血清上皮细胞膜结合黏液素1、α1-酸性糖蛋白水平与急性胆囊炎胆道炎症及预后的关系

目的分析血清上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、α1-酸性糖蛋白(AAG)水平与急性胆囊炎病人炎症以及预后的关系。方法收集2020年7月至2022年4月内蒙古北方医院收治的急性胆囊炎病人136例,病人根据严重程度分为轻度组、中度组与重度组,另选取同期体检健康者130例作为对照组,制备研究对象血清标本,ELISA法检测血清MUC1、AAG水平,比较对照组与急性胆囊炎组、不同严重程度急性胆囊炎病人白细胞计数、中性粒细胞、血清总胆红素、血清MUC1、AAG、C反应蛋白(CRP)水平;根据急性胆囊炎病人治疗后预后情况将病人分为预后良好组与预后不良组,比较两组血清MUC1、AAG水平;lo⁃gistic回归分析血清MUC1、AAG水平与急性胆囊炎病人预后情况的关系;受试者操作特征(ROC)曲线分析血清MUC1、AAG水平对急性胆囊炎病人预后不良的预测价值。结果与对照组相比,急性胆囊炎组病人血清MUC1[(134.29±22.35)ng/L比(85.17±14.11)ng/L]、AAG水平[(0.84±0.14)g/L比(0.45±0.07)g/L]升高(P<0.05);与轻度组相比,中度组、重度组病人白细胞计数、中性粒细胞、血清总胆红素、血清MUC1、AAG、CRP水平升高(P<0.05);与中度组相比,重度组病人白细胞计数、中性粒细胞、血清总胆红素、血清MUC1、AAG、CRP水平升高(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组急性胆囊炎病人血清MUC1、AAG升高(P<0.05);血清MUC1、AAG是急性胆囊炎病人预后不良的危险因素(P<0.05);血清MUC1、AAG、二者联合检测对急性胆囊炎病人预后不良的预测AUC分别为0.80(灵敏度为61.4%,特异度为86.4%)、0.81(灵敏度为95.5%,特异度为53.4%)、0.88(灵敏度为88.6%,特异度为79.5%)。结论血清MUC1、AAG在急性胆囊炎中均升高,且与病人的炎症程度有关,对病人术后预后不良具有较高预测作用。

Tim-3及其配体CEACAM1与特发性膜性肾病患者肾功能进展的相关性研究

目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者血清T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)及其配体癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)与其肾功能进展的相关性。方法选取2019年7月至2022年8月于该院住院并经肾组织活检确诊为IMN的80例患者作为IMN组,另选取77例同期体检健康者作为对照组。根据估算肾小球滤过率(eGFR)水平将IMN组分为肾功能正常组[eGFR>90 mL/(min·1.73 m^(2))],肾功能下降组[eGFR≤90 mL/(min·1.73 m^(2))]。采用酶联免疫吸附试验比较各组血清Tim-3、CEACAM1水平,分析IMN患者血清Tim-3、CEACAM1水平与一般临床指标的相关性,采用多因素Logistic回归分析影响IMN患者肾功能下降的危险因素。结果与对照组比较,IMN组血清Tim-3、CEACAM1水平升高(P<0.05);肾功能下降组血清Tim-3水平高于肾功能正常组(P<0.05);血清Tim-3水平与白蛋白、总蛋白、eGFR呈负相关(r=-0.266、-0.229、-0.374,P<0.05),与肌酐呈正相关(r=0.289,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,Tim-3水平升高是影响IMN患者肾功能下降的独立危险因素。结论IMN患者血清Tim-3、CEACAM1水平升高,Tim-3/CEACAM1可能在IMN的发生发展中发挥重要作用,血清Tim-3水平可为IMN患者治疗及预后提供一定依据。

