麻黄-细辛药对提取物对哮喘模型小鼠气道重塑的影响

目的探讨麻黄-细辛药对提取物对哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法将30只Balb/c小鼠分为对照组、模型组、麻黄-细辛组,各10只。除对照组外,其他两组建立哮喘小鼠模型。建模后第18天起给予麻黄-细辛组麻黄-细辛药对提取物雾化吸入治疗,给予对照组和模型组小鼠等体积生理盐水雾化吸入。观察各组小鼠肺组织形态,检测各组小鼠增强呼气间歇值(Penh),肺支气管肺泡灌洗液(BALF)中各类白细胞比例,BALF和血清的白细胞介素(IL)-6和IL-17水平,以及肺组织的Yes相关蛋白(YAP)、YAP mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。结果各组小鼠吸入相应浓度乙酰甲胆碱后,模型组小鼠Penh均高于对照组,麻黄-细辛组小鼠Penh均低于模型组(均P<0.05)。模型组小鼠的BALF中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及中性粒细胞比例,BALF和血清中IL-6及IL-17水平,以及肺组织中TGF-β1蛋白和α-SMA表达水平,YAP及其mRNA表达水平均高于对照组(均P<0.05);与模型组比较,麻黄-细辛组上述指标水平均降低(均P<0.05)。结论麻黄-细辛药对提取物能够减轻哮喘模型小鼠的气道反应性和炎症反应,并可能通过下调IL-17、IL-6、TGF-β1、α-SMA、YAP等因子的表达而抑制哮喘模型小鼠的气道重塑。

麻黄根总黄酮提取工艺的考察

目的:优选麻黄根总黄酮的提取工艺。方法:以麻黄根总黄酮的含量及收率为评价指标,对纯化方法进行优选,并在此基础上采用正交试验法优选出最佳工艺参数。结果:最佳纯化工艺为加8倍量50%乙醇搅拌20 min。结论:此工艺操作简便,重现性好,适合于大工业生产。

麻杏止咳胶囊质量标准的研究

目的:制定麻杏止咳胶囊的简便快捷的质量标准。方法:对制剂中的麻黄与甘草在同一块薄层板上进行了鉴别,采用高效液相法测定了麻杏止咳胶囊中麻黄碱和伪麻黄碱的含量。结果:通过方法学考察,盐酸麻黄碱的进样量在0.03968～0.8928μg范围内,呈良好的线性关系。盐酸麻黄碱的平均回收率为99.22%(n=9),RSD为1.18%。结论:方法简便、准确、重现性好、精密度高。可用于快速、准确地控制中药制剂质量。

基于GC-MS的小青龙汤挥发性成分研究

探讨小青龙汤组方药材组成复方前后挥发油成分和比例的变化.采用《中国药典》挥发油测定甲法提取小青龙汤复方、组方中含挥发油的单味药(麻黄、桂枝、细辛、干姜、五味子)及各单味药的阴性对照处方的挥发油,并采用GC-MS联用技术对其进行分析比较,应用峰面积百分比法计算相对百分含量.从小青龙汤中共鉴定出80个挥发性成分,其中百分含量较高的是甲基丁香酚(9.98%)、姜烯(9.86%)、肉桂醛(7.61%)、黄樟醚(7.56%)、衣兰烯(6.74%).另对各色谱峰进行归属,其中71个色谱峰已归属至药材,占已鉴定总峰个数的87.32%.小青龙汤、单味药及各药材阴性对照品中的挥发性成分存在差异.复方新增1,4-钙二烯、(-)-吉马烯、α-古芸烯等9个化合物,同时单味药中也存在个别挥发性成分未在复方中检测到.各单味药之间存在着促进或抑制溶出现象.在含挥发性成分的中药组成复方的汤剂中,不仅存在挥发性成分量的变化,还存在一系列成分间的相互作用和转化导致的质的变化,即生成新的化合物.

