血府逐瘀汤促血管新生中EphB4/ephrinB2信号通路的作用研究

目的:探讨Eph B4/ephrin B2信号通路在血府逐瘀汤促血管新生中的作用。方法:运用血清药理学方法,以1.25%、2.5%、5%浓度的血府逐瘀汤含药血清和空白血清干预人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC-12)48h,通过MTT法、Boyden小室迁移法、细胞黏附法、逆转录PCR法分别检测细胞增殖、迁移、黏附、Eph B4和Ephrin B2基因表达的情况。结果:与同血清含量的对照组比较,5%浓度含药血清对细胞的增殖能力起抑制作用。1.25%、2.5%和5%3个浓度含药血清皆有显著的促内皮细胞迁移和黏附作用,并能抑制Eph B4的表达,其中1.25%、2.5%浓度含药血清抑制Ephrin B2的表达。结论:血府逐瘀汤通过促内皮细胞迁移和黏附发挥促血管新生作用,且该作用可能与Eph B4/Ephrin B2通路密切相关。

sEphB4对糖尿病视网膜病变兔模型视网膜血管内皮细胞EphB4/EphrinB2和VEGF表达的影响

目的探讨s Eph B4对糖尿病视网膜病变兔模型视网膜血管内皮细胞Eph B4/Ephrin B2和VEGF表达的影响。方法选8~10周的雄兔8只为实验对象,建立糖尿病视网膜病变兔模型。将所有DR兔的右眼作为药物干预组,为药物干预组,分别予s Eph B4 200、500、1000μg各50μL玻璃体腔注入。左眼作为对照组,予以生理盐水50μL玻璃体腔注入。每月注射1次,治疗6个月后,应用检测兔眼视网膜及玻璃体增殖膜Eph B4、Ephrin B2和VEGF的表达。结果随着s Eph B浓度的不断增加,Eph B4、Ephrin B2、VEGF水平逐渐降低,且均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 s Eph B4可抑制糖尿病视网膜病变兔视网膜新生血管内皮细胞Eph B4/Ephrin B2和VEGF的表达。

骨髓间充质干细胞与骨髓瘤细胞共培养时EphB4/ephrinB2表达异常

目的:研究正常骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在与骨髓瘤细胞株U266、RPMI8226共培养过程中,骨髓瘤细胞对MSC EphB4/ephrinB2表达的影响。方法:应用Transwell培养体系,将正常骨髓MSC分别与骨髓瘤细胞株U266、RPMI8226细胞共培养7、12 d后分别应用实时定量RT-PCR和细胞免疫化学方法检测骨髓MSC的EphB4/ephrinB2mRNA和蛋白表达水平。结果:骨髓MSC与U266、RPMI8226共培养后,与对照组MSC相比,生长和形态未见明显改变,应用实时定量RT-PCR方法检测骨髓MSC EphB4/ephrinB2的mRNA水平较对照组均降低,在共培养7 d的时间点上除EphB4在RPMI8226共培养组与对照组差异无统计学意义,其余组间差异均有统计学意义(P<0.05),在12 d上差异无统计学意义(P>0.05)。细胞免疫化学结果显示共培养组MSC胞膜胞浆EphB4/ephrinB2表达下降。结论:骨髓瘤细胞株U266、RPMI8226在与正常骨髓MSC共培养后,诱导骨髓MSC EphB4/ephrinB2表达的下调,可能通过MSC成骨-破骨活动的脱耦合,参与骨髓瘤骨病的发生。

