Eriocitrin inhibits proliferation and migration of lung adenocarcinoma cells by regulating epithelial mesenchymal transition

Objective:To investigate the effects of Eriocitrin on the proliferation and migration of Lung adenocarcinoma(LUAD)cells A549 and H1299,and the mechanism of Epithelial-Mesenchymal Transition(EMT).Methods:The effects of different Eriocitrin on the proliferation of LUAD cells A549 and H1299 were examined by CCK8 method.EMT-associated epithelial calmodulin(E-cadherin and N-cadherin),vimentin,ferroptosis-associated protein SLC7A11,GPX4,FTH were detected by Western Blot and expression of mRNA of EMT marker molecules E-cadherin,N-cadherin,Snail were detected by qRT-PCR.Effects of saccharomyces cerevisiae suberin on ferroptosis in LUAD cells as observed by lipid reactive oxygen species(ROS)assay.Results:Eriocitrin could significantly inhibit the proliferative behavior of LUAD cells A549 and H1299 and showed a certain dose-and time-dependence.Compared with the control group,different concentrations of Eriocitrin could significantly reduce the scratch healing rate after 24 and 48 h of action,and the difference was statistically significant(P<0.01).The expression of ROS is increased,EMT-related protein E-cadherin was increased in LUAD cells A549 and H1299 compared with the control group after the intervention with Eriocitrin.N-cadherin and Vimentin expression was decreased.E-cadherin mRNA expression was increased,and N-cadherin,Snail mRNA expression was decreased,expression of ferroptosis-associated protein SLC7A11,GPX4,FTH was decreased,the difference was statistically significant(P<0.05).Conclusion:Eriocitrin may inhibit the proliferation and migration of LUAD cells by regulating the EMT pathway and has potential application in LUAD prevention and adjuvant chemotherapy.

圣草次苷抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和迁移:基于激活ROS/MAPKs信号轴

目的探讨圣草次苷通过ROS/MAPKs信号轴调控肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移的作用机制。方法分别用0、25、50、100、150、200、250、300μg/mL圣草次苷处理肝癌SMMC-7721细胞系24 h后,CCK-8法检测细胞活性;不同浓度的圣草次苷(100、200、300μg/mL)处理细胞后,运用划痕实验分别在24、48、72 h检测划痕愈合率,Transwell实验检测细胞迁移率,克隆形成实验检测细胞增殖能力,DAPI染色观察细胞核形态变化,Western blot检测侵袭蛋白E-cadherin、N-cadherin、MMP-2、MMP-9、凋亡因子PARP和Pro-caspase 3以及MAPKs通路p-JNK、p-P38、p-ERK信号分子;用(分别为2、5、10μmol/L)ERK抑制剂U0126、JNK抑制剂SB203580和P38抑制剂SP600125预先处理细胞2 h,再用200μg/mL圣草次苷处理细胞24 h,Western blot检测凋亡蛋白PARP的切割情况;分别用N-乙酰-半胱氨酸(NAC)(30μmol/L)或圣草次苷(100、200、300μg/mL)单独或共处理细胞后,通过DCFH-DA荧光探针法分别在15、30、60 min检测内源性活性氧(ROS)水平。结果圣草次苷在50μg/mL范围内,对细胞活力基本无影响(P>0.05);圣草次苷能够显著抑制SMMC-7721细胞的划痕愈合(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)和克隆形成(P<0.01),在300μg/mL浓度时作用最显著;圣草次苷明显减少侵袭蛋白N-cadherin、MMP-2、MMP-9的蛋白表达量(P<0.01),上调E-cadherin的蛋白表达量(P<0.05);圣草次苷诱导SMMC-7721细胞发生显著的凋亡形态学变化,Pro-caspase 3表达降低,PARP切割增多(P<0.01);圣草次苷在300μg/mL刺激30 min时ROS表达水平较高,NAC(30μmol/L)处理后,细胞内ROS表达水平下降明显;圣草次苷能够显著诱导MAPKs信号途径JNK、P38和ERK的磷酸化(P<0.01),U0126和SB203580能够增强圣草次苷诱导的PAPR切割,而SP600125逆转圣草次苷诱导的PARP切割。结论圣草次苷通过促进细胞内ROS的合成,诱导MAPKs信号通路的活化,调控肝癌细胞系SMMC-7721的增殖、迁移和凋亡。

