Western印迹分析方法检测其中EphA2及ERβ蛋白表达水平。结果:卵巢癌组织中ERβ及EphA2阳性率分别为99.2%(117/118)和90.7%(107/118);EphA2表达与卵巢癌患者的年龄、组织学类型及残余肿瘤大小无关(P>0.05),而与FIGO分期、组织分化程度有关(P<0.05);ERβ表达与卵巢癌患者的年龄、组织学类型、FIGO分期、残余肿瘤大小无关(P>0.05),与组织分化程度有关(P<0.05);ERβ与EphA2的表达有相关性(rs=0.184,P<0.05)。Western印迹分析,EphA2蛋白和ERβ蛋白条带强度一致。结论:ERβ与E-phA2蛋白可能与卵巢癌的进展有关。

EphA2及其配体在子宫内膜样腺癌中的表达及其与血管生成的关系

目的:探讨生促红素肝细胞受体A2(EphA2)及其配体ephrin-A1在子宫内膜样腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法:利用免疫组织化学法检测56例子宫内膜样腺癌、20例子宫内膜增生过长、30例正常子宫内膜增殖期和30例分泌期组织中EphA2、ephrin-A1、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达,并采用CD34抗体标记微血管内皮细胞,计算微血管密度(MVD)。分析EphA2和ephrin-A1的表达与MVD之间的相关性及其与子宫内膜样腺癌临床病理特征的关系。结果:子宫内膜样腺癌组织中EphA2和ephrin-A1的表达显著高于子宫内膜样增生过长及正常子宫内膜(P<0.05);EphA2和ephrin-A1表达水平及MVD值与子宫内膜样腺癌FIGO分期、肿瘤分化程度、肌层浸润深度、淋巴微血管浸润和孕激素受体表达有关(P<0.05);Spearman等级相关分析表明EphA2和ephrin-A1表达分别与MVD呈显著正相关(r=0.476,P<0.05;r=0.501,P<0.05)。结论:EphA2及其配体ephrin-A1在子宫内膜样腺癌中高表达,可能参与了肿瘤血管生成和孕激素抵抗。

ER、PR和EphA2在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和EphA2基因的表达及其与淋巴结转移、临床分期的关系及联合检测对乳腺癌术后治疗方案的制定和在预后中的意义。方法采用S-P免疫组化方法检测130例乳腺癌患者ER、PR和EphA2的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果(1)乳腺癌组织中ER、PR和EphA2的阳性表达率分别为63.1%、58.4%和72.3%。(2)ER、PR的阳性表达与乳腺癌患者的年龄、病理组织学类型、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移和临床分期无显著相关(P>0.05);(3)EphA2阳性表达与乳腺癌患者的年龄、肿瘤大小、病理组织学类型无显著相关(P>0.05);而与腋窝淋巴结转移、临床分期显著相关(P<0.05)。(4)EphA2的阳性表达率在乳腺癌ER\PR阴性组明显高于乳腺癌ER\PR阳性组(P<0.05)。结论ER、PR和EphA2与乳腺癌的发生、发展有关,联合检测ER、PR和EphA2有助于客观评估乳腺癌的生物学行为,有助于指导临床用药和预测预后。

受体酪氨酸激酶EphA2在肾细胞癌发生及发展中的作用

Eph(Erythropoietin producing hepatocellular carcinoma)基因家族属于受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinases,RTKs)家族中最大的一个亚族,可分为EphA和EphB。Eph基因家族参与很多生理活动,同时Eph基因的过表达也可导致细胞的恶性转化。近年来,研究发现EphA2基因的表达与肾细胞癌的分级、淋巴结转移、无瘤生存期等都直接相关,也与肾细胞癌的发生、发展和预后有关。为此,EphA2基因可能成为诊断、预测肾细胞癌的恶性程度及判断预后的生物学标记物,为肾细胞癌的生物治疗提供新靶点和新思路。

