Study on Tissue Culture and Adventitious Bud Induction of Eucheuma striatum

This study aimed to investigate the aseptic treatment and disinfection of E. striatum explants and the effects of three liquid culture medium （ PES, PESI, f/2） and plant hormones on adventitious bud induction from explants. The results showed that the vast majority of explants disinfected by combined treatment exhib- ited good growth and normal color with an average mortality rate of only 9%. E. striatum explants exhibited the best growth in PES liquid medium and the survival rate reached 66.67% at 40 d after culture. Under different concentrations （0.5, 2, 5 mg/L） of 6-BA, the induction rate ofE. striatum explants was significantly higher than that in control group, but no remarkable differences were found in the induction of adventitious buds from E. striatum explants. In PES liquid medium containing 6-BA and 2,4-D, the adventitious bud induction rate was 90% and the average number of induced adventitious buds was 6.63.

超声波辅助过氧化氢氧化降解制备相对低分子质量异枝麒麟菜硫酸多糖

目的制备相对低分子质量异枝麒麟菜硫酸多糖.方法采用超声波辅助过氧化氢氧化降解异枝麒麟菜硫酸多糖,并测定各多糖样品的相对分子质量及硫酸基、3,6-内醚半乳糖含量.结果制备了相对分子质量为5000～40000的硫酸多糖,其硫酸基含量均在18.5%以上.结论该方法适合于制备相对低分子质量高水溶性多糖,后处理简单,并能较好地保持多糖中的硫酸基.

超声辅助提取异枝麒麟菜硫酸酯多糖的工艺优化

对异枝麒麟菜硫酸酯多糖(ESSP)的超声辅助提取工艺进行研究,通过单因素试验和正交试验对该提取工艺进行优化。确定最佳工艺条件为超声时间20min、超声功率150W、料液(水)比1:90(g/mL),多糖的提取率达48.14%,所得的多糖含量96.94%,硫酸酯基含量19.66%。并与热水提取法进行比较,采用优化工艺提取的多糖提取率、多糖含量和硫酸酯基含量比热水提取法分别提高12.08%、8.07%和1.41%。两种方法所得ESSP均不含蛋白质和核酸,红外光谱显示其均含有糖的特征峰和硫酸酯基特征峰。

琼枝和异枝麒麟菜中硫酸酯基多糖不同提取方法的化学分析比较

采用"直接水提法"以及"KCl分级法"来提取琼枝和异枝麒麟菜中的多糖.分别用蒽酮-硫酸法、间苯二酚法、明胶-BaCl2分光光度法测定多糖样品的总糖质量分数、3,6-内醚半乳糖质量分数、总硫酸基质量分数;用凝胶色谱法测定各多糖样品的相对分子质量分布情况;用GC-MS测定麒麟菜硫酸酯基多糖的单糖种类及含量.结果显示采用"直接水提法"以及"KCl分级法"比传统的"碱处理法"产率高,而且硫酸基质量分数也明显增高.两种麒麟菜多糖均为硫酸酯基多糖,大部分都属于κ-卡拉胶类.各多糖样品的相对分子质量分布在105左右.麒麟菜多糖主要是由半乳糖和3,6-内醚半乳糖组成,此外还含有少量的葡萄糖、木糖、塔罗糖和艾杜糖等,不同方法提取的多糖样品其单糖种类基本一致.