EphB4/ephrinB2逆向信号对RAW264.7破骨细胞分化中PDZ结构域蛋白表达变化的研究

Eph受体是酪氨酸蛋白激酶受体家族中最大的亚家族,ephrin(Eph受体相互作用蛋白)是其配体,它们是膜结合蛋白,相互依赖进行信号转导.内居蛋白(syntenin)与Pick1属于PDZ结构域(PSD-95/Dlg-/Zo-1 domain)蛋白,报道称能与ephrinB配体结合,但是否受Eph受体调控尚未见报道.以RAW264.7细胞株为研究对象,通过蛋白质印迹及/或免疫荧光分析显示RAW264.7细胞经RANKL诱导的破骨细胞表达ephrinB2、内居蛋白(syntenin)和Pick1三个蛋白质.将提前成簇的可溶性EphB4蛋白加入培养液,与ephrinB2配体结合,用来研究EphB4/ephrinB2逆向信号对syntenin和Pick1表达水平变化的影响.免疫印迹及Real-time RT-PCR分析结果显示,在EphB4-Fc实验组中Pick1的蛋白质及mRNA水平都有明显增加,然而在EphB4-Fc实验组与Fc对照组别间syntenin的蛋白质及mRNA水平未见明显变化.免疫共沉淀结果显示,syntenin和Pick1不能与ephrinB2共沉淀.以上结果初步探索了体外破骨细胞分化过程中,EphB4/ephrinB2逆向信号对PDZ结构域蛋白(ephrinB2配体潜在的下游信号分子)表达变化的调控.

EphB4/EphrinB2对血管生成的影响及中医药作用研究进展

血管相关性疾病已经成为危害人类健康的重大疾病之一,促血管新生和抗血管新生机制的研究也已成为中医药研究领域的热点问题。EphB4和EphrinB2均属于膜结合型蛋白,相对于其他酪氨酸激酶受体,EphB4和EphrinB2在自身活化和信号转导方面表现出独特的方式,在信号转导过程中二者均可被对方激活,产生"正向信号"和"反向信号"。已有研究发现,EphB4/EphrinB2独特的双向信号在血管生成过程中起着重要的双向调节作用,并且有可能成为中医药影响血管生长的新的研究方向。

EphB4/ephrinB2在血管形成及动静脉分化中的功能及机制

EphB4和ephrinB2间的信号转导是双向的,即EphB4和ephrinB2可互被对方激活,一般规律是ephrinB2激活EphB4为正信号,而EphB4激活ephrinB2为逆信号。双向信号与上下游信号组成信号通路,调控血管形成过程中的动静脉分化。

雌激素通过调节EphB4/EphrinB2信号参与破骨细胞分化

目的研究雌激素通过调节EphB4/EphrinB2信号通路对破骨细胞分化的影响。方法 (1)采用RANKL诱导法培养卵巢摘除骨质疏松模型(OVX)组和假手术(Sham)组小鼠的破骨细胞,于第10天提取两组细胞的RNA和蛋白质样品,通过RT-PCR和Western blot检测细胞EphrinB2表达的变化;(2)采用雌激素及雌激素拮抗剂分别诱导培养RAW264.7破骨细胞,培养第8天提取RNA和蛋白质样品,利用RT-PCR和Western blot检测细胞EphrinB2表达的变化;(3)在OVX模型组小鼠的破骨细胞培养中添加EphrinB2配体EphB4-Fc片段,通过RT-PCR检测破骨细胞标志物的表达和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色并计数,观察破骨细胞分化能力的变化。结果卵巢摘除骨质疏松模型组小鼠EphrinB2的表达量低于假手术组(P<0.01);雌激素拮抗剂组EphrinB2的表达量低于对照组(P<0.01),而雌激素组EphrinB2的表达量高于对照组(P<0.05);给予EphrinB2的配体EphB4-Fc片段后,OVX组小鼠的破骨细胞标志物表达量降低(P<0.01,P<0.001),TRAP染色阳性细胞数减少。结论雌激素可以通过调节破骨细胞EphrinB2的表达影响破骨细胞分化,采用EphB4-Fc片段处理后,OVX组小鼠增强的破骨细胞分化受到抑制。