应用流式细胞术检测EphA2及其调节基因HoxA1、C-myc在喉癌组织中的表达及相互关系

目的从蛋白水平探讨HoxA1、C-myc、EphA2与喉癌发生发展的关系,从分子生物学角度探讨喉癌的发病机制。方法①喉癌组织40例及癌旁组织40例,取15例非喉癌患者的喉部正常黏膜组织做对照。所有肿瘤组织均经病理学确诊为鳞状细胞癌,癌旁组织及喉部正常黏膜均经病理证实为炎症或正常黏膜。②应用流式细胞术检测喉癌组织、癌旁组织及喉部正常黏膜组织的EphA2和HoxA1、C-myc蛋白表达的含量。结果 EphA2蛋白、HoxA1蛋白、C-myc蛋白在喉癌组织中的表达量分别高于癌旁组织和正常喉黏膜组织,而癌旁组织与正常黏膜组织间的表达差异无统计学意义。喉癌组织中EphA2蛋白与HoxA1蛋白、C-myc蛋白有多元线性回归关系,EphA2蛋白与HoxA1蛋白呈正相关,与C-myc蛋白呈负相关,Y=0.983+0.739X1-0.323X_2(P=0.000)。结论 EphA2蛋白、HoxA1蛋白和C-myc蛋白在喉癌中的表达与喉癌的发生发展有关。

EphA2在鼻咽癌致病过程中的作用及治疗靶点展望

促红细胞生成素产生肝细胞受体(erythropoietin-producing hepatocellular receptor,Eph)及其配体ephrin,是最大受体酪氨酸激酶(RTK)家族,由于配体ephrin和Eph受体均结合在细胞膜上,激活的信号转导通路,一般发生在直接接触的细胞之间,具有双向信号转导的独特特点。Eph受体-ephrin配体导致排斥性细胞收缩反应在许多生理和病理过程中起重要作用,在16种Eph受体中,EphA2与肿瘤的联系最强,因此已被广泛研究。肿瘤细胞中的EphA2信号传导可能具有促进肿瘤或抑制肿瘤的作用,取决于肿瘤微环境,EphA2具有需要配体和激酶活性的经典信号,也具有不需要配体或激酶活性的非经典信号形式。本文就近年来Epha2在鼻咽癌致病过程中非受体依赖机制和作为EB病毒感染关键分子的作用及治疗靶点展望等研究进展进行综述,以期为鼻咽癌的预防和治疗提供新的思路。

人脑星形细胞瘤中EphA2表达与肿瘤血管生成关系的研究

目的探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在人脑星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤血管生成的关系。方法用免疫组化方法测定78例人脑星形细胞瘤和8例正常脑组织（NB）中EphA2蛋白表达情况。用免疫组化方法检测肿瘤微血管密度（MVD）。结果EphA2蛋白阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞浆和细胞膜，呈棕黄色颗粒，肿瘤血管内皮细胞也呈阳性表达。在78例星形细胞瘤中，EphA2阳性表达率为93．6％，而正常脑组织中无EphA2表达，二者差异有统计学意义（P〈0．01）。而且随着肿瘤恶性程度增加，EphA2蛋白染色强度和阳性细胞数均明显升高，高级别星形细胞瘤（Ⅲ～Ⅳ）与低级别星形细胞瘤（Ⅰ～Ⅱ）相比差异有统计学意义（P〈0．05）。随着EphA2阳性表达强度增加，肿瘤组织的MVD也逐渐增加，从0～3级分别为（19．65±8．12）个／mm^3、（27．50±11．36）个／mm^3、（40．28±12．51）个／mm^3和（61．44±13．80）个／mm^3，组间差异有统计学意义（F=6．308，P=0．001）。EphA2表达与MVD显著相关（r=7．094，P〈0.01）。结论EphA2可作为判定人脑星形细胞瘤恶性程度的重要指标，与肿瘤微血管生成相关，有可能成为星形细胞瘤治疗的一个新靶点。

