肿瘤相关巨噬细胞促进胃癌上皮-间质转化的机制

目的探讨胃癌中肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)促进上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的相关机制。方法采用免疫组化法检测90例胃癌组织和20例癌旁正常组织中TAMs、TGFβ1及EMT标志物(E-cadherin、vimentin)的表达,并分析其相关性。结果 TAMs和TGFβ1在胃癌中的阳性率均高于正常胃黏膜(P<0.05),且均与Lauren分型、分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移相关(P均<0.05);胃癌中E-cadherin阳性率低于正常胃黏膜而vimentin阳性率高于正常胃黏膜(P均<0.001)当胃癌分化程度为低～未分化、浸润深度达浆膜、临床分期达Ⅲ+Ⅳ期及有淋巴结转移时,E-cadherin表达减少而vimentin表达增加。胃癌中TAMs与TGFβ1表达呈正相关,与E-cadherin表达呈负相关,与vimentin表达呈正相关。结论 TAMs可能通过调节TGFβ1促进胃癌EMT,进而促进肿瘤浸润和转移。

MMP-9和E-cadherin在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin)在乳腺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化法检测20例正常乳腺组织、20例乳腺增生组织及50例乳腺癌组织中MMP-9和E-cadherin的表达,并分析两者与乳腺癌的临床病理指标之间的关系。结果 MMP-9在正常乳腺、乳腺增生及乳腺癌组织中的阳性表达率分别为5.0%、30.0%、66.0%,在乳腺癌组织中的表达显著高于正常乳腺和乳腺增生组织,而E-cadherin在三组中的阳性表达率则恰好相反,分别为95.0%、85.0%、42.0%,在乳腺癌组织中的表达显著低于正常乳腺和乳腺增生组织,两者在乳腺癌组织中的阳性表达率呈显著负相关(r=-0.605,P<0.05)。MMP-9和E-cadherin的表达均与乳腺癌组织学分级、肿瘤临床TNM分期、腋窝淋巴结转移与否显著相关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小无显著相关性(P>0.05)。结论 MMP-9和E-cadherin均与乳腺癌的发生和发展密切相关,且二者在乳腺癌中的表达呈显著负相关,联合检测二者可能对乳腺癌的预后判断更具价值。

姜黄素通过阻滞MAPK/ERK通路抑制人子宫内膜癌HEC-1-B细胞的侵袭转移

目的阐明MAPK/ERK信号传导途径在姜黄素抑制子宫内膜癌细胞侵袭转移中的作用及其机制。方法不同浓度(0,10,20和30μmol/L)姜黄素干预HEC-1B细胞后,用Western blot检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、MEK1、p-MEK1及上皮间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadhrein、Vimentin、Twist和Snail)的表达;利用pc DNA3.1(+)-MEK1表达载体和pc DNA3.1(+)空载体稳定转染细胞后过表达MEK1;利用Transwell侵袭实验检测姜黄素及ERK抑制剂U0126对HEC-1-B细胞的侵袭能力的效应;利用real-time PCR法检测姜黄素对EMT相关分子(CDH1、CDH2、FN1、Snail 1、Twist 1、Vimentin、ZEB1和ZEB2)的mRNA水平的影响。结果与空白对照组相比,姜黄素(≥20μmol/L)能够显著抑制HEC-1-B细胞中ERK1/2的活化,且呈浓度依赖性(P<0.01)。外源性过表达MEK1可以削弱姜黄素对HEC-1-B细胞的抗侵袭作用。单独使用U0126或姜黄素均可显著降低HEC-1-B细胞侵袭力(P<0.01或P<0.05)。此外,联合使用U1026能够增强姜黄素的侵袭抑制作用。进一步的Western blot和real-time PCR结果表明,姜黄素通过阻滞ERK信号转导通路,抑制EMT的发生。结论姜黄素通过阻滞MAPK/ERK信号转导通路抑制子宫内膜癌细胞的侵袭转移,这将为临床肿瘤转移和复发的治疗提供理论依据。

