EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1与烧伤患者瘢痕评分、创面愈合时间关系及对创面愈合质量的预测价值

目的:探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1(Matrix metalloproteinase-9/Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,MMP-9/TIMP-1)与烧伤患者瘢痕评分、创面愈合时间关系及对创面愈合质量的预测价值。方法:选取2018年5月-2021年1月笔者科室收治的113例深Ⅱ度烧伤患者,采用削痂植皮联合外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子治疗,根据创面愈合质量分为良好组(n=88)、不良组(n=25),比较两组基线资料及治疗前、治疗5 d、10 d后EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1,应用Pearson分析治疗5 d、10 d后EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1与温哥华瘢痕量表(Vancouver scar scale,VSS)、创面愈合时间关系,采用多因素Logistic回归方程分析创面愈合质量的相关影响因素,采用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)及ROC下面积(Area under the curve,AUC)分析治疗5 d、10 d后EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1,预测创面愈合质量价值。结果:不良组创面愈合时间、VSS评分数值均高于良好组(P<0.05);不良组治疗5 d、10 d后EPO低于良好组,IL-1β、MMP-9/TIMP-1高于良好组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗5 d、10 d后EPO与VSS评分、创面愈合时间呈负相关(P<0.05);治疗5 d、10 d后IL-1β、MMP-9/TIMP-1与VSS评分、创面愈合时间呈正相关(P<0.05);将创面愈合时间、VSS评分控制后,治疗5 d、10 d后EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1仍与创面愈合质量相关(P<0.05);治疗10 d后EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1的AUC大于治疗5 d后,且EPO、IL-1β联合MMP-9/TIMP-1的AUC大于任一单一指标。结论:EPO、IL-1β、MMP-9/TIMP-1与烧伤患者瘢痕评分、创面愈合时间、创面愈合质量有关,联合检测能为临床预测创面质量提供有效参考,并有望成为促进创面愈合、提高愈合质量的一个干预靶点。

牦牛肺脏各支气管中EPO的表达差异研究

为研究促红细胞生成素(EPO)在牦牛肺脏各支气管中的表达差异性,本试验以高原牦牛肺脏作为研究对象,采用H&E染色、免疫组织化学染色的方法,对牦牛肺脏各支气管中EPO的分布与表达差异进行研究。H&E染色结果表明牦牛肺脏组织结构正常;免疫组织化学染色结果显示EPO在各支气管均有表达且黏膜皱襞为强阳性表达,平滑肌层、黏膜下层和外膜呈弱阳性表达。以上结果表明,牦牛肺脏各级支气管中EPO表达程度表现为黏膜上皮细胞强于平滑肌细胞、黏膜下层细胞与外膜细胞;且EPO在各级支气管均有表达,说明EPO对牦牛肺脏低氧适应性具有重要调控作用。

EPO在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的差异性表达

为揭示促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)在高原藏羊和平原绵羊睾丸组织中的表达差异,本研究采集藏羊和绵羊的睾丸组织,采用H&E染色法观察二者睾丸组织的形态结构,采用免疫组织化学染色法对藏羊和绵羊睾丸组织中EPO表达分布差异性进行分析。H&E结果显示,藏羊和绵羊睾丸组织结构均正常,绵羊生精小管形状较藏羊更为规则,且生精上皮细胞数量较多。免疫组化结果显示,藏羊和绵羊的睾丸组织中均能检测出EPO,但EPO在藏羊睾丸组织中的表达量高于绵羊睾丸组织。由此看来,藏羊在长期适应高原低氧环境的过程中,生殖器官组织结构发生了一定适应性变化,EPO在藏羊睾丸组织中的表达程度高于绵羊睾丸组织,对藏羊睾丸低氧适应性有重要调控作用,说明EPO可能与藏羊在高原环境下维持正常繁殖性能有关。

