CyclinD1、p15在食管鳞状细胞癌中的表达及生物学意义

目的:探讨细胞周期素D1(CyclinD1)、p15在食管鳞癌中的表达与食管鳞癌发生的关系。方法:采用链霉卵白素-过氧化物酶(SP)免疫组织化学(IHC)染色法和原位杂交(ISH)技术检测48例食管鳞状细胞癌组织,18例癌旁不典型增生组织和10例切缘正常组织中CyclinD1蛋白、p15蛋白及p15mRNA的表达。结果:食管癌组织(58.3%)及不典型增生组织(66.7%)中CyclinD1的阳性表达率均明显高于正常组织(0),差别有统计学意义(P<0.05);食管癌组织中p15mRNA及p15蛋白的阳性表达率分别为56.3%和47.9%,二者表达明显相关(P<0.05),均低于在正常组织和不典型增生组织中的表达(P<0.05);食管癌组织中Cy-clinD1的表达与p15蛋白的表达呈负相关(P<0.05)。结论:CyclinD1的高表达、p15的低表达可能与食管鳞癌的发生有关,且CyclinD1的高表达可能是癌变早期的分子事件;食管癌发展中,CyclinD1、p15可能互为拮抗,分别发挥正负调节的作用。

EBV相关胃癌组织中bcl-2和Ki-67蛋白表达的检测

①目的 探讨Epstein BarrVirus(EBV)相关胃癌 (EBVaGC)组织中bcl 2和Ki 6 7蛋白表达与EBV感染的关系。②方法 应用PCR Southern技术 ,检测 1 85例胃癌及相应癌旁组织中EBVDNA ,原位杂交技术检测PCR阳性标本EBV小RNA1 (EBER1 )的表达 ,确证EBVaGC。并选择EBV阴性胃癌 (EBVnGC)标本 ,应用免疫组化技术检测其bcl 2和Ki 6 7蛋白的表达。③结果 1 85例胃癌组织中检测到EBVaGC 1 3例 ,阳性率为 7.0 3% ,1 85例癌旁组织均为阴性 ,胃癌组织和相应癌旁组织EBV阳性率比较差异有显著性 (χ2 =1 1 .0 77,P <0 .0 0 1 )。E BVaGC和EBVnGC组织中bcl 2表达率分别为 5 3.85 %和 4 8.89% ,二者比较差异无显著性 (χ2 =0 .0 99,P >0 .0 5 )。EBVaGC和EBVnGC组织中Ki 6 7指数 (KI)平均值分别为 2 8.2 5 4± 6 .2 84和 37.86 4± 1 4 .5 2 3,二者比较差异有极显著意义 (t′=2 .5 5 3,P <0 .0 1 )。④结论 EBV感染与部分胃癌的发生有一定相关性 ,EBVaGC的发生与bcl 2蛋白表达无明显相关性 ,与Ki 6 7蛋白表达有一定相关性。

食管鳞状细胞癌中HER-2基因扩增和蛋白表达

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中HER-2基因扩增和蛋白表达状况以及与临床病理指标的关系。方法收集96例ESCC组织,采用免疫组化法检测HER-2蛋白表达,采用FISH法检测HER-2基因扩增,并对患者进行随访。结果免疫组化结果显示3例HER-2呈3+,15例2+,11例1+,67例-,3+的病例中2例HER-2基因扩增,15例2+的病例中1例拷贝数>6.0。HER-2蛋白过表达与基因扩增存在显著相关性(P<0.000 1)。HER-2基因扩增/蛋白过表达与肿瘤组织无坏死(P=0.012)、低临床分期(P=0.040)存在一定相关性。HER-2基因扩增/蛋白过表达患者呈预后好的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HER-2在ESCC中有一定的基因扩增率和蛋白过表达率,两者具有相关性,且HER-2基因/蛋白过表达是潜在预后好的指标。

p15在食管癌中的表达及生物学意义

目的探讨p15 mRNA及其蛋白在食管癌中的表达与食管癌发生的关系。方法采用原位杂交(insuit hybridyzation)技术和链霉卵白素-过氧化物酶(streptavidin-horseradish peroxidase,SP)免疫组织化学染色法检测48例食管鳞状细胞癌组织,18例癌旁不典型增生组织和10例切缘正常组织中p15 mRNA及其蛋白的表达水平。结果p15 mRNA及其蛋白在食管癌组织中的阳性表达率分别为56.3%和47.9%,二者表达呈明显正相关(χ2=22,P<0.05),均明显低于在正常组织和不典型增生组织中的表达(P<0.05);且p15 mRNA及其蛋白的表达与肿瘤的分化程度相关(P<0.05)。结论p15低表达可能与食管癌的发生有关,p15表达对食管癌恶性程度的评估有一定的参考价值。