圣草次苷通过上皮间充质转化途径抑制肺腺癌细胞的增殖及迁移

目的:探究圣草次苷(Eriocitrin)对肺腺癌(Lung adenocarcinoma, LUAD)细胞系A549和H1299增殖和迁移能力的影响,以及对上皮间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的作用机制。方法:采用CCK8方法检测不同浓度圣草次苷对LUAD细胞系A549和H1299增殖能力的影响;采用划痕实验评价A549和H1299细胞的迁移能力;用Western Blot法和qRT-PCR法分别检测EMT相关上皮钙黏蛋白(E-cadherin和N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4、FTH和EMT标志分子E-cadherin、N-cadherin、Snail的mRNA水平,及细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平,观察圣草次苷对LUAD细胞系铁死亡的影响。结果:圣草次苷可以明显抑制LUAD细胞系A549和H1299的增殖能力,并呈现出一定的剂量和时间依赖性。与对照组相比,不同浓度的圣草次苷作用24和48 h后均明显降低划痕愈合率,差异具有统计学意义(P<0.01)。与对照组相比,圣草次苷增加了LUAD细胞系A549和H1299的ROS的表达水平,增加了EMT相关蛋白E-cadherin的蛋白表达水平,降低了N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平。此外,qRT-PCR结果也显示:圣草次苷上调了E-cadherin mRNA的表达,下调了N-cadherin、Snail mRNA表达,铁死亡相关基因SLC7A11、GPX4、FTH蛋白水平均下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:圣草次苷通过EMT途径抑制LUAD细胞的增殖和迁移,并促进铁死亡过程的发生,在LUAD预防和辅助化疗中具有一定的应用潜力。

圣草次苷调控MPTP诱导的慢性小鼠帕金森疾病和机制研究

目的:探究圣草次苷减轻1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的慢性小鼠帕金森疾病和机制。方法:选取75只小鼠采用随机分组法分为:健康对照组、模型组、圣草次苷低剂量组(8 mg/kg)、圣草次苷中剂量组(16 mg/kg)、圣草次苷高剂量组(32 mg/kg),每组各15只;腹腔注射20 mg/(kg·d)的MPTP溶液,持续一周制成帕金森小鼠模型;给药组小鼠分别使用对应剂量的圣草次苷干预2周。使用旷场实验、悬挂实验、游泳实验检测小鼠行为;使用HE染色和TUNEL染色检测小鼠神经元细胞的凋亡情况;使用蛋白质印迹法检测小鼠脑组织Bax、Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9的表达情况;使用试剂盒检测小鼠黑质中SOD、MDA、LDH、GSH的含量;使用ELISA检测小鼠外周血中IL-6、TNF-α、iNOS和IL-10的含量;使用蛋白质印迹检测信号通路Nrf2、HO-1、NQO1的表达情况。结果:HE染色和TUNEL染色结果显示相比空白对照组,模型组小鼠神经细胞凋亡率显著升高(P<0.05),相比模型组,使用圣草次苷处理各组小鼠神经细胞凋亡率显著降低(P<0.05);相比空白对照组,模型组小鼠旷场移动路程、旷场中心区域活动时间、游泳时间和悬挂时间、SOD水平、Bcl-2、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平、MDA、LDH、GSH、TNF-α、IL-6、iNOS水平显著升高(P<0.05),IL-10无显著变化(P>0.05);相比模型组圣草次苷低剂量组Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著升高,Bax/Bcl-2显著降低(P<0.05),其余各指标均无显著变化(P>0.05);相比模型组,圣草次苷中剂量组和圣草次苷高剂量组旷场移动路程、旷场中心区域活动时间、游泳时间、SOD、IL-10、Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Bax/Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平、MDA、LDH、GSH、TNF-α、IL-6、iNOS显降低(P<0.05)。结论:圣草次苷可以通过抑制氧化应激、炎症反应,神经细胞的凋亡并激活Nrf2/HO-1信号通路缓解MPTP诱导的慢性PD。

麝香草中配糖物的分离及消除甲基硫醇活性

从麝香草的甲醇萃取物中分离出三个配糖物,用~1H—NMR,^(13)C-NMR核磁共振光谱确定了它们的结构为(-)-angelicoidenol-2-O-β-D-glucopyranoside(2),熊果苷(Arbutin)(3)和圣草枸橼酸苷(Eriocitrin)(4a)．比较了它们的消除甲基硫醇能力,对甲基硫醇消除能力大小顺序为圣草枸橼酸苷＞叶绿酸铜钠(Sodium copper chiorophyllin)＞圣草酚(Eriodictyol)＞熊果苷．化合物(R)-对伞花-9-基-卢-D-葡糖苷[(R)p-cymin-9-yl-β-D-glucopyranoside](1)和(2)完全没有消除甲基硫醇臭气能力．