模拟高原训练对大鼠促红细胞生成素(EPO)表达的影响

为了进一步研究高原训练对大鼠红细胞生成的影响，本研究以大鼠１８Ｓ－ｒＲＮＡ为内参照，用定量反转录聚合酶链式反应（ＱＲＴ－ＰＣＲ），测定了６０只ＳＤ雄性大鼠在模拟不同海拔游泳训练后ＥＰＯ ｍＲＮＡ的变化。结果表明，所有高原对照组中ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平均高于平原对照组，其中高原３０００米组和４０００米组较平原对照组有显著性增加Ｐ＜０．０５。在高原训练组中，除了高原２０００米训练后１周组及２周组较高原２０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有较大幅度增加外，其余各高原训练组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平较该组对照均有不同程度的下降。其中高原３０００米训练后１周组及２周组较高原３０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有显著水平的下降Ｐ＜０．０５，而高原４０００米训练后１周组及２周组较高原４０００米对照组ＥＰＯ ｍＲＮＡ水平有非显著水平的下降Ｐ＞０．０５。

长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态和EPO水平的影响

目的 :观察长期递增负荷跑台运动和营养补充对大鼠肝脏组织形态、EPO水平的影响 ,为探讨运动性贫血发生的机理和防治方法提供依据。方法 :雄性Wistar大鼠 30只 ,随机均分为 3组 :对照组、运动组、运动 +营养补充组。运动方式为 11周递增负荷跑台训练 ,营养补剂为铁复合剂。应用组织学光镜、酶联免疫吸附法 (ELISA)观察 3组大鼠肝脏组织形态、EPO水平。结果 :运动组大鼠肝脏组织肝细胞结构模糊、多数肝细胞表现出浑浊肿胀或一定程度的水样变性 ,而运动+营养组肝脏形态基本正常。运动 +营养组肝脏组织匀浆液EPO活性水平分别高于对照组、运动组。

模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和EPO基因表达的影响

目的 :研究模拟高住低练对大鼠红细胞相关指标和肾脏EPO基因表达的影响。方法 :4 8只雄性Wistar大鼠随机分为 4组 :低住低练组 (LoLo) ,模拟高住低练组 (HiLo) ,高住对照组 (Hi) ,对照组 (Con) ,每组 12只。模拟高住低练组和低住低练组进行相同的训练 ,但模拟高住低练组和高住对照组每晚在相当于 2 5 0 0米海拔高度的低压舱内居留 12～ 13小时 ,对照组和低住低练组仅在正常条件下居住 ,4周后测定大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积和肾脏EPO基因表达。结果 :模拟高住低练组大鼠红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组红细胞计数、血红蛋白浓度和红细胞比容与对照组相比无明显差异。模拟高住低练组肾脏EPO基因表达明显高于低住低练组、高住组和对照组 (P <0 .0 5 ) ,高住组、低住低练组与对照组之间无显著差异。结论 :模拟高住低练可提高大鼠血红蛋白浓度 ,促进肾脏EPO基因表达 ,EPO基因表达的增加可能是长期低氧和运动应激累积效应的结果。

葛根素对大鼠缺血脑组织EPO表达的影响

目的探讨葛根素对大鼠脑缺血后脑促红细胞生成素(EPO)表达的影响。方法应用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注48h损伤模型;分别于缺血2h再灌注即刻、再灌注24h给予腹腔注射葛根素400mg/kg(体重),对照组腹腔注射等剂量生理盐水,每组12只大鼠。大鼠苏醒后30min及处死前分别进行神经功能评分。48h处死大鼠,每组6只石蜡切片用HE染色检测腔梗死体积,免疫组织化学检测葛根素对缺血脑组织EPO表达的影响;每组6只ELISA法检测EPO活性。结果葛根素400mg/kg(体重)腹腔注射组的脑梗死体积明显小于对照组,葛根素治疗也可减少神经功能损伤,神经功能评分均明显好于对照组。免疫组织化学结果显示:葛根素组大鼠脑缺血侧皮层区及基底区EPO阳性细胞数明显高于对照组。结论葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用。其保护作用可能与提高EPO的表达有关。