STAT3在食管上皮内瘤变及食管癌组织中的表达及其意义

目的探讨STAT3mRNA及STAT3蛋白在食管上皮内瘤变演变过程中的作用。方法选取食管癌高发区的食管上皮内瘤变病例150例(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级各50例)及食管癌100例进行研究,将其中60例接受食管癌切除术患者的食管上、下残端的正常黏膜组织作为对照。采用原位杂交技术和免疫组织化学法检测正常食管黏膜、食管上皮内瘤变及食管癌组织中STAT3在mRNA及蛋白水平的表达情况。结果 STAT3mRNA在正常食管黏膜、食管上皮内瘤变及食管癌组织中的阳性表达率分别为3.33%、53.33%及89.00%;STAT3蛋白在上述组织中的阳性表达率分别为6.67%、60.67%及94.00%。不同程度的食管上皮内瘤变病例中,病变组织中STAT3mRNA及STAT3蛋白的表达随食管上皮内瘤变病变程度的加重而增加。STAT3在mRNA和蛋白水平的表达存在一致性(r=0.768,P<0.05)。结论 STAT3在食管上皮内瘤变及食管癌组织中高表达,它可能在食管上皮内瘤变的演变过程中发挥重要作用。

食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1表达的意义

目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1(Cyclin B1,Cyclin D1)mRNA和蛋白的表达及其与食管鳞癌床生物学指标的关系.方法:应用原位杂交法、免疫组化SP法对62例食管鳞癌组织(组织学Ⅰ级15例,Ⅱ级25例,Ⅲ级22例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移42例;肿瘤浸润深度:浸润至黏膜层、黏膜下层或浅肌层7例,深肌层14例,纤维膜41例)、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织进行Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系.结果:Cyclin B1,D1的mRNA和蛋白在正常食管黏膜组织中不表达或低表达,在癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中高表达,三者阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌患者癌组织中Cyclin B1,D1的mRNA和蛋白的表达与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05).Cyclin B1,D1 mRNA与蛋白正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的表达有高度的一致性.结论:CyclinB1,D1 mRNA和蛋白的高表达可促进食管鳞癌的发生与发展,在癌前病变期的鳞状上皮不典型增生组织中即出现高表达,是食管鳞癌发生过程中的早期事件.

EBV与癌基因P53、P21、P16在食道癌中表达与意义

目的 探讨EBV感染与癌基因P5 3、P2 1、P16在食道癌中的表达与意义。方法 对 6 0例食道癌病例 ,用原位杂交法检测EBV的表达 ,用免疫组化法检测P5 3、P2 1、P16的表达。结果 EBV阳性表达率为 72 % ,P5 3阳性表达率为 83% ,P2 1阳性表达率为 6 5 % ,P16阳性表达率为 30 %。在EBV阳性病例中P5 3、P2 1、P16的阳性病例分别为 2 7、2 8、5例。结论 EBV感染对食道癌的发生有一定的作用 ;P2 1、P16的表达与EBV感染有关 ;P5 3、P2 1。