异枝麒麟菜和扇形叉枝藻卡拉胶的研究

于1988－1990年以海南文昌海藻养殖场进口的异枝麒麟菜和在山东省青岛市采集的扇形叉枝藻为材料进行多糖产率、凝胶强度、粘度、凝固点、融点、硫酸酯和3．6－内醚－半乳糖含量分析，同时用红外光谱（IR）和13C－核磁共振波谱（13C－NMR）分析它们的组成结构。实验结果表明，异枝麒麟菜碱处理后所得多糖的凝胶强度很高，达8．6×104Pa。多糖产率也高，主要由k－卡拉胶组成，故异技麒麟菜是一种很好的制造k－卡拉胶的原料，扇形叉枝藻的多糖能形成凝胶，但其凝胶强度仅为1．2×104Pa，比异枝麒麟菜低得多。这种多糖的组成很复杂，由K－，l－，β－和λ－卡拉胶组成。

麒麟菜硫酸酯多糖体外抗病毒作用的研究

目的采用体外细胞培养法,研究琼枝和异枝麒麟菜硫酸酯多糖对HSV-1和CVB3的抗病毒活性,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT比色法观察琼枝和异枝麒麟菜硫酸酯多糖对Vero细胞的细胞毒性,用细胞病变(CPE)抑制法观察其对由HSV-1和CVB3引起CPE的抑制作用;采用分组实验初步探讨了多糖样品的抗病毒作用机制。结果和结论琼枝和异枝麒麟菜硫酸酯多糖能明显抑制由上述两种病毒引起的CPE,对Vero细胞的毒性很低,异枝粗多糖和异枝多糖A2组分(ESPA和ESPA2)对HSV-1的抗病毒效果均优于阿昔洛韦(ACV),本实验采用的全部多糖样品对CVB3的抗病毒作用也都优于病毒唑,而异枝麒麟菜硫酸酯多糖抗CVB3效果更为显著。从分组实验结果可初步推知,麒麟菜硫酸酯多糖样品不仅具有直接杀灭病毒作用,而且还可能通过进入细胞内部或吸附在细胞表面,发挥其抑制或杀伤病毒的作用。

薛家岛海水网箱养殖海域贝藻综合养殖效果及其影响因素分析

本研究于2018年9—11月在山东省青岛市薛家岛海域构建了包含鱼类网箱、马氏珠母贝(Pinctada martensi)和异枝麒麟菜(Eucheuma striatum)的多营养层次综合养殖(IMTA)模式,开展现场实验的同时,在室内测定了马氏珠母贝的摄食生理指标和异枝麒麟菜的营养盐吸收速率,对比分析了贝藻综合养殖对网箱养殖区的水质改善效果。结果显示,实验点马氏珠母贝壳高及特定生长率(SGR)均显著高于对照点,水层为0.50~0.62m的马氏珠母贝平均壳高显著高于其他水层。实验点异枝麒麟菜的净增重显著高于对照点,水深为0.60~0.90 m的生长速率最高;在24.45℃条件下,马氏珠母贝对颗粒有机物(POM)的摄食率、吸收率和吸收效率均值分别为(4.13±0.77)mg/(h·ind.)、(1.04±0.24)mg/(h·ind.)和(25.00±2.51)%,均显著高于20.74℃实验组;在实验温度范围内,异枝麒麟菜对N、P、Si营养盐的吸收速率均随着温度升高呈先升高再降低的趋势,最高值出现在30℃。实验期间,马氏珠母贝摄食和吸收的POM分别为778.08和144.47g,异枝麒麟菜吸收的N、P、Si总量分别为8.55、1.11和9.18 g,均高于对照点。研究表明,温度、养殖深度、POM及营养盐浓度是影响马氏珠母贝和异枝麒麟菜生长及生理代谢的主要因素。

海藻异枝麒麟菜多糖对纳米羟磷灰石晶体损伤小鼠血管平滑肌细胞的影响

目的探讨海藻异枝麒麟菜多糖(ESP)对纳米羟基磷灰石(nano-HAP)晶体诱导的小鼠血管平滑肌细胞(MOVAS)损伤的影响。方法将体外培养的血管平滑肌细胞分为空白对照组、模型组、实验组。空白对照组加入新鲜培养基,模型组给nano-HAP刺激24 h,实验组用不同浓度(50、150、450μg/mL)的ESP处理模型组细胞。采用MTT法检测细胞的活力,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测细胞LDH释放量,采用苏木精-伊红染色观察细胞形态。结果与空白对照组比较,模型组细胞活力明显下降(P<0.05),LDH释放量明显升高(P<0.05);与模型组比较,实验组细胞活力随着加入ESP浓度的增加而升高,LDH释放量随着ESP浓度的增加而逐渐下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ESP可减轻nano-HAP晶体对血管平滑肌细胞膜的损伤。