滑膜肉瘤中E-、N-cadherin和β-catenin的表达及意义

目的探讨上皮间叶转化(EMT)相关蛋白E-、N-cadherin和β-catenin在滑膜肉瘤中的表达及意义。方法收集滑膜肉瘤34例,包括双相型24例和单相纤维型10例,应用免疫组化EnVision两步法检测E-、N-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平。结果 (1)E-、N-cadherin和β-catenin在34例滑膜肉瘤中的阳性率分别为52.9%、76.5%、97.1%。E-cadherin在双相型滑膜肉瘤中的阳性率(70.8%)高于单相纤维型(10%)(P<0.05);N-cadherin、β-catenin在双相型和单相纤维型滑膜肉瘤中的阳性率分别为70.8%(17/24)和90%(9/10)、95.8%(23/24)和100%(24/24),差异均无显著性(P>0.05)。(2)在24例双相型梭形细胞成分中E-、N-cadherin和β-catenin的阳性率分别为12.5%(3/24)、50%(12/24)和62.5%(15/24);在10例单相纤维型滑膜肉瘤梭形细胞成分中的阳性率分别为10%(1/10)、80%(8/10)和100%(10/10)。β-catenin在单相纤维型滑膜肉瘤的梭形细胞的表达率高于双相型中的梭形细胞(P<0.05)。(3)在24例双相型滑膜肉瘤中,E-、N-cadherin和β-catenin在上皮样细胞中的阳性率分别为70.8%(17/24)、83.3%(20/24)和95.8%(23/24);在梭形细胞成分中的阳性率分别为12.5%(3/24)、50%(12/24)和62.5%(15/24)。E-、N-cadherin和β-catenin在上皮样细胞中的表达均高于梭形细胞(P<0.05)。(4)在双相型滑膜肉瘤中E-cadherin和N-cadherin、E-cadherin和β-catenin均同时表达的比例较高,在单相纤维型中E-cadherin不表达而N-cadherin、β-catenin表达的比例较高。(5)滑膜肉瘤中E-、N-cadherin和β-catenin的表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级和临床TNM分期之间差异均无显著性(P>0.05)。结论 EMT相关蛋白E-、N-cadherin和β-catenin均可能参与滑膜肉瘤的组织形态分化,N-cadherin和β-catenin影响双相型和单相纤维型滑膜肉瘤中E-cadherin的表达途径不同,滑膜肉瘤组织中可能存在间叶上皮转化(MET)现象。对其深入研究将有助于阐明滑膜肉瘤浸润和转移的分子机制。

缺氧微环境调控Twist促进人肝癌细胞株SMMC-7721的上皮间质转化

目的探讨缺氧条件下,Twist基因的表达及其在人肝癌SMMC-7721细胞株上皮间质转化中的作用机制。方法模拟缺氧微环境,分别在常氧(21%O_2)和缺氧(1%O_2)条件下培养SMMC-7721细胞24 h。在倒置光学显微镜下检测SMMC-7721细胞形态学的改变;RT-PCR和Western blot法检测细胞中HIF-1α、Twist、上皮表型标记蛋白E-cadherin及间质表型标记蛋白Vimentin的表达;Transwell小室侵袭实验检测缺氧条件和常氧条件下细胞侵袭能力的变化。使用Twist1靶向siRNA抑制其表达后,进一步采用RT-PCR和Western blot检测HIF-1α、Twist、E-cadherin和Vimentin的表达水平,Transwell法检测细胞侵袭能力变化。结果在缺氧模拟条件下,人肝癌SMMC-7721细胞中Twist基因表达水平显著升高,同时细胞发生上皮-间质转化和侵袭能力增强。靶向沉默Twist基因后,低氧诱导的上皮间质转化过程被逆转,同时细胞侵袭能力显著减弱。结论低氧条件下Twist基因异常激活,进而促进SMMC-7721细胞上皮-间质转化的发生和侵袭能力的增强。