UC患儿肠道菌群及血清MUC1、SOCS-3的表达水平与病情程度的相关性

目的探讨溃疡性结肠炎(UC)患儿肠道菌群及血清上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、细胞因子信号转导负调控因子-3(SOCS-3)的表达水平与病情程度的相关性。方法回顾性分析2018年1月至2022年10月榆林市第一医院收治的110例UC患儿的临床资料,根据溃疡性结肠炎严重程度的不同将患儿分为轻度组35例,中度组46例和重度组29例,另选取同期30例健康体检者作为对照组。检测所有受检者粪便样品中的肠道菌群分布情况以及血清MUC1、SOCS-3水平,并采用Pearson相关性分析法分析各指标与UC病情严重程度的相关性。结果血清MUC1水平比较,重度组>中度组>轻度组>对照组,SOCS-3水平比较,重度组<中度组<轻度组<对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重度组与中度组患儿的双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌明显少于轻度组与对照组,而肠杆菌、肠球菌、小梭菌明显多于轻度组与对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但重度组与中度组、轻度组与对照组的上述各项指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。经Pearson相关性分析结果显示,MUC1、肠杆菌、肠球菌、小梭菌与UC患儿病情严重程度呈正相关(r=0.639、0.221、0.420、0.316,P<0.05),SOCS-3、双歧杆菌、乳杆菌、真杆菌与UC患儿病情严重程度呈负相关(r=-0.481、-0.257、-0.252、-0.132,P<0.05)。结论UC患儿病情越严重,肠道致病菌越多,益生菌越少,且血清MUC1与UC患儿病情严重程度呈正相关,SOCS-3与UC患儿病情严重程度呈负相关。

鼻咽癌细胞系 SUNE 中 EBV-LMP1 基因对上皮细胞增殖的影响

目的研究鼻咽癌细胞系ＳＵＮＥ中ＥＢＶ┐ＬＭＰ１基因对上皮细胞增殖的影响，探索ＬＭＰ１在鼻咽癌发生中所起的作用。方法用ＬＭＰ１基因真核表达质粒转染人胚肾上皮细胞，检测ＬＭＰ１的表达，观察细胞在软琼脂中的集落形成能力，ＭＴＴ吸收能力以及ＰＣＮＡ的表达情况。结果被ＬＭＰ１基因转染的细胞生长旺盛，能在软琼脂中形成多个集落，ＭＴＴ吸收能力增强，ＰＣＮＡ的表达水平增高。结论ＬＭＰ１基因能明显改变上皮细胞的生物学行为，促进细胞的生长、增殖和转化，使转染的上皮细胞获得肿瘤细胞的生长特征。

过表达上皮膜蛋白1对结直肠癌SW-480细胞生物学行为的影响及其可能的机制

目的:探讨上皮膜蛋白1(epithelial membrane protejn-1,EMP1)在人结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)组织中的表达水平及其过表达对CRC SW-480细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法:免疫组织化学、Western blotting方法检测63例CRC组织及31例癌旁组织中EMP1的表达水平,分析EMP1表达与CRC临床病理参数的关系。慢病毒介导将pLenti6-EMP1质粒转染SW-480细胞,建立EMP1过表达细胞,转染plenti6/V5-DEST空白质粒为对照。Real-time PCR及Western blotting检测转染后SW-480细胞株中EMP1的表达,MTT、流式细胞术及Transwell实验分别检测EMP1过表达对SW-480细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。结果:EMP1蛋白在人CRC组织的表达显著低于癌旁组织(0.257±0.022 vs 0.863±0.086,P<0.05),并且其表达水平在不同T分期、有无淋巴结转移、临床分期以及组织分级组间表达有显著差异(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05)。成功构建EMP1过表达的LeEMP1细胞。与LeEmpty细胞相比,LeEMP1细胞的增殖能力显著下降[(60.94±4.04)%vs(100.00±0.00)%,P<0.05],凋亡率显著升高[(12.10±1.30)%vs(3.10±0.60)%,P<0.05]、侵袭转移能力显著降低[穿膜细胞数:(87.00±12.00)vs(178.00±21.00)个,P<0.05]。LeEMP1细胞Caspase-9表达显著高于LeEmpty细胞(0.764±0.073 vs 0.231±0.029,P<0.05),VEGFC表达显著降低(0.185±0.022 vs 0.663±0.065,P<0.05)。结论:人CRC组织中EMP1蛋白表达明显减低,过表达EMP1能够抑制CRC SW-480细胞的恶性生物学行为,其可能通过调控Caspase-9和VEGFC的表达来发挥作用。