MDS患者祛铁治疗与缓解EPO抵抗的初步研究

本研究旨在探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者袪铁治疗后红细胞生成素(EPO)、血红蛋白(Hb)、重组EPO(rEPO)的变化及EPO与血清铁蛋白(SF)的相关性。检测172例MDS患者及30例健康对照者SF、EPO浓度、血清铁(SI)、总铁结合力(TIBC)、C反应蛋白(CRP)、Hb;根据CRP值对SF进行调整。对34例低危组、SF>1 000 mg/L的患者给予袪铁胺治疗,比较治疗前后SF、EPO、SI、TIBC、Hb的变化。对58例低危组、EPO<1 000 U/L的患者给予rEPO治疗,比较铁过载组与非铁过载组袪铁治疗前后EPO抵抗的发生率。结果表明:非铁过载组EPO浓度高于正常对照组(997.44±473.48 vs 467.27±238.49)(P<0.05);铁过载组EPO浓度高于无铁过载组及正常对照组(3257.59±697.19 vs 997.44±473.48;3257.59±697.19 vs 467.27±238.49)(P均<0.05);铁过载组EPO抵抗发生率高于非铁过载组(18/35 vs 2/23)(P=0.001),铁过载组MDS患者EPO与SF呈显著正相关(r=0.310)(P=0.036)。袪铁治疗后SF、SI、TIBC及EPO浓度均较治疗前明显下降(3942.38±641.82 vs 2266.35±367.31;48.61±10.65 vs 28.52±12.61;59.84±12.62 vs 33.76±15.43;3808.01±750.22 vs 1954.78±473.18)(P均<0.05),Hb升高(35±18 vs 57±21)(P=0.046),部分EPO抵抗患者恢复疗效。结论:袪铁治疗能增强贫血MDS患者对EPO反应,缓解EPO抵抗,降低EPO病理性升高,提升Hb水平,减少输血依赖。

牦牛EPO基因的PCR-SSCP多态性研究

以巴州牦牛、大通牦牛和九龙牦牛为对象,对促红细胞生成素(EPO)基因用PCR-SSCP方法进行了多态性检测。结果表明:大通牦牛、巴州牦牛、九龙牦牛具有较丰富的遗传多样性,表现为AA,AB和BB3种基因型,AB为优势基因型,A为优势等位基因;经χ2适合性检验,3个牦牛品种在该基因位点上均处于Hardy-Weinberg平衡状态。同时发现随着海拔高度的增加,A等位基因频率逐渐升高,BB型的频率则降低,群体杂合度和多态信息含量也逐渐降低,这种变化可能与牦牛对低氧的适应能力有一定的关系。

重组人促红细胞生成素(rhEPO)在老年慢性病贫血(AcD)中治疗效果的评价及疗效的预测

目的在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血（anemia of chronic disease,AcD）患者中，应用重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗8周后测观察贫血改善情况，并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周，8周内血红蛋白（hemoglobin，Hb）上升20g／L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数（reticulocyte count, Ret）、总铁结合力（total iron binding capacity,TIBC） 、血清铁（serum iron，SI）、血清铁蛋白（serum ferritin serum，SF）、可溶性转铁蛋白受体（serum transferrin receptor, sTfR）作为观测指标，观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高，SI、LgSF下降，sTfR升高（P〈0．05）。20例患者8周时获得预期疗效，多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关（P〈0．05）。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组，绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC曲线）并计算曲线下面积（area under the curve,AUC），后者具有统计学意义并且AUC更大（AUC为0．81，P〈0．05，95％CI：0．627～0．993），并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58mIU／mL。如患者EPO≤58mIU／mL，可预测其能获得较好的治疗效果。结论rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果，患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。

EPO检测技术的研究进展

促红细胞生成素 ( EPO)是一种临床上广泛应用的重要药物 ,也是近年来兴奋剂检测的热点。本文主要从 EPO的产生和应用出发 ,对 EPO的结构、特性及其检测方法进行了介绍及评价 ,重点探讨了竞技体育中 EPO的检测技术 。

