HPLC多指标成分联合PCA和OPLS-DA法的复方儿茶胶囊综合质量评价

目的建立HPLC法同时检测复方儿茶胶囊中儿茶素、表儿茶素、槲皮素和山奈酚的含量,并结合主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)法构建其质量控制体系。方法采用Waters Symmetry C18色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相乙腈-0.5%冰醋酸,梯度洗脱;检测波长分别为280 nm(检测儿茶素和表儿茶素)、360 nm(检测槲皮素和山奈酚);用外标法计算各成分含量,并联合PCA、OPLS-DA进行品质分析。结果4种成分分别在各自范围内线性关系良好(r≥0.9992);平均加样回收率96.85%~99.54%(RSD<2.0%);经PCA法得2个主成分的累积贡献率达到87.463%;OPLS-DA法显示12批复方儿茶胶囊样品聚为3类;儿茶素和表儿茶素是影响复方儿茶胶囊产品质量的主要潜在标志物。结论所建方法结果准确、操作便捷,可用于复方儿茶胶囊的综合质量评价。

基于响应面法优化高产乙酸乙酯大曲清香型白酒二[米查]酒醅恒温发酵工艺

以大曲清香型白酒大[米查]酒糟为发酵底物,二[米查]酒醅发酵工艺为基础,以酒醅中乙酸乙酯含量及酒精度为考察指标,采用单因素试验及响应面试验对二[米查]酒醅恒温发酵工艺进行优化。结果表明,最优大曲清香型白酒二[米查]酒醅恒温发酵工艺条件为大曲添加量12%,辅料添加量8.8%,水分添加量44%,发酵温度28℃,发酵时间21 d。在此优化条件下,二[米查]酒醅中乙酸乙酯含量最高,为(0.69±0.01)g/kg,比优化前(0.39 g/kg)提高76.9%。

复方儿茶栓质量标准的研究

目的：为复方儿茶栓（中药制剂）提供质量控制方法。方法：拟定制备工艺，采用ＴＬＣ对儿茶、血竭、乳香等成分进行色谱鉴别，采用经典络合滴定法测定硫酸铝钾［ＫＡｌ（ＳＯ４）２］的含量。结果：鉴别的样品都能检出相应的斑点。含量测定［ＫＡｌ（ＳＯ４）２］有良好的重现性，加样回收率达９９．６２％（ＲＳＤ＝２．６４％）。结论：制备工艺可行。该制剂质量标准鉴别、含量测定方法简便可行，具有实用性。

清香型白酒发酵过程中微生物及理化指标的变化规律

以酿造清香型白酒的大楂和二楂酒醅为研究对象,追踪不同发酵阶段酒醅中微生物及理化指标,探讨大楂和二楂发酵过程中微生物及理化指标的动态变化规律。结果表明:酒醅发酵过程中主要的微生物为酵母和细菌;大楂和二楂发酵过程中温度呈“前缓、中挺、后缓落”的变化规律;pH值呈逐渐降低的变化趋势,大楂起始发酵pH值高于二楂,发酵结束后pH值约为3.3;酒精含量呈先逐渐升高后趋于稳定的变化趋势,发酵15 d后酒精含量趋于稳定;水分含量在发酵23 d后不再剧烈变化。大楂淀粉含量变化呈先降低后逐渐保持平稳的趋势,二楂呈逐渐降低的趋势。大楂、二楂酒醅发酵过程中还原性糖含量动态波动变化,而发酵后期还原性糖含量都保持较低水平。研究淀粉及还原性糖含量的变化规律有利于清香型白酒品质的提升和产量的保证。本研究结果将为清香型白酒发酵可调控化提供理论依据。