圣草次苷的合成及其对过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

以橙皮苷为原料,经三氯化铝-吡啶去甲基反应合成药用天然产物圣草次苷,产物通过1H核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)和13C NMR进行结构确证,并探究其对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导氧化应激损伤的人脐静脉内皮细胞系(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)细胞的保护作用机制。结果表明:圣草次苷对HUVEC细胞无毒性作用,能显著提高氧化损伤HUVEC细胞的存活率(P<0.05),但无显著剂量效应;显著降低细胞中活性氧水平和丙二醛含量(P<0.05),显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶等抗氧化酶的活力(P<0.05);显著上调Bcl-2/Bax蛋白比值和下调p53蛋白表达(P<0.05)。结论:圣草次苷能有效阻止H_(2)O_(2)所致HUVEC细胞损伤,该作用与圣草次苷的抗氧化活性和抑制细胞死亡有关。

基于“质-量”双标的枳壳质量分析方法研究

目的建立以对照药材为基准物质的定性和不依赖多种对照品定量的枳壳Aurantii Fructus药材“质-量”双标控制方法。方法采用HPLC技术,以对照药材为基准物质建立枳壳特征图谱,通过Q-TOF-MS技术,鉴定共有峰的化学成分,以对照药材和供试药材特征峰的相似度,明确药材真伪,即“质”;对内标成分“柚皮苷”进行准确定量,以内标成分计,计算不同批次供试品中各特征峰的相对含量,取“平均数-标准差”作为特征峰化学成分相对于内标物质化学成分的相对含量下限,依据特征峰相对含量下限明确枳壳药材优劣,即“量”。结果建立的特征图谱及含量测定方法符合方法学考察要求;确定了11个共有色谱峰,鉴定出了7个化学成分,分别为圣草次苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、川陈皮素、橘皮素,各枳壳供试药材与枳壳对照药材的相似度均大于0.90;规定了枳壳药材特征峰化学成分相对含量下限。结论该方法不依赖多种对照品,能清晰、快速地判断药材的真伪优劣,为枳壳的质量控制方法提供参考。

HPLC法测定枳壳中6个二氢黄酮类成分的含量

目的:建立HPLC法测定枳壳药材中6个黄酮类成分圣草次苷、新圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷的含量。方法:采用Inertsil ODS-4(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸(18∶82),流速1.0 mL.min-1,检测波长283 nm,柱温30℃。结果:圣草次苷、新圣草苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷6个二氢黄酮类化合物的质量分别在0.02～0.16、0.60～0.54、0.02～0.18、0.41～3.70、0.16～1.40、0.22～1.99μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.9995、0.9999、0.9999、0.9999、0.9999和0.9999;平均加样回收率(n=6)分别为100.8%、102.5%、97.8%、99.6%、98.0%、102.7%。结论:含量测定方法可作为中药枳壳的质量控制的有效方法。

HPLC波长切换法测定尤力克柠檬叶中4种活性成分的含量

目的建立高效液相色谱波长切换技术同时测定尤力克柠檬叶中绿原酸、圣草次苷、芦丁、地奥司明4种活性成分含量的方法。方法使用SepaxAmethyst C1-H8柱（250mm×4．60mm，5μm），以乙腈（A）-0．1％甲酸水溶液（B）为流动相进行梯度洗脱，流速1．0mL·min-1。检测波长为324nm（0～20min，绿原酸），284nm（20～68min，圣草次苷），256nm（68～80min，芦丁），346nm（80～125min，地奥司明）。柱温25℃，进样量20μL。结果4种化合物在测定的范围内峰面积与浓度之间均表现出良好的线性关系，平均加样回收率分别为98．55％（RSD=I．75％）、98.34％（RSD=2．36％）、101．41％（RSD=1．91％）、99．83％（RSD=2．08％）。结论该方法简便、准确，重复性好，可用于尤力克柠檬叶的质量控制。

枳实化学成分与治疗功能性消化不良关联性分析及实验验证

目的 研究枳实治疗功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)的药效物质基础。方法 运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)技术对10批枳实水煎液进行分析,确定共有成分;采用不规则喂养和夹尾刺激建立FD大鼠模型,以小肠碳末推进率、胃排空率及血清中胃动素、胃泌素水平为药效指标,采用灰色关联度分析法和Pearson双变量相关性分析建立色谱图中共有峰峰面积与药效指标的相关性,筛选出枳实治疗FD的药效物质,并通过斑马鱼肠蠕动模型进行药效验证。结果 10批枳实水煎液中共指认35个共有成分,通过灰色关联度和Pearson双变量相关性分析,筛选出辛弗林、马尔敏、黄柏酮、N-甲基酪胺、圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷共8个成分为枳实治疗FD的潜在药效物质。选择药效相关性较强、易得、可测的圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林进行实验验证,发现这5个成分均显著促进斑马鱼肠道蠕动(P<0.01)。结论 圣草次苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷和辛弗林为枳实治疗FD的药效物质。

