二仙汤加减对急性不完全性脑缺血大鼠脑保护作用的实验形态学研究

目的 :探讨二仙汤加减的脑保护作用及其作用机理。方法 :用中老年Wistar大鼠 ,采用双侧颈总动脉夹闭 2小时后 ,去夹再通的方法制作急性不完全性脑缺血再灌流模型。实验组大鼠造模前给予二仙汤加减 ,于血流再灌后 6h、2 4h、3d及 7d处死 ,对顶叶皮质及背侧海马进行形态学研究。结果 :实验组与对照组比较 ,光、电镜图象显示毛细血管、脑细胞渗出及细胞损伤明显减轻 ;海马CA1区细胞丢失明显减少 (P <0 .0 5 )。结论 :该方药有改善脑血液循环、减轻脑水肿和保护脑细胞的作用。

中药保留灌肠治疗卵巢早衰的临床研究

目的观察二仙汤加减中药保留灌肠治疗卵巢早衰对于血清中E2(雌二醇)、FSH(卵泡刺激素)、LH(黄体生成素)的影响。方法设立治疗组及对照组各35例,治疗组采用二仙汤加减中药保留灌肠治疗卵巢早衰,对照组采用二仙汤加减中药汤剂口服治疗卵巢早衰,两组治疗前E2、FSH、LH值差异均无统计学意义(P>0.05)。观察二组治疗前后对于血清中E2、FSH、LH的影响。结果治疗组与对照组中治疗后FSH值与治疗前相比均有显著下降,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后E2值较治疗前均显著提高,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后LH值较治疗前均有下降,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论二仙汤加减中药保留灌肠提高血清E2,降低FSH优于单纯中药汤剂口服,同时两组均可以降低LH值。

二仙汤加减对急性不完全性脑缺血大鼠脑含水量及SOD活力的影响

目的 探讨中药“二仙汤加减”对急性不完全脑缺血大鼠脑含水量及SOD活力的影响及其意义。方法 中老年Wistar大鼠采用双侧颈总动脉夹闭 2h后去夹再通的方法 ,制成急性不完全性脑缺血再灌模型 ,实验组于手术前给予“二仙汤加减” ,各组鼠于手术后 6h、2 4h、3d、及 7d处死取脑 ,检测脑含水量和SOD活力。结果 实验组脑含水量明显低于对照组 ,而SOD活力明显高于后者。统计结果显示有显著性差异 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 实验结果表明中药“二仙汤加减”有明显的改善脑血循环 ,提高脑细胞抗损伤能力的作用 。

二仙汤对更年期肾阳虚大鼠的影响

目的:探讨二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型的治疗作用。方法:将30只符合自然老化的更年期大鼠模型,随机平均分配为对照组、模型对照组和治疗组,3月龄鼠作为青年组。模型治疗组和治疗组用氢化可的松制造肾阳虚模型成功后,治疗组给予二仙汤灌胃14天。观察二仙汤对大鼠性激素水平的影响。结果:二仙汤能明显减轻肾阳虚症状,体重增加(P<0.01),治疗组血中的雌二醇(E2)明显高于模型组(P<0.05),促黄体生成素(LH)和卵泡生成素(FSH)低于模型组(P<0.05)。结论:二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型有治疗作用。

二仙汤加减对急性不完全性脑缺血大鼠心房特殊颗粒的影响及其意义的探讨

目的:探讨中药干预剂“二仙汤加减”对急性不完全性脑缺血大鼠心房特殊颗粒(ASG)的影响及其意义。方法:中老年Wistar大鼠,采用双侧颈总动脉夹闭2 h后去夹再通的方法,制作急性不完全脑缺血模型。造模前给予实验组大鼠“二仙汤加减”煎剂,于血流再通后6 h、24 h、3 d、7 d处死。取大鼠右心耳制作超薄切片,电镜观察。结果:再灌6 h、24 h对照组大鼠右心耳ASG明显减少甚至缺如,而实验组仅少量释放,肌浆内仍存在密集地ASG。结论:中药“二仙汤加减”明显的减少了急性不完全脑缺血大鼠右心耳ASG的释放,为该方药在脑缺血过程中的脑保护作用提供了证据。

