小眼虫的着丝粒蛋白检查

为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白，我们从比酵母更低等的原生生物着手，检查它们的着丝粒蛋白。另文我们已报道了对四膜虫研究的结果，本文报道的是对小眼虫（Ｅｎｇｌｅｎａｇｒａｃｉｌｉｓ）的检查。我们的结果表明：眼虫细胞核里存在的ＡＣＡ抗原的分子量，包括了用ＡＣＡ血清在高等生物中检出来的ＣＥＮＰ－Ａ、ＣＥＮＰ－Ｂ、ＣＥＮＰ－Ｃ和ＣＥＮＰ－Ｄ这几类基本的着丝粒蛋白组分。作免疫荧光染色后，细胞核呈很强的阳性反应，但分辨不出前着丝粒小点。核仁不被荧光染色，除了核仁外似乎整个核都被染色。这可能反映了抗原的分布在核内不是集中成点状的。经过制备核骨架的程序处理后，细胞核仍为阳性（尽管荧光较弱）。如此看来，眼虫至少已有相当大一部分的ＡＣＡ抗原是与核骨架结合着的。对分离的细胞核作相应的抽提处理后再作免疫印迹检查，得到的阳性反应带也证明了这一点。

嗜热四膜虫的着丝粒蛋白检查

目前国际上的着丝粒蛋白研究工作几乎全是以酵母和高等生物为材料进行的。为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白，我们以人喉癌培养细胞ＨｅｐⅡ作为对照材料，以两种ＡＣＡ血清和ＣＥＮＰ－Ｂ单抗、多抗以及ＣＨＯ动粒蛋白单抗为探针，用间接免疫荧光和免疫印迹技术对嗜热四膜虫（Ｔｅｔｒａｈｙｍｅｎａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）作检查。免疫荧光结果表明，ＨｅｐⅡ细胞的着丝粒抗原在间期核中呈点状分布：与ＨｅｐⅡ细胞的不同，嗜热四膜虫的着丝粒抗原在问期核中的分布呈不规则的斑块状。免疫印迹结果表明，作为单细胞生物的纤毛虫虽然在进化上距离哺乳动物和人甚远，但却已具备了与哺乳动物和人的相似的着丝粒／动粒点抗原蛋白。这说明着丝粒和动粒的蛋白组分可能是发生得很早的，而且是相当保守的。