靶向沉默EphA8基因对人结肠腺癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:通过转染siRNA片段,研究EphA8基因沉默后对结肠腺癌Ls174T细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:设计合成三对靶向沉默EphA8基因表达的siRNA片段,通过Lipofectamine2000介导转染人结肠腺癌细胞Ls174T。采用实时荧光定量PCR技术和Western Blot检测EphA8基因沉默效率,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。结果:三对siRNA片段均能沉默结肠腺癌Ls174T细胞EphA8 mRNA的表达,siRNA3抑制效果最明显,抑制率为85.71%。流式细胞术检测细胞凋亡结果显示:转染48 h后,Ls174T细胞实验组细胞凋亡率为33.29%;流式细胞术检测细胞周期结果显示:转染60 h后,结肠腺癌Ls174T细胞实验组S期细胞和G2期细胞比例显著降低。结论:本实验成功筛选出特异性靶向沉默EphA8基因的siRNA片段,并初步鉴定了EphA8基因的功能。

EphA8在非小细胞肺癌中的表达及其预后价值

目的:探讨EphA8(ephrin type-A receptor 8)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:收集167例NSCLC术后石蜡包埋的组织标本,制作组织芯片,利用免疫组织化学技术测定EphA8蛋白在肿瘤组织中的表达情况,分析EphA8蛋白表达与患者临床病理特征及5年生存率的相关性。结果:NSCLC肿瘤组织中EphA8蛋白阳性表达率为54.5%,其表达水平与肿瘤大小、TNM分期、原发肿瘤分级及淋巴结转移有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。单因素Cox回归分析显示,EphA8表达(P=0.030)及肿瘤大小(P=0.012)是影响NSCLC患者生存率的重要因素;多因素Cox回归分析显示,EphA8表达(P=0.046)及肿瘤大小(P=0.018)是NSCLC独立的预后因素,EphA8高表达、肿瘤体积大预示患者预后不良。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,EphA8高表达患者5年总生存率低于EphA8低表达患者,肿瘤直径≥3 cm患者5年总生存率低于肿瘤直径<3 cm患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:EphA8可作为临床评估NSCLC的预后指标,高表达提示患者预后不良。

EphA8在结肠癌组织中的表达和临床意义

目的探讨EphA8在结肠癌组织中的表达情况和临床意义。方法采用实时定量RT．PCR和Westernblot检测EphA8mRNA和蛋白在1种正常结肠黏膜细胞株和2种结肠癌细胞株中的表达情况。采用免疫组织化学法检测98例结肠癌组织和12例正常结肠组织中EphA8和血管内皮生长因子（VEGF）的蛋白表达情况，同时使用CD31染色检测肿瘤微血管密度（MVD）情况，并分析EphA8与VEGF和MVD的关系及其与病理分期、预后的关系。结果EphA8的mRNA在结肠癌细胞株的表达明显高于正常结肠黏膜细胞株（t=11．98，13．54，均P〈0．001）。EphA8蛋白在结肠癌细胞株的表达也明显高于正常结肠黏膜细胞株（t=4．63，P=0．006；t=4．92，P=0．004）。免疫组织化学结果表明EphA8蛋白在结肠癌组织高表达，且癌组织中EphA8的蛋白表达与肿瘤大小（X^2=22．97，P〈0．001）、分期（P〈0．001）、分化程度（P=0．007）、淋巴结转移（P〈0．001）、远处转移（X^2=6．97，P=0．008）以及患者生存率（X^2=17．3，P〈0．001）存在显著相关性，而与患者的性别和年龄没有明显相关性（X^2=1．36，P=0．30；X^2=0．83，P=0．44）。此外，EphA8与VEGF和MVD的表达呈正相关（r=0．434，P〈0．001；r=O．584，P〈0．001）。结论EphA8在结肠癌的恶性发展和转移中有重要作用，因此，EphA8对于结肠癌的治疗干预和预后判断具有潜在的临床应用价值。