基于ITS2序列的鬼箭羽及其混伪品DNA条形码鉴定

目的建立快速鉴别鬼箭羽及其混伪品的方法,确保临床用药安全。方法采用DNA条形码分析的方法,对16批鬼箭羽药材进行核基因ITS2片段扩增、测序及序列拼接,用MEGA7.0软件进行序列分析,并构建鬼箭羽近源种及混伪品的系统发育分析树。结果16批鬼箭羽药材中共检测到2种ITS2单倍型,单倍型之间仅有一个位点的突变,说明不同产地鬼箭羽种内保守性高,遗传稳定。系统聚类分析表明,鬼箭羽与其近源种并为一个大分支,而其混伪品自成一支,可相互区分。结论ITS2序列作为DNA条形码能够方便、快速地鉴别鬼箭羽及其混伪品。

中药鬼箭羽降糖有效部位的药效学和化学研究

目的 :在对中药鬼箭羽药效学研究基础上 ,提取分离其降糖作用的物质基础。方法 :用健康小鼠和四氧嘧啶所致的化学性糖尿病小鼠模型 ,以血糖为指标研究鬼箭羽的降糖作用有效部位和物质基础 ,采用硅胶和凝胶柱层析等分离纯化技术 ,根据理化性质及光谱数据鉴定结构。结果 :鬼箭羽对健康小鼠血糖水平无明显影响 ,但能显著降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠血糖水平 ,其中水提取部位降糖作用最好。乙酸乙酯部位降糖作用仅次于水提取部位 ,乙酸乙酯部位经聚酰胺柱色谱用 5 0 %乙醇洗脱所得组分降糖效果明显。对 5 0 %乙醇洗脱组分进行分离得到 4个酚酸类化合物 ,分别为对羟基苯甲酸 (p hydroxybenzoicacid ,EA 1) ,3,4 二羟基苯甲酸 (protocatechuicacid ,EA 2 ) ,3 甲氧基 4 羟基苯甲酸 (4 hydroxy 3 methoxybenzoicacid ,EA 3) ,3 5 二甲氧基 4 羟基苯甲酸 (3,5 dimethoxy 4 hydroxybenzoicacid ,EA 4 )。结论 :鬼箭羽对糖尿病小鼠有明显的降糖作用 ,其活性物质主要来自于乙酸乙酯部位 5 0 %乙醇洗脱所得的化学组分。从该部位分离的四个成分均为首次从该植物中分得。

中药鬼箭羽提取物对脂肪细胞葡萄糖摄取作用的影响

目的 :在对中药鬼箭羽药效学研究的基础上 ,初步探讨其各提取组份SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4对于脂肪细胞的降糖作用机制。方法 :采用分离的大鼠脂肪细胞 ,用高浓度葡萄糖和胰岛素诱导脂肪细胞胰岛素抵抗模型 ,观察鬼箭羽各提取组份对于胰岛素抵抗模型脂肪细胞的葡萄糖摄取的影响以及对于正常脂肪细胞 ,低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的影响。结果 :鬼箭羽各提取组份SML 1,SML 2 ,SML 4 ( 10 μg/ml)对脂肪细胞葡萄糖的基础摄取率有所提高。SML 2 ,SML 3( 10 0 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 μg/ml) ;SML 1,SML 3,SML 4 ( 1μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3( 0 1μg/ml)对于低浓度胰岛素 ( 1 2nmol/L)刺激的外周葡萄糖摄取均有协同增强作用。SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 0 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ,SML 3,SML 4 ( 10 μg/ml) ;SML 1,SML 2 ( 1μg/ml) ;SML 1,SML 2 ( 0 1μg/ml)可以提高胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取水平。 结论 :鬼箭羽各提取组份可以促进正常脂肪细胞低浓度胰岛素刺激脂肪细胞的葡萄糖摄取 ,促进胰岛素抵抗脂肪细胞的葡萄糖摄取可能是其降糖作用机制之一。

微波辅助萃取鬼箭羽叶中芦丁和槲皮素

A detail procedure for extracting rutin and quercetin from Euonymus alatus(Thunb.) Sieb was developed with an obturated microwave-assisted extraction(MAE) device with pressure and temperature controlling units.The effects of solvent concentration,ratio of solution to solid,radiation time and microwave power were discussed in orthogonal experiments.Compared with Soxhlet extraction and ultrasonic extraction,microwave extraction was a rapid method with a higher yield and less solvent consumption.The mechanism of the microwave-assisted extraction was studied by scanning electronic micrograph.In the case of microwave heating,the build-up pressure within the cells could exceed their capacity for expansion,and caused their rupture more rapidly than that in conventional extraction.