长期慢性低氧对牦牛和黄牛血液中HIF-2α、EPO水平及红细胞相关指标的影响

为探讨牦牛和迁饲黄牛血液中红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、低氧诱导因子-2α(HIF-2α)、促红细胞生成素(EPO)等因子对高原适应和习服的不同特征及调控机理,按照海拔低于3 500m和高于3 500m两组采集青海地区的牦牛血样,同时采集高山迁饲黄牛(海拔2 500m)及低海拔黄牛(海拔1 300m)血液,采用全自动血液分析仪测定血液中红细胞、血红蛋白、红细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)等;采用双抗夹心酶标法测血液中EPO、HIF-2α含量。通过t检验及单因素方差分析法分析指标间的差异性,并分析各指标与HIF-2α、EPO的相关性。结果表明,海拔高于3 500m牦牛组的RBC、HB、HCT显著升高,而HIF-2α和EPO水平却未发生显著变化。与迁饲黄牛和低海拔黄牛相比,牦牛血液中的RBC明显降低,而MCH、HIF-2α和EPO显著升高。牦牛血液中EPO、RBC、HB、HCT、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关;迁饲黄牛血液中红细胞分布宽度(RDW-SD)与EPO水平呈显著相关;低海拔黄牛血液EPO、MCH水平与HIF-2α水平呈显著相关。推测:海拔升高引起的低氧是影响牦牛血液RBC、HB、HCT改变的主要因素;与黄牛相比,低RBC、低MCH、高HIF-2α、高EPO水平是牦牛适应低氧的主要特征,且牦牛血细胞各指标对血液中HIF-2α水平的改变更敏感。提示牦牛通过遗传进化成功适应高原环境。

血清EPO指标在耐力运动训练中的应用

采用文献资料研究方法 ,从EPO的生物学特性、EPO与耐力运动能力、EPO与低压氧舱等方面分析入手 ,探讨EPO在高原训练和低压氧舱训练中的变化规律。认为 ,EPO可作为耐力运动训练的预见及评价指标 ;间断低压氧舱应用 ,很可能是今后耐力运动训练的主要手段。

鸡血藤总黄酮对血虚小鼠IL-3、EPO影响的实验研究

目的:观察鸡血藤总黄酮(STF)对化学因素所致的血虚小鼠血清IL-3、EPO水平的影响。方法:采用盐酸苯肼(APH)、环磷酰胺(CTX)复合造模,建立血虚模型小鼠,检测外周血及血清IL-3、EPO水平。结果:与正常对照相比,模型小鼠的外周血、IL-3降低,而血清EPO升高(P<0.01),鸡血藤总黄酮各剂量组的外周血、IL-3水平高于模型对照组(P<0.05),EPO水平显著低于模型对照组(P<0.05)。结论:鸡血藤总黄酮可以通过促进机体分泌IL-3促进红系造血,与EPO水平无关。

EPO对大鼠急性脊髓损伤后Bcl-2及Bax表达与运动神经元凋亡的影响

目的:探讨促红细胞生成素对脊髓损伤后脊髓后角Bcl-2、Bax表达及神经元凋亡的影响。方法:120只SD大鼠随机分成4组:空白组、单损组、生理盐水组、EPO组;以T10为中心横断损伤脊髓,EPO组术后即刻给予EPO每日3000U/kg腹腔注射,盐水组腹腔注射等量生理盐水。采用免疫组织化学染色和Tunel法检测损伤后基因Bcl-2、Bax的表达水平和神经元凋亡变化。结果:Bcl-2在1天达高峰,单损组58.32±2.37;EPO组176.68±11.21;3天后开始下降,14天仍有微量表达;EPO组较单损组Bcl-2表达明显增加,EPO组Bcl-2表达比损伤组在相同时间点有明显差异(P<0.05),组内24h时间点较其它点Bcl-2表达均有明显差异(P<0.01)。Bax8h开始增多,24h达峰值,3天开始下降,7天达正常水平。结论:EPO能在SCI后促进Bcl-2、抑制Bax表达,调高Bcl-2/Bax比值,减少继发神经元细胞凋亡,促进神经再生与修复。

