黑木耳多糖对人红白血病K562细胞周期和凋亡的影响

目的:观察黑木耳多糖(Auricularia auricula polysaccharide,AAP)体外对人红白血病K562细胞的抗肿瘤作用及其机制。方法:将K562细胞与AAP以及AAP作用于体外培养人外周血单个核细胞(PBMCs)的上清液培养,用MTT法检测K562细胞增殖和流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。结果:AAP对K562细胞没有显示直接的细胞毒作用,但AAP作用的PBMC上清液能显著抑制K562细胞的增殖,抑制率最大可达49.68%;AAP作用的PBMCs上清液能使G0/G1期细胞显著增加(P<0.05,P<0.01);200μg/mL到800μg/mL浓度AAP刺激的PBMCs上清液能显著诱导K562细胞凋亡(P<0.05,P<0.01),其凋亡率可达24.70%。结论:AAP通过激活免疫细胞抑制肿瘤细胞生长,诱导其凋亡并使细胞阻滞于G0/G1期。

MTT法测定稀土离子对BEL-7402及K562细胞的毒性及增殖毒性

用MTT法测定稀土离子在不同浓度、不同培养液中,与BEL 7402和K562细胞作用不同时间,对细胞的毒性和增殖毒性。结果表明,在含10%小牛血清培养液中,仅个别稀土离子在较高浓度时对BEL 7402细胞增殖有较弱的抑制作用;对于K562细胞,稀土离子在低浓度时对细胞增殖即表现出较强的抑制作用(P<0.05)。当培养液不含小牛血清时,较低浓度的稀土离子即可抑制BEL 7402细胞的增殖(P<0 05)。

PB231诱导K562细胞凋亡的初步研究

目的 研究PB2 3 1诱导K 562细胞凋亡作用 ,探讨PB2 3 1的抗肿瘤机制。方法 采用荧光显微镜观察细胞形态学变化 ,MTT法测定PB2 3 1对K 562细胞生长抑制作用 ,琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 K562细胞经PB2 3 1处理后 ,在倒置光显微镜下可见细胞变形和凋亡小体形成 ;荧光显微镜下可见染色质凝集。MTT法检测其IC50 值为 5× 1 0 -5M。琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNALadder”。结论 PB2 3 1可诱导K562细胞发生凋亡。这可能是其抑制K562细胞生长的作用机理之一。

过表达PTPα促进K562细胞体外增殖能力和体内致瘤性

探讨蛋白质酪氨酸磷酸酶α(PTPα)在血液肿瘤细胞中的特异性表达,研究过量表达PTPα对人红白血病细胞K562生物学行为的影响及在裸鼠体内致瘤能力的改变.首先应用RT-PCR和Western印迹检测3种不同类型造血系肿瘤细胞(K562、NB4、Jurkat T)中PTPα的表达水平.根据检测结果,选择K562细胞作为研究对象,利用脂质体将PTPα真核表达载体转染K562细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,RT-PCR和Western印迹验证过表达情况;经MTT法检测细胞增值能力的改变;用流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞分化状态;并将阳性克隆细胞皮下接种裸鼠,观察PTPα基因转染前后细胞系在裸鼠体内的致瘤能力及瘤体的组织化学变化.上述实验结果表明,通过G418压力筛选获得了PTPα高表达多克隆细胞系K562-PTPα;经体外增殖实验分析,实验组K562-PTPα细胞与未转染组细胞K562和转染空载体组细胞K562-splice相比,细胞生长速度增快,G2/M期细胞比例增加(P<0.05),而细胞分化状态无明显变化;裸鼠体内致瘤实验显示,K562组、K562-splice组和K562-PTPα组平均瘤重分别为(1.1±0.3)g、(1.3±0.2)g和(2.5±0.5)g;病理切片显示,K562-PTPα组瘤体组织分化程度较对照组低、恶性程度高,细胞的致瘤能力增强(P<0.01).综上所述,过表达PTPα使K562细胞具有更强的体外增殖能力和体内致瘤性,表明PTPα可能在造血系统恶性肿瘤的发生发展中发挥促进作用.

鲨鱼软骨制剂对三种细胞系的抑制效应

目的 :研究鲨鱼软骨制剂 ( SCP)对人胃癌细胞 ( MGC80 -3 )、红白血病细胞( K562 )、人脐静脉血管内皮细胞 ( VEC3 4 0 )的生长抑制作用 ,探讨其抗癌作用机制。方法 :采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀、烘干、微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂 ;采用 MTT法检测不同浓度 SCP对体外培养的 MGC80 -3细胞系、K562细胞系和 VEC3 4 0细胞系的生长抑制作用。结果 :SCP明显抑制 MGC80 -3、 K562和 VEC3 4 0三种细胞系的生长 ,其 IC50值分别为 1 mg/ml、 0 .75～ 1 .5mg/ml和 3 mg/ml。结论 :SCP能直接抑制肿瘤细胞生长 ,又能抑制血管内皮细胞的生长 。

土槿甲酸诱导人红白血病细胞凋亡的研究

目的 :探讨土槿甲酸的抗肿瘤作用机制。方法 :应用MTT法测定土槿甲酸对K5 62细胞生长抑制作用 ;荧光染色法观察细胞形态学变化 ;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA裂解。结果 :K5 62细胞经土槿甲酸处理后MTT法检测其IC50 值为 5× 1 0 - 5M ;荧光显微镜下可见染色质凝集、碎裂、凋亡小体形成。琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNALadder”。结论 :土槿甲酸可诱导K5