中药麻黄根的研究概述

麻黄根为传统中药,历代本草均记载其具有止汗功效。本文通过查阅国内外麻黄根研究的相关文献,对麻黄根近40年的化学成分、生物活性及临床应用进行了综述,为合理开发利用麻黄根奠定基础。

麻黄对甘草3个成分血药浓度的影响

目的采用UPLC-MS/MS法探讨甘草与麻黄配伍后对甘草中入血成分甘草酸、甘草次酸和甘草苷药动学的影响。方法将12只大鼠随机分成2组,各组分别灌胃给予单味甘草和麻黄-甘草(2∶1)水煎液后,于不同时间点采血,所得血药浓度-时间数据经DAS3.2.2计算相关的药动学参数。结果与单味甘草组相比,麻黄-甘草(2∶1)组甘草苷、甘草次酸和甘草酸的AUC_(0-t)(药-时曲线下面积)和C_(max)(最大血药浓度)均下降,MRT_(0-t)(平均驻留时间)和t_(1/2z)(血浆消除半衰期)均推迟,V_z/F(表观分布容积/吸收分数)均增大;甘草苷和甘草酸的CL_z/F(总体清除率/吸收分数)均增大;甘草酸的T_(max)(达峰时间)缩短了,甘草次酸的T_(max)则推迟了。结论甘草与麻黄配伍后,降低了甘草酸、甘草次酸和甘草苷的生物利用度,延缓了三者在体内的消除,增大了三者在体内的分布体积。

四逆二陈麻辛汤加味联合糖皮质激素治疗慢性喘息性支气管炎75例

目的:观察四逆二陈麻辛汤加味联合糖皮质激素治疗慢性喘息性支气管炎的临床疗效。方法:将150例慢性喘息性支气管炎患者按照随机数字表法分成对照组与观察组,每组各75例。对照组采用糖皮质激素治疗,观察组在对照组的基础上联合四逆二陈麻辛汤。观察两组患者的临床疗效,比较两组患者治疗前后中医证候积分及肺功能[一秒用力呼气容积(Forced expiratory volume in one second,FEV_1)、呼气流量峰值(peak expiratory flow,PEF)及FEV_1/用力肺活量(forced vital capacity,FVC)]变化情况。结果:观察组有效率为92.00%,对照组有效率为80.00%,两组患者临床疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后各积分均低于治疗前,且观察组喘息、哮鸣、胸闷积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗后FEV_1、FEV_1/FVC、PEF均高于治疗前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:四逆二陈麻辛汤加味联合糖皮质激素治疗慢性喘息性支气管炎,可提高临床疗效,改善症状及肺功能。

亲水作用色谱-质谱法测定麻黄根多糖单糖的组成

目的:建立一种亲水相互作用色谱-质谱(HILIC-UPLC-MS/MS)检测分析方法,用于直接检测麻黄根多糖的单糖组成。方法:采用ACQUITY UPLC BEH Amide色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相A为乙腈-水(95∶5),B为乙腈-水(5∶95),柱温60℃,梯度洗脱(0~10 min,92%~70%A;10~10.1 min,70%~92%A;10.1~15 min,92%A),进样量2μL,流速0.2 m L·min^(-1);质谱采用电喷雾离子源,负离子模式下多反应离子检测。Turbo V离子源参数如下:毛细管电压-4.5 k V,源温度550℃;气帘气和碰撞气压力分别设为30 psi和10 psi;雾化气和气化气压力均为55 psi,碰撞电池入口电位和出口电位均为-10 V。结果:该方法在12 min内实现8种未衍生单糖成分的完全基线分离,精密度、稳定性和重复性的RSD均<2.1%,各成分的回收率在99.3%~102.5%,RSD在1.5%~2.9%,应用上述建立的方法分别对5批麻黄根多糖进行单糖组成分析,结果显示,麻黄根中检测到5种单糖分别为L-鼠类糖,L-阿拉伯糖,D-甘露糖,D-半乳糖,D-半乳糖醛酸。结论:HILICUPLC-MS/MS方法灵敏度高、重复性好、快速、准确、样品前处理简单、无需衍生化,可用于植物多糖中单糖及寡糖的快速检测。

