基于不同炮制方法的淫羊藿黄酮类成分含量研究

试验旨在寻求羊脂油炮制淫羊藿的内在机理,以甘肃产淫羊藿为研究对象,用羊脂油、牛脂油、猪脂油进行炮制,分别提取有效成分,利用紫外分光光度法和高效液相色谱法进行有效成分含量测定,比较不同炮制品和生品总黄酮、淫羊藿苷、宝藿苷Ⅰ和朝藿定C的含量。结果显示:各炮制品总黄酮含量均显著低于生品(6.84%),其中羊脂油炙含量(5.69%)显著高于其他炮制品;生品和羊、牛脂油炙炮制品中淫羊藿苷含量无显著差异,羊脂油炙炮制品为0.77%,牛脂油炙炮制品为0.70%,生品为0.70%,猪脂油炙炮制品中淫羊藿苷含量为0.50%,较生品和其他炮制品显著降低;羊脂油炙、牛脂油炙淫羊藿中宝藿苷Ⅰ含量无显著性差异,分别为0.08%和0.07%,但显著高于生品(0.05%)和猪脂油炙淫羊藿(0.04%);羊、牛、猪脂油炙炮制品中朝藿定C含量分别为0.29%、0.27%和0.24%,均显著低于生品(0.57%)。得出结论:淫羊藿最佳炮制辅料为羊脂油,其次为牛脂油。

微生物发酵转化黄酮类化合物研究进展

黄酮类化合物是自然界中存在的天然有机化合物,具有抗氧化、抗癌、预防骨质疏松和增强免疫调节等多种生物活性。通过微生物发酵技术对黄酮类化合物进行结构修饰,可以产生更多结构新颖的衍生物,提高生物利用度。常用的微生物有肠道菌群、内源性微生物和一些转化效果良好的菌株,转化反应类型有糖基化、甲基化、羟基化、氢化和水解反应等。黄酮类化合物的微生物转化以黄酮苷和苷元的相互转化为主,转化后可实现苷元类成分的大量富集。本文以大豆、陈皮、黄芩、淫羊藿中的黄酮为例,对黄酮类化合物的微生物转化现状进行总结分析,可为黄酮类化合物的转化研究和新药研发提供参考。

从肾论治绝经后骨质疏松症的中医研究进展

绝经后骨质疏松症是一种与绝经密切相关的慢性全身性骨骼病症,中医学将其归属于“骨痿”,发病与肾有关,补肾法是根本治则。本文针对从肾论治PMOP的中医研究进展进行综述,旨在为临床治疗该病与研究提供一定的参考依据。

女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用

目的探究女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用。方法将Wistar雄性大鼠应用随机数字表法分为对照组、模型组、女贞子-淫羊藿药对组,每组10只。除对照组外,其他两组均于第4 d腹腔注射顺铂3 mg/kg;女贞子-淫羊藿药对组在给予顺铂前3 d灌胃350 mg/kg提取物,连续7 d。取材结束后,计算大鼠体重变化率和脏器指数,考察肾功指标和组织病理学变化,采用免疫组化法观察大鼠肾脏肾损伤分子1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)和NADPH氧化酶4(Anti-NADPH oxidase 4,NOX4)阳性信号的表达和分布;Western Blot法检测KIM-1和NOX4蛋白表达的影响;试剂盒微量法检测大鼠肾组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸/还原型辅酶II(NADP+/NADPH)水平的变化;ELISA法检测女贞子-淫羊藿药对对大鼠肾组织中白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响。结果相较于对照组,顺铂导致大鼠体重和肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著性降低(P<0.05),肾脏器指数、血清血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,CREA)、尿酸(uric acid,UA)、肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-1β、IL-6水平显著性升高(P<0.05),HE染色显微镜下显示肾小管上皮细胞坏死脱落,管腔变形空泡化,KIM-1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显增加(P<0.05);相比于模型组,女贞子-淫羊藿药对干预使肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著升高(P<0.05),肾脏器指数、血清BUN、UA和肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-6水平显著下降(P<0.05),肾组织HE染色显示损伤减轻且KIM-1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论女贞子-淫羊藿药对通过抑制肾组织中KIM-1的表达,激活抗氧化酶的活性和抑制炎症因子的释放,发挥了对顺铂肾毒性的保护作用。