乳腺增生辨证施治69例疗效观察

目的 :应用辨证施治治疗乳腺增生。方法 :根据患者的年龄大小、体质强弱、病程长短、肿块大小、软硬等辨证分为肝郁型和肾虚型 ,前者以舒肝理气、通络活血止痛为主 ,软坚散结为辅 ,治疗药用逍遥散加减方 ;后者以温补肾阳、固摄冲任为主 ,疏肝散结止痛为辅治疗 ,药用二仙汤加味方。结果 :本组 6 9例 ,临床痊愈 2 5例 ,显效 3 1例 ,有效 1 1例 ,无效 2例 ,临床痊愈率 3 6 .2 3 %,总有效率97.1 0 %。结论 :对乳腺增生疾病 ,应用中医辨证施治 ,疗效满意。

龟鹿二仙汤与复方阿胶浆治疗乳腺癌化疗骨髓抑制

乳腺癌化疗导致骨髓抑制,外周血白细胞计数降低,皮下注射重组人粒细胞刺激因子可快速刺激骨髓产生白细胞,但疗效短,价格昂贵,且存在不良反应。现代研究证明中药有效成分提取物均具有一定抗肿瘤作用,以龟鹿二仙汤、复方阿胶浆为代表的复方制剂效果更为明显,但其作用机制尚不清楚。补气养血是治疗乳腺癌化疗致骨髓抑制的主要方法,常用药物中几乎都含有保护骨髓、升高白细胞、抗肿瘤作用的成分,但无论方剂是用汤剂、散剂或者丸剂,不会产生严重副作用,但起效慢,影响化疗后白细胞恢复。目前尚缺乏统一诊疗标准,难以推广使用,未来对辨证分型、病因病机、诊断、预防和治疗等仍需不断努力和完善,将药物中保护骨髓和抗肿瘤的成分提取出来,以达快速且安全有效效果。

二仙汤治疗中老年睾酮部分缺乏症的临床研究

目的:观察二仙汤治疗中老年男子雄激素部分缺乏症(PADAM)的疗效。方法:80例PADAM随机分为治疗组(二仙汤治疗)和对照组(11-酸睾酮治疗)各40例,治疗3个月,观察疗效和不良反应。治疗前后分别进行PADAM症状评分和血清睾酮检测。结果:治疗组显效率和总有效率分别为20.0%和62.5%;对照组分别为30.0%和75.0%,两组比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:二仙汤治疗中老年睾酮部分缺乏症安全有效。

二仙汤合二至丸治验体会

二仙汤合二至丸是中医临床首先用于治疗肾阴阳两虚所致之更年期综合征的,但通过长期的临床实践证实,对于各种因肾阴阳两虚所致疾病,采用二仙汤合二至丸加减治疗,皆能收到满意的效果。现就二仙汤和二至丸的来源、方药组成、功用、医案选录、诊治体会加以总结,以策提高学习和应用效果。

二仙汤对去卵巢大鼠干预作用的LC-MS血清代谢组学分析

目的:基于液相色谱-质谱法(LC-MS)探讨去卵巢大鼠血清内源性代谢物的改变及二仙汤的干预作用。方法:将24只健康雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和二仙汤组,每组8只,模型组和二仙汤组切除双侧卵巢组织,假手术组切除双侧腹腔内小块脂肪组织,术后2周开始灌胃给药。二仙汤组给予7.5 g·kg^(-1)二仙汤进行灌胃,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水。给药结束后,腹主动脉取血,采用LC-MS对大鼠血清进行非靶向代谢组学研究,结合正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,基于基因组百科全书(KEGG)数据库进行代谢通路分析并采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)验证代谢通路关键酶的水平。结果:代谢组学结果显示,模型组与假手术组间82个差异代谢物包括甘油磷脂、脂肪酰基、类固醇及其衍生物等14类成分,其中差异最显著的为甘油磷脂类。二仙汤可回调82个差异代谢物中的65个,其中11个具有统计学意义,主要为甘油磷脂中的磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LysoPC),其次为类固醇和类固醇衍生物中的皮质酮和11-脱氧皮质醇;代谢通路分析表明模型组甘油磷脂代谢、类固醇激素生物合成等通路发生变化,并在二仙汤给药后得以回调。ELISA结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠血清中甘油磷脂代谢物PC、LysoPC生成的关键代谢酶磷酸胆碱胞苷酰转移酶(CCT)、分泌型磷脂酶A2(sPLA2)及溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶(LPCAT)水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),胆碱磷酸转移酶1(CPT1)水平有所下降但差异无统计学意义;与模型组比较,二仙汤组CCT、sPLA2、CPT1水平均有显著升高(P<0.01)。此外,与假手术组比较,模型组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,二仙汤组TC、TG、LDL-C水平显著降低,HDL-C水平显著升高(P<0.01)。结论:去卵巢大鼠内源性代谢物及相关代谢通路发生改变,二仙汤可回调部分差异代谢物及相关通路,如调节代谢酶CCT、sPLA2、CPT1,从而升高PC、LysoPC的水平以调控甘油磷脂代谢,进而改善去卵巢大鼠脂代谢紊乱等病理变化。