微波辅助萃取-分光光度法测定卫矛中总黄酮

采用微波辅助萃取法提取，以分光光度法测定卫矛样品中的总黄酮含量。并且通过单因素实验和正交实验设计优化了溶剂浓度、溶剂用量、微波功率和微波辐射时间等微波提取条件，确定了微波辅助萃取法提取卫矛中黄酮类化合物的最佳条件为：使用60％乙醇，在液固比40：1条件下，以255W的微波功率，微波辐射5min。在上述最优条件下进行了精密度和回收率实验，所得结果的相对标准偏差为1．71％（n=5），回收率在97％～101％之间。与传统的索氏提取法和超声波提取法比较，微波辅助萃取法具有操作简便，经济可靠，重现性好等特点。该实验采用的微波辅助萃取-分光光度法测定法简便高效，可推广应用于各类中草药中总黄酮的含量测定。

RP-HPLC法测定鬼箭羽中3种活性成分的含量

目的：建立同时测定鬼箭羽中降糖活性成分山柰酚、柚皮素及槲皮素含量测定的方法。方法：采用反相高效液相色谱法,以AlltimaC18（4.6mm×250mm,5μm）为色谱柱,乙腈-0.1%甲酸（38：62）为流动相,检测波长258nm,流速0.8mL/min,柱温30℃。结果：山柰酚、柚皮素及槲皮素的线性范围分别为0.02064-0.2580μg（r=0.9996）,0.05592-0.699μg（r=0.9997）,0.01656-0.207μg（r=0.9998）;加样回收率分别为100.6%（RSD=2.5%）,96.4%（RSD=1.1%）,101.9%（RSD=1.7%）。结论：本法简便、准确、重现性好,适用于鬼箭羽中3种活性成分的同时测定,可用于鬼箭羽药材的质量控制。

卫矛抗心肌缺血有效部位的化学成分研究

目的对卫矛Euonymus alatus抗心肌缺血有效部位的化学成分进行研究。方法利用各种色谱法分离化学成分,通过理化性质和波谱法鉴定化合物的结构。结果从卫矛中分离得到5个化合物,分别为1-[3-(α-D-吡喃葡萄糖氧基)-4,5-二羟基苯基]-乙酮(Ⅰ)、8-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖基苯乙醇(Ⅱ)、丁香酚苷(Ⅲ)、金丝桃苷(Ⅳ)、橙皮苷(Ⅴ)。结论化合物Ⅰ为新化合物,命名为鬼箭羽苷(guijianyuside),化合物Ⅱ、Ⅲ为首次从卫矛中分离得到。

鬼箭羽多糖分析方法研究

目的建立鬼箭羽多糖分析方法。方法采用L9(34)正交实验法考察样品提取方法,通过单因素实验优选多糖显色条件,用紫外-可见分光光度法测定多糖含量。结果多糖提取方法:以75和100mL水提取2次,第1次煎煮2h,第2次煎煮1h;显色条件:取供试溶液1.0mL,加入0.05g·mL-1苯酚液1mL,混匀,再加浓硫酸7.0mL,摇匀,于20℃水浴中反应30min,冰水浴冷却5min,在482nm波长处测定吸光度;葡萄糖质量浓度在0.012～0.18mg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为100.4%,RSD=1.2%。结论建立的鬼箭羽多糖分析方法可行、准确、简便。

鬼箭羽药材的薄层色谱鉴别

对鬼箭羽的各主要成分进行了定性研究。采用现代薄层色谱(TLC)技术对鬼箭羽中何帕22(29)-烯-3β-醇、β-谷甾醇、羽扇豆酮、白桦酯醇、齐墩果酸、雷公藤内酯甲进行了色谱鉴别,结果表明,用TCL技术鉴别鬼箭羽,方法的专属性强,重现性好,操作简便,完全可以作为鬼箭羽药材的质量控制标准。

卫矛容器育苗的关键技术

随着城镇化建设的快速发展,对园林绿化工程用苗的质量要求越来越高,为使苗木在不同季节均能栽植成活,生产中大多采用容器育苗的方式进行培育。通过近几年的生产实践和经验做法,针对辽东山区绿化苗木经营现状,基于圃地选择、平整苗床、建遮阳棚、容器基质配制、填装基质、卫矛芽苗的选择和移栽、苗期管理几个方面,介绍了当年生卫矛容器苗的育苗技术。