续苓健骨方联合阿仑膦酸钠调控EphB4/EphrinB2双向通路对去卵巢骨质疏松大鼠的研究

目的观察续苓健骨方联合阿仑膦酸钠对去卵巢快速骨丢失模型大鼠骨密度、结构、骨代谢和EphB4/EphrinB2信号通路的影响,探讨其作用机制。方法50只雌性SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、续苓健骨方组、阿仑膦酸钠组和联合用药组,行双侧卵巢切除术制备模型;药物分别干预12周后取材,DXA检测股骨骨密度,HE染色观察胫骨组织显微结构,ELISA检测血清Ⅰ型胶原交联C末端肽(S-CTX)和Ⅰ型原胶原N端前肽(PINP)水平,Real-time PCR和Western blot检测腰椎EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,模型组骨密度显著降低(P<0.001),骨小梁稀疏并且排列紊乱,S-CTX和PINP含量均增高(P<0.01),骨组织EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.001)。与模型组相比,3个药物组骨密度均增高,其中以联合用药组最佳(P<0.001),骨小梁较密并且排列规则,S-CTX含量不同程度降低,PINP含量不同程度增高,EphB4、EphrinB2 mRNA和蛋白表达水平均增高。结论续苓健骨方联合阿仑膦酸钠起协同作用,可能通过激活EphB4/EphrinB2信号通路改善骨组织显微结构和血清骨代谢指标,从而提高大鼠骨密度起抗骨质疏松作用。

实验性正畸牙移动过程中EphB4/ephrinB2促成骨作用的研究进展

正畸治疗过程中,对牙齿施加相对缓慢而持久的轻力可通过牙周膜组织传导至牙槽骨,从而引起骨改建,达到牙齿移动的目的。机械张力作用于牙周膜成纤维细胞(PDLF)后激活ephrinB2,随后PDLF与邻近PDLF和成骨细胞通过EphB4/ephrinB2相互作用,两者协同促进成骨。本文简要介绍PDLF对张力产生应答后激活EphB4/ephrinB2并促进成骨相关机制的最新进展。

EphrinB2/EphB4-Fc蛋白片段腹腔注射对去卵巢小鼠骨质疏松的防治作用

目的探讨腹腔注射促红细胞生成素肝细胞激酶受体配体B2(EphrinB2)/促红细胞生成素肝细胞激酶受体B4(EphB4)蛋白片段对去卵巢小鼠骨质疏松的防治效果。方法取7周龄健康雌性C57BL/6小鼠39只,随机分为假手术组、模型组、干预组,每组各13只。模型组、干预组通过摘除小鼠卵巢组织建立绝经模型,假手术组仅切除卵巢组织周围脂肪组织。造模术后1周,干预组给予腹腔注射EphrinB2-Fc蛋白片段以及EphB4-Fc蛋白片段0.1 mg/(kg·d),假手术组和模型组注射等量生理盐水,继续喂养16周。小鼠脱颈处死,取出股骨,采用力学测试机测试三点弯曲力学性能,获得弹性模量、最大载荷;取腰椎、股骨和颅骨,采用双能X线骨密度检测仪检测骨密度和骨小梁厚度;取第5腰椎和远端股骨,采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色法检测破骨细胞数量;采集小鼠腹主静脉血,酶联免疫吸附法检测血清碱性磷酸酶(ALP)、脱氧吡啶啉(DPD)。取小鼠股骨和胫骨,收集骨髓腔冲洗液中的细胞,采用RT-PCR法检测EphrinB2、EphB4 mRNA,Western blotting法检测EphrinB2、EphB4蛋白。结果与假手术组相比,模型组骨弹性模量、最大载荷降低;与模型组相比,干预组骨弹性模量、最大载荷升高(P均<0.05)。与假手术组相比,模型组骨密度、骨小梁厚度降低;与模型组相比,干预组骨密度、骨小梁厚度升高(P均<0.05)。模型组破骨细胞数量多于假手术组和干预组(P均<0.05)。与假手术组相比,模型组血清ALP、DPD水平降低;与模型组相比,干预组血清ALP、DPD水平升高(P均<0.05)。与假手术组相比,模型组骨组织EphrinB2、EphB4 mRNA和蛋白表达水平下降;与模型组相比,干预组骨组织EphrinB2、EphB4 mRNA和蛋白表达水平升高(P均<0.05)。结论过表达EphrinB2/EphB4信号通路蛋白能够改善去卵巢小鼠的骨力学性能,减少破骨细胞数量,提升骨代谢指标,从而防治绝经后骨质疏松。

