二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40所致肾阴虚AD大鼠海马蛋白质组学的影响

目的:探究二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)所致肾阴虚阿尔茨海默病(AD)大鼠生物学基础的影响。方法:大鼠去卵巢后随机分为5组,即模型组、多奈哌齐组、二精丸高、中、低剂量组,每组11只,另设11只为假手术组,术后1周,连续腹腔注射D-半乳糖7周,术后4周,单侧海马注射Aβ1-40。术后3周开始灌胃给药,模型组与假手术组灌胃生理盐水,二精丸高、中、低剂量组分别用对应浓度灌胃给药(9.0,4.5,2.25 g·kg^-1),多奈哌齐组灌胃1.0 mg·kg^-1多奈哌齐,给药体积为10 mL·kg^-1,每日1次,连续给药35 d。给药第31天,Y迷宫检测大鼠学习能力。末次给药后麻醉大鼠,分离大鼠海马,尼氏染色观察形态学。提取海马蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测蛋白,Protein Discovery软件鉴定蛋白,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析,PANTHER Classification System数据库对差异蛋白进行基因本体(GO)分析,String分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集信号通路。结果:与模型组大鼠比较,二精丸高、中剂量组大鼠Y迷宫正确交替率明显提高(P<0.05),海马CA1区神经元数量明显提高(P<0.01);二精丸高剂量组的差异蛋白(Ratio>1.5或Ratio<0.5)有胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)等115个,中剂量组差异蛋白有突触素等94个,多奈哌齐组差异蛋白有乙酰辅酶A乙酰转移酶等87个。GO分析发现这些蛋白主要分为微管相关蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白等与AD相关蛋白;KEGG分析发现上述差异蛋白共涉及Dopaminergic synaps等93条信号通路。结论:二精丸可能是通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路、胰岛素信号通路、酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、雌激素信号通路,Dopaminergic synapse等多条通路相关蛋白的表达,从而达到防治肾阴虚AD的目的。

三方益子方与3种不同补肾方对肾阳虚多尿模型大鼠的药效学研究

目的:比较三方益子方与不同补肾方干预腺嘌呤致肾阳虚多尿模型大鼠的药效学作用。方法:采用雄性SD大鼠灌胃腺嘌呤4周复制肾阳虚多尿大鼠模型,造模后2周开始同时给予三方益子方、缩泉丸、二精丸及水陆二仙丹药液,期间观察各组大鼠的日常行为,记录各组大鼠的夜尿和日尿,检测尿液中尿素氮和肌酐水平,末次给药后于腹主动脉取血,检测血浆中尿素氮、肌酐、醛固酮及抗利尿激素水平,称定肝脏、肾脏、脾脏、睾丸、肾上腺及膀胱质量并计算脏器指数,观察肾脏外观并HE染色观察肾脏组织病理学状态。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢,出现弓背蜷缩、皮毛暗淡稀疏、自主活动减少等表现,且夜尿量、24 h尿量、脏器指数、生化指标均具有显著性差异(P<0.05),表明肾阳虚多尿模型复制成功。给药4周后,与模型组比较,三方益子方组的夜尿量、24 h尿量均显著下降(P<0.05),其他各给药组的夜尿量、24 h尿量均显示差异无显著性(P>0.05);各给药组尿中尿素氮、肌酐水平均显著升高,血浆中尿素氮、肌酐显著下降,以及醛固酮、抗利尿激素水平均有显著上升(P<0.05),且仅三方益子方组血浆中各指标与空白组相比显示差异无显著性(P>0.05);各给药组大鼠的脏器指数、肾脏外观及肾脏HE切片结果具有不同程度的改善,其中三方益子方组改善效果最佳。结论:三方益子方对肾阳虚多尿模型大鼠具有显著的缩尿作用,其干预肾阳虚多尿模型大鼠的药效学作用优于缩泉丸、二精丸和水陆二仙丹。