二仙汤对去卵巢大鼠认知障碍的影响

目的：观察二仙汤对去卵巢大鼠引起的认知障碍作用及初步机制探讨。方法：将雌性sD大鼠按体质量随机分成假手术组，模型组，阳性药戊酸雌二醇组（0．8mg·kg-1·d-1），二仙汤高、中、低剂量组（相当生药量12，8，4g·kg-1·d-1）。除假手术组外，其他组动物均以去卵巢复制认知障碍模型，经阴道涂片筛选后，每日1次给药，连续90d后，以Mirrors水迷宫实验检测大鼠认知能力，比色法检测大鼠大脑皮质乙酰胆碱酯酶（AchE），乙酰胆碱转移酶（ChAT），总超氧化物歧化酶（T．SOD），丙二醛（MDA）水平，蛋白免疫印迹法（Westernblot）检测海马和大脑皮质区域的雌激素d受体蛋白表达。结果：与假手术组比较，模型组逃避潜伏期随着试验次数显著增多（P〈0．01），在原平台象限停留时间减少（P〈0．05），ChAT活性降低（P〈0．01）且AchE活性升高（P〈0．05），大脑皮质区域的雌激素d受体表达显著减少（P〈0．01）；与模型组比较，二仙汤能缩短模型大鼠逃避潜伏期，增加空间探索试验时穿过原目标平台的次数和原目标平台象限停留时间比例，以及增加ChAT活性，降低AchE活性，雌激素a受体表达显著增加（P〈0．01）。结论：二仙汤能改善去卵巢致大鼠认知障碍，其机制可能与中枢胆碱活性和雌激素等有关。

二仙汤对去卵巢大鼠心功能和血压动态演变的干预作用

目的:探讨大鼠去卵巢后心功能、血压的演变规律及二仙汤对其的影响及机制。方法:选用健康10周龄雌性SPF级SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、雌激素组(戊酸雌二醇,0.18 mg·kg^-1)、二仙汤组(7.5 g·kg^-1)。大鼠去卵巢后2周开始灌胃给药,1次/d,连续12周。二仙汤组及雌激素组分别给予二仙汤或戊酸雌二醇灌胃,假手术组和模型组灌胃等体积纯净水。给药4,8,12周末以无创超声心动图(UCG)及尾动脉检测技术、放免法检测心功能、血压(BP),血清雌二醇(E2)含量;给药12周末采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清内皮素-1(ET-1),血管紧张素2(AngⅡ)含量,苏木素-伊红(HE)染色、电镜技术、原位末端标记法(TUNEL)检测心肌形态学和凋亡情况。结果:与假手术组比较,给药4周末模型组射血分数(EF)减小、左室收缩末期容积(LVVols)增大(P<0.05),8周末各组心功能无显著差异,12周末模型组左室收缩末期内径(LVIDs),LVVols,左室舒张末期内径(LVIDd),左室舒张末期容积(LVVold)均显著增大(P<0.01),4,8,12周末模型组收缩压(SBP)增高(P<0.05),并呈不断升高趋势,舒张压(DBP)变化不明显,12周末模型组血清E2水平降低(P<0.05),ET-1,AngⅡ升高(P<0.01),心肌肌原纤维不规则、部分肌丝断裂,线粒体嵴紊乱、断裂或消失,细胞凋亡增多(P<0.01);与模型组比较,二仙汤组心肌收缩、舒张功能明显改善,血压降低;血清E2含量明显升高(P<0.05),血清ET-1含量明显降低(P<0.05),血清AngⅡ含量显著降低(P<0.01);心肌、线粒体形态结构改善,心肌细胞凋亡指数显著降低(P<0.01)。结论:大鼠去卵巢后出现心功能降低、血压增高等一系列病理改变,与心功能下降比较血压升高的变化出现更早,二仙汤通过调节E2,血液活性物质及心肌凋亡等途径发挥对去卵巢大鼠心功能、血压的干预作用。

