Comparative Research on Serogroups Distribution and Antimicrobial Resistance of Escherichia coil Isolates from Poultry in Different Areas of China

A total of 241 Escherichia coli （E. coli） isolates from 349 avian samples （292 from cloacae, 29 from feed and water, 28 from dust and padding） were collected from Northeast, South, North, and Central China in recent years. The percentage of isolation was 69.1%. There are 67 serogroups each with 1-2 isolates distributed in different regions, and some of these regions had the preponderant serogroups. Antimicrobial-resistance （AR） of E. coli was so severe that the majority were multi-AR. Fifty percent strains were resistant to 10-19 antimicrobial drugs. Overall, the isolates represented resistance to nalidixic acid （88.1%）, tetracycline （85.7%）, sulfamethoxazole （81.0%）, trimethoprim-sulfamethpxazole （77.1%）, ampicillin （76.2%）, amoxilline （74.3%）, streplomycin （66.2%）, fluoroquinolones （57.1-66.7%）, chloramphenicol （52.9%）, gentamicin （39.0%）, and kanamycin （36.2%）. The isolates were sensitive to cefalexin, amoxilline-clavulanic acid, amikacin, and florfenicol with an AR rate of 0-19,5% only, The results showed that the AR was more severe in chicken farms in which the antibiotics were used broadly and repeatedly. This study indicated the AR characterization of E, coli in different areas of China. It will be a foundation for studying AR mechanism and regulating the usage of antimicrobial in the poultry industry.

和田地区鹅源致病性大肠杆菌的血清群、致病性与耐药性研究

为了查明新疆和田地区鹅场发生的以腹泻为主要症状,以肝周炎和心包炎为主要病理变化的疾病是否由大肠杆菌引发,本研究无菌采集23份病死鹅内脏样本,采用常规细菌分离鉴定、PCR方法进行大肠杆菌鉴定,对分离菌的O血清群、致病性及耐药情况进行分析。结果显示,共分离到23株大肠杆菌,血清群包括O18(21.74%)、O78(13.04%)、O2(8.70%)和O1(4.35%),12株(52.17%)血清群未明。主要携带的毒力基因包括irp2(95.65%)、iucD(73.91%)、fyuA(17.39%)和astA(8.70%),分离株对小鼠具有致病性。23株大肠杆菌对四环素的耐药率为100%,氯霉素、环丙沙星、氨苄西林、左氧氟沙星、哌拉西林、复方新诺明、链霉素和头孢噻肟的耐药率在60.87%~95.65%,对多黏菌素B均敏感。共检测出12种耐药基因,tetA、tetG、cml 1、bla_(TEM)、sul1、aac、bla_(CTX-M-1)的检出率在43.48%以上,bla SHV、bla_(CTX-M-9)、tetE、aadA1的检出率在4.35%~30.43%,未检到bla CTX-M-2。本研究确定和田地区鹅场腹泻、肝周炎和心包炎为大肠杆菌感染所致,血清型较为复杂,耐药性严重。

中国不同地区家禽大肠杆菌血清型分布和耐药性比较研究

近几年在中国东北、华南、华中和华北地区采样,得到鸡泄殖腔拭子292份、饲料和水29份、鸡舍尘土和垫料28份,共349份。用麦康凯培养基分离大肠杆菌,共分离到大肠杆菌241株(东北地区107株;华南地区107株;华中地区12株;华北地区15株),分离率为69.1%。共有血清型67种,每种血清型1～2株,个别血清型有10株左右。呈地区性和多样性分布,有些地区有优势型,有的地区优势型不明显。细菌耐药性非常严重,以多重耐药为主,耐10～19种药物的菌株占50%以上,有一定地区性。总体上耐药率最高的是萘啶酸(88.1%),其它依次为四环素85.7%、磺胺甲基异恶唑81.0%、复方新诺明77.1%、氨苄西林76.2%、阿莫西林74.3%、链霉素66.2%、氟喹诺酮类57.1%～66.7%、氯霉素52.9%、庆大霉素39.0%、卡那霉素36.2%。细菌对氟苯尼考、奥格门丁、头孢曲松、头孢噻吩、阿米卡星普遍敏感,耐药率仅为0～19.5%。使用抗菌药的鸡场,对相应药物耐药率较高。该项研究为进一步分析研究耐药机理和制订兽医临床抗菌药使用规范奠定了基础。