急支糖浆HPLC特征指纹图谱研究及多成分定量测定

目的 建立急支糖浆的HPLC指纹图谱，并测定其主要成分的量，为急支糖浆的质量控制提供可靠方法。方法 采用Waters XTerra RP18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以0.8%冰醋酸水溶液（含有0.2%三乙胺）-乙腈为流动相进行梯度洗脱，体积流量1.0 mL/min，柱温35℃，检测波长为280 nm。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2012年版）建立急支糖浆HPLC指纹图谱并进行相似度分析；通过与阴性对照及混合对照品色谱峰进行比对，确定共有峰归属及成分指认；并对指认出的成分进行定量分析。结果 在特征图谱研究中，共确定17个共有峰，图谱中2、8号峰来源于鱼腥草，4、10号峰来源于金荞麦，7、12、15号峰来源于四季青，1、13号峰来源于麻黄，16、17号峰来源于枳壳，而3、6号峰为鱼腥草、金荞麦和四季青共有峰。同时利用相似度软件对10批急支糖浆指纹图谱进行分析，各批次样品相似度在0.98以上；通过比对特征峰保留时间，指认出6种主要成分，分别为原儿茶酸（3号峰）、原儿茶醛（6号峰）、阿魏酸（7号峰）、绿原酸（10号峰）、盐酸麻黄碱（13号峰）和柚皮苷（16号峰）；10批样品中原儿茶酸量在3.122 1~3.270 0 mg/mL，原儿茶醛量在5.108 6~5.224 9 mg/mL，阿魏酸量在8.893 2~9.120 8 mg/mL，绿原酸量在6.792 1~6.931 0 mg/mL，盐酸麻黄碱量在2.154 4~2.236 2 mg/mL，柚皮苷量在4.125 8~4.183 3 mg/mL。结论 所建立的急支糖浆HPLC指纹图谱和定量测定分析方法快速、准确、灵敏度高、专属性强，可以有效地评价该制剂的质量。

芩双片的薄层鉴别研究

目的建立芩双片的薄层鉴别方法。方法采用薄层色谱法对芩双片中的黄连、黄芩、麻黄、甘草、大青叶进行定性鉴别。结果薄层色谱能够能检出黄连、黄芩、麻黄、甘草和大青叶且阴性对照均无干扰。结论该法简便易行专属性强分离度重现性好,可用于芩双片的质量控制。

浅谈经方三拗汤饮片炮制与临床辨证应用

古往今来,历代医家对经方"三拗汤"中药味——麻黄、苦杏仁、甘草同方异制的炮制方法一直存在不同认识。本文结合"三拗汤"饮片炮制的历史沿革和现代研究,对炮制方法与药性、化学成分及临床应用的关联性进行探讨,并对其临床饮片炮制品的合理选用及临证配伍加减情况展开论述,为本方同方异治的临床辨证应用提供参考,充分阐述"同方异制,同方异治"的中医学辨证论治思想。

再造丸定性定量方法研究

目的：建立再造丸的定性定量方法。方法：采用TLC法对方中的人工牛黄、大黄、当归和川芎、麻黄进行定性鉴别;采用TLC法对乌头碱的限量进行检查;采用HPLC法测定再造丸中天麻的活性成分天麻素的含量：使用岛津Shim-pack VP-ODS（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-磷酸盐溶液（含磷酸氢二钠和磷酸二氢钾各0.1 mol.L-1）-水（0.5∶3∶96.5）为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长221 nm,柱温30℃。结果：TLC色谱中可检出人工牛黄、大黄、当归和川芎、麻黄;天麻素进样量在0.0428~1.284μg范围内,线性关系良好,平均回收率为95.5%（RSD=1.2%,n=6）。结论：该法准确,重复性好,可用于再造丸质量控制。

寒湿痹颗粒的质量控制研究

目的制定寒湿痹颗粒的质量控制方法。方法采用TLC法对处方中麻黄、白芍、甘草、黄芪进行了定性鉴别。采用反相高效液相色谱法测定寒湿痹颗粒中芍药苷,Diamonsil C_(18)色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)为流动相,检测波长为230nm。结果 TLC鉴别方法专属性强,分离效果良好。芍药苷在0.2027～4.0540μg线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为96.2%,RSD为1.9%(n=6)。结论本方法灵敏、简便、准确,重现性好,可作为寒湿痹颗粒的质量控制方法。

HPLC法测定麻黄根药材中麻黄酚的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定麻黄根中麻黄酚的含量。方法:采用Alltima C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1%醋酸(0～60min,流动相比例28:72→45:55),流速为1.0mL.min-1,检测波长376nm。结果:麻黄酚进样量在0.101～1.01μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9997);平均回收率(n=6)为100.2%。结论:本方法简便,准确,重复性好,可作为麻黄根药材的质量控制方法。