调控EphB4/EphrinB2信号通路治疗绝经后骨质疏松症的研究进展

骨细胞骨吸收活性和成骨细胞骨生成活性相互调控,构成了一个独特的耦合关系,对骨质疏松病人的骨骼生长和保持其正常的骨组织形态具有重要意义。近年来,EphB4/EphrinB2通路被认为是调控骨质疏松发生发展的重要机制之一。现从中西医角度分析调控EphB4/EphrinB2信号通路治疗绝经后骨质疏松症的相关研究作一阐述,重点分析左归丸调控EphB4/EphrinB2信号通路治疗绝经后骨质疏松症的内在潜力。

模拟失重下EphrinB2/EphB4通路在共培养体系中血管平滑肌细胞增殖及凋亡中的作用

目的探究模拟失重下EphrinB2/EphB4通路对共培养体系中血管平滑肌细胞的增殖及凋亡的影响,为探索失重环境下航天员心血管功能失调的机制提供思路。方法利用细胞回转器对人主动脉内皮细胞(HAECs)和人主动脉平滑肌细胞(HASMCs)的共培养体系进行模拟失重处理,分为正常重力(Control)组、模拟失重(MG)组,培养48 h后,采用qRT-PCR和Western blotting检测HASMCs中EphB4、EphrinB2的表达变化情况,加入EphB4抑制剂NVP-BHG712,观察其对模拟失重下共培养体系中HASMCs的α平滑肌动蛋白(α-SMA)、HASMCs增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)等表达的影响;采用免疫荧光检测尾悬吊28 d大鼠颈动脉平滑肌细胞中EphB4的表达情况。结果HAECs和HASMCs共培养48 h后,与Control组相比,MG组HASMCs中EphB4和EphrinB2水平明显升高(P<0.05),α-SMA及Bax表达显著下降(P<0.05),PCNA与Bcl-2表达显著增高(P<0.05);与MG组相比,共培养体系中加入EphB4通路抑制剂NVP-BHG712可以使模拟失重下的HASMCs中Bax和α-SMA表达显著升高(P<0.05),PCNA和Bcl-2表达显著下降(P<0.05)。结论模拟失重效应通过EphrinB2/EphB4通路促进共培养体系中HASMCs的增殖,促进HAECs和HASMCs共培养体系中HASMCs向合成表型转换,并抑制凋亡。

补肾壮骨方通过EphB4/Ephrin-B2轴缓解绝经后骨质疏松

目的:探讨补肾壮骨方是否通过EphB4/Ephrin-B2轴缓解绝经后骨质疏松。方法:采用临床疗效确切的补肾壮骨方灌服绝经后骨质疏松小鼠模型,取BALB/c小鼠50只,随机分为正常对照组、假手术对照组、去势手术组、补肾壮骨方组、雌激素组。正常对照组、假手术对照组与去势手术组灌服生理盐水,补肾壮骨方组、雌激素组分别灌服等体积补肾壮骨方、雌激素,灌胃12周后处死小鼠,取血和骨进行检测。ELISA检测E2、FSH、LH性激素水平及骨生化指标;Western blot检测EphB4、Ephrin-B2蛋白表达水平;Micro-CT成像检测骨密度和骨小梁参数。结果:去势手术组小鼠体重高于其他4组(P<0.05);在性激素方面,去势手术组FSH、LH水平明显高于其他4组,E2水平低于其他4组(P<0.05)。在骨生化指标方面,去势手术组ALP明显高于其他4组,Ca、P含量明显低于其他4组(P<0.05)。在骨密度及骨结构参数方面,去势手术组BMD、BV/TV、Tb.Th显著低于其他4组(P<0.05),补肾壮骨方组与雌激素组中BMD、BV/TV低于正常对照组与假手术组(P<0.05)。Western blot检测提示去势手术组EphB4蛋白表达的显著低于其他4组(P<0.05),补肾壮骨方组与雌激素组低于正常对照组与假手术对照组(P<0.05);Ephrin-B2蛋白表达在去势手术组显著高于其他4组(P<0.05),补肾壮骨方组与雌激素组高于正常对照组与假手术对照组(P<0.05)。结论:补肾壮骨方通过调节EphB4/Ephrin-B2信号轴缓解绝经后骨质疏松,为临床应用补肾壮骨方提供可靠证据。

