中国南方食管鳞癌APC基因连锁位点D5S346和D5S82杂合性丢失的研究

目的:分析中国南方食管癌高发地区(潮汕地区)食管鳞状细胞癌APC基因连锁位点D5S346和D5S82的杂合性丢失情况。方法:采用PCR银染技术,检测42例配对食管鳞癌标本D5S346和D5S82的杂合性丢失情况。结果:D5S346和D5S82在该食管癌人群中杂合性丢失率高达35%和39%。结论:APC基因附近微卫星标记D5S346和D5S82在中国南方食管鳞癌中的杂合性丢失频率较高,提示APC基因在食管癌中可能同样存在缺失改变。

食管鳞癌FRA189A处微卫星DNA杂合性丢失

[目的]检测食管癌组织FRA189A处微卫星DNA标记杂合性丢失情况 ,为新的抑癌基因定位提供依据。[方法]应用聚合酶链式反应(PCR) ,结合SSLP -硝酸银染色技术以D18S978位点为遗传标记 ,检测和分析食管癌及癌旁组织中杂合性丢失情况。[结果]26例食管癌中23例为信息个体 ,杂合性丢失频率为60.8%(14/23信息个体) ,染色体定位于18q12.2。[结论]FRA189A处D18S978位点杂合性丢失可能与食管癌的发生有关 ,提示此处可能存在新的抑癌基因。

抑癌基因RASSF1A微卫星变异与宫颈癌发生发展的关系

目的探讨抑癌基因RASSF1A微卫星变异在宫颈癌发生发展中的作用及其与HPV感染的关系。方法选择RASSF1A基因的两个微卫星多态标记位点，采用PCR技术对宫颈组织进行杂合性丢失与微卫星不稳定性的检测，同时检测宫颈组织中HPV16的感染状况。结果两位点的LOH发生率在宫颈癌组织临床分期及病理分级之间差异有统计学意义（P〈0．05）。双位点的LOH及MSI在宫颈癌有无淋巴结转移间差异有统计学意义（P〈0．05）。RASSF1A基因的LOH发生率在HPV16感染阳性组中明显高于阴性组（P〈0．05）。结论RASSF1A基因的改变是宫颈癌发生过程中的较晚期事件，RASSF1A基因的LOH与MSI对于宫颈癌的筛查、早期诊断及判断预后可能具有临床实用价值。RASSF1A基因的LOH与HPV16感染二者共同作用在宫颈癌的发生发展过程中更有意义。

华南地区鼻咽癌13号和14号染色体长臂发生高频率等位基因杂合性缺失

目的分析鼻咽癌(NPC)13号染色体长臂(13q)和14号染色体长臂(14q)上21个位点的等位基因杂合子丢失(LOH),并分析这些位点的LOH与NPC临床病理及EBV感染的关系.方法用聚合酶链反应(PCR)为基础的微卫星多态性分析技术结合基因扫描和基因绘图技术对60例NPC进行LOH分析.结果 13q染色体发生一个或多个位点LOH频率为78%,高频率LOH(大于30%)位点集中于13q12.3-q14.3和13q32附近.14q染色体发生至少一个位点LOH的频率为80%,高频率丢失位点集中于14q11-q13、14q21-q24和14q32附近.13q31-q32位点的LOH与低滴度血清EBV EA/IgA有关;14q染色体的LOH与NPC细胞的分化差有关.结论华南地区鼻咽癌在13q和14q染色体发生高频率的LOH,这些缺失区可能存在多个在NPC发生发展过程中起重要作用的肿瘤抑制基因.

食管癌患者多个染色体区域的杂合性缺失及其临床意义

目的选择食管癌中遍布10个染色体区域的17个微卫星位标，进行食管癌手术切除标本的微卫星杂合缺失（LOH）分析，并探讨这些位点的LOH与患者临床病理参数之间的关系。方法68份食管癌患者手术切除的鳞癌组织标本中，高分化鳞癌20份，中分化鳞癌30份，低分化鳞癌18份。采用PCR荧光测序法和凝胶电泳分别检测68例患者的鳞癌组织及匹配的外周血样本中17个微卫星位点的杂合性缺失状况；并比较分析LOH与肿瘤临床病理参数之间的关系。结果68份标本中检出位点D8S261 LOH频率最低（33．3％），检出位点D9S125 LOH频率最高（85．2％），其中，12个位标LOH频率高于50．0％，3个（D3S1597、D3S1285、D9S125）高于75．0％；分化程度不一的肿瘤标本在位点D9S111与D13S153处的LOH频率差异有统计学意义（Х^2=15．5、10．8，P均〈0．05），位点D9S111处高分化的12份标本中发生缺失2份，中分化20份标本中发生缺失14份，低分化16份标本中发生缺失14份，位点D13S153处8份高分化标本中2份发生缺失，中分化的28份标本中12份发生缺失，低分化的12份标本中11份发生缺失；发生淋巴结转移的肿瘤标本与未转移标本在位点D8S261处的LOH频率差异有统计学意义（Х^2=6．4，P〈0．05），位点D8S261处发生转移的14份标本中1份出现缺失，未转移的22份标本中12份出现缺失。结论食管鳞癌中存在广泛、高频的LOH，位于高频缺失位点附近的基因可能参与了食管癌的发生发展；位点D9S111和D13S153处的缺失与食管癌的病理分级有显著的相关性，分化越差的标本在2位点处缺失频率倾向越高；位点D8S261处的缺失与食管癌淋巴结转移呈反向相关，在该处发生缺失的标本淋巴结转移的可能性往往较低。