五紫三黄方对激素依赖性哮喘模型小鼠下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴功能的影响

目的观察五紫三黄方对醋酸泼尼松片干预治疗的哮喘模型小鼠下丘脑—垂体—肾上腺(HPA)轴功能的影响。方法将120只BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、醋酸泼尼松片组和五紫三黄方低、中、高剂量组,每组20只。空白组小鼠用生理盐水腹腔注射和雾化,其余5组小鼠于第1、7、14天给予腹腔注射10μg卵蛋白+2mg氢氧化铝凝胶;第21天开始用1%卵蛋白雾化激发,每天1次,连续7天,其后每隔3天雾化1次,共雾化18次。每次雾化前醋酸泼尼松片组和五紫三黄方低、中、高剂量组小鼠均给予3.9 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,第42天开始按照每两天醋酸泼尼松0.325 mg/kg速度撤减激素用量,于第63天全部撤离;同时从第35天开始五紫三黄方低、中、高剂量组分别给予五紫三黄方配方颗粒1.994g/kg、3.988 g/kg、7.976 g/kg灌胃,模型组和空白组给予等体积的生理盐水;第64天采用放射免疫法测定各组小鼠血浆促肾上腺皮质素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质酮(COR)含量。结果模型组与空白组小鼠血浆COR、CRH和ACTH含量比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组比较,醋酸泼尼松片组小鼠以上指标均降低(P<0.05或P<0.01);与醋酸泼尼松片组比较,五紫三黄方低、中、高剂量组以上指标均有升高(P<0.05或P<0.01),且五紫三黄方高剂量组的改善程度优于五紫三黄方低、中剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论五紫三黄方能够改善醋酸泼尼松片干预治疗哮喘小鼠导致的HPA轴功能受损,且大剂量使用效果更佳。

分子对接结合网络药理学研究桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的分子作用机制

目的利用分子对接和网络药理学的方法预测桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的主要活性成分和作用靶点,结合中医方解配伍理论对其多成分-多靶点-多通路的作用进行分析。方法在TCMSP、TCM-Datebase@Taiwan、PubChen Compound数据库收集桂枝芍药知母汤中9味中药(桂枝、芍药、知母、甘草、麻黄、生姜、白术、防风、附子)的主要化学成分。通过DrugBank、TTD数据库查找与类风湿关节炎治疗相关的蛋白靶点,并上传到String在线数据库,构建蛋白互作网络关系。在PDB数据库下载合适的蛋白靶点晶体结构,采用Discovery studio 4.5.0软件进行化合物与靶点的分子对接,利用Cytoscape 3.6.1软件,构建药物-化合物-靶点可视化网络,阐释桂枝芍药知母汤抗类风湿关节炎的主要作用机制。结果分子对接结果显示桂枝芍药知母汤中存在316个潜在的抗关节炎活性成分,作用于26个靶点,其中MAPK1、ZADH2、P38、AKR1C2、DHODH、CA2、MMP3、MMP9、RANKL等蛋白是主要作用靶点。生物功能和通路分析提示,桂枝芍药知母汤的作用机制主要涉及骨吸收(28%)、组蛋白激酶活性(20%)、肽基酪氨酸磷酸化(20%)、前列腺素代谢过程(12%)等生物过程。作用通路主要是破骨细胞的分化(94.12%)。结论采用分子对接结合网络药理学的方法,从多靶点多途径的角度研究桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎的药效物质基础及分子机制,为更好的临床用药提供参考和依据。

治疗咳嗽中药专利复方的用药规律分析

通过分析近20年中药治疗咳嗽的专利现状,探讨中药在治疗咳嗽过程中的用药规律。在SIPO专利检索平台和中国知网的专利数据库对中药治疗咳嗽的专利进行检索,采用Clementine 12.0软件进行关联性和高频中药网络分析,分析治疗咳嗽中药和配伍中药药对的使用规律。在治疗咳嗽的316首中药专利中,中药复方中使用频数最高的中药为甘草,其他使用频数较高的中药有桔梗、麻黄、陈皮、半夏等;使用的化痰止咳平喘类药偏多。常用的药对为甘草-桔梗、甘草-陈皮、半夏-甘草、麻黄-甘草。通过对中药频数、药类、药对、关联规则、高频中药网络的分析,结合中医理论可以揭示咳嗽中药复方的配伍规律,为临床用药提供依据。