母婴分离/束缚应激模型小鼠海马小胶质细胞变化及温阳解郁方的调节作用

目的:观察母婴分离/束缚应激诱发焦虑抑郁小鼠海马小胶质细胞激活和白细胞介素-1β(IL^(-1)β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达情况,探讨温阳解郁方抗焦虑抑郁的机制。方法:84只雄性C57BL仔鼠于出生后第0天(PD0)随机分为空白组、束缚应激组和造模组,造模组采取母婴分离结合束缚应激制备焦虑抑郁模型,将造模组按随机数字表法分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组。在离乳第21天(PD21)至成年第90天(PD90),空白组、束缚应激组和模型组饲喂正常饲料,其余饲喂药混饲料(温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组用药剂量分别为5.85,12.03,16.71 g·kg^(-1)及2.60 mg·kg^(-1))。采用旷场实验,O迷宫和社会交互实验评估模型组小鼠焦虑抑郁状态;免疫组化法(IHC)观察海马小胶质细胞及离子钙接头蛋白-1(Iba-1)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测IL^(-1)β,IL-6,TNF-α,Iba-1,糖皮质激素受体(GR)mRNA表达水平。结果:与空白组比较,模型组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著减少(P<0.01),开臂活动时间与活动总路程明显减少(P<0.05,P<0.01),训练探察时间和辨别探查时间显著增加(P<0.01),Iba-1蛋白及mRNA表达,IL^(-1)β,IL-6,TNF-αmRNA表达水平显著升高(P<0.01),GR mRNA表达水平显著降低(P<0.01),IHC结果显示小胶质细胞的过度激活。与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著上升(P<0.01),开臂活动时间显著上升(P<0.01),训练探察时间和辨别探查时间明显降低(P<0.05,P<0.01);Iba-1蛋白及mRNA表达,IL^(-1)β,IL-6,TNF-αmRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),GR mRNA表达水平显著上升(P<0.01),IHC结果表明小胶质细胞的形态恢复;温阳组和解郁组小鼠开臂活动时间显著上升(P<0.01),辨别探查时间明显降低(P<0.05),Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-6 mRNA表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);温阳组小鼠GR mRNA表达水平明显上升(P<0.05),TNF-αmRNA表达水平明显降低(P<0.05);解郁组小鼠5 min运动总路程显著上升(P<0.01),训练探察时间明显降低(P<0.05),IL^(-1)βmRNA表达水平明显降低(P<0.05),IHC结果表明两组小胶质细胞有所恢复。结论:温阳解郁方的综合疗效和药理作用优于温阳方和解郁方,其作用机制可能通过抑制母婴分离/束缚应激小鼠海马小胶质细胞的激活,降低IL^(-1)β,IL-6,TNF-α等细胞因子的表达,增加海马GR表达,从而改善小鼠的焦虑抑郁样行为。

逍遥二仙汤加减治疗围绝经期综合征情绪障碍的临床疗效

目的:观察逍遥二仙汤加减治疗围绝经期综合征情绪障碍(肾虚肝郁证)的临床疗效及对单胺类神经递质和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法:将108例患者按随机数字表法分为对照组和观察组各54例。对照组口服舒肝解郁胶囊,2粒/次,2次/d;观察组口服逍遥二仙汤加减,1剂/d。两组疗程均为12周。进行治疗前后汉密尔顿焦虑量表(HAMA),汉密尔顿抑郁量表-17(HAMD-17),改良Kupperman指数(KI),匹兹堡睡眠质量指数(PSQI),绝经期生存质量量表(MENQOL)和肾虚肝郁证评分;检测治疗前后雌二醇(E_(2)),卵泡生成素(FSH),黄体生成素(LH),BDNF,5-羟色胺(5-HT),去甲肾上腺素(NE)和多巴胺(DA)水平;进行安全性评价。结果:观察组HAMA和HAMD-17评分均低于对照组(P<0.01);观察组KI,肾虚肝郁证,PSQI和MENQOL评分均低于对照组(P<0.01);观察组5-HT,E_(2),DA,NE和BDNF水平均高于对照组(P<0.01);观察组临床疗效高于对照组(Z=2.184,P<0.05);两组患者观察期间均没有发现与服用中药相关不良反应。结论:采用逍遥二仙汤加减治疗围绝经期情绪障碍(肾虚肝郁证)患者,可有效减轻情绪障碍及相关症状,并能调节单胺类神经递质、神经营养因子及雌激素,临床疗效显著,且使用安全。