原子吸收分光光度法测定藏药二十五味珊瑚丸中5种重金属含量

目的:建立测定藏药二十五味珊瑚丸中5种重金属含量的方法,并考察西藏不同地区5个厂家生产的该药品中重金属含量情况。方法:以浓硝酸-高氯酸(4∶1,V/V)消解二十五味珊瑚丸样品,采用火焰原子吸收分光光度法测定其中铜(Cu)、铅(Pb)、镉(Cd)3种重金属元素的含量,氢化物发生原子吸收分光光度法测定其中砷(As)、汞(Hg)2种重金属元素的含量。结果:5种重金属元素含量检测在相应质量浓度范围内线性关系均良好(r均≥0.999 1);Cu、Pb、Cd元素的检测限分别为0.001 6、0.041 2、0.036 3mg/L,定量限分别为0.005 3、0.137 3、0.121 0 mg/L;As、Hg元素的检测限分别为0.325 7、0.692 3μg/L,定量限分别为1.085 7、2.307 7μg/L;精密度试验的RSD均≤5.54%(n=6);稳定性试验的RSD均≤3.79%;重复性试验的RSD均≤3.72%;平均加样回收率为91.34%~110.11%,RSD为0.66%~6.80%(n=6)。含量测定结果显示,5个厂家的样品中Cu含量皆未超标,但Cd、Hg含量均超标;其中还有4个厂家样品中Pb含量超标,2个厂家样品中As含量超标。结论:建立的含量测定方法的准确度、灵敏度较高,且稳定性、重复性较好,适用于二十五味珊瑚丸中5种重金属含量的测定;5个厂家生产样品均在一定程度上存在重金属超标问题。

25味珊瑚丸载药纳米颗粒的生物效应研究

目的探讨25味珊瑚丸载药纳米颗粒(Ershiwuwei Shanhu’ Pill,ESP)于体内外的生物效应。方法将ESP纳米颗粒与SH-SY5Y细胞共培养8 h,荧光示踪与透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)观察其在细胞吸收分布情况。大鼠随机分为空白对照组和用药组,分别通过尾静脉注射生理盐水或ESP,HE染色观察肝脏形态的变化,旷场实验(Open field test)评估大鼠兴奋度变化,扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察SH-SY5Y细胞在25味珊瑚丸不溶组分上的生长情况。结果25味珊瑚丸纳米颗粒出现在各种细胞器中,出现破碎的细胞核。体内实验中,用药组大量肝细胞液化坏死,与模型组相比,用药组大鼠动物总运动距离显著增加(P<0.05),细胞可在25味珊瑚丸不溶组分生长良好。结论 25味珊瑚丸载药纳米颗粒可能导致大鼠焦虑并具有强烈的肝毒性。

藏药二十五味珊瑚丸中獐牙菜藏药材名称的探讨

目的:探讨藏药二十五味珊瑚丸中獐牙菜药材名称的准确表述。方法:依据藏医药古籍及现代文献记载、现行药品标准和藏药习用品使用情况进行分析。结果:獐牙菜之名系多种藏药材的总药材名称,不能满足一药一物的要求,因此不宜在国家药品标准中使用。结论:藏药成方制剂中獐牙菜名称,应修订为桑蒂(川西獐牙菜),或甲蒂(印度獐牙菜),或帕蒂(普兰獐牙菜)。

二十五味珊瑚丸治疗脑梗死30例临床观察

目的:观察二十五味珊瑚丸治疗脑梗死的临床效果。方法:选取60例急性脑梗死患者,随机分为对照组与治疗组各30例,对照组采用抗血小板聚集、强化调脂、护脑、扩管、降压等对症支持治疗,治疗组对照组在基础上加用二十五味珊瑚丸口服;治疗21d后进行血生化检测及NIHSS功能评分,评价临床疗效及其对肝肾功能血脂、心肌酶谱、同型半胱氨酸的影响。结果:与对照组相比,治疗组治疗前NIHSS评分差异无统计学意义(P>0.05),治疗组治疗前后NIHSS评分显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);对照组总胆固醇(TCHO)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)水平差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗前后TCHO、LDL-C、甘油三酯(TG)、尿酸水平差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,治疗组治疗后TG水平降低,存在统计学差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组治疗前后ALT、AST、BUN、CREA、CK、UA存在统计学差异(P<0.05),与对照组相比,治疗后ALT、AST、CK、CKMB、BUN水平有所升高,但差异具有统计学意义(P>0.05)。结论:二十五味珊瑚丸治疗脑梗死疗效确切,但存在一定的心肝肾功能影响,其机制可能与其调节血脂有关。