EphA2受体表达与卵巢癌侵袭性的关系

目的探讨酪氨酸蛋白激酶受体EphA2在卵巢癌组织中的表达意义及其与卵巢癌微血管生成之间的相关性。方法应用免疫组化方法检测76例卵巢癌标本和20例卵巢良性病变中EphA2蛋白的表达情况,并分析EphA2表达与卵巢癌临床病理学因素及微血管生成之间的关系。结果卵巢癌中EphA2的阳性表达率77.6%(59/76)明显高于卵巢良性病变的表达率25.0%(5/20),P<0.01。晚期卵巢癌(III/IV期)EphA2的阳性表达率84.4%(54/64)明显高于早中期卵巢癌(I/II期)41.7%(5/12),P<0.01。高级别卵巢癌(III级)E-phA2的阳性表达率82.5%(52/63)高于低级别卵巢癌(I/II级)的阳性表达率53.8%(7/13),P<0.05。EphA2表达与患者的年龄、肿瘤的组织学类型、淋巴结转移及有无腹水无明显相关性(P>0.05)。免疫组化结果还发现,除卵巢癌细胞外,肿瘤组织内微血管内皮细胞也有EphA2受体蛋白表达。CD34染色后卵巢癌的微血管密度(MVD)与EphA2表达水平有显著相关性(P<0.05),EphA2阳性表达强度高的肿瘤区域有较高的微血管密度。结论EphA2过表达提示卵巢癌具有较强的侵袭性,或可作为卵巢癌一个重要的治疗靶点。

浸润性乳腺癌组织肝配蛋白A型受体2(EphA2)高表达且与细胞焦亡负相关

目的探讨肝配蛋白A型受体2(EphA2)参与浸润性乳腺癌中细胞焦亡(pyroptosis)的机制。方法采用Western blot法检验乳腺癌患者癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织EphA2、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、白细胞介素1β(IL-1β)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白表达水平;采用免疫荧光技术检测45例乳腺癌患者癌组织和癌旁组织中EphA2表达情况;用Pearson相关系数对患者癌组织EphA2的蛋白表达与细胞焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1和IL-1β进行相关性分析。结果与正常乳腺组织及癌旁组织相比,乳腺癌组中NLRP3、caspase-1、IL-1β和ICAM-1的蛋白表达水平明显降低,EphA2蛋白表达明显升高;EphA2水平与细胞焦亡相关蛋白NLRP3、caspase-1和IL-1β均呈负相关性。结论乳腺癌组织EphA2高表达,且与细胞焦亡呈负相关。

屋尘螨提取物激活气道上皮细胞EphA2-STAT3/p38 MAPK信号通路介导气道炎症

目的探讨受体酪氨酸激酶肝配蛋白A型受体2(EphA2)对屋尘螨提取物(HDM)诱导气道上皮细胞表达炎症细胞因子的作用及其机制。方法用EphA2小干扰RNA(siRNA)转染气道上皮细胞株16HBE细胞建立EphA2敲减的细胞模型,HDM刺激16HBE细胞后,采用实时定量PCR检测EphA2、白细胞介素6(IL-6)和IL-8 mRNA水平,细胞因子微球检测技术(CBA)检测IL-6、 IL-8、 IL-17A、 IL-17F和肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白水平;Western blot法检测EphA2、磷酸化的EphA2(p-EphA2)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)、 p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK)、核因子κB p65(NF-κB p65)及磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白水平。STAT3抑制剂Stattic联合HDM或p38 MAPK抑制剂SB203580联合HDM刺激16HBE细胞,实时定量PCR检测IL-6和IL-8 mRNA水平、 CBA检测IL-6和IL-8蛋白水平。结果敲低EphA2显著抑制HDM诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8,降低STAT3及p38 MAPK的总蛋白及磷酸化水平,但对NF-κB p65总蛋白及磷酸化水平均无明显影响。Stattic抑制STAT3表达及活化后,显著抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA和蛋白表达;而SB203580抑制p38 MAPK信号通路后,抑制HDM诱导16HBE细胞中IL-6和IL-8 mRNA表达水平,而对其蛋白水平无影响。结论 HDM通过激活EphA2-STAT3/p38 MAPK通路诱导16HBE细胞表达IL-6和IL-8参与气道炎症。

