杜仲胚轴、子叶直接诱导不定芽及再生体系的建立

目的探索杜仲胚轴、子叶不定芽诱导条件,建立杜仲再生体系。方法分别以杜仲种胚、胚轴切段、子叶切段、芽为外植体,将它们接种到一系列含有不同激素质量浓度的培养基中。结果在外植体的选择上,胚轴优于子叶。对于杜仲胚轴的伸长生长,以MS培养基附加2.0mg/LGA效果最好。在含有0.1mg/LNAA及0.8mg/L6-BA的MS培养基中,杜仲胚轴可直接诱导产生不定芽,诱导率达到47%。在壮芽及生根培养中,分别采用附加1.0mg/L6-BA、0.1mg/LNAA的MS培养基及附加1.5mg/LIBA、20mg/L蔗糖的1/2MS培养基效果最好,经28、14d,芽苗生长系数及生根率分别达到2.48和91.7%。结论建立了稳定高效的杜仲再生体系,为外源基因导入杜仲奠定了基础。

杜仲乔林与叶林树皮中次生代谢物含量的比较

通过回流提取法,对杜仲乔林与叶林2种栽培模式下树皮中次生代谢物的含量差异进行了分析。结果发现,乔林树皮中杜仲醇、总黄酮和杜仲胶的含量均比叶林树皮中的高,而叶林树皮中绿原酸、京尼平甙酸和桃叶珊瑚甙却比乔林树皮中的高;同时比较将杜仲树皮碾成粉状和丝绵状2种处理方式对次生代谢物提取的影响发现,二者效果相差不明显,但考虑到后期要提取杜仲胶,建议将杜仲皮碾成丝绵状。

栽培方式对杜仲皮次生代谢物含量的影响

采用叶林和乔林两种栽培模式对杜仲定向培育,并分别对杜仲皮次生代谢物含量进行了测定.结果表明:在不同的栽培模式下,杜仲皮中次生代谢物的含量存在差异,杜仲醇和杜仲胶的含量,乔林皮高于叶林皮;京尼平甙酸、绿原酸、桃叶珊瑚甙的含量则是叶林皮高于乔林皮;总黄酮的含量随提取溶剂的不同而有高有低.对杜仲皮进行不同的预处理和选用不同的提取溶剂,能改变提取得率,但是,叶林皮与乔林皮次生代谢物含量变化趋势基本不变,说明栽培方式对杜仲皮次生代谢物有一定影响.

杜仲肉桂醇脱氢酶基因全长cDNA克隆及序列分析

以杜仲(Eucommia ulmoides Olive)4、5月份新长成的杜仲幼嫩叶片为材料,在克隆一段肉桂醇脱氢酶(cin-namyl alcohol dehydrogenase,CAD)基因的基础上,以杜仲cDNA为模板,采用cDNA末端快速扩增法(Rapid ampli-fication of cDNA Ends,RACE)克隆了5’端828 bp和3’端798 bp cDNA序列,经5’RACE产物和3’RACE产物序列拼接,获得全长为1243bp的杜仲CAD cDNA序列,开放阅读框编码243个氨基酸,命名为EuCAD(GenBank登录号:DQ142643)。与GenBank中序列比对分析发现,该cDNA序列与苹果树、桉树、红橡树中的CAD基因序列同源性均为81%,预测编码的氨基酸序列与苹果树、桉树、红橡树的同源性分别为73%、70%和70%,因此认为是杜仲肉桂醇脱氢酶基因。该基因为首次从杜仲中克隆,为探索木质素的合成调控机理奠定基础。

中药杜仲对补体系统的作用

目的建立方便快速的补体缺失血清制备方法,利用补体缺失血清,研究杜仲抑制补体系统的作用及其机制。方法①将指定补体抗体与相应补体结合,制备不同补体成分缺失血清;②通过补体经典激活途径,测定中药及其提取物的抗溶血作用;③以不同成分缺失的补体缺失血清,评估中药及其提取物对不同补体成分的影响。结果①成功制备补体C3、C4、C5缺失血清,略优于市售成品;②杜仲树皮部位有抑制补体溶血作用。结论杜仲树皮部位有一定抑制补体溶血作用,其抑制补体溶血的位点可能位于补体C3、C4段上,而不在C5段上。