S100A2基因及其蛋白在食管癌中的表达及其临床意义

目的：观察S100A2 mRNA及其蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其与食管癌临床病理特征之间的关系，并探讨其在食管癌发生、发展中的作用及临床应用价值． 方法：收集40例手术切除的食管鳞状细胞癌标本，同时取40例手术切缘食管正常黏膜组织．应用免疫组织化学S-P法检测其中S100A2蛋白的表达，原位分子杂交技术检测S100A2 mRNA的表达． 结果：S100A2 mRNA及S100A2蛋白在食管鳞状细胞癌组织中阳性表达率均明显低于正常食管黏膜（77．5％vs100％，72．5％vs100％，均P〈0．01）；其中高、中、低分化三组间差异均有显著性（均P〈0．05），并且高、中分化组S100A2 mRNA的阳性表达率均明显高于低分化组（分别为933％vs85．7％，86．7％vs85．7％，均P〈0．05）;无淋巴结转移组S100A2 mRNA阳性表达率均明显高于有淋巴结转移组（分别为92％vs53．3％，92％vs40％，均P〈0．01）．食管鳞状细胞癌组织中S100A2 mRNA和S100A2蛋白的表达呈明显正相关（r=0．607，P〈0．001）. 结论：S100A2在食管癌的发生发展中具有重要作用，并可能作为判断食管癌生物学行为的重要参考指标．

食管癌与单纯性疱疹病毒的关系

目的：观察单纯性疱疹病毒（ＨＳＶ）在食管癌组织中的分布并探讨其与食管癌的关系。方法：对５２ 例食管癌石蜡包埋组织用免疫组化和原位杂交技术进行定位观察。结果：癌组织ＨＳＶ 免疫组化阳性率ＨＳＶ１ 为５３－８ ％ ，ＨＳＶ２ 为５７－７％ ；癌旁食管粘膜ＨＳＶ 为６５－５ ％ ，其中ＨＳＶ１（１２／２９）４１％ ，ＨＳＶ２（１６／２９）５５－２％ 。原位杂交癌阳性率为５３－８ ％ ，癌旁粘膜为５８－６％ 。ＨＳＶ 阳性率与癌组织的分化程度和淋巴结转移相关（ Ｐ＜ ０－０５） ，但与癌组织间质淋巴细胞浸润的强度无关（ Ｐ＞０－０５）。结论：ＨＳＶ感染可能影响食管癌的分化和癌细胞的生物学特性。

食管鳞状细胞癌中人乳头状瘤病毒感染的意义

目的：探讨人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染在食管鳞状细胞癌（ＥＳＣＣ）发生发展中的意义。方法：采用原位杂交和免疫组化ＬＳＡＢ法检测３３例ＥＳＣＣ中的ＨＰＶＤＮＡ、ＨＰＶ属特异性结构抗原（ＨＰＶＧＳＡｓ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。结果：３３例ＥＳ－ＣＣ中的８例可见ＨＰＶＤＮＡ阳性细胞，阳性率达２４．２％；这些ＨＰＶＤＮＡ阳性细胞的ＰＣＮＡ均阴性，３３例ＥＳＣＣ，包括８例有ＨＰＶＤＮＡ阳性细胞者，ＨＰＶＧＳＡｓ均为阴性。在癌旁增生、异型增生和原位癌灶中未见ＨＰＶＤＮＡ或ＨＰＶＧＳＡｓ阳性细胞。

食管鳞癌组织Survivin mRNA和蛋白表达的临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中Survivin mRNA与蛋白表达的相互关系,探讨两者在食管鳞癌发生和发展中的作用。方法:采用原位杂交技术检测30例食管鳞癌及相应的癌旁组织中Survivin mRNA的表达,同时采用免疫组织化学SP法检测相应标本中Sur-vivin蛋白的表达。结果:在食管鳞癌和相应的癌旁组织中Survivin mRNA表达的阳性率分别为66.7%和10.0%,Survivin蛋白表达的阳性率分别为76.7%和16.0%。食管鳞癌组远高于癌旁组,差异有统计学意义,P<0.01。Survivin mRNA与蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达具有一致性(P>0.05),其阳性率高低与性别、年龄、肿瘤大小无关,而与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期有关。结论:Sur-vivin基因的异常表达可能对食管鳞癌的发生和发展起重要作用。