EPHA2抗体对结直肠癌西妥昔单抗耐药的逆转作用

目的明确结直肠癌(CRC)病人西妥昔单抗治疗前后EPHA2的表达水平,并探索EPHA2抗体能否逆转西妥昔单抗的耐药。方法收集8例KRAS野生型CRC病人在西妥昔单抗治疗前及疾病进展后的配对肿瘤组织标本,采用免疫组化方法检测EPHA2的表达水平。使用西妥昔单抗处理其敏感细胞系、原发及继发耐药的CRC细胞系,以MTT方法检测细胞增殖能力。使用EPHA2抗体DS-8895a、西妥昔单抗单药或联合处理原发及继发耐药的CRC细胞,检测各组细胞增殖能力。结果在西妥昔单抗治疗前及进展后的肿瘤组织中,存在治疗后EPHA2表达的上调(t=6.056,P<0.05)。在KRAS野生型CRC细胞系中,DS-8895a与西妥昔单抗有协同增敏作用;而在西妥昔单抗继发耐药CRC细胞系中,DS-8895a可逆转西妥昔单抗的耐药。结论 EPHA2抗体与西妥昔单抗联合可能具有逆转西妥昔单抗继发耐药作用,以及潜在的协同增敏作用。EPHA2有可能成为CRC治疗策略的新突破。

抑制EphA2受体对内毒素性急性肺损伤的保护作用

目的:探讨抑制EphA2受体对内毒素性急性肺损伤的保护作用。方法:将成年SD大鼠随机分为对照组(C组)、LPS组(L组)和抑制剂组(M组),检测给予LPS后1 h、3 h和6 h血清中炎症细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素(IL-6)水平的变化,检测大鼠肺组织湿/干重(W/D)比值,检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性的变化。结果:与对照组相比,L组在3个时间点TNF-α和IL-6的含量升高(P<0.05);而给予EphA2/Fc后,M组TNF-α和IL-6的含量低于L组(P<0.05);与对照组相比,LPS组肺组织W/D的比值和MPO活性升高(P<0.05),而给予EphA2/Fc后,M组W/D的比值和MPO活性低于L组(P<0.05)。结论:使用抑制剂EphA2/Fc抑制EPh A2受体对内毒素性急性肺损伤有保护作用,EphA2受体可以作为急性肺损伤研究治疗的新靶点。

抑制EphA2受体对内毒素性急性肺损伤的保护作用研究

分析抑制EphA2受体对内毒素性急性肺损伤的保护作用。选取我院收治的39例内毒素性急性肺损伤患者为观察组,另选取39例同一时期的健康志愿者作为对照组,观察两组治疗前后TNF-a水平、IL-6水平、MPO活性水平的变化情况。观察组治疗前TNF-a水平、IL-6水平、MPO活性水平显著高于对照组(P<0.01),差异具有统计学意义。采用抑制EphA2受体治疗后,观察组的TNF-a水平、IL-6水平、MPO活性水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在内毒素性急性肺损伤患者的临床治疗中,抑制EphA2受体具有显著的保护作用,可作为治疗急性肺损伤患者的新靶点。