我国部分地区禽病原性大肠杆菌的分离与鉴定

从江苏、广东、河南、新疆、四川、北京、黑龙江等１８个省、市、自治区临诊上有典型大肠杆菌病病变的病禽１０５１羽采集病料，分离培养和鉴定出５９５株大肠杆菌。经Ｏ血清型测定，除１４４株未能定型、１１株自凝外，共鉴定出４４０个分离株的Ｏ血清型。这些分离株覆盖了６０个血清型，但以Ｏ１８、Ｏ７８、Ｏ２、Ｏ８８、Ｏ１１、Ｏ２６、Ｏ４、Ｏ１、Ｏ１２７和Ｏ１３１等１０个血清型为主，共２６４株，占定型菌株的６０％；前６种血清型在种类上只占定型菌株血清型总数的１０％，却拥有２０４个分离株，占定型菌株的４６３６％。因此，可以认定Ｏ１８、Ｏ７８、Ｏ２、Ｏ８８、Ｏ１１、Ｏ２６等６个血清型为优势血清型。不同地区优势血清型分离株６０个，以每分离株１０７菌落形成单位（ＣＦＵ）细菌气管内接种１日龄无特定病原体（ＳＰＦ）鸡６羽，根据接种后７天内发生死亡和病变鸡的比例，确定出高致病株、中度致病株和低致病株分别为８３３３％、１０％和６６７％；其它常见血清型Ｏ４、Ｏ１、Ｏ１２７和Ｏ１３１分离株３０个和１０个非常见血清型分离株，按同样方法接种１日龄易感鸡６羽，高致病株、中度致病株和低致病株分别为９０％、１０％和０％。结果表明：我们所收集的分离株均?

猪源致病性大肠杆菌的血清型、毒力基因及抗菌药耐药性的调查

【目的】探讨猪大肠杆菌病分离的E.coli的优势血清型与毒力基因和耐药性的相关性。【方法】采用玻片凝集法测定了猪大肠杆菌病有关的血清型分布,PCR方法调查7种毒力相关基因,用微量稀释法测定了所有菌株对18种抗菌药的敏感性。【结果】超过一半的菌株含有astA,Stx2e和eaeA基因,且毒力基因组合Stx2e+astA和Stx2e+eaeA较为流行。定型菌株53株,分别属于15个不同的血清型,其中O8和O64为主要流行的血清型。O8型菌株中,所有均携带astA基因,多数耐四环素、环丙沙星、恩诺沙星、氯霉素和磺胺甲噁唑,但对安普霉素,阿米卡星和多黏菌素E敏感;而O64型菌株中,多数携带astA和Stx2e基因,所有对环丙沙星、恩诺沙星、氯霉素和磺胺甲噁唑耐药,但对多黏菌素E和卡那霉素敏感。【结论】O8和O64为主要流行的血清型,两种血清型菌株拥有相似的毒力基因谱和耐药表型,但有不同的敏感表型。

华东地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌的O血清型和毒力因子

从江苏、江西、安徽等 7个省疑似黄、白痢直肠棉拭及病死猪的十二指肠和肠系膜淋巴结中分离鉴定出 339株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定 ,除 77株未能定型、4 1株自凝外 ,测定出 2 2 1个分离株的O血清型 ,这些分离株覆盖了 6 4个血清型 ,以O1 0 7、O1 0 1 、O2 0 、O93、O1 1 和O1 49为主 ,共 99株 ,占定型菌株的 4 4 80 %。这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异。运用黏附素单抗对以上菌株进行F4、F5、F6、F1 8、F4 1 5种黏附素检测 ,共 97个分离株表达黏附素 (2 8 6 1 % ) ,而表达两种和 3种黏附素的菌株分别有 2 2株和 8株 ,它们分别占表达黏附素菌株的2 2 6 8%和 8 2 5 % ,其中单独表达F4、F6、F5 +F4 1黏附素菌株分别有 1 8、30、1 5株 ,分别占表达黏附素菌株的1 8 5 6 %、30 93%和 1 5 4 6 % ;同时运用多重PCR对其中 1 4 5个分离株进行毒素基因 (STa、STb、LT、SLT 2e)的检测 ,拥有STa和STb毒素基因的菌株分别占检测菌株的 5 1 72 %和 37 2 4 %。F6、F4、F5 +F4 1和STa。