机械扩张力作用下小鼠腭中缝EphB4和ephrinB2表达的研究

目的观察小鼠腭中缝在机械扩张力作用的不同阶段EphB4/ephrinB2分布和表达规律。方法选用6周龄健康雄性C57BL/6小鼠40只,随机分成对照组和实验扩张组,每组各20只。用双眼簧扩弓器施加扩张力(0.56 N)于实验加力组小鼠的腭中缝区。实验组分别于加力后1、3、7、14 d抽取5只小鼠通过石蜡切片免疫组化对EphB4/ephrinB2进行组织定位,观察表达规律并与未施力的对照组比较。结果扩张组EphB4/ephrinB2表达水平高于对照组,差异具有统计学意义。第3天实验组EphB4/ephrinB2表达水平表达最高。结论对小鼠腭中缝施加扩张力的情况下能够诱导EphB4/ephrinB2的表达增加,说明EphB4/ephrinB2在腭中缝扩张新骨改建过程中具有重要意义。

EphB4及其配体EphrinB2在食管鳞癌中表达及其与血管生成的关系

目的:探讨EphB4受体及其配体EphrinB2在食管鳞癌组织中的表达及其与血管生成的关系。方法:应用免疫组织化学Envision plus法检测60例食管鳞癌和10例癌旁组织中EphB4受体及其配体EphrinB2的表达和VEGF的表达,采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测60例食管鳞癌和10例癌旁食管组织中EphB4、EphrinB2和VEGF mRNA的相对含量,并分析EphB4、EphrinB2和VEGF的表达的相关性。结果:食管鳞癌组织中EphB4、EphrinB2、VEGF mRNA和蛋白的表达均高于癌旁正常食管黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。EphB4 mRNA和EphrinB2 mRNA表达正相关(r=0.541,P<0.05),EphB4 mRNA、EphrinB2 mRNA均和VEGF mRNA表达正相关(r=0.642,r=0.582;P均<0.05)。结论:EphB4和EphrinB2在食管鳞癌中高表达,与血管生成密切相关。

血府逐瘀胶囊调控EphB4/EphrinB2促血管适度生长的实验研究

目的研究血府逐瘀胶囊适度促血管新生的作用及其对EphB4/EphrinB2表达的影响。方法通过检测血府逐瘀胶囊含药血清对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line 1,HMEC-1)活性、细胞周期、迁移、黏附和体外成血管的影响,明确药物具有适度促血管新生的作用,并运用实时定量PCR、Western blot技术检测药物对EphB4/EphrinB2表达的影响。结果血府逐瘀含药血清对内皮细胞活性及S期细胞比例均无影响。细胞迁移方面,1.25%含药血清作用24、48、72 h均显著增加细胞迁移能力;但2.50%含药血清在最初24 h抑制细胞迁移,随后显著促进迁移,与5.00%含药血清的影响趋势正好相反。细胞黏附方面,1.25%含药血清作用72 h时显著减少黏附细胞数;2.50%药物血清在前两个时间段增加细胞黏附数,随后在72 h抑制细胞黏附;5%含药血清在24 h表现出抑制作用,而在48 h转为促进,随后作用消失。成血管方面,仅2.50%含药血清表现出促进作用,而5.00%含药血清作用48 h和72 h均出现抑制现象。2.50%含药血清组的实时定量PCR和Western blot结果显示,药物作用12 h上调EphB4的表达,作用24 h下调EphB4表达的同时上调EphrinB2的表达。结论仅2.50%含药血清作用48 h对HMEC-1的迁移、黏附和体外成血管均有促进作用,为最佳促血管生长条件,提示血府逐瘀胶囊促血管新生作用具有一定的条件限制,而药物调控EphB4/EphrinB2的表达是其重要因素之一。