Eph受体在卵巢癌中的研究进展

促红细胞生成素肝细胞(erythropoietin-producing hepatocellular,Eph)受体是酪氨酸受体家族中的一员,广泛表达于人类多种组织或细胞中,具有调节细胞生长、迁移及血管形成的潜在作用。近年来研究发现,EphA2、EphB2、EphB4在卵巢癌中呈现高表达,这种高表达与肿瘤的增殖、转移、血管形成和侵袭性相关,与患者预后负相关,有可能成为卵巢癌患者的预后指标或治疗靶点。

促红细胞生成素肝细胞A2受体及其配子ephrinA1与恶性肿瘤关系的研究进展

促红细胞生成素肝细胞(EphA2)及其配体ephrinA1的表达、功能及其在肿瘤细胞中的信号转导与多种恶性肿瘤发生发展密切相关,EphA2和ephrinA1的表达受肿瘤细胞种类和微环境的影响,进而诱导肿瘤细胞及相关细胞信号转导,产生相应的生物学行为。EphA2、ephrinA1系统有望成为恶性肿瘤药物治疗的新靶点。

EphA_2与肿瘤

酪氨酸蛋白激酶受体(receptor tyrosine kinases,RTKs)参与细胞增生和分化、胚胎发育和细胞内信号转导等过程,具有重要的生理功能。生促红素人肝细胞(erythropoietin-producing human hepatocelluar,Eph)A2是Eph受体酪氨酸蛋白激酶家族RTKs中的一员,广泛表达在人类多种组织或细胞系中,对调节细胞生长、迁移及血管形成有潜在的作用。EphA2过表达可导致细胞的恶性转化,增强肿瘤细胞的侵袭性和转移性。EphA2有望成为恶性肿瘤治疗的新的靶点和预后指标。

miR-141的过表达抑制MHCC-97H肝癌细胞的增殖和侵袭迁移

目的观察肝细胞癌组织中miR-141的表达水平,通过上调MHCC-97H肝癌细胞中miR-141的水平观察对MHCC-97H细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法实时定量PCR检测miR-141在肝癌及癌旁组织中的表达水平,并分析miR-141表达水平与临床病理指标的关系及生存率。利用人工合成的miR-141模拟物,瞬时转染MHCC-97H细胞。MTT法检测MHCC-97H细胞的增殖,TranswellTM实验检测MHCC-97H细胞的侵袭及迁移,Westernblot法及免疫组织化学检测miR-141下游潜在靶点肝细胞产生的促红素受体A2(EphA2)的表达。结果miR-141在肝癌组织中表达水平显著低于相应癌旁组织;肝癌组织中miR-141低表达与TNM分期、门静脉侵犯及Edmondson分级显著相关;低表达miR-141患者3年生存率明显低于高表达组;miR-141模拟物转染可上调MHCC-97H细胞miR-141水平,上调miR-141可显著抑制MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移,并下调EphA2的蛋白水平;miR-141低表达组EphA2蛋白水平明显高于miR-141高表达组,相关性分析显示肝癌组织中miR-141与EphA2蛋白表达呈显著负相关。结论miR-141在肝癌组织中表达下调且与EphA2表达呈显著负相关,其低表达与肝癌恶性临床病理特征有关,上调miR-141表达可抑制EphA2的表达抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。

EphA 2在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

[目的]探讨上皮细胞激酶2（EphA2）在膀胱移行细胞癌（Bladder transitional cell carcinoma BTCC ）中的表达及意义。[方法]采用Western blotting 和 RT-PCR技术测定20例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜EphA2蛋白和 EphA2 mRNA的表达。[结果]EphA2蛋白在BTCC中的表达明显高于正常膀胱黏膜（ P ＜0．01），在BTCC低分化组表达强于高分化组；EphA2 mRNA在BTCC中的表达高于正常膀胱黏膜（ P＜0．01），与BTCC的分化程度无关（ P＝0．295）。[结论]EphA2将成为判定膀胱癌恶性程度的指标，EphA2 mRNA表达强度与EphA2蛋白表达强度不完全一致。提示转录后的调控机制干预了 BTCC中EphA2的表达。