淫羊藿化学成分的研究

目的:对淫羊藿EpimediumbrevicornumMaxim 化学成分进行研究。方法:硅胶柱及薄层色谱分离,光谱分析鉴定结构。结果:分离鉴定了5个化合物:金丝桃苷(hyperoside,Ⅰ) ,淫羊藿苷(icariin ,Ⅱ) ,朝藿定B(epimedinB ,Ⅲ) ,朝藿定C(epimedinC ,Ⅳ) ,肌醇(inositol,Ⅴ)结论:其中Ⅰ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ化合物为首次从该种植物中分离鉴定。

仙灵脾减轻外源性糖皮质激素抑制神经内分泌免疫作用的临床与实验研究

目的：研究仙灵脾对外源性糖皮质激素抑制下丘脑－垂体－肾上腺－胸腺（ＨＰＡＴ）轴作用的保护效应。方法：临床选择需用强的松治疗的患者６５例，随机分为复方强的松组（强的松与仙灵脾合方）与强的松组，观察用药前后皮质醇和促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）及淋巴细胞增殖反应的变化；动物实验用皮质酮皮下注射造成大鼠 ＨＰＡＴ轴抑制模型，观察仙灵脾对 ＨＰＡＴ轴相关指标的影响。结果：血浆 ＡＣＴＨ、皮质醇和淋巴细胞增殖反应两组患者治疗前均无明显差异，治疗后强的松组明显下降，复方强的松组明显上升（ Ｐ＜ ０． ０５）。实验动物表现为下丘脑单胺类递质被激活；垂体、肾上腺、胸腺重量减轻；室旁核、正中隆起 ＣＲＨ神经细胞与神经纤维减少，肾上腺束状带与胸腺皮质萎缩；自然杀伤细胞细胞毒活性及淋巴细胞产生ＩＬ－２、γ－干扰素水平降低（Ｐ＜０．０５）；仙灵脾组上述各项指标较皮质酮组明显改善（Ｐ＜０．０５）。结论：仙灵脾具有减轻外源性糖皮质激素副作用的神经内分泌免疫学效应。

淫羊藿对小鼠成骨细胞增殖、功能及凋亡的影响

目的:观察淫羊藿提取液对体外培养的小鼠成骨细胞增殖、功能及凋亡的影响。方法:利用序列酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞,用组织化学和免疫组化染色进行细胞鉴定。用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测淫羊藿对成骨细胞增殖的影响,通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性反映淫羊藿对细胞功能的作用。建立地塞米松诱导的成骨细胞凋亡体系,并利用流式细胞仪观察淫羊藿对这一凋亡体系的影响。结果:分离和获得的大量单一多角形细胞,经碱性磷酸酶组织化学染色呈强阳性,经Ⅰ型胶原、骨桥蛋白、骨涎蛋白免疫组化染色呈阳性,证实获得的细胞为成骨细胞。淫羊藿提取液不影响成骨细胞的增殖,但可以显著提高成骨细胞碱性磷酸酶的活性,其中相当于生药1g/L组的作用最明显。100nmol/L和1000nmol/L地塞米松可以显著增加成骨细胞凋亡率,但同时加入相当于生药1g/L的淫羊藿提取液,并不引起细胞凋亡率的明显变化。结论:淫羊藿对成骨细胞的增殖和凋亡没有明显作用,但却显著增加了成骨细胞碱性磷酸酶的活性。淫羊藿防治骨质疏松症的重要机制之一可能是促进成骨细胞的成骨功能。

淫羊藿药材HPLC指纹图谱的研究

目的 :采用高效液相色谱法建立淫羊藿药材的指纹图谱。方法 :用AlltechC18(4 6× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱 ,0 5 %冰醋酸溶液和乙腈为流动相 ,采用梯度洗脱 ,流速 1 0ml/min ,检测波长 2 72nm。结果 :淫羊藿药材指纹图谱共检出 7个峰 ,峰面积之和大于总峰面积的 90 % ,其精密度、稳定性、重复性均符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求 (暂行 )》中的有关规定。结论