粘蛋白1的物理屏障作用与其抑制呼吸道合胞病毒诱导呼吸道炎症无关

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)感染呼吸道上皮细胞后表达上调的粘蛋白1(MUC1)是否可以通过物理屏障作用阻止RSV接近并感染呼吸道上皮细胞,进而抑制炎症反应。方法我们通过向两种呼吸道上皮细胞系(A549和HEp-2)中转染MUC1真核表达载体pcDNA3.1-MUC1的方法过表达MUC1,再应用相同感染复数的RSV分别感染过表达MUC1和转染对照质粒pcDNA3.1的呼吸道上皮细胞,最后比较感染两种细胞内RSV的滴度。结果 RSV成功感染体外培养的两种呼吸道上皮细胞,且RSV在HEp-2细胞内形成的空斑较A549细胞内形成的空斑易于计数。过表达MUC1和转染对照质粒pcDNA3.1的呼吸道上皮细胞内病毒滴度无显著差异。结论呼吸道上皮细胞过表达的MUC1不能抑制RSV接近并感染呼吸道上皮细胞,即MUC1不是通过物理屏障作用抑制RSV诱导炎症反应。

EMP1蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测上皮膜蛋白基因1(EMP1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色方法对60例OSCC患者组织切片中的EMP1表达进行检测,分析不同临床参数中EMP1的表达差异,并计算EMP1表达评分用于诊断OSCC的灵敏度和特异度。结果:EMP1主要表达在细胞膜和(或)胞浆中,淋巴细胞及细胞间质中无明显表达。临床早期OSCC的EMP1表达评分高于晚期,无淋巴结转移OSCC的EMP1表达评分高于有淋巴结转移者,差异有统计学意义。用于诊断淋巴结转移的灵敏度和特异度分别为61.9%和77.8%,用于诊断OSCC临床分期的灵敏度和特异度均为70.0%。结论:EMP1的表达与淋巴结转移、临床分期存在一定相关性,可能对临床诊断和治疗OSCC具有指导价值。

EB病毒潜伏膜蛋白1对人支气管上皮细胞转化作用机理的研究

背景与目的:目前许多研究显示潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein1,LMP1)在一些上皮源性肿瘤的发生中可能起重要作用,但有关LMP1对正常上皮细胞作用的研究并不是很多。因而,本研究拟观察EBV-LMP1对人支气管上皮细胞(humanbronchialepithelial,HBE)的转化作用,并初步探讨其作用机制。方法:将LMP1单独或与hTERT逆病毒表达载体共同转染HBE细胞,经抗性药物筛选获得阳性细胞克隆;通过绘制细胞生长曲线,进行软琼脂集落形成试验、端粒酶活性检测和cyclinA、p21、CDK4蛋白表达的检测,研究LMP1对HBE细胞生物学特性的影响。结果:共同转染LMP1和hTERT的HBE细胞生长旺盛。各组细胞HBE/LMP1+hTERT、HBE/LMP1和HBE/pLNSX+pBabe的软琼脂集落形成率分别为22.98%、16.94%和8.85%;端粒酶活性分别为2.825、2.441、1.876。我们进行Westernblot检测发现前两组细胞cyclinA表达上调、p21表达下调,且两组之间无明显差异;而CDK4蛋白在各组之间表达一致。结论:在转化HBE细胞的过程中,LMP1和hTERT可能具有协同作用,通过调节cyclinA和p21蛋白的表达水平,引起细胞异常增殖,使细胞向恶性化转变。

靶向LMP1基因siRNA作用对AP-1及其相关因子表达的影响

背景与目的:潜伏膜蛋白LMPl是EBV基因组BamH I Nhet片段上BNLF1编码的一种跨膜蛋白,它是发现最早的能在体外恶性转化细胞系的EBV潜伏期蛋白。本研字己旨在探讨LMP1沉默对AP-1信号转导通路及其下游与细胞转化、增殖和凋亡等相关因子转录表达的影响。方法:应用50 nmol/L靶向LMP1功能区编码序列的siRNA649转染EBV阳性的胃癌上皮细胞GT38,分别作用24、48、72、96、120 h,采用RT-PCR检测c-Jun,生存素,CDK4和MMP9 mRNA转录水平;免疫组化法检测细胞生存素蛋白表达;Western印迹法检测c-Jun,JunB和CDK4蛋白表达。结果:靶向LMP1特异性siRNA作用后,各时间点c-Jun和生存素mRNA水平均明显低于细胞对照组(P<0.05),c-Jun以24 h时降低最为明显,而生存素以48 h时降低最为明显;CDK4 mRNA水平均明显高于细胞对照组(P<0.05);转染后24、48、72 h时MMP9 mRNA表达水平均明显低于细胞对照组(P<0.05),96 h和120 h时MMP9则无明显改变(P>0.05)。与细胞对照比较,c-Jun和JunB蛋白表达均下调,JunB蛋白表达在作用第5天时有所恢复,CDK4蛋白表达均上调。免疫组化检测结果显示转染后细胞质中代表生存素阳性的棕色颗粒明显减少。结论:靶向LMP1功能区编码序列的siRNA转染可影响EBV阳性胃上皮细胞AP-1及其下游相关因子的表达,进而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。