鬼箭羽的现代药理作用研究成果

鬼箭羽为卫矛科植物,史载于《神农本草经》,是一种具有多种疗效的中药,可活血消肿、破血、通经、杀虫、止痛,主要治疗女子月经病、腹痛、虫积、疝气、心胸疼痛、产后瘀滞等病。随着近几年医学的发展,对鬼箭羽的药理作用、临床应用、化学成分等各个方面的研究也逐渐的扩大深入。研究发现,中药鬼箭羽对于糖尿病及其并发症、高脂血症、心肌缺血、脑血管病、慢性肾病等多种疾病均有较好疗效,同时还有抗感染、抗过敏、抗炎抑菌、抗氧化、杀伤癌细胞等作用。本文在对相关文献进行梳理和跟踪的基础上,综述了鬼箭羽药理作用的现代研究成果,希望为进一步的探索及开发利用提供帮助。

鬼箭羽化学成分与药理作用研究进展

鬼箭羽被认为是卫矛科植物卫矛[Euonymus alatus(Thunb.)Sieb.]的具翅状物枝条或其翅状附属物。其味苦,性寒,入足厥阴肝经,功效在历代本草中收录多为破血通经、杀虫驱邪,多偏重用于治疗女子妇科经血疾病及古人驱邪杀虫。现代研究表明,鬼箭羽具有降血糖、调血脂、抗炎抗菌、抗过敏等多重作用,用于治疗糖尿病、高血脂、慢性肾病等多种内科病证。不论单方抑或组方,均有很好的疗效。近年来鬼箭羽在抗肿瘤方面的独特疗效也多为学者关注。

鬼箭羽药材本草考证

鬼箭羽用药历史悠久,其古时主要用于治疗女子妇科经血疾病与驱邪杀虫,但现今对其研究较少。研究以鬼箭羽药材为基础,通过查阅历代本草医籍文献,与现代相关文献资料进行结合对比,对鬼箭羽进行名称考证、基原考证、用药部位考证、采收加工考证以及药材产区与分布考证。结果表明,鬼箭羽古时多以"卫矛"之名收载,亦存在众多别名,其名称多以植物形态而得来。历代本草书籍中收录其基原现今认为是卫矛科植物卫矛[Euonymus alatus(Thunb.)Sieb.],古时鬼箭羽常于春、夏、冬三季取其带翅状物的枝条或仅取其枝条上的翅状物,再经酥炙或直接阴干而得。鬼箭羽药用功效古今差异不大,主要为活血通经、祛风止痛、解毒消肿、杀虫。研究通过对鬼箭羽药材的药用历史考证可进一步探究影响鬼箭羽药材质量评价标准的诸多因素,为鬼箭羽药材的商品规格等级研究提供本草学依据。

生长季节浇肥对移栽卫矛叶片内保护酶活性的影响

通过对移栽卫矛苗木浇施复合肥后生长期叶片内保护酶活性变化情况的研究,判断最有利于移栽苗生长的施肥量,为实际生产提供理论支持。以3年生卫矛苗木为试材,浇施NPK比例为6:12:18的复合肥,每株施肥量为F18.33g,F228.33g,F348.33g,F468.33g,F588.33g,1个对照,3次重复。肥料平均分4个月浇入土壤,每个小区25株,随机排列。于4—8月份的每月第10天取样,测定保护酶活性。试验结果表明,SOD呈现出先升高后降低的单峰曲线变化规律,经F3、F4、F5处理后的苗木SOD比对照和F1、F2处理后的苗木SOD提前1个月达到最高值;POD活性除对照一直升高外,经施肥处理后的苗木,其POD均在6月份达到最高值后下降;对照PPO的活性在6—7月份达到最低值,而施肥后的PPO活性始终处于升高趋势,与对照变化明显不同,且7—8月的PPO活性极显著高于对照。综合比较来看,F3处理的施肥量最佳。

不同施氮量对卫矛保护酶活性及可溶性蛋白含量的影响

以2年生卫矛为试材,设置5个氮水平,研究了追肥对卫矛生理特性的影响。结果表明：30 g·株^-1处理SOD活性最高在5-9月份与对照之间差异显著;30 g·株^-1处理POD活性在6-9月份处于最高值,6、9月份显著高于对照;30 g·株^-1处理PPO活性6-9月份处于最高值,显著高于对照,20 g·株^-1处理在7-9月份显著低于30 g·株^-1处理;可溶性蛋白含量30 g·株^-1,处理6-9月份显著高于对照。综合分析认为,30 g·株^-1处理效果最佳。

