雌性激素对妊娠豚鼠胆囊运动功能影响的实验研究

目的:探讨妊娠情况下雌性激素对豚鼠胆囊运动功能的影响及对胆囊结石形成的作用。方法:60只雌性豚鼠随机分为实验组(40只)和对照组(20只),实验组建立妊娠豚鼠动物模型,分为妊娠30d组和妊娠60d组,采用化学发光法和酶联亲和抗体组织化学法分别进行血清雌二醇(E2)、孕酮(Pg)浓度检测及胆囊组织雌激素受体(E R)、孕激素受体(PR)的检测,同时测量各组豚鼠胆囊空腹体积(FV),胆囊空腹胆汁量(FB)的变化,并观察胆囊结石形成情况。结果:妊娠60d组豚鼠有3只形成胆囊结石,妊娠豚鼠血清E2、Pg含量,胆囊组织E R、PR阳性表达率均明显高于非孕豚鼠(P<0.001),且随妊娠期进展而呈逐渐升高趋势。妊娠60d组豚鼠FV及FB明显大于妊娠30d组和对照组(P<0.001)。结论:妊娠期血清E2和Pg含量显著升高,诱发胆囊运动功能下降,胆囊胆汁淤积,是妊娠期胆囊结石形成的重要原因。

升清胶囊下调胆囊结石豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受体

目的:研究雌激素受体和孕激素受体在胆固醇结石形成中的作用及升清胶囊对其表达的影响。方法:将80只雌性豚鼠随机分为正常对照组、模型组、熊去氧胆酸组和升清胶囊组,每组20只。除正常对照组外,采用高脂致石饮食法建立胆囊胆固醇结石模型。升清胶囊组和熊去氧胆酸组豚鼠分别灌胃相应药物。造模7周后观察各组豚鼠胆囊成石情况,并采用免疫组织化学法检测豚鼠胆囊上皮组织雌、孕激素受体的表达。结果:升清胶囊可降低造模豚鼠的成石率,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。按正常对照组、升清胶囊组、熊去氧胆酸组和模型组的顺序,各组豚鼠胆囊组织雌、孕激素受体阳性表达半定量分级逐级升高,升清胶囊组与模型组、熊去氧胆酸组比较差异有统计学意义(P<0.05)。各组间雌、孕激素受体阳性表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:疏肝利胆方药升清胶囊可下调雌、孕激素受体的表达,降低胆固醇结石形成。

H_1型调宁蛋白mRNA在胆道中的表达与妊娠豚鼠胆囊结石形成关系的实验研究

目的探讨妊娠胆囊结石形成过程中h1型调宁蛋白mRNA表达变化对胆道动力学改变的影响,从分子水平上阐明妊娠胆结石形成的机制。方法将30只成年雌性豚鼠随机等分为未孕组、孕30d组和孕60d组3组,每组各10只。实验组豚鼠按雌雄4∶1比例搭配同笼喂养交配,建立豚鼠妊娠胆结石模型。动物剖腹后穿刺胆囊收集胆汁;采集门静脉血,分离血清;取除胆囊及Oddi括约肌。分别测定胆汁中总胆固醇(TC)、总胆红素(TBiL)、总胆汁酸(TBA)浓度,血清雌二醇(E2)及孕酮(Pg)含量,应用半定量RT-PCR法测定胆囊平滑肌和Oddi括约肌中h1型调宁蛋白(h1-Calponin)mRNA的表达量变化。结果妊娠豚鼠胆汁呈成石性胆汁生化改变。孕60d组胆汁TC、TbiL较非孕组明显增高(P<0.05),TBA浓度显著降低(P<0.01);血清E2、Pg含量较非孕组明显升高(P<0.001);孕60d组豚鼠胆囊平滑肌中h1-calponinmRNA表达量明显高于非孕组(P<0.001),而Oddi括约肌中h1-calponinmRNA表达量较非孕组明显降低(P<0.01)。结论妊娠豚鼠h1-calponinmRNA表达在胆囊平滑肌中增高,在Oddi括约肌中下降,导致胆道运动功能紊乱和胆汁淤滞,可能是妊娠胆囊结石形成的关键因素。

高胆固醇饮食对妊娠豚鼠胆囊AQPsmRNA及雌性激素受体的影响

目的研究高胆固醇饮食对妊娠豚鼠胆囊运动及胆囊黏膜上皮水通道蛋白-1（AQP-1）和水通道蛋白-8（AQP-8）的影响。方法60只妊娠豚鼠，随机分为实验组A组、B组和对照组，实验组给予致结石饮食（胆固醇含量分别为1％和0．5％）喂养8周。采用RT-PCR对其胆囊AQP-1与AQP-8进行检测，应用化学发光法和酶联亲和抗体组织化学法分别检测血清雌二醇（E2）、孕酮（Pg）浓度及胆囊组织雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的检测，同时测量各组豚鼠胆囊空腹体积（FV），胆囊空腹胆汁量（FB）的变化，并观察胆囊结石形成情况。结果A组、B组结石发生率分别为75％（15／20）、35％（7／20），明显高于对照组5％（1／20），且实验组结石均为以胆固醇类为主的结石。A组胆囊组织AQP-1与AQP-8mRNA表达低于B组，且显著低于对照组。A组其血清E2、Pg含量，胆囊组织ER、PR阳性表达率均高于B组，且明显高于对照组。同时A组FV及FB明显大于B组和对照组（P〈0．05）。结论高胆固醇饮食可降低妊娠豚鼠胆囊黏膜上皮AQPtmRNA与AQP8mRNA的表达，且可导致血清E2、Pg含量进一步升高，诱发胆囊运动功能下降，从而提高胆囊结石的发生率。