粗毛淫羊藿的鉴别研究

目的:本文通过性状鉴别与显微鉴别的方法来对粗毛淫羊藿的外在形态特征以及显微特征进行研究,为其近缘种分类的鉴定提供参考依据。方法:采用眼观结合体视显微镜观察粗毛淫羊藿的植物形态特征,并采用光学显微镜对粗毛淫羊藿叶表皮及花粉粒和药材粉末显微特征进行观察和分析。结果:在植物形态上,花茎复叶回数为一回三出复叶,叶型为披针形、叶质较薄,为革质,在叶缘上有细密的刺齿,叶尖锋利,叶片上表面的颜色为深绿色,没有毛,下表面为灰绿色或灰白色,有密被粗短伏毛,基出脉有7条,凸起显著;花瓣有距;花色为白色、紫色、淡紫色;萼片两轮,外萼片4枚,内萼片4枚;花瓣远较内萼片长,呈角状距,根茎竖走,多叉状分支而弯曲。在粉末显微鉴定观察上,可见花粉粒类似球形或长球形、极面观三裂圆形,极面观小,外壁表面具有清晰的网状纹饰,网脊上密布均匀的瘤状突起,网眼很多,形状大小不一。结论:本研究方法简便环保、准确可靠,可为淫羊藿物种真伪的鉴定提供参考依据。

粗毛淫羊藿及其不同炮制品中总黄酮的含量

目的 :测定粗毛淫羊藿生品及 4种不同炮制品中总黄酮的含量并作比较。方法 :采用紫外分光光度法测定含量。结果 :总黄酮含量由高到低顺序为 :生品 >清炒品 >酒炙品 >盐炙品 >羊脂炙品 ;平均回收率为96 0 1% ,RSD 0 74% (n =5 )。结论 :加热等因素致使炮制品总黄酮含量均有降低 ;而临床仍多用炮制品 ,其原因当在于辅料的协同、促进等作用 。

粗毛淫羊藿及其不同炮制品中10种微量元素的含量

目的 :测定粗毛淫羊藿生品及 3种不同炮制品中 10种微量元素的含量并作比较。方法 :采用火焰原子吸收光谱法。结果 :粗毛淫羊藿生品及 3种炮制品中均含有所测的 10种元素 ,且 3种炮制品中都有若干元素含量高于生品。结论 :淫羊藿 3种炮制品 ,从其微量元素含量来看 ,各有所长 ;因此 ,对一些搁置已久的炮制方法 。

粗毛淫羊藿幼叶愈伤组织的生产

应用正交设计法考察4种激素对粗毛淫羊藿(Epim edium acum inatumFranch.)叶片诱导愈伤组织的影响。得出IBA作用极显著,2,4-D作用显著,6-BA、NAA作用不显著,它们作用大小依次为:IBA>2,4-D>6-BA>NAA。诱导粗毛淫羊藿愈伤组织产生的最佳激素配比为:B5+2,4-D 2 mg/L+IBA 1 mg/L。

粗毛淫羊藿根的化学成分研究(Ⅱ)

目的：对粗毛淫羊藿根的化学成分进行研究。方法：采用柱层析法进行分离，用ＵＶ，ＩＲ，ＦＡＢＭＳ，１ＨＮＭＲ和１３ＣＮＭＲ等光谱技术鉴定化合物的结构。结果：从正丁醇部分分离到４个化合物，鉴定为ｅｐｉｍｅｄｏｓｉｄｅＡ（Ⅴ），二叶淫羊藿甙Ｂ（Ⅵ），朝藿定Ｃ（Ⅶ），大花淫羊藿甙Ｃ（Ⅷ）。结论：均为８异戊烯基黄酮类化合物，化合物Ⅵ，Ⅶ，Ⅷ为首次从本植物中得到。

毛细管区带电泳法测定人工种植粗毛淫羊藿中绿原酸的含量

目的:建立粗毛淫羊藿中绿原酸含量的 CZE 测定方法,比较不同地区人工种植粗毛淫羊藿中绿原酸含量。方法:采用熔融石英毛细管柱(50μm×95cm,有效长度86.8cm)作为分离通道;以20mmol·L^(-1)硼砂(pH=9.12)为运行缓冲液;运行电压30kV;毛细管柱温20℃;检测波长:327nm;精密量取样品溶液,外标法测定含量。结果:粗毛淫羊藿中绿原酸成分得到完全分离,测定精密度得到明显改善;绿原酸的线性范围为3.28～42.64μg·mL^(-1),r=0.9995;方法的加样回收率为98.6%,RSD 为2.0%。结论:本方法简便、准确,重复性好。

粗毛淫羊藿甙的分离和结构

粗毛淫羊藿Epimedium acuminatum Franch为小檗科植物,又名尖叶淫羊藿,分布于四川、云南、贵州和湖北,在当地作淫羊藿药用。对粗毛淫羊藿的化学成分研究尚未见报道。本文报道从四川产粗毛淫羊藿的地上部分分离到五个化合物并进行了结构研究。