Raptor通过Wnt3a/β-catenin信号通路对乳腺癌侵袭与转移的作用

目的探讨Raptor是否可以通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。方法采用免疫印迹法(Western blotting)检测乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231(MDA231)中Raptor蛋白的表达情况;采用小RNA(RNAi)干扰技术将质粒转染MDA231,将过表达质粒转染MCF-7;趋化运动实验检测乳腺癌细胞的运动能力;Transwell侵袭实验检测乳腺癌细胞的侵袭能力;Western blotting检测上皮细胞-间充质转化(EMT)标志物的表达情况;核质分离实验检测β-联蛋白(β-catenin)的转核情况。结果 Western blotting法检测结果显示,Raptor在低转移细胞系MCF-7中低表达,而在高转移细胞系MDA231中高表达。转染后,SiRaptor/MDA231细胞组中Raptor蛋白的表达明显下降,MCF-7/Raptor细胞组中Raptor蛋白的表达明显升高,表明转染成功。用Wnt3a刺激处理后,趋化运动和Transwell侵袭实验结果显示,SiRaptor/MDA231细胞组运动和侵袭能力明显降低,MCF-7/Raptor细胞组运动和侵袭能力明显增强。Western blotting法检测结果显示,用Wnt3a和抑制剂Dkk1不同处理后,SiRaptor/MDA231细胞组中上皮-钙黏蛋白(E-cadherin)上调,波形蛋白(vimentin)下调,细胞核中β-catenin的表达降低,而MCF-7/Raptor细胞组中E-cadherin蛋白下调,vimentin蛋白上调,β-catenin蛋白的表达升高。结论 Raptor能通过Wnt3a/β-catenin信号通路促进EMT的发生,进而促进乳腺癌细胞的侵袭与转移。

上皮间质转化的信号转导调控及药物开发

上皮间质转化(epithelial-mesenchym al-transition,EMT)是胚胎形成过程中的关键步骤,研究表明其在原发性肿瘤转移过程中同样发挥了重要作用。参与EMT的信号通路包括Wnt/β-catenin、Notch、Hedgehog、TGFβ和生长因子受体等,针对相应信号通路的药物成为有效的恶性肿瘤治疗手段。

下调Snail基因对子宫内膜癌增殖和侵袭的影响

目的探讨下调Snail基因对子宫内膜癌增殖和侵袭的影响及其机制。方法培养子宫内膜癌细胞株,构建Snail-shRNA表达载体,建立下调Snail基因表达的子宫内膜癌细胞株;用CCK-8法检测子宫内膜癌细胞株(Ishikawa)的增殖能力。用Transwell小室结合基质胶(Matrigel)法比较子宫内膜癌细胞株与相应的瞬时转染细胞株在细胞迁移能力及侵袭能力的差异。结果通过下调Snail基因在细胞内的表达,体外观察子宫内膜癌细胞增殖能力空白对照组高于细胞转染组;迁移与侵袭能力空白对照组高于细胞转染组。结论 Snail基因在子宫内膜癌中表达下调;与抑制子宫内膜癌的增殖和侵袭转移相关,其可能机制与逆转肿瘤的上皮细胞-间质转化过程和共同抑制下游转移靶基因相关。

鼠胚呼吸内胚层相关第二生心区发育中的上皮-间充质转化

目的探讨上皮-间充质转化与鼠胚呼吸内胚层相关第二生心区发育的关系。方法用免疫印迹法检测转化生长因子β2(TGF-β2)和转化生长因子β3(TGF-β3)在胚龄9~14 d小鼠胚胎心脏的表达情况。另用叉头框蛋白A2(Foxa2)、胰岛因子1(ISL-1)、层黏连蛋白(LN)及上皮型钙黏蛋白(E-cad)抗体,对35例胚龄10~12 d小鼠胚胎心连续石蜡切片进行免疫组织化学或免疫荧光染色。结果 TGF-β2和TGF-β3蛋白于胚龄10~12 d在小鼠胚胎心脏均有表达。在上述呼吸内胚层相关第二生心区发育的时间点,均可见ISL-1阳性呼吸内胚层与周围ISL-1阳性第二生心区间充质分界不清或混为一体的现象,同时伴有相应部位基底膜的断续状或者模糊不清状改变;尤其在胚龄11 d和12 d,部分呼吸内胚层或其实心细胞索细胞失去Foxa2表达,呈较强ISL-1表达,同时伴有基底膜的断裂或者缺失,E-cad表达减弱,细胞间隙出现,甚至从内胚层脱离,失去上皮细胞的顶-底极性。结论TGF-β信号调节的上皮-间充质转化参与鼠胚呼吸内胚层相关第二生心区发育形成。