追肥对卫矛可溶性蛋白、电导率及叶绿素含量影响的研究

为了确定追肥对改善卫矛营养的基本规律,为卫矛的合理施肥提供理论支持,以4年生卫矛为试材,单株施肥量分别为T1:10.00g,T2:20.00g,T3:30.00g,T4:40.00g,T5:50.00g,1个对照,3次重复,小区试验设计。试验结果表明:5—8月T4处理可溶性蛋白含量始终处于最高值,T3、T5处理仅次于T4处理,试验末期分别比对照提高了74.75%、53.54%、62.63%,T1、T2处理与对照间无显著差异。6—8月T4处理电导率处于最低值,T5处理次之,8月份分别比对照降低了33.78%、33.66%,T2处理降低幅度最小,仅为9.38%;4—8月叶片内叶绿素含量随着施肥量增加表现出增加的变化,8月份T4、T5处理分别比对照提高26.61%、29.03%,显著高于T1～T3处理。综合分析认为,T4(40.00g/株)施肥量为最佳处理。

鬼箭羽中黄酮类化学成分研究

目的对鬼箭羽Euonymus alatus中的黄酮类成分进行研究。方法利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离并鉴定了13个化合物,其中二氢黄酮及其苷类4个:柚皮素(1)、香橙素(2)、二氢槲皮素(3)、橙皮苷(4);黄酮及其苷类8个:山柰酚(5)、槲皮素(6)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(7)、山柰酚-7-O-β-D-葡萄糖苷(8)、槲皮素-7-O-α-L-鼠李糖苷(9)、金丝桃苷(10)、山柰酚-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(11)、槲皮素-3,7-二-O-α-L-鼠李糖苷(12);黄烷酮醇类1个:去氢双儿茶素A(13)。结论化合物3、7～9、11、12为首次从该植物中分离得到。

鬼箭羽化学成分的研究Ⅱ

目的研究鬼箭羽(Euonymus alatus)的化学成分。方法采用硅胶,Sephadex LH-20,大孔树脂,制备高效液相色谱仪等柱色谱及重结晶等方法分离纯化,通过理化常数测定和光谱分析鉴定化合物的结构。结果从中分离得到8个已知化合物分别为:雷公藤内酯甲(1),槲皮素(2),苯甲酸(3),何帕-22(29)-烯-3β-醇(4),5-羟甲基糠醛(5),咖啡因(6),角鲨烯(7),正二十五烷(8)。结论化合物4～8为首次从该植物中得到。

鬼箭羽化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究鬼箭羽的化学成分。方法采用溶剂法和色谱法进行分离纯化，通过理化性质、光谱数据的解析进行结构鉴定。结果分离并鉴定的9个化合物分别为β-谷甾醇（Ⅰ）、木栓醇（Ⅱ）、木栓酮（Ⅲ）、松萝酸（Ⅳ）、羽扇豆酮（Ⅴ）、白桦脂醇（Ⅵ）、齐墩果酸（Ⅶ）、正二十六烷酸（Ⅷ）和正二十八烷醇（Ⅸ）。结论化合物Ⅴ～Ⅷ均为首次从鬼箭羽中分离获得。

卫矛提取物不同组分总黄酮含量及抗氧化抗炎活性评价

目的比较卫矛提取物不同极性组分总黄酮含量及抗氧化抗炎活性。方法 60%乙醇提取卫矛黄酮类化合物,经萃取制得4个不同极性的组分(石油醚组分、乙酸乙酯组分、正丁醇组分、水组分)。采用分光光度法测定各组分的总黄酮含量;通过清除DPPH自由基、ABTS自由基试验和还原力试验,评价各组分的抗氧化活性;利用脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7释放一氧化氮模型,评价各组分的抗炎活性。结果卫矛提取物总黄酮的含量为(271.25±5.51)mg·g-1,其中乙酸乙酯组分的总黄酮含量最高,为(773.61±12.03)mg·g-1,显著高于总提取物和其他组分(P<0.01)。活性评价结果表明卫矛提取物具有良好的抗氧化和抗炎活性,其中乙酸乙酯组分的抗氧化活性最强,乙酸乙酯组分和石油醚组分则具有良好的抗炎活性。结论卫矛的化学成分具有良好的多样性,其作用机制具有多组分、多靶点、多途径的特点,其具体机制有待进一步深入研究。