圣草次苷对大鼠缺血再灌注心肌损伤的保护作用

目的:观察圣草次苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用,并探讨其作用机制。方法:取60只健康SD大鼠,随机分为假手术组、模型组以及圣草次苷低、中、高剂量组(8、16、32 mg·kg^(-1))、和地尔硫组,每组10只,采用手术结扎法构建心肌缺血再灌注损伤模型;圣草次苷低、中、高剂量组以及地尔硫组于造模前1周开始灌喂给药,模型组和假手术组给予等量生理盐水灌喂。再灌注结束后,通过苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察大鼠心肌组织病理改变;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)染色检测心肌细胞凋亡情况;采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白介素6(interleukin 6,IL-6)、白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、肌钙蛋白(cardiac troponin,cTnI)、肌红蛋白(myohemoglobin,Mb)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase MB,CK-MB)含量水平;Western blot检测心肌组织c-Myc、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3剪切体(Cleaved caspase-3)、JAK激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、磷酸化JAK2(phosphorylated JAK2,p-JAK2)、信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator oftranscription 3,STAT3)、磷酸化STAT3(phosphorylated STAT3,p-STAT3)蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组HR、LVEF、FS、LVSP、LVWT、c-Myc水平显著降低(P<0.05),cTnI、Mb、CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,圣草次苷16、32 mg·kg^(-1)组及地尔硫卓组HR、LVEF、FS、LVSP、LVWT、c-Myc水平显著升高(P<0.05),cTnI、Mb、CK-MB、TNF-α、IL-6、IL-1β、Bax/Bcl-2、Cleaved caspase-3/caspase-3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3水平显著降低(P<0.05)。结论:圣草次苷可能通过减少促炎细胞因子表达,同时调节JAK2/STAT3信号通路抑制心肌细胞凋亡,在MIRI中发挥心肌保护作用。

枳术丸与枳术颗粒多成分对比分析研究

目的建立液质分析方法,对比收载于《中国药典》2015年版的同方不同剂型的枳术丸和枳术颗粒中20个活性成分的含量。方法按《中国药典》2015年版制备工艺,采用3批原料制备枳术丸和枳术颗粒。建立高效液相色谱-三重四级杆-质谱(HPLC-Qq Q-MS)分析2种剂型中20个活性成分含量的方法。色谱条件为Poroshell 120 SB-C18色谱柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm);流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈溶液(B),梯度洗脱条件:0~7 min,23%B;7~17 min,23%~80%B;17~20 min,80%~100%B,20~30 min,100%B;体积流量0.5 m L/min;柱温30℃。结果 3批原料制备的枳术丸和枳术颗粒成品,20个活性成分的日服用量,丸剂是颗粒剂的1.48~13.37倍,总量相差493.01~615.07 mg。其中热不稳定性成分白术内酯I、白术内酯II和白术内酯III相差的倍数最大,其次为水溶性较差的川陈皮素。结论枳术丸和枳术颗粒成品中活性成分含量有明显差异,尤其是处方中水溶性差、热不稳定的成分。

圣草次苷激活Nrf2信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤作用研究

目的建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,考察圣草次苷改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法利用无糖无血清培养基结合厌氧(94%N_(2)、5%CO_(2)、1%O_(2))处理H9c2心肌细胞4 h后,更换新鲜完全培养基再放入正常孵箱复氧24 h,制备H/R损伤模型。在造模前12 h给予圣草次苷(5、10、20μg·mL^(-1)),细胞活力及乳酸脱氢酶(LDH)检测实验中选择灯盏乙素(20μg·mL^(-1))作为阳性药,对照组及模型组给予等体积DMSO。MTT法测定细胞存活率;试剂盒检测细胞培养上清液中LDH水平;试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;TUNEL染色检测细胞凋亡;DCFH-DA和JC-1探针分别检测细胞内活性氧(ROS)和线粒体膜电位改变;Western blotting检测核蛋白中转录因子(NF)-E2相关因子2(Nrf2)和总蛋白中血红素氧合酶1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)水平。结果与对照组比较,H/R损伤诱导的模型组细胞存活率明显下降,凋亡明显增加,LDH水平明显升高,细胞内MDA水平明显升高,SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低,ROS释放明显增多,线粒体膜电位明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,圣草次苷可剂量相关性地改善上述变化,其中10、20μg·mL^(-1)组均差异显著(P<0.01)。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组细胞Nrf2核转位以及HO-1、GCL表达水平无显著变化;与模型组比较,圣草次苷10、20μg·mL^(-1)显著增加Nrf2核转位及HO-1、GCL表达水平(P<0.01)。结论圣草次苷能够保护H/R诱导的H9c2心肌细胞损伤,其可能通过激活Nrf2抗氧化信号通路,增加细胞内源性抗氧化能力,抑制氧化应激损伤,保护线粒体功能以阻止细胞凋亡的发生。