应用体外培养法研究淫羊藿水提物对人精子膜功能损伤的保护作用

目的:观察淫羊藿水提取物对人精子膜功能氧化损伤的保护作用,探讨淫羊藿治疗弱精子症男性不育的作用机制。方法:应用体外培养的方法,经Percoll梯度离心法优选后的精子作为正常精子模型,采用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(HX-XO)体系产生活性氧(ROS)。在有氧环境下,ROS、不同浓度的淫羊藿水提物与精子悬液共同孵育后,检测精子膜脂质过氧化损伤程度,通过精子尾部低渗膨胀试验、精子顶体完整率评估精子膜功能。透射电镜观察精子超微结构,并与已知的抗氧化剂VitC对照。结果:淫羊藿水提物小、中、大剂量(125、250、500mg/mL)在相同的条件下均可提高精子悬液超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低丙二醛(MDA)含量,显示对ROS所致精子膜的氧化损伤均具有不同程度的干预作用,对精子膜功能具有一定的保护作用。其中250mg/mL的淫羊藿水提物与VitC(0.25mg/mL)相比无统计学差异(P>0.05),500mg/mL的淫羊藿水提物明显优于VitC(P<0.05、P<0.01)。淫羊藿水提物对精子膜结构和功能的保护作用呈剂量依赖性,大剂量(500mg/mL)时作用最显著。结论:淫羊藿水提物对人精子膜结构和功能损伤具有明显的保护作用,其作用机制与提高SOD活力,抗脂质过氧化物产生有关。

淫羊藿分株种群特征及其与箭叶淫羊藿空间分布的点格局分析

对四川省南充市金城山3个不同海拔梯度(560 m、653 m、774 m)上的淫羊藿分株种群特征以及用聚块性指标(m*/m)、聚集指数、Cassie指标、扩散系数和点格局分析法,分别对淫羊藿基株种群与海拔771 m处箭叶淫羊藿基株种群的空间分布格局进行了研究.结果显示:在低海拔梯度560 m处淫羊藿分株种群密度达到最大,随着海拔的升高,淫羊藿分株种群密度显著减小.不同海拔高度下,淫羊藿分钻种群根冠比在774 m处最高.3种海拔梯度上,淫羊藿基株种群空间分布格局为集群分布;箭叶淫羊藿基株种群在尺度(t)0～0.01之间呈随机分布,在0.01～0.5之间呈集群分布.最后,结合保护淫羊藿和箭叶淫羊藿的药用资源以及点格局分析方法在研究草本植物种群空间分布格局中的优越性展开了讨论.

正交试验优化淫羊藿总黄酮和多糖的分步提取工艺优化

通过对淫羊藿总黄酮和多糖进行分步提取工艺优化,探寻一种提高淫羊藿综合利用率的提取工艺。利用单因素结合正交试验优化淫羊藿总黄酮的超声波辅助提取工艺,并对此工艺所得药渣进行多糖的水煮提取工艺优化。结果表明,总黄酮提取的最优工艺条件为按料液比1:10(g/mL)加入70%乙醇溶液,在60℃提取温度、150W超声功率下提取2次,每次5min,提取效率达4.72%;多糖提取的最优工艺条件为按料液比1:10加入水,在90℃提取温度提取2次,每次30min,提取效率达1.89%。优化后的淫羊藿总黄酮和多糖分步提取工艺操作简单、能耗低、提取效率高、多糖损失率低、较大限度地提高了淫羊藿的综合利用率。

RRLC-TOF/MS快速鉴别中药淫羊藿中43种化学成分

目的运用快速液相-高分辨飞行时间质谱(RRLC-TOF/MS)技术对中药淫羊藿化学成分进行快速鉴别。方法色谱分离采用SHISEIDO MG C18(3.0 mm×100 mm,3μm)色谱柱;流动相为乙腈和0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,A相比例随时间的变化:5%～19%(0～3 min),19%～32%(3～13 min),32%～52%(13～25 min),52%～70%(25～30 min);柱温25℃;流速0.6 ml/min,柱后分流比为3∶1。质谱定性采用飞行时间质谱,电喷雾离子源(ESI),正离子模式,质量数扫描范围m/z 100～1 000。结果一次性鉴别出淫羊藿中43种的化学成分。结论建立了一种基于RRLC-TOF/MS技术对淫羊藿中的化学成分进行快速鉴别的方法,为中药淫羊藿的质量控制及体内的深入研究奠定了基础。