异枝麒麟菜硫酸多糖的降解及其对尿石矿物草酸钙的抑制作用

采用过氧化氢法降解了相对分子质量约为141万±8.3万的海藻异枝麒麟菜(Eucheuma striatumSchmitz)硫酸多糖(ESPS),降解产物平均相对分子质量为4 819±440。降解后多糖的硫酸基(OSO32-)质量分数稍有下降,由16.03%降至15.20%左右。同时,用体外模拟方法研究了降解前后ESPS对草酸钙(CaOxa)晶体生长的抑制作用,降解后的ESPS明显优于未降解多糖,其诱导生成的一水草酸钙(COM)晶体尺寸进一步减小,晶体数量减少,且棱角更为圆钝。表明低分子质量ESPS更能抑制CaOxa晶体的成核和生长。

降解前后异枝麒麟菜硫酸多糖对草酸钙晶体生长的调控作用

采用过氧化氢法降解产于印尼的海藻异枝麒麟菜硫酸多糖(ESPS).降解前ESPS的平均分子量为1410000,硫酸基(OSO23-)含量为16.0%(w);而降解后其分子量显著下降至4819,硫酸基含量则略微下降至15.2%.采用体外模拟方法研究了降解前后ESPS对草酸钙晶体生长的抑制作用.扫描电子显微镜(SEM)和X射线衍射(XRD)结果表明,降解后ESPS能使一水草酸钙(COM)晶体数量进一步减少,晶粒尺寸进一步减小.当降解ESPS浓度从0.006g·L-1分别增加到0.010和0.050g·L-1时,COM晶体平均尺寸由11.5"m×2.9"m分别减小到9.2"m×2.9"m和6.0"m×2.5"m,晶体数量由3357mm-2分别减少到2298和1532mm-2,COM的(101)面衍射峰强度I(101)与(010)面对应的(020)衍射峰强度I(020)之比(I(101)/I(020))由5.54分别增加到16.2和20.0.结果显示,具有小分子量的降解ESPS对草酸钙晶体成核与生长的抑制效果明显优于大分子量的未降解ESPS.

异枝麒麟菜酶法降解工艺的优化研究

以施氏假单胞菌分泌的卡拉胶酶为工具,采用二次回归正交旋转组合设计,对异枝麒麟菜的酶法降解工艺进行了研究,探讨pH、温度和卡拉胶酶添加量对还原糖生成量的影响。pH、温度和卡拉胶酶添加量与还原糖生成量的数学回归模型为:Y=0.3310+0.0107Z1-0.0848Z2+0.0451Z3-0.0012Z31-0.0055Z32+0.0186Z21-0.0940Z21-0.0635Z22-0.0125Z23;最佳的酶解参数为:pH 6.27,温度39.6℃,加酶量74.4 U,底物质量浓度为0.7595 g/L(总糖含量),酶解8 h。

印尼巴厘海域产卡拉胶海藻的生物多样性分析

从印度尼西亚的蓝梦岛（Lembongan）和帕尼达岛（NusaPenida）共采集40株产卡拉胶海藻，分别提取各株的基因组DNA、克隆并测序其线粒体Cox2—3间隔序列。依据获取的Cox2—3序列和其它已知种类的Cox2—3序列构建系统树，对上述海藻样品的种类进行了匹配鉴定。结果表明，本次共采集到2种产胶藻，齿状麒麟菜（Eucheuma denticulatum）和异枝卡帕藻（Kappaphycus striatum）。本研究为丰富对印尼海域产卡拉胶海藻遗传多样性的认识提供了依据。