传统清香型白酒发酵过程中细菌群落结构及其动态演替

利用Illumina MiSeq高通量测序技术,对传统清香型白酒大楂和二楂发酵过程中的细菌群落结构、丰度及演替规律进行研究,测序获得有效序列数分别为319 872条和269 087条,归类为15个门(厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、放线菌门、浮霉菌门、绿弯菌门、疣微菌门、酸杆菌门、芽单胞菌门、衣原体门、硝化螺旋菌门、广古菌门、产金菌门、梭杆菌门、蓝细菌门,分别包含39 567,22 717个OTUs。研究表明:大楂和二楂细菌群落组成丰富,在发酵过程中细菌的种类和数量随着发酵和环境的变化而变化,主要优势菌群包括葡萄球菌属、片球菌属、乳杆菌属。它们动态变化,此消彼长,影响大楂和二楂酒的质量与风味物质的产生。

传统清香型白酒发酵过程中真菌群落结构及其动态演替

通过Illumina MiSeq高通量测序技术,对传统清香型白酒大楂和二楂发酵过程中的真菌群落结构、丰度及演替规律进行研究,测序获得有效序列数分别为488956条和642670条,分别包含14230个和7303个OTU,归类为26个亚门或纲,主要为子囊菌纲、担子菌亚门、接合菌亚门和其它未分类的单元。结果表明,传统清香型白酒大楂和二楂真菌群落组成丰富,在发酵过程中真菌的种类和数量随着发酵时间的延长和环境的改变而不断变化,其中子囊菌纲的腹膜孢酵母属、酵母属、假丝酵母属、有孢汉逊酵母属和有孢圆酵母属为传统清香型白酒大楂或二楂发酵主要优势菌群。本研究为清香型白酒发酵过程中功能性微生物菌群的进一步挖掘奠定了基础。

藏药二十五味儿茶丸的质量标准研究

目的建立二十五味儿茶丸的质量控制方法。方法采用薄层色谱（TLC）法鉴别决明子、荜茇、木香、蒺藜，并以高效液相色谱法对方中儿茶素、表儿茶素的含量进行测定。结果TLC法可鉴别决明子、荜茇、木香、蒺藜的特征斑点；儿茶素、表儿茶素分别在0．036～1．800μg，0．039～1．950μg范围内线性关系良好。儿茶素加样回收率为98．68%（n=6），RSD为1．67％，表儿茶素加样回收率为96-70%（n=6），RSD为0．79％。结论定性、定量方法准确、快速，可作为该制剂的质量控制方法。

藏药二十五味儿茶丸降尿酸作用及对尿酸转运蛋白表达水平的影响

目的研究藏药二十五味儿茶丸对氧嗪酸钾联合次黄嘌呤诱导的大鼠高尿酸血症的防治作用。方法 60只大鼠随机分为空白组、模型组、别嘌醇组(10 mg/kg)和二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(1、0. 5、0. 25 g/kg),除空白组外,其余各组皮下注射氧嗪酸钾(200 mg/kg)联合灌胃次黄嘌呤(300 mg/kg)建立高尿酸血症模型,1 h后灌胃给予相应药物,连续7 d。生化法测定血清尿酸(UA)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平,血清及肝组织中黄嘌呤氧化酶(XOD)活性; HE染色观察肾脏组织病理变化;免疫组化法测定肾脏有机阴离子转运蛋白1 (OAT1)、有机阴离子转运蛋白3 (OAT3)及尿酸盐阴离子转运体1 (URAT1)的表达。结果与空白组比较,模型组血尿酸水平、血清及肝脏组织XOD水平显著升高,肾脏组织出现病理损伤,肾脏组织OAT1及OAT3表达显著降低,URAT1表达显著升高。与模型组比较,二十五味儿茶丸高剂量组能明显降低血尿酸水平,抑制XOD活性,改善肾脏病理损伤,升高OAT1及OAT3的表达,抑制URAT1的表达。结论二十五味儿茶丸可以有效治疗高尿酸血症并对肾脏有一定的保护作用,其降尿酸机制可能与抑制XOD活性,提高OAT1、OAT3的表达,抑制URAT1的表达有关。

