尾巨桉DH32-28组培再生过程中激素浓度筛选与转基因愈伤组织获得

探索尾巨桉良种无性系DH32-28的组培再生体系,进而建立稳定的遗传转化系统,以期为进一步获得转基因桉树再生植株,以及开展桉树基因功能及分子育种研究提供参考。以DH32-28组培苗叶片和茎段为外植体,通过筛选植物生长调节剂噻苯隆(TDZ)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、1-萘乙酸(NAA)以及吲哚丁酸(IBA)的合适浓度,进行外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根诱导;通过测定愈伤组织诱导阶段以及生根诱导阶段组培材料对卡那霉素的耐受力,确定卡那霉素的临界筛选浓度,用于农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化实验。结果表明:以MS为基本培养基,0.025 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA、0.05 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA的激素配比分别最适于DH32-28叶片和茎段的愈伤诱导,愈伤诱导率均为98.3%。将诱导出的叶片和茎段愈伤组织转移到含有0.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA的不定芽分化培养基中,不定芽分化率分别为44.4%和96.7%。以1/2MS为基本培养基,添加0.5 mg·L^(-1)IBA对DH32-28再生芽的不定根诱导率最高,不定根诱导率为72.8%。愈伤组织和不定芽诱导阶段的卡那霉素最适筛选浓度为5 mg·L^(-1),生根阶段最适浓度为20 mg·L^(-1)。本研究成功建立了尾巨桉无性系DH32-28高效的再生体系,并采用农杆菌介导的遗传转化方法将红色荧光蛋白报告基因DsRed2导入到DH32-28茎段受体材料,获得了表达DsRed2的转基因愈伤组织。

尾巨桉(DH32-28)二代高产林生长规律及经济效益研究

采用树干解析法对广西南宁地区尾巨桉(DH32-28)二代高产林生长规律进行分析,结果表明,5年生林分平均树高、平均胸径和平均材积分别达21.33 m,13.62 cm,0.142 4 m^3/株。树高和胸径连年生长量都在第1年时最大且连年生长量曲线均为反"J"型,材积连年生长曲线则呈抛物线状并在第4年出现峰值。经模型研究得出,林分材积数量成熟年限为6 a。二代高产林分的经济效益可观,5年生人工林项目的累积财务净现值为41 960.14元/hm^2,内部收益率为85.76%,高产林年均利润为14 186.00元/hm^2。投资项目年均投资利润率、年均利税率分别达到93.43%和110.09%。

广西南宁巨尾桉(DH32-28)植苗林调查因子关系模型研究

[目的]调查广西南宁巨尾桉(DH32-28)植苗林各调查因子间的关系。[方法]对在广西南宁树木园新塘和横县林区内生长正常的巨尾桉(DH32-28)植苗林进行调查,分别测定每株树的胸径、树高、年龄等树木调查因子,并对其相关性进行分析,建立胸径与造林时间、树高与造林时间、胸径与树高等因子之间的一系列数学模型,并进行模型的实用性和精度检验。[结果]胸径、树高与造林时间的对数函数关系比较密切,树高与胸径的二次函数模型关系比较密切。胸径与造林时间的关系可以用对数函数模型y=-3.310+4.132lnx来反映,树高与造林时间的关系可以用对数函数模型y=-15.881+8.816lnx来反映,胸径与树高的关系可以用二次函数模型y=0.635+0.822x+0.042x^2来反映。[结论]模型揭示了广西南宁巨尾桉(DH32-28)植苗林各调查因子之间的生长规律性,同时还可以用于桉树人工林林分生长预估中单株树木潜在的生长分析,对桉树人工林的可持续经营利用和森林生态系统恢复具有一定的指导意义。

尾巨桉DH32-28组培快繁技术研究

以尾巨桉DH32-28半木质化萌发茎段为组织培养外植体材料,在不同的诱导、增殖和生根培养基条件下诱导不定芽,确定了适宜的培养基和培养条件,为加快优良无性系分化速度、缩短培养周期、降低生产成本奠定了理论基础。

尾巨桉DH_(32-26)组培快繁技术

[目的]探索尾巨桉DH_(32-26)组培快繁技术,为其规模化生产提供参考。[方法]采用组织培养手段,以尾巨桉DH_(32-26)半木质化萌发茎段为材料,对外植体诱导及无菌组织培养体系进行研究。[结果]最佳外植体诱导培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5mg/L,发芽率为92.3%;最佳增殖培养基为改良MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L,增殖个数为3.7;最佳生根培养基为改良1/2MS+IBA 0.2 mg/L+ABT 0.3 mg/L,生根率可达98.3%。[结论]该研究获得了尾巨桉初代诱导、增殖和生根适宜培养基和培养条件,初步达到工厂化生产要求。

尾巨桉(DH32-28)二代高产林分生物量研究

采用固定样方调查法对广西南宁地区尾巨桉无性系DH32-28第二代高产林生物量和生产力进行研究,结果表明:林分生物量为132.749t/hm^2,地上、地下部分生物量分别为106.930、25.181t/hm^2。生物量在不同器官之间的分配大小依次为:树干>根兜>树枝>粗根>树叶>中根>细根,树干生物量最大,占林分总生物量的74.98%。高产林分生产力为24.766t/hm^2·a,生产力分配格局与生物量分配格局基本一致,林分生产力主要集中在平均胸径以上的径阶,合计19.505t/hm^2·a,占林分总生产力的78.76%。不同径阶林木生物量增长率差异显著,11cm以下、11~13cm、14cm以上增长率分别为5~10%、15%、20~30%。说明林分生物量增长率与林分生物量分配格局无关,而与林木所处林分中的优势度有关。