上皮膜蛋白1调控人鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探讨上皮膜蛋白1(epithelial membrane protein 1,EMP1)对人鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法 通过脂质体介导,对人鼻咽癌细胞CNE-1(简称CNE-1)分别进行pcDNA3.1(+)空载体质粒和pcDNA3.1(+)-EMP1过表达重组质粒转染。采用实时荧光定量PCR、免疫印记技术检测转染CNE-1与人鼻黏膜上皮细胞HNEpC(简称HNEpC)中EMP1的表达水平。后续实验分3组,分别为CNE-1组(对照组)、pcDNA3.1(+)空载体质粒转染CNE-1(空载体组)和pcDNA3.1(+)-EMP1过表达重组质粒转染CNE-1(过表达组),进行CCK8、集落形成实验、Transwell迁移与侵袭实验,比较3组中EMP1的表达对肿瘤细胞活力、细胞增殖、细胞迁移与侵袭的影响。结果EMP1 mRNA和EMP1在对照组中的相对表达量均显著低于过表达组和HNEpC组,差异均有统计学意义(P均<0.05),与空载体组比较差异无统计学意义(P>0.05)。细胞活力、集落形成率、细胞迁移及侵袭数,对照组均显著高于过表达组,差异均有统计学意义(P均<0.05),与空载体组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EMP1在CNE-1和HNEpC中表达有差异,体外实验证实了上调EMP1表达可抑制肿瘤细胞增殖、迁移与侵袭的生物学行为。

复发性口腔溃疡治疗前后患儿血清上皮细胞膜结合黏液素1、CC修饰趋化因子11水平变化及对复发的预测价值

目的:探讨复发性口腔溃疡患儿治疗前后血清上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、CC修饰趋化因子11(CCL11)水平变化及对复发的预测价值。方法:选取复发性口腔溃疡患儿136例为观察组,同期健康体检且口腔无溃疡者142例为对照组。比较复发性口腔溃疡患儿治疗前后各指标水平,比较未再次复发组和再次复发组各指标水平。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MUC1、CCL11、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素2(IL-2)水平。Pearson法分析患儿血清MUC1、CCL11与TNF-α、IL-2的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清MUC1、CCL11对复发性口腔溃疡再复发的预测价值。结果:与对照组相比,观察组血清MUC1、CCL11、TNF-α、IL-2水平显著升高(均P<0.05)。与治疗前相比,治疗后血清MUC1、CCL11、TNF-α、IL-2水平显著降低(均P<0.05)。Pearson法分析显示,血清MUC1、CCL11均与TNF-α、IL-2呈正相关(均P<0.05)。治疗后,与未再次复发组相比,再次复发组血清MUC1、CCL11、TNF-α、IL-2水平显著升高(均P<0.05)。ROC曲线分析表明,MUC1、CCL11预测复发性口腔溃疡再次复发的曲线下面积(AUC)为0.886、0.813;MUC1联合CCL11预测复发性口腔溃疡再次复发的AUC为0.908,敏感度为84.40%,特异性为86.50%。结论:治疗后复发性口腔溃疡患儿血清MUC1、CCL11水平显著降低,对预测复发性口腔溃疡患儿再次复发具有一定价值。