肿瘤相关巨噬细胞与肿瘤细胞上皮间质转化关系的研究进展

上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞在形态学上发生向间质细胞表型的转变,在肿瘤的侵袭和转移过程中发挥重要作用,肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associatedmacrophage,TAM)是肿瘤的基本成分之一,通过分泌TNF-α、IL-6、EGF、VEGF、MMP-9、uPA等因子诱导肿瘤细胞发生EMT,协同其刺激新生血管形成、降解基质、促进肿瘤细胞发生局部侵袭及远处转移。

长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响

目的 :探讨长链非编码RNA BANCR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达水平,以及BANCR对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响。方法:用定量PCR技术检测NSCLC组织及细胞系中BANCR的表达水平;通过转染pc DNA-BANCR上调BANCR的表达水平,并通过q PCR检测转染效率。用Transwell实验检测上调BANCR的水平对SPC-A1细胞和A549细胞增殖和侵袭能力的影响,Western blot检测这2种细胞中上调BANCR的水平对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响。结果 :相比正常肺组织及细胞,在NSCLC组织和细胞中BANCR的表达出现显著下调。MTT实验显示,上调BANCR的表达能降低SPCA1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力。BANCR过表达能通过上调E-cadherin表达并下调Vimentin表达,影响EMT。结论:BANCR可通过影响EMT,抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭。

白细胞介素-6诱导CD44+ CD24-/low肿瘤干细胞生成促进乳腺癌MCF7细胞辐射抵抗的研究

目的：上皮-间充质转化（EMT）能诱导 CD44＋CD24－／low乳腺癌干细胞的产生，白细胞介素-6（IL-6）是很强的 EMT 诱导因子，探讨 IL-6是否通过诱导 CD44＋CD24－／low细胞的产生，从而促进乳腺癌 MCF7细胞的辐射抵抗。方法含50 ng／ml IL-6的培养基培养 MCF7细胞，流式细胞术检测 CD44＋CD24－／low乳腺癌干细胞标记的变化，实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）及Western blot 检测 EMT 标记分子的表达水平，进一步利用流式细胞术从诱导组中分选出 CD44＋CD24－／low细胞，克隆形成实验检测分选后细胞的辐射抵抗能力。结果IL-6能诱导 MCF7细胞发生间充质样转化，诱导5 d 后 CD44＋CD24－／low细胞显著富集，诱导形成的 CD44＋CD24－／low细胞的辐射抵抗能力显著提高。结论IL-6诱导了 CD44＋CD24－／low 乳腺癌干细胞的产生，从而促进MCF7细胞的辐射抵抗。

肾小管上皮细胞转分化与转化生长因子-β和以其为靶点的治疗策略

肾间质纤维化几乎是所有肾脏疾病进展到终未期肾功能衰竭的共同病理途径,近年研究表明,肾小管上皮细胞向间充质细胞转分化(EMT)是肾间质纤维化发生发展的核心环节之一。转化生长因子(TGF)-β是促EMT作用最强的细胞因子,可以启动并完成整个EMT过程,是纤维化形成与发展的启动枢纽。因此,针对TGF-β可为肾间质纤维化的防治提供新的有效途径。现就该研究方向的新进展作一综述。

白细胞介素-34/集落刺激因子-1R在转化生长因子-β1诱导A549细胞上皮-间质转化中的表达

目的探讨白细胞介素-34/集落刺激因子-1受体(IL-34/CSF-1R)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导A549细胞发生上皮-间质转化(EMT)中的表达。方法体外培养A549细胞;CCK 8法检测不同浓度TGF-β1在不同时间点对A549细胞增殖的影响;选用5μg/L TGF-β1刺激A549细胞(0、12、24、48h),提取细胞蛋白和RNA,Western blotting法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏连蛋白(E-Cad)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白的变化;Real-time PCR法检测IL-34、CSF-1R、MMP-2、MMP-9基因表达的变化。结果 TGF-β1对A549细胞的增殖无明显影响(P>0.05)。TGF-β1刺激A549细胞后,间质细胞标志性蛋白α-SMA表达升高,上皮细胞标志性蛋白E-Cad表达下降,纤维化相关的MMP-2蛋白表达升高,MMP-9蛋白表达先升高后下降,TIMP-1蛋白早期出现短暂性增高后,呈持续降低趋势(P<0.01)。IL-34mRNA表达逐渐升高,CSF-1R mRNA、MMP-2 mRNA、MMP-9 mRNA表达先升高后下降(P<0.01)。结论 TGF-β1诱导A549细胞的EMT过程中,存在IL-34/CSF-1R的动态表达。