粗毛淫羊藿黄酮提取物的制备工艺研究

目的优选淫羊藿黄酮类物质的制备工艺。方法设计了6种提取工艺对粗毛淫羊藿黄酮类物质的制备进行了研究。结果6种工艺提取物产量顺序为工艺6,1>工艺2>工艺3,4,5。不同工艺提取物总黄酮含量有极显著差异,其高低依次为:工艺3>工艺1>工艺2>工艺4>工艺5>工艺6。工艺2,4,6提取物淫羊藿苷含量最高,其次是工艺3,均显著高于其余工艺,而工艺1提取物的淫羊藿苷含量最低,平均值仅有0.70%。结论工艺2和3较好,其提取物产量、总黄酮含量和淫羊藿苷含量均较高,对相关产业的发展具有一定的参考意义。

黔产淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿定C的含量测定

目的建立同时测定淫羊藿中淫羊藿苷和淫羊藿定C含量的方法 ,为淫羊藿质量控制提供依据。方法采用RP-HPLC法测定含量。色谱柱为Spherisorb C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL.min^-1,检测波长为270 nm,柱温为25℃。结果淫羊藿定C质量浓度在12.0-300.0 mg.L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为101.05%,RSD为3.01%;淫羊藿苷质量浓度在0.4-10.0 mg.L^-1内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为100.51%,RSD为2.53%。结论本方法分析时间短且重现性和稳定性较好,可作为控制淫羊藿质量的检测方法 。

3种移栽淫羊藿属植物的植株形态、叶绿素相对含量与气孔导度的比较研究

【目的】揭示不同淫羊藿属Epimediam物种之间及种内的生理生化特征差异,为人工规范化栽培种植及产量提高提供理论参考.【方法】测量了3种移栽淫羊藿属植物的植株高度、叶形态、叶绿素相对含量和气孔导度等生物指标,并运用非参数检验和邓肯氏单因素方差分析对数据进行了比较分析.【结果和结论】新叶植株高度:巫山淫羊藿E.wushanese>柔毛淫羊藿E.pubescen>粗毛淫羊藿E.acuminatum,其中,巫山淫羊藿与柔毛淫羊藿、粗毛淫羊藿植株高度均差异显著.老叶植株高度:巫山淫羊藿>粗毛淫羊藿>柔毛淫羊藿,其中,柔毛淫羊藿与巫山淫羊藿、粗毛淫羊藿植株高度均达显著差异.3个种间老叶植株的叶片形态差异显著,而新叶不显著;种间及种内的老叶和新叶的叶绿素相对含量均具有显著差异,且老叶植株的叶绿素相对含量均大于新叶植株.气孔导度的种内差异显著,新叶植株叶片的气孔导度大于老叶植株叶片的气孔导度.说明不同淫羊藿属植物对生长环境的适应能力不同.

粗毛淫羊霍化学成分的研究

从粗毛淫羊藿的地上部分分得３种黄酮甙单体，经化学性质鉴定和紫外、红外、质谱、氢谱等分析，分别鉴定为宝藿甙Ⅱ，淫羊藿甙Ａ和淫羊藿甙。其中宝藿甙Ⅱ系首次从该植物中分离得到。

不同大花类群淫羊藿属植物的花部特征及生殖特征研究

淫羊藿是我国重要的草本植物,在中药、功能性食品和园林观赏等领域都具有重要用途,受地域差异性影响,淫羊藿属植物的植株形态、花部特征、开花物候和生殖特征各不相同。本研究对四川不同产地野生种群大花类淫羊藿(巫山淫羊藿、粗毛淫羊藿和宝兴淫羊藿)的开花动态、花部特征、访花昆虫与繁殖系统进行了对比研究。结果表明:(1)3种淫羊藿属植物的开花期较为集中,巫山淫羊藿和粗毛淫羊藿的花期为3月下旬~4月下旬,单花花期均为3~4 d;宝兴淫羊藿的花期为4月中旬~5月中旬,单花花期5~6 d;(2)膜翅目和双翅目昆虫为3种淫羊藿属植物的有效访花者,有效访花者访花特性与花部特征之间具有明显的相关性;(3)3种淫羊藿属植物的花序、花和果实的数量受所处环境影响较大,自然结实率:巫山淫羊藿>宝兴淫羊藿>粗毛淫羊藿;温度和光照是最主要的影响因子。

粗毛淫羊藿内转录间隔区序列扩增条件的优化

用CTAB法提取粗毛淫羊藿叶片DNA,进行内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列PCR扩增试验,通过单因子试验研究了退火温度、Mg2+浓度、TapDNA聚合酶浓度、dNTP浓度对ITS-PCR反应的影响,并通过各因子的组合研究,建立了适宜于粗毛淫羊藿ITS分析的扩增体系:25μL体系中2.5μL 10×buffer、1μL模板DNA、1.0 mmol/LMgCl2、1.5 mmol/L dNTP、1.25 UTaq酶、0.4μmol/L ITS 4、ITS 5。PCR反应程序为95℃5 min;94℃30 s,52℃45 s,72℃1 min,共35个循环;72℃7 min。粗毛淫羊藿ITS扩增条件的优化,可以为淫羊藿属遗传多样性的研究及分子鉴定奠定基础。