溃疡性结肠炎患者血清MUC1、sTREM-1水平与病情严重程度及临床结局的关系

目的探讨血清上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、可溶性髓样细胞触发受体1(sTREM-1)水平与溃疡性结肠炎(UC)病情严重程度以及临床结局的关系。方法选择153例UC患者,根据病情严重程度分为轻度组(49例)、中度组(65例)、重度组(39例),根据黏膜病理学检查结果分为活动期组(91例)和缓解期组(62例),根据临床结局分为好转组(106例)和未好转组(47例),另选择82例健康志愿者为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测血清MUC1、sTREM-1水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析MUC1、sTREM-1以及MUC1+sTREM-1预测UC患者临床结局的价值。结果UC组血清MUC1、sTREM-1水平高于对照组(P均<0.01),重度组血清MUC1、STREM-1水平高于中度组和轻度组(P均<0.01),中度组血清MUC1、sTREM-1水平高于轻度组(P均<0.01)。活动期组血清MUC1、sTREM-1水平高于缓解期组(P均<0.01),好转组血清MUC1、sTREM-1水平低于未好转组(P均<0.01)。MUC1、sTREM-1截断值为18.42 U/mL、159.35 pg/mL时,预测UC患者经临床治疗后未好转的曲线下面积(AUC)分别为0.706、0.699,MUC1、sTREM-1联合预测UC患者经临床治疗后未好转的AUC为0.903,高于MUC1、sTREM-1单独检测(P均<0.05)。结论UC患者血清MUC1、sTREM-1水平均升高,且与患者病情严重程度和临床结局有关,可作为评估UC临床结局的潜在指标。

溃疡性结肠炎患者血浆sIL-2R、MUC1检测及其意义

目的:分析溃疡性结肠炎患者血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)检测的意义。方法:检测溃疡性结肠炎患者(研究组)及体检健康者(对照组)血浆sIL-2R、MUC1水平。对比分析研究组轻、中、重度及活动期、缓解期患者各指标水平,另外比较活动期预后良好与预后不良患者各指标水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆sIL-2R、MUC1水平检测对活动期患者预后的预测价值。结果:研究组sIL-2R、MUC1水平[(354.71±11.26)、(11.93±2.38)U/mL]高于对照组[(91.65±8.32)、(6.84±1.52)U/mL](t=158.329、15.038,均P=0.000),研究组活动期sIL-2R、MUC1水平[(390.72±11.63)、(14.85±3.06)U/mL]高于缓解期[(287.34±9.25)、(6.47±1.04)U/mL](t=42.754、14.765,均P=0.000),研究组预后良好者sIL-2R、MUC1水平[(365.71±10.48)、(13.43±2.16)U/mL]低于预后不良者[(477.29±11.73)、(19.77±1.94)U/mL](t=32.933、9.521,均P=0.000),sIL-2R、MUC1水平在轻、中、重度患者中依次升高(F=627.902、67.224,均P<0.05);二者单项及联合检测的灵敏度76.92%、84.62%、76.92%,特异度80.00%、77.78%、86.67%。结论:溃疡性结肠炎患者血浆sIL-2R、MUC1水平升高,与病情程度、活动性相关,可预测预后。

人支气管上皮细胞地塞米松耐药与MUC1表达的关系

目的探讨人支气管上皮细胞地塞米松耐药与黏蛋白1(MUC1)表达的关系。方法制备香烟烟雾提取物(CSE),体外培养人正常支气管上皮细胞NHBE(以下称NHBE细胞),分别给予终浓度为0、1%、2.5%、5%、10%CSE干预,采用MTT法检测细胞存活率,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。选择引起NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌增加的CSE最小浓度进行后续实验。取NHBE细胞,予终浓度为1×10-8 mol/L的地塞米松干预1个月,收集细胞,设为耐药细胞组,加入适量CSE溶液和地塞米松,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度、地塞米松终浓度达到1×10-8 mol/L;另取NHBE细胞,随机分为非耐药细胞1组和非耐药细胞2组,非耐药细胞1组加入适量CSE溶液,使CSE终浓度达到上述筛选的最小浓度;非耐药细胞2组加入适量地塞米松,使地塞米松终浓度达到1×10-8 mol/L。各组干预48 h,采用ELISA法检测培养上清液炎症因子IL-8、GM-CSF,采用RT-qPCR法检测MUC1 mRNA相对表达量。结果随着CSE浓度升高,NHBE细胞存活率逐渐降低,呈剂量依赖性(F=8.520,P<0.01)。5%、10%CSE干预后NHBE细胞存活率明显低于0、1%、2.5%CSE干预后,并且10%CSE干预后NHBE细胞存活率低于5%CSE干预后(P均<0.05)。而0、1%、2.5%CSE干预后NHBE细胞存活率两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与0、1%、2.5%CSE比较,5%、10%CSE均能使NHBE细胞炎症因子IL-8、GM-CSF分泌明显升高(P均<0.05)。引起炎症因子IL-8、GM-CSF水平增加的CSE最小浓度为5%,故选择5%CSE进行后续实验。耐药细胞组炎症因子IL-8、GM-CSF水平明显高于非耐药细胞2组(P均<0.05),而与非耐药细胞2组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。耐药细胞组MUC1 mRNA相对表达量均低于非耐药细胞1组和非耐药细胞2组(P均<0.01),而非耐药细胞1组与非耐药细胞2组MUC1 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论人支气管上皮细胞地塞米松耐药可能与MUC1表达降低有关。