Barrett食管的形态学、免疫组织化学及hTERC基因表达

目的探讨Barrett食管（BE）活检标本的临床病理学特点及与近端胃肠化黏膜的鉴别诊断。方法按WHO标准选取BE标本38例，观察病理组织学特征，对38例BE、44例近端胃肠化黏膜进行免疫组织化学CK7、CK20、CK4、CK8、SLOOP、MUC6、COX2、bc1-2观察，并用荧光原位杂交（FISH）方法检测hTERC基因情况。结果BE和近端胃肠化黏膜中CK7、CK20、MUC6、COX2、bc1-2表达差异无统计学意义（P〉0．05）。SLOOP阳性表达在BE与近端胃肠化黏膜间差异有统计学意义（P〈0．05）；BE中CK7与CK4、CK7与CK8表达结果呈正相关（P〈0．05）。近端胃肠化黏膜中CK7与CK4、CK7与CK8表达结果均无相关性（P〉0．05）；使用FISH方法检测两组标本hTERC基因的表达情况，BE组阳性率为57．9％（22／38），而近端胃肠化黏膜阳性率为13．6％（6／44），两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在鉴别BE和近端胃肠化黏膜中CK7与CK20表达的意义尚不能肯定；而CK7／CK4／CK8同时阳性可能支持BE的诊断，对鉴别两者有一定作用。SLOOP有可能作为鉴别BE和近端胃肠化黏膜两者的免疫标志物；hTERC基因扩增检测可能有助于BE诊断，并提示BE向食管腺癌发展的过程中该基因可能起重要作用。

AIB1基因在食管鳞状细胞癌发病过程中的作用及临床病理意义

目的探讨AIB1基因扩增及蛋白表达在食管鳞状细胞癌（ESCC）发病过程中的作用。方法运用组织芯片技术，通过荧光原位杂交（FISH）与免疫组织化学SABC法对203例ESCC组织中AIB1基因扩增及其编码的AIB1蛋白表达水平进行检测；结合临床病理资料，分析它们之间的相关性。结果115例ESCC能成功进行FISH检测，其中5例（4．4％）呈现AIB1基因高水平扩增；10例（8．7％）AIB1基因低水平扩增。免疫组织化学检测发现94例（46．3％）ESCC的肿瘤组织出现AIB1蛋白的过度表达；而且AIB1蛋白表达与肿瘤分期有明显相关性，53．7％的T3-4期ESCC（66／123）呈现AIB1蛋白过度表达，远较T1-2期（35．0％，25／80，P=0．008）高。进一步对AIB1基因扩增与蛋白表达进行相关性分析，发现AIB1基因高水平扩增的ESCC全部出现AIB1蛋白过度表达；10例AIB1基因低水平扩增的ESCC中8例出现AIB1蛋白过度表达；剩余100例AIB1基因无扩增的ESCC中，仍有41例呈现AIB1蛋白过度表达。结论AIB1基因通过基因扩增及其他分子机制导致了其编码蛋白的过度表达，促进了部分亚群ESCC的发生和进展过程。

SEL1L基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨SEL1L(human Sel-1-like)mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测90例手术切除的食管鳞状细胞癌、35例距癌灶边缘5 cm以上切缘的正常黏膜、60例癌旁黏膜及20例内窥镜活检的食管鳞状上皮不典型增生组织中SEL1L蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测上述癌组织、正常黏膜、癌旁黏膜中SEL1LmRNA的表达。结果(1)SEL1L mRNA在食管鳞状细胞癌的表达率为80.0%(72/90),较正常黏膜的14.3% (5/35)和癌旁黏膜的16.7%(10/60)高(P<0.01);SEL1LmRNA在有淋巴结转移组的表达阳性率为92.7%(38/41)比无淋巴结转移组69.4%(34/49)高(P<0.01)。(2)SEL1L蛋白在鳞状细胞癌的表达阳性率为87.8%(79/90),在鳞状上皮不典型增生中的表达阳性率为90.0%(18/20),分别较正常黏膜的14.3%(5/35)和癌旁黏膜的13.3%(8/60)高(P<0.01)。SEL1L蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均无明显相关性(P>0.05)。(3)食管鳞状细胞癌组织中SEL1LmRNA和SEL1L蛋白的表达呈明显正相关(P=0.492,P<0.01)。结论(1)SEL1L蛋白表达的调控主要在转录水平,SEL1L蛋白表达水平的升高主要是相应转录水平上调的结果。(2)SEL1L蛋白过表达可能是食管鳞状细胞癌发生的早期表现,SEL1L蛋白的检测可作为识别食管癌高风险患者的生物标记物。