中华羊茅Epichloё内生真菌的actin序列分析

Epichloё内生真菌与禾本科植物很常见。现已有大量关于禾草Epichloё内生真菌系统演化研究的报道,但是尚未发现中华羊茅所带Epichloё内生真菌系统演化方面的研究。本研究经过检测采自青海、甘肃、四川等地中华羊茅8个种群的Epichloё内生真菌带菌率发现8个种群的Epichloё内生真菌均带有Epichloё内生真菌,带菌率为100%。该结果为研究中华羊茅所带Epichloё内生真菌系统演化的研究提供了优良的材料。因此,本研究通过克隆actin(act)序列,并与已报道Epichloё内生真菌act序列构建系统进化树。结果表明,供试菌act序列在进化树上成单支分布,表明该菌属于同一种Epichloё内生真菌,且可能是一个新种。此外,遗传距离分析也证明了供试菌为同一菌种。进化关系同时发现分布在相同或相近地理位置的Epichloё内生真菌聚集在同一个分支,表明它们之间的亲缘关系较近,表明Epichloё内生真菌亲缘关系与宿主采集地密切相关。

中华羊茅内生真菌Epichlo? sp.挥发性物质的抑菌活性及成分分析

为测定中华羊茅内生真菌Epichloe sp.挥发性物质的抑菌活性和成分,依次采用挥发油提取器和乙酸乙酯萃取Epichloe sp.菌株的发酵产物,再采用琼脂扩散法、悬滴法和滤纸片扩散法测定其抑菌活性;基于顶空固相微萃取和气相质谱联用法分析挥发性物质成分。结果表明:挥发性物质、乙酸乙酯提取物、水相部分和发酵液可以抑制小麦根腐离蠕孢(Bipolaris sorokiniana)、新月弯孢(Curvularia lunata)和黑曲霉(Aspergillus niger)菌丝生长。高浓度的挥发性物质对四种真菌孢子萌发和芽管长度抑制效果显著高于低浓度(P<0.05)。结果表明,随着挥发性物质浓度的增加对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的抑菌作用增强,同一挥发性物质浓度对金黄色葡萄球菌的抑制作用强于大肠杆菌。此外,从挥发性物质中鉴定出32种具有较高质谱匹配度的化合物,其中主要成分包括异山梨醇(16.26%)、甲基叔丁基醚(8.18%)、二氢甘露醇(3.75%)、羟基丙酮(2.99%)、乙酸(1.22%)、己醇(1.20%)、3-糠醛(0.92%)、5-羟甲基二氢呋喃-2-酮(0.86%)、5-羟基戊酸-2,4-二叔丁基苯酯(0.86%)和棕榈酸甲酯(0.85%)。总之,中华羊茅内生真菌Epichlosp.挥发性物质具有拮抗细菌和真菌的作用。

中华羊茅内生真菌发酵液对种子萌发特性的影响

采用原液及稀释10倍、20倍、30倍、40倍和50倍的中华羊茅内生真菌发酵液浸种中华羊茅和醉马草种子,研究其对发芽势、发芽率、苗长、根长和苗鲜质量的影响。结果表明,不同浓度的发酵液对种子萌发的各项指标起到不同程度的促进和抑制作用。其中,40倍稀释液可明显提高中华羊茅种子发芽势、发芽率(P<0.05),其他各处理起到显著抑制作用(P<0.05);10倍、20倍、30倍和40倍稀释液能明显促进中华羊茅幼苗的生长(P<0.05),原液则明显降低苗长(P<0.05);原液和20倍稀释液明显抑制其根的生长(P<0.05);10倍稀释液能明显增加其苗鲜质量(P<0.05),而40倍和50倍稀释液显著降低苗鲜质量(P<0.05)。10倍和50倍稀释液可明显提高醉马草的发芽势(P<0.05),10倍稀释液明显提高其发芽率(P<0.05),原液对其发芽势和发芽率有显著的抑制作用(P<0.05);20倍和30倍稀释液明显促进苗生长(P<0.05),但40倍和50倍稀释液明显抑制幼苗的生长(P<0.05);原液和30倍稀释液对其根系的生长有明显抑制作用(P<0.05);原液和10倍稀释液能明显增加醉马草的苗鲜质量(P<0.05)。