干扰MT1-MMP表达对口腔鳞癌细胞增殖、侵袭的影响

目的:检测膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)在口腔鳞癌(OSCC)中的表达,探讨其对OSCC细胞增殖、侵袭的影响。方法:选取40例OSCC及癌旁组织样本,实时荧光定量PCR检测样本中MT1-MMP及上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA表达。采用小干扰RNA(siRNA)靶向干扰HSC3细胞MT1-MMP基因,实验分为siControl、siMT1-MMP、siControl+转化生长因子-β1(TGF-β1)及siMT1-MMP+TGF-β1组。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测MT1-MMP、E-cadherin、TGF-β信号通路相关蛋白CUTL1及Wnt5a的表达。结果:相对于癌旁组织,OSCC组织中MT1-MMP mRNA水平为高表达,E-cadherin为低表达(P<0.05);在干扰MT1-MMP表达后,HSC3细胞的增殖能力无明显变化(P>0.05);与siControl和siMT1-MMP组比较,siControl+TGF-β1组和siMT1-MMP+TGF-β1组细胞侵袭能力增强(P<0.01);与siControl+TGF-β1组比较,siMT1-MMP+TGF-β1组细胞侵袭能力减弱(P<0.01);与siControl组相比,siControl+TGF-β1组中MT1-MMP表达及TGF-β信号通路相关蛋白CUTL1及Wnt5a表达显著升高,E-cadherin表达下降(P<0.01);与siControl+TGF-β1组相比,siMT1-MMP+TGF-β1组中MT1-MMP、CUTL1及Wnt5a的蛋白表达水平有所下调,且E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:干扰MT1-MMP可能通过调节TGF-β1诱导的EMT进程抑制OSCC细胞侵袭。

直肠癌组织和结肠粘膜上皮粘附分子-1的表达及其临床意义

目的 探讨粘附分子-1(CD_(54))在直肠癌组织和邻近肠粘膜上皮的表达及其临床意义.方法 应用荧光标记的CD_(54)单克隆抗体分子探针,通过流式细胞仪检测,对36例直肠癌癌组织、癌下缘2cm处肠粘膜上皮及患者正常结肠上皮的CD_(54)表达进行了对比研究.结果 直肠癌细胞CD_(54)表达为(9.79±5.12)%,与癌下缘2cm处肠上皮无显著差异(P>0.05),但显著高于正常处结肠上皮和正常对照组(P<0.05).结论 CD_(54)肠癌组织明显表达,可作为直肠癌临床研究的指标;癌下2cm处肠上皮CD_(54)表达与直肠癌组织相似,提示有恶性转化的趋势.

泼尼松对支气管上皮细胞黏蛋白5AC、细胞间黏附分子-1、白细胞介素-6分泌的影响

目的:探讨泼尼松对脂多糖(LPS)诱导的支气管上皮细胞黏蛋白5AC(MUC5AC)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)分泌的影响。方法:体外分离鉴定原代支气管上皮细胞,LPS以1μg/m L剂量诱导细胞炎症反应,泼尼松5、10、20、40、50、100μmol/L干预治疗,酶联免疫法(ELISA)检测细胞上清液MUC5AC、ICAM-1、IL-6水平变化,采用定量逆转录PCR(RT-PCR)、免疫印迹(Western-blot)检测MUC5AC、ICAM-1、IL-6 m RNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测核因子κB(NF-κB)核定位,Western-blot检测泼尼松干预治疗前后表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)活化情况。结果:泼尼松以剂量依赖性降低LPS诱导的支气管上皮细胞内MUC5AC、ICAM-1、IL-6 m RNA水平和蛋白水平,抑制NF-κB、EGFR、ERK1/2活化。结论:泼尼松在体外能抑制MUC5AC、ICAM-1、IL-6的产生,其机制可能与抑制NF-κB、EGFR、ERK1/2的激活有关。