温胆汤UPLC-UV-MS/MS指纹图谱研究

目的研究和建立温胆汤UPLC-UV指纹图谱,确定色谱峰药材来源,同时对各成分进行定性研究,为该方物质基础和质量控制提供科学依据。方法 UPLC-UV法进行温胆汤指纹图谱研究,对14批样品进行相似度分析;阴性液对照法进行共有峰药材来源研究;UPLC-MS/MS法对温胆汤中成分进行定性研究。结果建立了温胆汤UPLC-UV指纹图谱,进行了方法学考察,结果显示该方法精密度、稳定性、重复性良好;对14批样品进行指纹图谱研究,得出共有峰指纹图谱,标记了22个共有峰;进行了14批样品相似度比较,相似度在0.863~0.998;通过与对照品保留时间比较,直接指认了橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、甘草苷和甘草酸铵;与药材阴性液比较,对22个共有峰药材来源进行了归属;UPLC-MS/MS法定性了橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、甘草苷和甘草酸铵5个成分,推断出了圣草枸橼苷、异柚皮苷、枸橘苷、乌拉尔甘草皂苷乙4个成分。结论建立的指纹图谱方法准确、可靠,对温胆汤物质基础和质量控制研究提供了一定参考。

基于AHP-熵权法结合正交试验设计优选岭南特色饮片制枳壳的发酵工艺及发酵前后成分对比研究

目的 建立枳壳发酵品中多个成分的含量测定方法,优化岭南特色饮片制枳壳的发酵工艺,并比较枳壳发酵前后的成分变化。方法 通过UHPLC测定枳壳发酵品中特征成分含量,在单因素实验的基础上,采用正交试验法考察发酵温度、发酵时间、发酵湿度等影响因素,以枳壳发酵品中的10种特征黄酮类成分(包括黄酮苷及苷元)的含量和发酵品的外观性状作为指标,采用层次分析法(analytic hierarchy process,AHP)结合熵权法对这些指标设置不同的权重,并计算复合评分来优选其发酵工艺。结果 枳壳的最佳发酵工艺为浸泡时间4 h,发酵时间48 h,发酵温度37℃,发酵湿度90%;枳壳发酵后,黄酮苷类成分的含量下降,黄酮单糖苷和苷元类成分的含量均大幅度增加。结论 建立的UHPLC多成分含量测定方法操作简单、准确,优选的枳壳发酵工艺简便、稳定可行,可规范枳壳的发酵工艺,为制枳壳的工业化生产奠定基础。

圣草次苷对MCAO大鼠氧化损伤和炎性反应的影响

目的旨在研究圣草次甘对MCAO大鼠氧化损伤和炎性反应的影响。方法线栓法建立脑缺血再灌注大鼠模型,HE染色检测脑组织病理损伤;试剂盒检测氧化应激水平;TUNEL染色检测细胞凋亡;ELISA检测炎性因子水平:蛋白印迹检测MBP.Bax、Bel-2、NRLP3蛋白表达。结果圣草次苷减轻脑组织病理损伤程度,降低MBP蛋白表达,下调Bax/Bcl-2表达抑制脑细胞凋亡,开高胸缺血再灌注氧化应激指标GPO,GSH水平,降低MIDA活力,降低炎性因子L6.TNF-a.IL-I水平,抑制NLRP3的表达。结论圣草次苷具有级解脑缺血再灌注大鼠氧化损伤和炎性反应并抑制NRLP3表达的作用。

圣草次苷-CTAB-DNA三元体系共振光散射光谱研究及应用

基于圣草次苷和十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)的二元体系增强DNA的共振光散射(resonance light scattering,RLS)信号,提出了一种测定纳克级小牛胸腺DNA(ctDNA)的新方法.研究了圣草次苷、CTAB与DNA的结合方式并讨论了三元体系的最佳反应条件.增强的RLS信号与DNA浓度具有良好的线性关系,线性方程为ΔIRLS=28.33+1241c,r=0.9953.采用该方法对合成样品进行了分析测定,回收率和RSD分别为96.51%~101.38%和2.56%~3.90%,检出限为1.942μg·L^-1.