埃兹蛋白与肝癌侵袭转移及上皮间质转化的关系

目的研究埃兹蛋白（Ezrin）对原发性肝癌组织侵袭转移的影响，及其与肝癌细胞上皮间质转化（Epithelial—Mesenchymal Transition，EMT）的关系。方法采用免疫组化maxvision法检测60例原发性肝癌组织及30例正常肝组织中Ezrin、E—cad和Vimentin的表达及关系。结果Ezrin在原发性肝癌组织中的阳性表达率较正常肝组织高（60％ vs 6．7％，P〈0．01），其在肝癌中的过度表达与组织分化程度有关（P〈0．05），与癌组织的大小无关（P〉0．05）。上皮性标志物E—cad在肝癌组织中的阳性表达率明显低于正常癌旁组织（43％ vs 76．6％，P〈0．01）。间质性标志物Vimentin在肝癌组织中的阳性表达率高于正常癌旁组织（43．7％ vs 0％，P〈0．01）。统计学相关分析表明Ezrin与E—cad的表达呈负相关，与Vimentin的表达无相关性。E—cad与Vimentin表达呈负相关。结论Ezrin在肝癌侵袭转移过程中发挥重要作用，并与肝癌上皮问质转化有关。

Axl及Slug在胆管癌中的表达及临床意义

目的研究Axl与锌指转录因子Slug在胆管癌中的表达及与临床参数的关系。方法收集2010年9月至2015年7月定州市人民医院手术切除的病理证实为胆管癌石蜡标本70例,并收集其中病理证实为非癌组织的癌旁胆管蜡块标本20例,采用免疫组织化学(S-P)法进行检测,分析其临床意义。结果不同年龄、肿瘤大小、肿瘤分级的Axl与Slug蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),有淋巴结转移、动静脉受侵的Axl与Slug蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移和动静脉受侵组(P<0.05)。在胆管癌中Axl与Slug的表达呈正相关(r=0.658,P<0.001)。结论 Axl与Slug表达可能与胆管癌的发生、发展有关,在胆管癌细胞增殖、侵袭及转移中起重要作用。

miR-302b在糖尿病肾病中抑制高糖诱导上皮间质细胞转化的研究

目的糖尿病肾病(DN)是一种糖尿病血管并发症,其发病机制仍然复杂。本研究旨在探讨糖尿病肾病发展过程中,miR-302b在高糖诱导上皮间质细胞转化(EMT)过程中的潜在作用,并揭示其可能的分子机制。方法用高糖(30 mM)处理足细胞与上皮细胞,构建糖尿病肾病模型。用病毒包装法打包miR-302b中的过表达载体,然后转染到足细胞与上皮细胞中。结果在miR-302b的过表达影响下,与上皮间质细胞转化相关的蛋白分子,包括Slug蛋白、Snail蛋白、波形蛋白和纤连蛋白都显著降低,而E-钙黏蛋白、β-连环蛋白、α-连环蛋白显著增加。结论研究结果表明,miR-302b的过表达是通过抑制高糖诱导上皮间质细胞转化过程,从而在糖尿病肾病中起保护作用。