HPLC法测定藏药二十五味珊瑚丸中β-细辛醚的含量

目的：建立藏药二十五味珊瑚丸中β-细辛醚的HPLC含量测定方法。方法：采用Waters XSELECT CSH C18色谱柱,以甲醇-水（56∶44）为流动相,流速为1.0m L/min,检测波长为254nm,柱温为35℃。结果：β-细辛醚在0.9926~2.9778μg范围内线性良好（r=0.9999）,平均回收率为99.27%,RSD为1.1%。结论：该方法准确、可靠、快速、灵敏,可用于藏药二十五味珊瑚丸的质量控制。

三种二十五味珊瑚丸配伍方案治疗症状性癫痫的临床疗效评价

目的:观察三种二十五味珊瑚丸配伍方案治疗症状性癫痫的临床疗效和安全性,并评价何种配伍方案疗效最佳。方法:回顾性的临床对照研究,176例符合病例入选标准的癫痫患者,按不同的药物组分为4组,3组观察组均给予二十五味珊瑚丸(1g/d),按癫痫类型分别加单种常规剂量抗癫痫药(卡马西平或丙戊酸钠或复方苯硝那敏片),对照组给予顺气安神丸(16粒/d)加常规剂量丙戊酸类,治疗1年,以癫痫发作次数下降率及动态脑电图的变化作为主要疗效判断标准;以癫痫发作持续时间下降率作为次要疗效指标;以发作频率减少50%～75%和75%以上作为治疗有效和显效的评定标准;以不良事件发生率来评价药物的安全性。结果:3组观察组中加卡马西平组(P=0.022)、加丙戊酸钠组(P=0.016)和加复方苯硝那敏片组(P=0.001)的患者在癫痫发作次数下降率、动态脑电图改善(均P<0.01)、发作频率疗效等级(P=0.019)上与顺气安神丸加丙戊酸类组比较均有显著性差异,但3组观察组之间比较均无统计学意义(P>0.05);3组观察组中只有加复方苯硝那敏片组的发作时间下降率与对照组比较有统计学意义(P=0.024)。结论:3种二十五味珊瑚丸配伍方案治疗症状性癫痫皆能明显减少癫痫的发作次数、改善动态脑电图的结果、改善发作后头痛及认知功能,其中加丙戊酸钠组及加复方苯硝那敏片组还能明显减轻癫痫的发作类型程度,加复方苯硝那敏片组能显著缩短发作持续时间,综合得出观察组中加复方苯硝那敏片组疗效最佳。

原子吸收光谱法测定二十五味珊瑚丸中微量元素铁锌的含量

目的:测定二十五味珊瑚丸中微量元素Fe、Zn的含量,为其质量控制提供参考。方法:参照《中国药典》(2015)三部通则0406原子吸收分光光度法,建立二十五味珊瑚丸中Fe、Zn的含量测定方法。结果:原子吸收光谱法测定二十五味珊瑚丸中Fe、Zn的含量,Fe、Zn回归方程分别为y=0.0970x+0.0061(r=0.99938),y=0.1167x-0.0050(r=0.99900),线性关系良好;检出限分别为Fe(0.009278 mg/L),Zn(0.05656 mg/L);Fe、Zn元素的加样回收率及RSD分别为84.50%,0.74%;106.17%,1.13%;5个厂家生产的二十五味珊瑚丸中微量元素Fe、Zn的含量都比较高。结论:二十五味珊瑚丸中相对较高的Fe、Zn含量,可能为其发挥疗效起到重要作用。

藏药二十五味珊瑚丸中微量元素铜铁含量分析

目的:测定藏药二十五味珊瑚丸中两种微量元素Cu和Fe的含量,为其质量控制提供参考。方法:参照《中国药典》二部附录ΙΧ原子吸收分光光度法,建立二十五味珊瑚丸中Cu和Fe的含量测定方法。结果:火焰原子吸收光谱法测定二十五味珊瑚丸中微量元素Cu和Fe的含量,线性关系良好,检出限分别为Cu 0.038mg/L,Fe 0.017 mg/L;Cu元素的加样回收率为97.10%,RSD=0.5128%,Fe元素的加样回收率为100.19%,RSD=0.0174%;二十五味珊瑚丸中Cu元素的含量为0.01234 mg/g,Fe元素的含量为1.64556 mg/g。结论:藏药二十五味珊瑚丸中Cu、Fe元素的含量较高,可能为其发挥疗效起到重要作用。

