广东地区家畜、家禽肠道大肠杆菌药物敏感性和O157:H7分离状况

目的了解O157大肠杆菌在健康人、家畜和家禽中的存在情况和粪便中分离到的大肠杆菌的药物敏感性,为病原大肠杆菌耐药率增高寻找依据。方法2000～2001年选健康成人、小孩和健康家畜、禽粪便标本620份,一部分直接划种于选择培养基,37℃培养24h;另一部分用EC肉汤培养基,37℃培养18h,以进行增菌,然后转种于CT-SMAC平板,37℃培养24h。然后进行血清学鉴定以判断是否为O157大肠杆菌。用低片法测定分离到的620株大肠杆菌对氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(AMS)、庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)和氧氟沙星(OFX)的药物敏感性;用琼脂平皿二倍稀释法测定不同来源标本分离的部分大肠杆菌对CIP和OFX的MIC值。结果在健康猪、牛和鸡的粪便中均找到了O157大肠杆菌,检出率在1.5%左右,健康成人和小孩粪便中均未找到O157大肠杆菌;健康成人、小孩、家畜和家禽粪便中分离的大肠杆菌,β-内酰胺酶产生率较低,在6%～12%之间;分离的大肠杆菌对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦和庆大霉素的耐药率较低,在10%以下,且人和家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率差别不大;从人粪便分离的大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药率低,而从家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率高。结论在广东,O157大肠杆菌亦存在于部分家畜、禽肠道中,有造成食物污染的危险;

用聚合酶链反应检测LT-大肠埃希菌

本文报告了用聚合酶链反应快速检测LT—E Coli 的实验方法及应用。使用了二个寡核苷酸引物,直接将大便标本接种于LB 肉汤中,对LTA 亚基一段高度保守区域的DNA 进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳检测,检测了30株细菌,只有LT—E Coli,LT/ST—E Coli 为阳性,其余细菌检测均为阴性,最低检测细菌量为50CFU,整个检测过程在7h 内完成.用此方法,检测了40株从腹泻患者标本中分离的大肠埃希菌,并用LT 探针技术进行比较,完全符合率为90%,用此方法检测LT—E Coli,快速、特异、敏感。

美洲大蠊粉对腹泻小鼠治疗的效果

【目的】研究小鼠饲料添加剂美洲大蠊粉对腹泻小鼠腹泻率、稀便率、体重、采食量、饮水量的影响。【方法】采用腹腔注射0.02 m L/g的3×108cfu/m L大肠杆菌菌悬液建立腹泻模型(5 d),其后在小鼠饲料中添加不同剂量的美洲大蠊粉用于治疗(10 d)。分别在1、3、5、7、9、11、13和15 d测定小鼠体重、采食量、饮水量、腹泻小鼠数、2 h内的稀便数。【结果】在1~5 d,与空白组相比,稀便率、腹泻率逐渐增加,3~5 d内模型组、高、中、低剂量组的体重、采食量、饮水量差异显著(P<0.05)。6~15 d,与模型组相比,稀便率、腹泻率逐渐减小,高、中、低剂量组在第7、11 d的体重、9 d的饮水量差异显著(P<0.05),13 d高剂量组的体重、饮水量、采食量差异显著(P<0.05),15 d高剂量组的体重、饮水量差异显著(P<0.05)。【结论】小鼠饲料添加剂美洲大蠊粉能显著的降低小鼠的腹泻率及稀便率,提高腹泻小鼠体重、采食量、饮水量,且高剂量组显著高于中、低剂量组。

F-RNA噬菌体YM1肠道宿主分析

【背景】F-RNA噬菌体近年来常被作为水环境中诺如病毒污染的指示物。本课题组前期以大肠杆菌ATCC700891T为宿主,从人便样中筛选出一株F-RNA噬菌体YM1,其与大肠杆菌噬菌体MS2亲缘关系最近,MS2宿主通常为含有性菌毛的雄性大肠杆菌。【目的】探索F-RNA噬菌体与其肠道宿主及诺如病毒之间的互作关系,筛选YM1的肠道宿主。【方法】采用选择性培养基筛选YM1阳性便样中的大肠杆菌并进行YM1侵染验证,结合16S rRNA基因扩增子测序分析YM1接种前后便样中的差异性菌群种类,对YM1阳性便样中潜在的YM1肠道宿主进行分析。【结果】筛选到351个大肠杆菌菌株,YM1侵染结果表明这些大肠杆菌均不是YM1的宿主;16S rRNA基因扩增子测序分析差异性菌种显示,Enterobacter sp.(OTU144)和Enterobacter sp.(OTU11)这2株肠杆菌属细菌的相对丰度在YM1感染后发生显著性的降低,表明该2种细菌可能为YM1的潜在肠道宿主。【结论】YM1具有严格的宿主特异性,便样中大肠杆菌并非YM1的肠道宿主,同时发现了2种YM1的潜在宿主,为进一步筛选分离YM1的肠道宿主提供了方向和依据。