EPO对缺血/再灌注损伤大鼠心肌细胞Mfn2蛋白表达及心肌细胞凋亡的影响

目的观察重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对缺血/再灌注损伤大鼠心肌细胞Mitofusin2(Mfn2)蛋白表达的影响及其抗心肌细胞凋亡的作用。方法选取成年SD大鼠35只,随机分为正常组(Normal),假手术组(Sham),缺血再灌注组(I/R),缺血再灌注EPO治疗组(I/R+EPO)。各组分别于再灌注3h和24h后,剪取心脏缺血/再灌注损伤区域,用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测Mfn2蛋白的表达。结果再灌注3h和24h后,与正常组和假手术组相比,I/R组Mfn2蛋白的表达和心肌细胞凋亡均显著增加;与I/R组相比,I/R+EPO组Mfn2蛋白的表达和心肌细胞凋亡均显著降低。结论EPO可以下调缺血再灌注损伤后心肌细胞Mfn2蛋白的表达,抑制心肌细胞的凋亡。

基于FP法的EPOR配体高通量筛选模型

目的 寻找疗效好、副作用小的EPO功能类似物。方法 用FITC标记EPO，从FVA细胞中提取含EPO受体的细胞膜，建立了用FP法筛选EPOR配体的模型，并对实验条件进行了优化和可能影响模型的因素（DMSO）进行了分析，此外用Z’因子对此模型进行了评估。结果 样品中含0％～5％DMSO不会对实验结果产生影响，Z’因子的值为0．78．结论 建立的筛选模型稳定性好和准确率高。

藏猪促红细胞生成素(EPO)基因多态性分析

选取高海拔低氧环境饲养的藏猪、长白猪为研究对象,利用直接测序法和PCR-RFLP分子标记技术对促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)基因进行多态性分析,结果表明,藏猪EPO基因相对于长白猪存在16个转换,1个15bp片段的缺失。

EPO对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤NSE表达的影响

目的:观察促红细胞生成素(EPO)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经元特异性烯醇化酶表达的影响。方法:7日龄SD大鼠随机分成假手术对照组、EPO治疗组、缺氧缺血(HIBD)组。造模后在不同时间点检测脑质量损伤百分比、皮层脑组织HE染色、免疫组化观察皮层神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果:与假手术对照组相比较,HIBD组大鼠脑组织病理变化明显,EPO治疗组能明显改善大鼠脑组织形态变化和脑质量损伤百分比(P<0.05);HIBD组大鼠造模48 h后可见部分NSE阳性表达出现在神经元外,造模后第4天NSE的阳性表达达到高峰;在相同时间点EPO治疗组可明显减少NSE阳性表达颗粒在神经元间隙的出现;HIBD组大鼠在造模后48h和8 d NSE阳性细胞数目均少于同日龄对照组和EPO组(P<0.05)。结论:EPO在HIBD发生早期起到神经保护的作用,减少神经元的坏死,减轻缺氧缺血导致的脑功能损伤。

慢性阻塞性肺疾病气道重塑与血常规、EPO相关性的实验研究

目的:从慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠不同时间段红细胞数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞数(WBC)、促红细胞生成素(EPO)、转化生长因子(TGF-β1)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)几个关键环节,探讨COPD气道重塑与血常规、EPO的相关性,推测合并贫血的可能性。方法:采用气管内滴注脂多糖加烟熏法建立大鼠COPD模型,分别设正常组、COPD模型4周组、COPD模型8周组,造模结束后对大鼠分别进行血液和肺泡灌洗液(BALF)的采集,并对相关指标进行检测。结果:RBC、Hb、EPO在4周组中均有不同程度增高,但在8周组则有不同程度的下降;TGF-β1、MMP-9、WBC则在两个时间段中均有不同程度的升高。相关性分析:EPO与RBC、Hb成正相关;4周组和8周组TGF-β1、MMP-9与WBC成正相关;8周组RBC、Hb、EPO与TGF-β1、MMP-9成负相关。结论:随着COPD病情进展,气道重塑重要细胞因子与血液主要指标的相关性越明显,出现贫血合并症的可能性越大,可以尝试从中医药角度探索干预策略或途径。