应用激光共聚焦显微术检测脑星形细胞瘤中EphrinB2及EphB4蛋白的表达

背景与目的:EphrinB2是一种新型促血管生成因子。EphrinB2与其受体EphB4可表达于多种肿瘤细胞,并与肿瘤发生及血管生成有关。本研究旨在了解EphrinB2及EphB4蛋白在脑星形细胞瘤中的表达规律,并初步探讨其可能意义。方法:利用双标免疫荧光分别检测EphB4/EphrinB2蛋白与胶质纤维酸性蛋白(glialfibrilaryacidprotein,GFAP)或CD34蛋白在35例脑星形细胞瘤新鲜标本及人脑胶质瘤细胞系CHG-5、SHG-44中的共表达,以LeicaSP2激光共聚焦显微镜观察、摄像并分析。结果:EphB4或EphrinB2蛋白与CD34蛋白可在部分间质血管内共表达,定位于血管内皮细胞。在肿瘤细胞及两种细胞系,亦可见EphB4或EphrinB2蛋白与GFAP的共表达。在分化程度较低的SHG-44细胞中,EphB4或EphrinB2平均荧光强度分别为72.48±33.78和96.80±36.98,均强于相应分化较好的CHG-5细胞(56.7±21.7和53.6±18.8),而CHG-5细胞GFAP绿色荧光强度(47.5±16.7)较SHG-44细胞(22.3±15.3)则明显增强。结论:EphB4/EphrinB2蛋白表达可能与肿瘤细胞的分化程度有关。

靶向EphB4的慢病毒干扰载体对结肠癌细胞中EphB4及EphrinB2表达的影响

目的有研究显示Eph B4在肿瘤发生发展中的作用与其配体Ephrin B2密切相关。文中主要通过慢病毒介导的RNA干扰技术干扰结肠癌细胞中Eph B4基因的表达,观察Eph B4基因表达改变对其配体Ephrin B2表达的影响。方法根据Eph B4基因序列设计并合成3对miRNA的oligo DNA,退火形成双链后与pc DNA6.2-GW/Em GFP-miRNA载体相连并瞬时转染HEK293细胞,通过荧光显微镜、q PCR筛选出干扰效率最高的质粒,将其与中间载体p DONR221和慢病毒载体p Lenti6/V5-DEST连接构建慢病毒表达载体p Lenti6/V5-DEST-Eph B4。用脂质体将慢病毒载体以及包装质粒(p LP1、p LP2和p LP/VSVG)共转染293FT细胞,收集上清Lenti-miR-Eph B4感染HEK293细胞株进行滴度鉴定。将获得的病毒液感染人结肠癌细胞株,通过荧光显微镜和q PCR检测结肠癌细胞中Eph B4及其配体Ephrin B2的表达变化。结果测序结果表明3对干扰载体SR1、SR2、SR3序列与参考序列一致,成功转染HEK293细胞后,各转染组细胞荧光显微镜下均可见到绿色荧光蛋白表达;q PCR显示载体SR-3的沉默效率最高;构建出来的慢病毒载体p Lenti6.3/V5-DEST-miR-Eph B4在293FT细胞中包装成功,所得慢病毒滴度为7×108TU/m L;Lenti-miR-Eph B4浸染后,SW480和Caco-2中Eph B4 mRNA相对表达量(0.49±0.02、0.62±0.04)均较原始SW480(1.00±0.00)和Caco-2降低(1.00±0.00),差异有统计学意义(P=0.000);SW480中Ephrin B2 mRNA表达量F(2.11±0.04)较原始SW480(1.00±0.00)明显升高(P=0.000);而Caco-2细胞中Ephrin B2 mRNA表达无明显改变(1.01±0.02),差异无统计学意义(P=0.315)。结论靶向Eph B4的慢病毒干扰载体能够有效降低SW480及Caco-2细胞中Eph B4 mRNA表达水平。Eph B4与其配体Ephrin B2之间的相互作用可能受到多种因素调控,有待后续深入研究。