重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合康复新液治疗复发性口腔溃疡患者的效果

目的:观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合康复新液治疗复发性口腔溃疡患者的效果。方法:回顾性分析2020年7月至2021年9月该院收治的128例复发性口腔溃疡患者的临床资料,根据治疗方案不同将其分为观察组与对照组各64例。对照组采用康复新液治疗,观察组在对照组基础上联合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗,比较两组临床疗效,临床症状改善时间,治疗前后血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)]水平和血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、上皮细胞膜结合黏液素1(MUC1)、CC修饰趋化因子11(CCL11)水平,治疗后3个月内复发率,以及不良反应发生率。结果:观察组治疗总有效率为98.44%(63/64),高于对照组的87.50%(56/64),差异有统计学意义(P<0.05);观察组溃疡愈合时间、疼痛消失时间、水肿消失时间、渗出消失时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清IL-2、IL-6、TNF-α、CRP水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组血清SOD水平均高于治疗前,且观察组高于对照组,两组MDA、MUC1、CCL11水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗期间,两组均无明显不良反应发生;治疗后3个月内,观察组复发率为9.38%(6/64),低于对照组的23.44%(15/64),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶联合康复新液治疗复发性口腔溃疡患者可提高治疗总有效率和SOD水平,缩短临床症状改善时间,降低血清炎性因子水平、MDA水平、MUC1水平、CCL11水平和复发率,其效果优于单纯康复新液治疗。

棉铃虫围食膜肠粘蛋白基因HM72的克隆、表达及其蛋白组织定位

围食膜是昆虫中肠上皮细胞分泌形成一层特有的非细胞性半透膜,肠粘蛋白是其重要的组成成分。本研究利用棉铃虫Helicoverpa armigera围食膜蛋白多克隆抗体免疫筛选棉铃虫中肠cDNA表达文库,共获得385个阳性克隆,经DNA测序和序列对比,确认其中之一为编码棉铃虫中肠围食膜肠粘蛋白的cDNA克隆HM72。序列分析显示,该cDNA全长为2888bp(GenBank登录号:HM017910),其中ORF长2469bp,编码823个氨基酸,包含起始密码子ATG和终止密码子TAA,在poly A末端上游19bp处有一个多聚腺苷酸信号序列AATTAA。氨基酸序列分析表明,其N-端含有16个氨基酸的信号肽,预测分子量为84.2kDa,等电点3.63,为酸性蛋白质。结构域分析表明,该蛋白具有5个几丁质结合功能域,一个粘蛋白结构域和两个甘氨酸-天冬氨酸富集区,该基因成功表达100kDa的目的蛋白。Western blot分析表明,HM72蛋白存在于棉铃虫中肠、围食膜、粪便及蜕中,并由整个中肠分泌,而在棉铃虫脂肪体、体壁、马氏管、唾腺、消化液、血淋巴中没有检测到HM72蛋白。

人羊膜上皮细胞培养液抑制角膜炎症的实验研究

目的探讨人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cell,HAEC)培养液对角膜炎症反应的抑制作用及机制。方法体外培养及鉴定HAEC和兔角膜上皮细胞,制备HAEC培养液。根据培养兔角膜上皮细胞的培养液成分不同分为无血清改良杜氏培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium,DMEM)组(DMEM组)、无血清DMEM与HAEC培养液1∶1混合组(混合组)、HAEC培养液组(HAEC组)。传代的角膜上皮细胞贴壁24h后,用磷酸盐缓冲液润洗后按分组更换为上述3种培养液培养48h后收集细胞。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HAEC培养液中白介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1Ra)的含量。采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测3组培养液中兔角膜上皮细胞中的白介素(IL)-1β信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)的表达,采用八肽胆囊收缩素(cholecystokinin-octapeptide,CCK-8)法检测3组细胞的增殖情况。结果 HAEC和兔角膜上皮细胞的形态学观察符合上皮细胞特征。HAEC培养液中IL-1Ra的含量为(153.56±0.36)ng/L,无血清DMEM对照中未检出IL-1Ra。3组培养液中,兔角膜上皮细胞的IL-1β mRNA表达由低至高分别为HAEC组、混合组和DMEM组,3组的IL-1β mRNA表达差异均有统计学意义(均为P<0.05)。兔角膜上皮细胞分组培养24、48、72h后,HAEC组的兔角膜上皮细胞吸光值明显高于混合组和DMEM组,DMEM组的兔角膜上皮细胞吸光值在各时间点均低于混合组(均为P<0.05)。结论 HAEC可分泌IL-1Ra抑制角膜上皮细胞IL-1β的表达,减少炎症反应及移植排斥作用,并促进角膜上皮细胞增殖。