UBE3C在雌激素促进子宫内膜癌细胞迁移及侵袭中的作用机制研究

目的:探讨泛素连接酶E3C(UBE3C)在雌激素(E_2)诱导子宫内膜癌细胞发生迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)过程中的作用。方法:免疫组化法检测子宫内膜癌组织中UBE3C表达情况。qRT-PCR及Western blot法检测UBE3C在子宫内膜癌细胞株、子宫内膜间质细胞株及正常子宫内膜上皮细胞中的表达。雌激素以浓度及时间梯度处理Ishikawa细胞,qRT-PCR及Western blot法检测UBE3C mRNA和蛋白表达。雌激素处理siNC或siUBE3C转染的Ishikawa细胞,划痕试验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western blot法检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、snail及slug表达。结果:UBE3C在子宫内膜癌组织及细胞中高表达。雌激素能上调Ishikawa细胞UBE3C mRNA及蛋白表达,且在一定范围内呈剂量时间依赖性。雌激素刺激增强Ishikawa细胞的迁移、侵袭能力,促进EMT;si-UBE3C干扰能显著抑制上述作用,且能减弱雌激素对Ishikawa细胞迁移、侵袭能力的增强及EMT的促进。结论:UBE3C与雌激素能增强子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭能力,促进上皮间质转化,UBE3C可能是雌激素下游重要的靶基因之一,介导雌激素诱导子宫内膜癌细胞的迁移、侵袭及上皮间质转化。

滴滴涕对人大肠癌DLD1细胞上皮间充质转化的影响

目的探究滴滴涕(DDT)对人结直肠腺癌上皮细胞(DLD1)上皮间充质转化的影响及机制。方法DLD1细胞用DDT 0.01,0.1,1.0,10.0和100.0 nmol·L^(-1)处理48 h后,倒置显微镜下观察细胞形态;实时荧光定量PCR法检测E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA表达。Western蛋白质印迹法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路主要蛋白STAT3和p-STAT3的蛋白水平。用STAT3抑制剂WP1066(5μmol·L^(-1))处理,通过Western印迹法和实时荧光定量PCR法检测其对DDT诱导的STAT3/Snail1信号通路中p-STAT3、STAT3的蛋白水平和上皮间充质转化关键因子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白、波形蛋白和锌指转录因子Snail1的mRNA水平的影响。结果与正常对照组相比,DLD1细胞在DDT处理48 h后,细胞形态由卵圆形逐渐变为长梭形,E-钙黏着蛋白mRNA相对表达显著降低(P<0.01),为正常对照组的(42.4±2.8)%。N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA相对表达显著提高(P<0.01),为正常对照组的1.91±0.1倍和(1.5±0.2)倍。STAT3信号通路蛋白STAT3和p-STAT3蛋白表达均升高(P<0.01),为正常对照组的2.1和1.8倍。锌指转录因子Snail1的mRNA相对表达显著升高(P<0.01),是正常对照组的(1.5±0.1)倍。STAT3抑制剂WP1066 5μmol·L^(-1)处理后,锌指转录因子Snail1 mRNA的表达明显下调(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的(56.3±0.9)%,同时抑制DDT诱导的E-钙黏着蛋白mRNA表达升高(P<0.01),为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的2.5±0.1倍,N-钙黏着蛋白和波形蛋白mRNA表达降低(P<0.01),分别为DDT 1.0 nmol·L^(-1)处理组的(50.2±2.9)%和(61.6±6.1)%。结论 DDT可能通过STAT3/Snail1信号通路改变上皮间充质转化子E-钙黏着蛋白、N-钙黏着蛋白和波形蛋白的表达,进而促进大肠癌细胞上皮间充质转化。

虫草素通过下调TGF-β抑制高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化

目的:探讨虫草素对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响。方法:体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞株(NRK52E细胞株),分为正常对照组(葡萄糖5.5 mmol/L,NG组)、高糖组(葡萄糖30 mmol/L,HG组)、高糖+虫草素组(葡萄糖30 mmol/L+虫草素10μg/ml,HG+C组)。分别于刺激12 h,24 h,48 h后收集细胞。应用定量RT-PCR测定NRK52E TGF-β,E-cadherin,α-SMA mRNA的表达;Western印迹方法检测TGF-β、E-cadherin、α-SMA蛋白的表达。结果:高糖刺激后NRK52E细胞的TGF-β和α-SMA mRNA及蛋白表达明显高于正常糖组(P<0.01),而虫草素组TGF-β和α-SMA mRNA及蛋白表达显著低于高糖组(P<0.05);高糖诱导的NRK52E细胞E-cadherin mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.01);而虫草素组NRK52E细胞E-cadherin mRNA及蛋白水平显著高于高糖组(P<0.05)。结论:虫草素可以明显抑制高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化,其机制可能是通过下调TGF-β实现。