麻黄-甘草药对对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的体外抗炎作用分析

目的:观察麻黄-甘草药对对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的增殖以及对脂多糖(LPS)刺激条件下对细胞分泌一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF)-α和经典活化(M1)/替代活化(M2)炎症表型转化的影响。方法:利用噻唑蓝(MTT)比色法考察不同剂量的药对对RAW264.7细胞增殖的影响;药对干预脂多糖(LPS,1 mg·L-1)建立的细胞炎症模型,格里斯试剂法(Griess)法检测NO释放量,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测上清中TNF-α的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测药对对LPS刺激条件下RAW264.7细胞M1型巨噬细胞常见标志物一氧化氮合酶(iNOS),白细胞介素-6(IL-6),IL-1β及M2型巨噬细胞常见标志物IL-10,精氨酸酶1(ARG1)及甘露糖受体1(MRC1)基因的表达。结果:麻黄-甘草药对的剂量在100 mg·L-1及以下时对RAW264.7细胞增殖没有影响;与LPS组比较,剂量在25~100 mg·L-1的药对可以显著降低NO的含量(P<0.05,P<0.01),10~100 mg·L-1剂量下对TNF-α表达的抑制显著(P<0.05,P<0.01);50 mg·L-1的药对还可以显著降低M1型巨噬细胞标志基因iNOS,IL-6及IL-1β的表达(P<0.05,P<0.01),而对M2型巨噬细胞标志基因IL-10,ARG1,MRC1没有影响。结论:麻黄-甘草药对能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症,其机制可能与抑制巨噬细胞向M1型方向的偏移,减少NO及TNF-α等炎症因子的分泌相关。

不同配伍比例对麻黄-甘草药对中麻黄类生物碱成分血浆药动学的影响

目的:研究麻黄-甘草(MH-GC)药对不同配比水煎液灌胃给予大鼠后,血浆中麻黄类生物碱含量的变化。方法:大鼠按体重随机等分成4组,分别为MH,MH-GC(12∶3),MH-GC(12∶6)和MH-GC(12∶12),于给药后不同时间点采血,给药量分别为7.42,9.28,11.13,14.84 g·kg-1。利用液液萃取法处理血浆样品,以盐酸金刚烷胺为内标,采用UPLC-MS/MS测定血浆样品中盐酸去甲基麻黄碱(NME),盐酸去甲基伪麻黄碱(NMP),盐酸麻黄碱(E),盐酸伪麻黄碱(PE)和盐酸甲基麻黄碱(ME)的血药浓度,利用DAS 3.0软件计算药动学参数。结果:与MH组相比,MH-GC(12∶3)组中NME和NMP的MRT0-t得到显著缩短,PE的t1/2z和Vz/F也显著降低;MH-GC(12∶6)组中NME,E和PE的AUC0-t均得到显著提高,PE的CLz/F和Vz/F显著降低;MH-GC(12∶12)组中E和PE的MRT0-t则显著延长,ME的CLz/F显著提高。结论:麻黄与不同比例的甘草配伍后,5种麻黄类生物碱的部分药动学参数具有显著性差异。随着甘草用量的不同,所表现出的减毒或增效侧重点则不同,从药动学角度证明了古方用药针对不同病症药物用量不同的科学性与合理性。

基于肺泡巨噬细胞M2极化的麻黄-大黄药对治疗急性肺损伤的作用机制研究

目的 探讨麻黄-大黄药对对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡替代激活的巨噬细胞(alternatively activated macrophages,M2)极化的调控作用及其机制。方法 Wistar大鼠随机分为对照组、模型组及麻黄-大黄低、中、高剂量(2.2、4.4、8.8 g/kg)组和地塞米松(5 mg/kg)组,大鼠ip脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制备ALI模型,造模后立即给予药物进行干预,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察肺组织病理变化;采用免疫荧光双标法检测肺泡巨噬细胞标记物F4/80和M2标记物CD206,以及F4/80和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的共表达;采用流式细胞术检测肺组织F4/80和CD206阳性巨噬细胞数量的变化;采用q RT-PCR法检测肺组织中精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)和IL-10 m RNA表达;采用Western blotting法检测肺组织中Arg-1和IL-10蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠肺组织肺泡结构破坏,肺间质水肿增厚,炎性细胞聚集、浸润,其中巨噬细胞数量显著增多;免疫组化和流式细胞术检测结果证实,肺泡巨噬细胞数量增多、表达增强,M2巨噬细胞表达增强、数量增多;M2肺泡巨噬细胞相关细胞因子IL-10和Arg-1 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,麻黄-大黄高、中剂量组肺组织病理状态明显改善,肺组织M2肺泡巨噬细胞数量进一步升高,抗炎因子IL-10和促修复因子Arg-1蛋白和m RNA表达均显著上调(P<0.01)。结论 麻黄-大黄药对可促进肺泡巨噬细胞M2极化,增加抗炎因子激活和释放,抑制炎症反应,从而治疗急性肺损伤。