EphrinB2/EphB4在牙槽骨吸收-重建过程中的作用

目的初步探讨EphrinB2/EphB4信号在牙槽骨吸收及骨重建过程中的表达及其意义。方法采用RT-PCR及Western blot方法分别检测小鼠RAW264.7细胞体外诱导前后、小鼠MC3T3-E1细胞骨吸收上清处理前后EphrinB2及EphB4的表达情况。以免疫组化(S-P)法、免疫荧光等方法检测大鼠实验性牙槽骨吸收模型牙体牙周联合标本中EphrinB2、EphB4的表达情况。结果 EphrinB2和EphB4在小鼠RAW264.7细胞、MC3T3-E1细胞中均有明显的表达,骨吸收上清作用于MC3T3-E1细胞后,分化的成骨细胞EphrinB2表达量(17.53±0.43)较阴性对照组(15.67±0.45)有显著升高(P<0.01);采用E-LPS注射法成功制备了稳定、可靠的实验性大鼠牙槽骨吸收模型,模型中免疫荧光结果可见EphB4和EphrinB2分别在牙槽骨缘成骨细胞及破骨细胞存在区的高信号。结论 EphrinB2/EphB4信号参与了骨吸收-重建过程,成骨细胞和破骨细胞均可共表达EphrinB2/EphB4并可能存在成骨细胞间的EphrinB2/EphB4传导完成促进成骨活动。

EphB4和EphrinB2 mRNA在子宫颈癌组织中的表达及其与血管生成的关系

目的检测EphB4和EphrinB2 mRNA在子宫颈癌组织中的表达,探讨其在子宫颈癌发生、发展及血管生成过程中的作用。方法采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)法检测90例子宫颈癌、15例子宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和15例正常宫颈组织中EphB4和EphrinB2 mRNA的表达,同时利用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法检测上述组织的微血管密度(MVD),分析EphB4和EphrinB2 mRNA的表达与各种临床病理参数和血管生成的关系。结果尽管所有子宫颈组织中均可检测出EphB4和EphrinB2 mRNA的表达,但是EphB4 mRNA在子宫颈癌(125.59±16.63)和CIN(122.61±17.30)组织中的表达强度均高于其在正常宫颈组织中的表达(95.72±4.63)(P均<0.05)。EphrinB2 mRNA在子宫颈癌组织中的表达强度(111.11±22.86)明显高于其在CIN(94.48±6.30)和正常宫颈组织中的表达(93.56±7.89)(P均<0.05)。EphB4 mRNA在子宫颈癌组织中的表达强度与子宫颈癌的临床分期和肿瘤直径密切相关(P均<0.05)。EphrinB2 mRNA在子宫颈癌组织中的表达强度只与子宫颈癌的肿瘤直径密切相关(P<0.05)。正常宫颈组织、CIN和子宫颈癌组织中MVD逐渐增加,分别为(11.33±2.38),(26.47±7.47)和(42.97±9.99)。子宫颈癌组织中EphB4和EphrinB2 mRNA的表达均与MVD呈正相关。结论EphB4和EphrinB2在子宫颈癌的发生、发展及血管生成过程中可能起重要的作用。