内生真菌对不同地理种群中华羊茅生长及营养品质的影响

本研究以分布于青海、四川的6个中华羊茅(Festuca sinensis)地理种群及其Epichlo?内生真菌为研究对象,分别构建了带Epichlo?内生真菌(E+)和不带内生真菌的(E?)种群,比较了其在温室盆栽条件下的生长状况(分蘖、茎粗、叶宽、株高、鲜重和干重)和营养成分(粗脂肪、粗蛋白、粗灰分和叶片含水量),旨在探明内生真菌和寄主基因型对中华羊茅生长和营养品质的影响。结果表明:1)内生真菌对部分地理种群中华羊茅的株高、分蘖、茎粗、鲜重、粗脂肪(ether extract,EE)、粗蛋白(crude protein,CP)和叶片含水量有显著影响(P<0.05),且在不同地理种群中表现不一致。种群84 E+植株株高显著高于E?植株(P<0.05),种群41、57和141 E+植株粗脂肪含量显著高于相对应的E?植株(P<0.05),种群41、99和141 E+植株粗蛋白含量显著高于相对应的E?植株(P<0.05),种群99 E+植株叶片含水量显著高于E?植株(P<0.05);种群57 E+植株分蘖数显著低于E?植株(P<0.05),种群99 E+植株茎粗显著低于E?植株(P<0.05),种群57和99 E+植株株高显著低于相对应的E?植株(P<0.05),种群57 E+植株粗蛋白含量显著低于E?植株(P<0.05)。2)不同地理种群的E+和E?植株分蘖、茎粗、株高、鲜重和粗脂肪、粗蛋白含量有显著差异(P<0.05),且各种群表现不尽相同。6个地理种群E?植株,种群57的分蘖数显著高于种群84和99(P<0.05),种群57的粗蛋白含量显著高于其他5个地理种群(P<0.05),种群111的株高显著高于种群84和99(P<0.05),种群111的粗脂肪含量显著高于种群41和99(P<0.05);6个地理种群E+植株,种群111的分蘖数和茎粗均显著高于其他5个种群(P<0.05),种群141的鲜重和干重均显著高于种群41和84(P<0.05),种群111和141的粗脂肪含量均显著高于种群41、84和99(P<0.05);综合分析生长和营养指标,6个地理种群E?植株,种群57和111表现最好,6个地理种群E+植株,种群111和141表现最好。综上,内生真菌促进了部分地理种群(84)植株的生长,提高了部分地理种群(41和141)的营养品质,抑制了部分地理种群(99)植株的生长,降低了部分地理种群(57)的营养品质;寄主基因型对中华羊茅共生体的生长和营养品质显著影响(P<0.05)。

中华羊茅内生真菌发酵液对牧草生理特性的影响

以中华羊茅和醉马草为试材,采用原液、稀释10、20、30、40、50倍的中华羊茅内生真菌发酵液分别浇灌幼苗的方法,研究了不同浓度的发酵液对牧草叶绿素、过氧化氢酶和过氧化物酶等指标的影响,以期为开发微生物肥料和生物农药提供数据依据和实践基础。结果表明:不同浓度的发酵液对叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、过氧化氢酶和过氧化物酶起到不同效果。20、30、40、50倍稀释液显著提高中华羊茅叶绿素a和总叶绿素含量(P<0.05),但原液明显降低叶绿素b和总叶绿素含量(P<0.05);10、20、30倍稀释液显著提高过氧化氢酶(CAT)活性(P<0.05),分别提高了161.89%、104.76%和47.95%,50倍稀释液明显降低CAT活性(P<0.05);各处理组均显著提高其过氧化物酶(POD)活性(P<0.05),幅度达到34.69%~95.92%。30、40、50倍稀释液显著增加醉马草叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量(P<0.05),增长幅度分别达到11.21%~26.17%、14.63%~26.22%和13.65%~26.57%,原液则明显降低其叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量(P<0.05);10倍稀释液显著提高其CAT活性15.14%(P<0.05),而其它各处理组显著降低CAT活性(P<0.05);原液和10倍稀释液对其POD活性有明显的促进作用(P<0.05),30、40、50倍稀释液则抑制醉马草POD活性(P<0.05)。