助阳中药粗提物对粤黄鸡免疫功能的影响

将１日龄健康雌性粤黄鸡１２０只随机均分为４组。Ⅰ组饲喂基础日粮，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ组在基础日粮中分别添加２％淫羊藿粗提物、２％补骨脂粗提物、１％淫羊藿粗提物＋１％补骨脂粗提物。在１４日龄时给每只鸡接种１次鸡新城疫Ⅰ系疫苗。试验期（８周）末，与Ⅰ组比较，Ⅱ、Ⅳ组胸腺指数显著减小（Ｐ＜０．０５），脾脏指数显著增大（Ｐ＜０．０５），Ⅳ组的法氏囊指数也显著增大（Ｐ＜０．０５）；外周血液中Ｔ淋巴细胞百分率以Ⅱ、Ⅳ组升高极显著（Ｐ＜０．０１），Ⅲ组升高显著（Ｐ＜０．０５）；血清中ＮＤＶ抗体滴度Ⅱ、Ⅳ组升高显著（Ｐ＜０．０５）；血清中Ｔ３含量Ⅱ、Ⅲ组升高显著（Ｐ＜０．０５）、Ⅳ组升高极显著（Ｐ＜０．０１）；Ｔ４含量仅Ⅳ组升高显著（Ｐ＜０．０５），Ⅱ、Ⅲ组升高不显著（Ｐ＞０．０５）。上述结果提示，淫羊藿粗提物和淫羊藿粗提物＋补骨脂粗提物均能增强粤黄鸡细胞免疫及体液免疫功能，而补骨脂粗提物只增强细胞免疫功能。

淫羊藿花粉萌发及花粉管生长研究

运用方差分析、多重比较和正交实验方法对淫羊藿花粉的萌发和花粉管生长进行了研究.结果表明:培养基内硼酸、硝酸钙、蔗糖在一定浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定浓度时则起抑制作用;镁和钾对花粉萌发及花粉管生长影响不显著.在正交实验中蔗糖和H3BO3对淫羊藿花粉萌发有显著影响,而培养基组分间没有明显的交互作用.淫羊藿最适花粉液体培养基为15%蔗糖+40 mg/L H3BO3+40 mg/LCa(NO3)2·4H2O;在pH值为5.0、25℃和600 lx光照时淫羊藿花粉萌发和花粉管生长最好.

药典内5种淫羊藿中黄酮类成分的反相高效液相色谱分析

报道了药典规定的５种淫羊藿──淫羊藿、箭叶淫羊藿、巫山淫羊藿、柔毛淫羊藿和朝鲜淫羊藿中９种黄酮──淫羊藿甙（ｉｃａｒｉｉｎ）、宝藿甙－Ⅰ（ｂａｏｈｕｏｓｉｄｅＩ）、宝藿甙－Ⅱ（ｂａｏｈｕｏｓｉｄｅⅡ）、淫羊藿甙Ａ（ｅｐｉｍｅｄｏｓｉｄｅＡ）、箭藿甙Ｂ（ｓａｇｉｔｔａｔｏｓｉｄｅＢ）、朝藿定Ｂ（ｅｐｉｍｅｄｉｎＢ）、朝藿定Ｃ（ｅｐｉｍｅｄｉｎＣ）、大花淫羊藿甙Ｃ（ｉｋａｒｉｓｏｓｉｄｅＣ）和大花淫羊藿甙Ｆ（ｉｋａｒｉｓｏｓｉｄｅＦ）的反相高效液相色谱测定。色谱柱为ＤＩＳＫ－Ｃｐｈｅｎｌｙ，流动相为乙腈－乙酸液（水：３６％乙酸＝１００：４），梯度洗脱，检测波长为２７２ｎｍ。

淫羊藿果实成熟与生境的关系

以四川省南充市金城山3个不同海拔高度(562m,640m和726m)的淫羊藿为研究对象,对其果实成熟的时间及数量进行了研究;同时也对其果实成熟量与大气湿度、温度、光照强度之间的关系进行了研究.相关的数据分析表明,淫羊藿果实成熟过程可分为初始期、高峰期和末期3个阶段.果实成熟主要受湿度,光照和温度的影响.气温的突变可能是促进淫羊藿果实成熟的机制之一;果实数与相对光照、温度之间都存在极显著的相关性.随着海拔高度的变化,淫羊藿果实成熟时间也有相应变化.由于淫羊藿果实成熟后易自裂,所以研究不同生境淫羊霍果实成熟时间的差异对于淫羊霍种子的采收也相当重要.