复方儿茶胶囊中维生素B_2和烟酸的HPLC测定

建立了高效液相色谱法同时测定复方儿茶胶囊中的维生素B2和烟酸。采用C18色谱柱,流动相为甲醇-5mmol/L庚烷磺酸钠(10∶90,含0.03%三乙胺,用冰乙酸调至pH3),检测波长265nm。维生素B2和烟酸分别在6.4～128μg/ml和3.2～64μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为100.1%和99.3%。

吉林省白山市二岔铁矿地质特征及矿床成因探讨

吉林省白山市二岔铁矿位于中朝准地台、辽东台隆、铁岭—靖宇台拱、龙岗断块中南部边缘,太古宙早期区域内发生幅度较大的拗陷,接受广泛巨厚的一套粘土质、砂质碎屑岩类沉积,其间夹有硅铁质沉积并伴有火山(基性)岩浆喷溢活动,太古宙末期强烈造山运动使这些沉积岩层发生强烈挤压,形成褶皱构造及区域性断裂。伴随强烈造山运动致使太古宙地体发生中、深度区域变质作用与混合岩化作用。区域变质作用和混合岩化作用,对本区火山沉积变质铁矿的形成具有重要意义。二岔铁矿已探明基础储量(122b)30.26万吨、资源量(333)11.

高效液相色谱法测定复方儿茶搽剂中盐酸小檗碱的含量

目的建立测定复方儿茶搽剂中盐酸小檗碱的测定方法。方法采用高效液相色普法,用LichrospherC18色谱柱(200mm×4.6mm,5μm,流动相:以乙腈-0.1%磷酸溶液(每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g),检测波长265nm,流速为1.0ml。结果盐酸小檗碱的线性范围为0.089～0.801μm。平均加样回收率为99.1%,RSD为0.34%(n=6)。结论本方法操作简便,结果准确,分离效果好,可用于复方儿茶搽剂的质量控制。

石花清香型白酒大茬和二茬酒醅真菌类群的比较

采用Illumina MiSeq高通量测序技术对襄阳地区清香型白酒大茬和二茬酒醅中的真菌群落结构及多样性进行对比分析。结果表明,大茬酒醅中真菌菌群的丰富度和多样性均高于二茬酒醅,且2种酒醅真菌类群存在明显的差异。2种酒醅共有134个核心OTU,在门水平上,2种酒醅的优势真菌门均为子囊菌门(Ascomycota),平均相对含量分别为99.82%和99.97%。在属水平上,大茬酒醅中优势真菌属为热子囊菌属(Thermoascus)(33.77%)、腹膜孢酵母属(Saccharomycopsis)(22.60%)、酵母属(Saccharomyces)(13.51%)、Leiothecium(9.34%)、曲霉菌属(Aspergillus)(4.19%)和汉逊酵母属(Hanseniaspora)(1.62%),二茬酒醅中优势真菌属为Saccharomyces(84.64%)、Saccharomycopsis(1.42%)和Thermoascus(1.30%)。由此可见,虽然共有部分真菌类群,但2种酒醅真菌群落结构存在明显的差异。

高效液相色谱法测定藏成药二十五味儿茶丸中乌头碱的含量

目的建立测定二十五味儿茶丸中乌头碱含量的高效液相色谱(HPLC)法。方法色谱柱为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.04 mol/L三乙胺(用磷酸调节pH至3.0)-甲醇(60∶40),流速为1.0 mL/min,检测波长为233 nm,柱温为40℃。结果乌头碱进样量在0.029 92-0.224 4μg(r=0.9999)范围内与峰面积呈良好线性关系;乌头碱加样回收率为102.27%,RSD为2.21%(n=6)。结论该方法简便、准确、重复性好,可作为该制剂的质量控制方法。