粗毛淫羊藿ISSR-PCR体系的正交优化

采用正交试验设计方法,建立了粗毛淫羊藿ISSR分析的优化反应体系:即20μL反应体系中含有10×buffer、2.0 mmol.L-1Mg2+、0.10 mmo.lL-1dNTP、1.5U Taq酶、40 ng模板DNA和0.6μmol.L-1引物;PCR反应程序为:95℃5 min;94℃30 s,52℃45 s,72℃2 min,共35个循环;72℃10 min,4℃保存。

两种黔产淫羊藿总黄酮对小鼠学习记忆的对比研究

目的:研究贵州地方品种粗毛淫羊藿与黔岭淫羊藿中淫羊藿总黄酮(TFE)对化学药物诱导的痴呆小鼠模型学习记忆能力的影响,比较两种黔产淫羊藿TFE对小鼠学习记忆改善效果差异。方法:实验选用东莨菪碱、戊巴比妥、环磷酰胺3种化学药品分别复制出学习记忆损伤模型,按剂量1300,650mg·kg-1灌胃TFE14d,采用Morris水迷宫实验,以定位航行实验和空间探索能力为指标进行其行为学检测。结果:两种TFE均能改善东莨菪碱等3种化学药物致痴呆小鼠学习记忆能力,且呈量效依赖关系。粗毛淫羊藿比黔岭淫羊藿改善记忆能力效果更好一些。结论:两种黔产淫羊藿TFE可明显改善东莨菪碱、戊巴比妥、环磷酰胺3种化学药物所致的空间记忆障碍,其效果与脑复康效果接近。两种TFE作用差异明显,粗毛淫羊藿优于黔岭淫羊藿。提示ICA是TFE中增强记忆的主要物质基础;同时也提示除了ICA外,TFE中尚有其他改善学习记忆的有效成分。

粗毛淫羊藿的光合特性分析

以粗毛淫羊藿为材料，利用LI-6400型便捷式光合作用测定系统，研究其光合速率的变化及其环境影响因素。结果表明，淫羊藿净光合速率为2．1～2．55μmolCO2／（m^2·s），净光合速率、气孔导度和蒸腾速率的日变化均呈单峰曲线，净光合速率的峰值出现在10：00时，整体上淫羊藿上午的光合速率高于下午的光合速率。蒸腾速率的峰值出现在12：00。相关性分析表明，粗毛淫羊藿叶片净光合速率与气孔导度、相对湿度呈显著正相关，与温度呈极显著负相关，与胞间CO2浓度呈负相关，但不显著。

粗毛淫羊藿的引种栽培试验

报道粗毛淫羊藿（EpimediumacuminatumFranch）的引种栽培方法．试验表明，遮阴度较高、相对湿度较大、酸性腐殖土的立地条件加上一定的栽培管理措施，是该植物的引种栽培成功的生境．对淫羊藿属（EpimediumL．）其它种类的药用植物引种栽培也具有一定的参考价值．

不同生长期黔产天平山淫羊藿和粗毛淫羊藿叶中黄酮类成分的含量变化研究

通过采用高效液相色谱法和紫外分光光度法,分别测定不同生长期黔产天平山淫羊藿和粗毛淫羊藿叶中黄酮类成分的含量变化,确定淫羊藿药材合理的采收期.结果为不同生长期淫羊藿叶中淫羊藿苷和总黄酮的含量有较大差异,花期>果期>花前期>果后期,从淫羊藿药材的品质、产量和可持续利用角度出发,其生产应以花期至果期(4~5月)采收为好.

粗毛淫羊藿小孢子形成及雄配子体发育观察

采用光镜和扫描电镜对粗毛淫羊藿的小孢子形成及雄配子体发育过程进行观察。结果显示:花药四室,药壁的发育方式为双子叶型;发育后期的药室内壁具有纤维状加厚现象;腺质绒毡层,发育后期可见其内切向壁分布乌氏体;小孢子母细胞减数分裂时的胞质分裂为同时型;不同药室中雄配子体的发育过程具有典型的不同步性;四分孢子为四面体型;成熟花粉粒为2?细胞型,长球形,3个萌发沟,沟内具突起。

粗毛淫羊藿大孢子形成及雌配子体发育观察

采用石蜡切片技术对粗毛淫羊藿的大孢子形成及雌配子体发育过程进行观察。结果表明:粗毛淫羊藿子房单心皮1室,每室胚珠多数,双珠被,厚珠心,倒生胚珠。大孢子母细胞经减数分裂形成直线形排列的4个大孢子,合点端大孢子发育成功能大孢子,其余3个退化。胚囊发育类型为蓼型。