基于人工神经网络的淫羊藿红外光谱的研究

对于不同产地和不同栽培条件的药材,其药效的不同是由于其所含化学成分和各成分含量的比例不同所造成的,这种差异将造成红外图谱的差异。但这些差异非常细微,单纯地从谱图去区分其特征是非常困难的。文章利用傅里叶变换红外光谱,测定了42种来自吉林3个不同产地的淫羊藿样品的红外光谱,并对光谱数据进行了相应的预处理。为了提高神经网络的训练速度,在利用人工神经网络建立模型之前,通过小波变换的方法对光谱变量进行了压缩。同时对建立的模型的相关参数进行了详细的讨论。实验表明,建立的模型能够正确地对42个淫羊藿样品进行产地鉴别,同时避免了传统光谱分析对药材的分离和提取,从而为中药质量的科学控制和现代化管理提供了可靠的依据。

心叶淫羊藿化学成分研究(Ⅱ)

目的对心叶淫羊藿Epimedium brevicornum全草进行化学成分研究。方法利用硅胶柱色谱、高效液相色谱分离和纯化,通过理化方法及波谱数据分析鉴定其结构。结果分离得到8个化合物,波谱鉴定为:5-羟基-2-异戊烯基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ)、4-羟基-2-异戊烯基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)、5,7,4′-三羟基黄酮-7-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅲ)、宝藿苷(baohuosideⅠ,Ⅳ)、宝藿苷(baohuosideⅡ,Ⅴ)、淫羊藿苷C(icariside C,Ⅵ)、淫羊藿苷(icariin,Ⅶ)和淫羊藿苷(icariside,ⅠⅦ)。结论化合物为新化合物,命名为淫羊藿酚;化合物和系首次从该植物中分离得到。

心叶淫羊藿化学成分研究

目的研究心叶淫羊藿(Epimedium brevicornumMaxim.)的化学成分。方法利用硅胶柱色谱分离和纯化,通过理化方法及波谱分析鉴定其结构。结果分离得到5个化合物,波谱鉴定为:5,7,4′-三羟基-8,5′-二异戊烯基黄酮(Ⅰ)、淫羊藿素(i-caritin)(Ⅱ)、去甲淫羊藿素(desmethylicaritin)(Ⅲ)、3,7-二羟基-4′-甲氧基黄酮(Ⅳ)和3,7,3′,4′,5′-五羟基黄酮(robinetin)(Ⅴ)。结论其中化合物Ⅰ为一新化合物,化合物Ⅳ和Ⅴ首次从该植物中分离得到。

淫羊藿总黄酮对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用

目的:研究淫羊藿总黄酮(TFE)对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用。方法:Balb/C小鼠40只,雌雄各半,随机分为空白组、模型组、TFE低、中、高剂量组,每组8只。空白组腹腔注射生理盐水,其余各组连续5d腹腔注射环磷酰胺建立免疫低下模型。空白组和模型组灌胃生理盐水,TFE低、中、高剂量组分别按200、400及800mg/kg剂量灌胃TFE。给药35d后测定各组体质量、脾质量、脾细胞绝对数量、相对数量、骨髓有核细胞数量及脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞数量。结果:造模结束后,模型组脾细胞绝对数量、相对数量、骨髓有核细胞数量及脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、NK细胞的数量低于空白组;TFE低剂量组脾脏中CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞及骨髓有核细胞数量高于模型组;TFE中剂量组和高剂量组的脾细胞绝对数量、骨髓有核细胞数量及脾脏中CD3+、CD8+、CD19+、NK细胞数量高于模型组;而且TFE高剂量组脾细胞相对数量和CD4+也高于模型组;差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:TFE可显著增强环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫功能,其部分机制在于增加脾细胞绝对数量和相对数量,调节脾脏中T细胞亚群、B淋巴细胞、NK细胞数量,并促进骨髓有核细胞的增殖。