猪源大肠杆菌(ETEC、STEC、AEEC)毒力基因及其与O抗原型的关系

【目的】揭示从我国部分地区仔猪腹泻或水肿病病猪体内分离到的300个大肠杆菌分离株所属病原型(pathotype)、毒力基因及其与O血清型的关系。【方法】O血清型采用常规的凝集试验进行测定,毒力基因采用PCR方法检测。【结果】通过对这300个分离株的O血清型及其毒素、紧密素和黏附素基因进行鉴定,结果显示除50株未定型、17株自凝外,测定出233个分离株的血清型,这些分离株覆盖了45个血清型,其中以O149、O107、O139、O93和O91为主,共133株,占定型菌株的57.1%;拥有estⅠ、estⅡ、elt、stx2e和eaeA基因的菌株分别为102(34.0%)、190(63.3%)、81(27.0%)、57(19.0%)和54(18.0%)株;分离株中有51株K88基因阳性(其中菌毛表达率为100%),75株F18基因阳性(其中菌毛表达率为50.7%),在K88菌株中,O149血清型与estⅠ或estⅡ+elt密切相关,在F18菌株中,O107血清型与estⅠ或estⅡ、O139血清型与stx2e紧密相关。依其毒力特征可将这些分离株分为以下6种类型:ETEC、STEC、AEEC、ETEC/STEC、AEEC/ETEC和AEEC/ETEC/STEC,分别拥有190、24、36、32、17和1个菌株,占分离株的63.3%、8.0%、12.0%、10.7%、5.7%和0.3%。通过分析这些分离株的O血清型、毒素类型和黏附素型之间的相关性:猪源ETEC以O149、O107、O93和O98等血清型为主,O149:K88菌株主要与estⅡ或estⅡ+elt肠毒素相关,O107:F18菌株主要与estⅡ相关,O93和O98血清型菌株主要与estⅡ肠毒素相关;STEC菌株以O139:F18血清型为主,拥有stx2e;AEEC菌株拥有紧密素,无明显优势血清型;ETEC/STEC菌株以O107:F18和O116:F18血清型为主,主要与estⅠ+stx2e或estⅡ+stx2e密切相关,ETEC/AEEC菌株以O91和O107血清型为主,全部拥有肠毒素estⅠ和紧密素基因。【结论】我国至少存在6种病原型的猪肠道致病性大肠杆菌,其中ETEC为我国部分地区猪大肠杆菌病的主要病原,同时其病原型日益复杂。

猪源肠外致病性大肠杆菌的分离与鉴定

目的检测猪源肠外致病性大肠杆菌(ExPEC)的血清型与毒力基因。方法对2013-2014年间秦皇岛地区30份组织病料采用细菌形态观察、培养特性试验、生化试验鉴定出8株肠外致病性大肠杆菌。采用玻片凝集法测定这些大肠杆菌病的血清型,并用PCR扩增法检测9种毒力基因。结果定型菌株5株,分别属于O53、O93和O157 3个血清型,9种毒力基因PCR检测结果表明ler、iutA、irp2、fyuA、astA 5种基因检出率分别为100%、75.0%、50.0%、50.0%、25.0%。结论所检测的猪源肠外致病性大肠杆菌以O53、O93和O157为主要流行血清型,同时携带fyuA、ler和iutA基因的菌株致病性较强。

宠物源大肠杆菌的血清型和毒力基因及耐药性调查

为研究宠物源致病性大肠杆菌(Escherichia coli)的血清型、毒力基因和耐药性之间的相关性,本研究由健康和患病犬、猫直肠拭子样品中分离177株E.coli,并采用玻片凝集法鉴定其血清型,结果显示分离株中定型菌株135株,分别属于20个不同的血清型,其中O1、O2和O8为主要的流行血清型。PCR方法检测11种毒力相关基因,并采用琼脂稀释法测定分离菌株对14种抗菌药的敏感性,结果表明3个血清型的菌株拥有相似的耐药表型,但毒力基因谱不同。62%的分离菌株携带fimH基因,并且毒力基因组合iroN+hlyF、iroN+fimH和traT+sitA比较流行。55%的O1血清型携带fimH基因,并且多数耐受四环素、多西环素、头孢噻吩和庆大霉素;20.8%的O2血清型菌株携带traT和sitA基因;50%的O8血清型携带traT和fimH基因。3个血清型分离菌株多数对安普霉素和阿米卡星敏感。

奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析

【目的】研究奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌HPI携带情况及其与O血清型的关系,并对部分菌株的相关基因序列进行分析。【方法】从中国北京、内蒙古、甘肃、四川、重庆、云南、贵州等7个省市部分地区1 260份临床型和隐性奶牛乳腺炎奶样中分离得到190株大肠杆菌,对分离菌株进行耶尔森菌强毒力岛核心区irp2基因、fyuA基因及HPI毒力岛在大肠杆菌染色体中插入位置的鉴定,分析HPI毒力岛的携带情况及其与分离菌株O血清型之间的关系。【结果】190株大肠杆菌分离株中,irp2基因阳性率为26.31%(50/190),fyuA基因阳性率为18.94%(36/190)。50株HPI+分离株中检出asn_tRNA_intB基因32株,阳性率为64%(32/50)。本试验克隆的irp2基因(273 bp)、fyuA基因(1 071 bp)、asn_tRNA_intB基因(1 512 bp)均与已发表序列高度同源,同源性分别在97.1%、98.2%、97.2%以上,且其HPI毒力岛大多位于大肠杆菌染色体的asn_tRNA位点上。【结论】耶尔森菌HPI在奶牛乳腺炎源大肠杆菌中广泛流行分布,但也存在差异,而不同血清型菌株携带HPI的倾向性可能只与特定的血清型有一定的关系。

一规模化猪场断奶仔猪腹泻大肠杆菌毒力因子的检测

从疑似断奶仔猪腹泻的仔猪中分离、鉴定出15株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,11株为0131、4株未定型,所有O131血清型菌株呈β溶血。多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测菌毛,O131菌株的毒素为STa、STb、SLT-2e,表达F18粘附素,未定型菌株的毒素为STa,共表达F6和F18粘附素。对15株大肠杆菌用16种抗生素进行药敏试验,结果表明:分离株对阿米卡星、痢特灵、新霉素敏感,而对多种抗生素产生了不同程度的耐药性。运用本场大肠杆菌分离株灭活苗免疫猪群,取得良好效果。

不同来源鸡大肠杆菌致病性比较研究

分别从鸡场环境、正常鸡体和病死鸡中分离大肠杆菌 ,进行致病性试验 ,并鉴定致病性较强的菌株的血清型。结果表明 ,来源于死鸡、死胚中的大肠杆菌致病性最强 ,其次是来源于鸡体喉部和空气中的大肠杆菌 ,而来源于泄殖腔、精液及种蛋表面的大肠杆菌致病性最弱。分离的致病性大肠杆菌共有 1

健康鸡与病鸡大肠杆菌某些生物特性的分析

从健康肉鸡和蛋鸡分离到大肠杆菌 180株 ,已鉴定的血清型为O1 、O2 、O7、O8、O36 、O78、O1 1 1 ,其中O2 、O78为致病性大肠杆菌所常见的血清型 ;从大肠杆菌病病鸡分离到 70株 ,已鉴定的血清型有O2 、O78、O36 。用 9种抗生素进行了药敏试验。结果表明 :绝大多数菌株对庆大霉素、痢特灵和卡那霉素有较高敏感性 ;一些菌株对氯霉素、链霉素和环丙沙星也有较高的敏感性 ;

江苏境内鸡源大肠埃希氏菌的某些生物学特性

从江苏九个蛋鸡场47羽疑似大肠杆菌病的病、死鸡的肝、脾、心包液、腹水、输卵管、脑实质、眼球液中分离鉴定出23株大肠埃希氏菌，分离率为48．94％。对其中17株进行血清型鉴定，共有11种血清型，其中O20、O78、及O89较为多见，分别占待检菌株的11．77％、1765％和11．77％，其余为O9、O18、O26、O3O、O36、O88、O131及O149，其中Og、O18、O30、O36、O131及O149为国内外首次发现，未定型菌2株。文中还对分离菌的致病性及抗生素敏感性进行了研究。

淮安地区禽大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

从淮安市及8个区县畜牧兽医站动物门诊部临诊的具有典型大肠杆菌病变的150羽病死禽中,分离鉴定出大肠杆菌112株,定型92株,共测出24个血清型,其中O18(20株)、O78(14株)、O1(11株)、O5(10株)4种血清型占定型菌株的59.78%,为淮安地区优势血清型。这一结果为制备菌苗预防大肠杆菌病奠定了基础。药敏试验结果表明,所分离的大肠杆菌对氟喹诺酮类、磺胺类、四环素及青霉素类耐药率较高,对庆大霉素、卡那霉素、头孢噻吩有一定的耐药性,而对头孢噻呋、阿米卡星、奥格门丁、氟苯尼考、磷霉素敏感,其耐药率低于16.3%。