二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦治疗癫痫的临床研究

目的探讨二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦片治疗癫痫的临床疗效。方法选取2015年4月至2016年10月中国人民解放军第二五四医院、天津市环湖医院收治的癫痫患者30例为研究对象,按照序列号法将患者随机分为对照组和治疗组,每组各30例。对照组餐后口服左乙拉西坦片,起始剂量500 mg/次,2次/d,一周后加至1 000 mg/次,2次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服二十五味珊瑚丸,1 g/次,1次/d。两组患者均连续治疗3个月。观察两组的临床疗效,比较两组的淋巴细胞亚群水平、炎症因子水平、癫痫发作频率。结果治疗后,对照组和治疗组的总有效率分别为73.33%、93.33%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+水平明显升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组淋巴细胞亚群水平明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAM-1)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组炎症因子水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组癫痫发作频率明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且治疗组癫痫发作频率明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论二十五味珊瑚丸联合左乙拉西坦片治疗癫痫具有较好的临床疗效,可减少癫痫发作频率,改善患者免疫功能,减轻炎症反应,具有一定的临床推广应用价值。

二十五味珊瑚丸调控Akt/mTOR/GSK-3β信号通路改善阿尔茨海默病小鼠的作用机制

该研究基于Akt/mTOR/GSK-3β信号通路研究藏族药二十五味珊瑚丸(Ershiwuwei Shanhu Pills,ESP)对阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)小鼠的作用机制。将BALB/c小鼠随机分为空白组,模型组,二十五味珊瑚丸低(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、高(800 mg·kg^(-1))剂量组和盐酸多奈哌齐(donepezil hydrochloride,DP HCL)组。除空白组外,其他各组灌胃20 mg·kg^(-1)三氯化铝并腹腔注射120 mg·kg^(-1)D-半乳糖,连续56 d构建阿尔茨海默病模型并给予药物治疗。采用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力,检测小鼠海马体中p-tau蛋白含量,检测小鼠海马体和血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)水平,苏木精-伊红染色(HE)和尼氏染色对小鼠全脑进行病理学观察,TUNEL染色观察小鼠皮层区的细胞凋亡情况。Western blot法测定小鼠海马体的p-mTOR、p-Akt和GSK-3β蛋白表达。结果显示,与模型组相比,二十五味珊瑚丸给药组小鼠的潜伏期和找到原平台的路径显著缩短,全脑病理损伤程度显著改善;TUNEL阳性细胞表达有所减少;海马体中p-tau蛋白含量显著降低;海马体和血清中SOD、CAT、T-AOC水平显著升高,MDA水平显著降低;海马体p-mTOR和p-Akt蛋白表达显著增加,GSK-3β蛋白表达显著减少。研究结果表明,二十五味珊瑚丸可减轻D-半乳糖联合三氯化铝致小鼠阿尔茨海默病引起的学习记忆能力衰退和氧化损伤,其作用机制可能与Akt/mTOR/GSK-3β信号通路有关。

基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路探讨二十五味珊瑚丸对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍的作用研究

该研究基于Keap1/Nrf2/HO-1信号通路研究藏族药二十五味珊瑚丸(Ershiwuwei Shanhu Pills,ESP)改善东莨菪碱(scopolamine,scop)致小鼠学习记忆障碍的作用机制。将ICR小鼠随机分为空白组、模型组、二十五味珊瑚丸低(200 mg·kg^(-1))、中(400 mg·kg^(-1))、高(800 mg·kg^(-1))剂量组和盐酸多奈哌齐组,采用腹腔注射东莨菪碱的方法建立学习记忆障碍模型。通过Morris水迷宫行为学实验检测小鼠学习和记忆能力,Nissl染色检测小鼠海马和皮质神经元损伤情况,免疫荧光检测小鼠海马和皮质中神经元特异核蛋白(NeuN)表达,采用生化试剂盒检测小鼠海马中乙酰胆碱(Ach)含量和乙酰胆碱酯酶(AchE)活性,血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)含量,Western blot法检测海马中细胞质Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶1(HO-1)的蛋白含量。结果显示,与模型组相比,二十五味珊瑚丸给药组小鼠在Morris水迷宫行为学实验中潜伏期显著减少;Nissl染色结果显示,神经元数量显著增加;免疫荧光检测NeuN结果显示,NeuN表达显著提高;AchE活力和MDA水平显著降低,Ach含量和SOD、CAT、T-AOC水平显著提高;Western blot法检测结果显示,模型组小鼠Keap1表达显著提高,二十五味珊瑚丸给药组表达差异无统计学意义,与模型组小鼠相比,二十五味珊瑚丸给药组Nrf2和HO-1表达显著提高。结果表明,二十五味珊瑚丸对东莨菪碱导致的小鼠学习记忆障碍有保护作用,其作用机制可能是通过调节Keap1/Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化作用。