二十五味儿茶丸对痛风性关节炎大鼠炎症反应的影响

目的:探讨二十五味儿茶丸对尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎的防治作用及炎症反应机制。方法:80只SD大鼠,随机分为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.3 mg·kg^(-1)),氢化可的松组(4 mg·kg^(-1))及二十五味儿茶丸高、中、低剂量组(2.4,1.2,0.6 g·kg^(-1)),除正常组外,其余各组采用向大鼠踝关节内注入尿酸晶体建立急性痛风性关节炎模型,测定造模前及造模后3,6,9,12,15 h关节肿胀度,同时经眼眶静脉丛取血测定白细胞(WBC)和中性粒细胞(NEUT)数目,取滑膜组织测定炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),IL-8,环氧合酶-2(COX-2)含量,并采用蛋白质免疫印迹(Western bolt)检测滑膜组织中COX-2蛋白水平的表达。结果:与正常组比较,模型组各时间点大鼠关节肿胀度明显升高,WBC,NEUT数目明显升高,TNF-α,IL-1β,IL-8,COX-2含量明显升高(P<0.05,P<0.01),COX-2蛋白水平有所升高,但无统计学差异;与模型组比较,二十五味儿茶丸高、中、低剂量组肿胀度明显降低,抑制率明显升高,可明显减少WBC,NEUT数目,明显降低炎性因子TNF-α,IL-1β,IL-8,COX-2含量,并可明显降低COX-2蛋白水平表达(P<0.05,P<0.01)。结论:二十五味儿茶丸通过减少白细胞、中性粒细胞数目,抑制炎症因子的释放,从而达到抗急性痛风性关节炎炎症反应作用。

一测多评法同步测定藏药二十五味儿茶丸中的6种成分

目的采用一测多评法测定藏药二十五味儿茶丸中的胡椒碱、没食子酸、儿茶素、龙胆苦苷、木香烃内酯和去氢木香内酯。方法色谱柱为X BridgeTMC18(250mm×4.6 mm,5μm),流动相A为甲醇-乙腈(3∶2)、B为0.2%磷酸,梯度洗脱,分段变波长测定。以胡椒碱为内参物建立与其他5种指标成分间的相对校正因子(RCF),并计算其含量。同时采用外标法测定该6个成分,比较两者的差异。结果在一定的线性范围内,胡椒碱与没食子酸、儿茶素、龙胆苦苷、木香烃内酯和去氢木香内酯的RCF分别为2.561、11.91、6.779、3.688、5.879,在不同实验条件下重复性良好,RSD分别为1.90%、1.10%、0.99%、0.54%、1.50%。不同来源的二十五味儿茶丸中6个成分含量的计算值与实测值间无明显差异。结论本法只采用胡椒碱对照品即可同步测定6种成分的含量,为藏药的多指标质量评价提供新思路。

藏药二十五味儿茶凝胶对大鼠慢性湿疹模型LTB-4、LTC-4因子的影响

目的评价藏药二十五味儿茶凝胶治疗大鼠慢性湿疹的疗效。方法采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导大鼠背部慢性湿疹。将72只SD大鼠随机分为两组,取12只大鼠作为空白对照组,另一组共60只造模成功后随机分为模型组、阳性对照组、藏药二十五味儿茶凝胶高、中、低剂量组5组。阳性对照组给予丁酸氢化可的松乳膏(尤卓尔),藏药二十五味儿茶凝胶低(0.14g/kg)、中(0.21g/kg)、高(0.35g/kg)剂量经皮给药,于致敏后给药,观察各组大鼠第4次激发3天后采用ELISA法检测大鼠血清中的LTB-4、LTC-4的含量。结果藏药二十五味儿茶凝胶中剂量能有效减轻慢性湿疹大鼠引起的皮损炎症程度,调节慢性湿疹组大鼠血清中LTB-4和LTC-4水平。结论藏药二十五味儿茶凝胶能降低慢性湿疹模型大鼠血清LTB-4和LTC-4含量,其治疗湿疹的作用机制可能与免疫调节及减轻炎症反应相关。