一株分离自肉雏鸡脑部大肠埃希氏菌的某些生物学特性

对一株分离自以神经紊乱为主要症状肉雏鸡脑实质的Ｅ．ｃｏｌｉ（ＬＣＢ）的某些生物学特性进行了研究。包括对ＫＭ小鼠及１ｄ鸡的致病性、血清学特性、抗生素敏感性、菌毛的表达及电镜观察、血凝性、溶血性。结果表明，该菌株血清型属０１３１，为国内外首次发现，腹腔接种对ＫＭ小鼠具有高致病性，脑内接种对１ｄ鸡也具高致病性，但腹腔及气管接种对１ｄ鸡无致病性，不产生溶血素，在ＮＢ中经３７℃７２ｈ培养不表达菌毛；对鸭、犬的ＲＢＣ表现强凝集，对鸡、豚鼠、马的ＲＢＣ表现弱凝集，血凝能被Ｄ－甘露糖抑制，表现为ＭＳＨＡ；菌株对ＰＩＰ、ＣＦＺ高敏，对ＧＥＮ、ＮＥＯ、ＣＴＮ中度敏感，对其它抗生素则低敏或耐药。

1株鸡源神经型大肠埃希氏菌的分离及特性分析

从某鸡声以瘫痪、歪颈、昏睡为主要症状的肉雏鸡脑实质中，分离到１株革兰氏阴性、有动力的短杆菌，定名为ＬＣＢ。其主要生化特性为氧化酶阴性、接触酶阳性，发酵葡萄糖、甘露醇，产酸产气，了酵乳糖、山梨醇，不发酵蔗糖、卫茅醇、肌醇，不产生硫化氯，不液化明胶，不分解尿素，Ｍ－Ｒ阳性，Ｖ－Ｐ阴性。经鉴定为大肠埃希氏菌，血清型属Ｏ１３１，为国内外新发现的鸡大肠埃希氏菌的血清型。该菌株腹腔接种对ＫＭ小鼠具有高致病性，

致肉雏鸡脑病的大肠埃希氏菌的分离鉴定

通过采集以神经紊乱为主要症状的病、死肉雏鸡的脑实质作病原菌的分离培养、形态学观察、生化特性试验，共分离鉴定出２株大肠埃希氏菌，血清型鉴定表明，这２株分离菌均属Ｏ１３１，为国内外首次发现；动物接种试验结果为，腹腔接种对ＫＭ小鼠均具有强毒力，脑内接种对１日龄鸡均具高致病性，但腹腔接种对１日龄鸡致病性有差异，其中一株为高致病性，另一株无致病性，抗生素敏感性试验表明，二株分离菌耐药谱相似，对氧哌嗪青霉素、头孢唑啉高度敏感，对庆大霉素、新霉素、先锋霉素、丁氨卡那中度敏感，对其它药物则低敏感或耐药。

某大型鸡场鸡大肠杆菌病流行病学调查

某大型鸡场的28个分场分离到的菌株,经生化检验为大肠杆菌的有87株,经O血清测定定型65株,4株自凝,18株未能定型,其中O78占20株,O1占14株,O2占5株,这些分离株中O78、O1、O2有39株占定型菌株的60.0%,因此可以认定O78、O1和O2为该大型鸡场的优势血清型,以不同场分离的菌株,以每分离株107菌落形成单位(CFU)细菌气管接种1日龄易感鸡,根据接种后7天内发生死亡和病变鸡的比例,确定出高致病株、中等致病株和低致病株分别为87.36%、8.05%和4.59%。

重庆市部分地区鸭源大肠杆菌的O抗原血清型及耐药性

从重庆市5个区、县的部分规模化鸭场收集以心包炎、肝周炎及腹膜炎为主要病理变化的病死鸭,无菌采取其心血和肝脏后接种,分离出30株细菌,经细菌的形态特性和生化特性分析,鉴定为大肠杆菌.该试验对分离的大肠杆菌进行了O抗原单价血清型鉴定试验及药敏试验.结果表明:30株分离菌中有23株定型分属于11种血清型,其中以O78,O93,O92和O21为优势血清型(共占46.67%).30株分离菌对21种抗生素的耐药率高于50%,其中耐受7种药物以上的有28株,占93.3%,耐受10种药物以上的有23株,占76.6%,表明重庆地区部分养鸭场鸭源大肠杆菌的耐药性严重.