二十五味松石丸调节巨噬细胞表型改善CCL_(4)诱导的大鼠肝纤维化

目的:探讨二十五味松石丸通过调节肝巨噬细胞表型改善CCL_(4)诱导大鼠肝纤维化的作用及可能机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二十五味松石丸88、176、352 mg/kg组,除正常对照组外,其余大鼠采用皮下注射CCL_(4)橄榄油建立肝纤维化模型,造模的同时按分组给予相应药物治疗。4 w后检测大鼠肝组织中病理变化和胶原纤维沉积;生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活力;ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)含量;免疫组化检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、CD68和CD163阳性表达;免疫印迹检测肝组织中α-SMA、TGF-β1、CD68、CD163、p-STAT1和p-STAT3蛋白表达;实时荧光定量PCR法检测肝组织中Cd68、Cd163 mRNA表达;免疫荧光双标检测CD68、CD163在肝组织中比例情况。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠血清中ALT、AST活力显著升高(P<0.01),TNF-α、IL-6、HA和LN含量显著升高(P<0.01),病理损伤区域较大,胶原沉积明显增多;TGF-β1、α-SMA的阳性面积和蛋白表达显著升高(P<0.01),CD68^(+)阳性细胞、mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),CD163^(+)阳性细胞、mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.01);p-STAT1蛋白表达显著增加(P<0.01),p-STAT3蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型对照组相比,二十五味松石丸治疗各组大鼠血清的ALT、AST活力显著降低(P<0.01),TNF-α、IL-6、HA和LN含量明显降低(P<0.05或P<0.01),病理损伤区域减少,胶原沉积明显降低;TGF-β1、α-SMA的阳性面积和蛋白表达显著降低(P<0.01),CD68^(+)阳性细胞、mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01),CD163^(+)阳性细胞、mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01);p-STAT1蛋白表达明显减少(P<0.05或P<0.01),p-STAT3蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。结论:二十五味松石丸能改善CCl_(4)诱导的大鼠肝纤维化,可能通过STAT信号通路抑制CD68^(+)巨噬细胞表型、促进CD163^(+)巨噬细胞表型,降低组织炎症反应。