扶芳藤黄酮提取工艺优化及其抗疲劳活性研究

试验旨在优化扶芳藤黄酮提取工艺,研究其抗疲劳和抗氧化作用。试验以扶芳藤黄酮提取率为指标,对液料比、乙醇浓度、提取时间、超声功率等因素进行了单因素试验,在此基础上进行了响应面优化设计,考察了扶芳藤的抗疲劳效果。将50只小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组(复方扶芳藤合剂)、疲劳模型组以及扶芳藤黄酮提取物低、高(200 mg/kg和400 mg/kg)剂量组,每组10只,进行小鼠抗疲劳试验。结果显示,扶芳藤黄酮最佳提取条件为液料比55 mL/g、乙醇浓度60%、提取时间73 min、超声功率175 W,在此条件下黄酮得率为5.94%,与预测值基本一致。扶芳藤黄酮能够有效延长小鼠负重游泳时间,降低血清中乳酸(LD)和尿素氮(BUN)含量,增加小鼠体内肝糖原和肌糖原水平,增强超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,降低丙二醛(MDA)含量。研究表明,扶芳藤黄酮的抗疲劳和抗氧化效果较好,可作为缓解动物疲劳和氧化应激的饲料添加剂。

遮光处理对扶芳藤生长和光合特性的影响

研究了不同遮光处理（0、30%、60%、80%）对红脉扶芳藤生长及光合特性的影响。结果表明：在全光下，扶芳藤光饱和点（606.4μmol·m^-2·s^-1）和光补偿点（32.6μmol·m^-2·s^-1）均较低，属耐荫植物，净光合速率日变化呈双峰曲线，有“午休”现象，一天内Pn总值低于遮光处理，枝叶生长较慢；遮光处理，Pn呈单峰曲线，且高于全光处理；遮光30%-60%下，光合作用较强，蒸腾旺盛，枝叶生长加快，叶片组织结构正常，叶片变薄，比叶质量下降，叶绿素总量增加，叶色浓绿，观赏价值增强，表明一定程度的遮光有利于扶芳藤生长发育。

微波提取扶芳藤多糖的工艺研究

目的:研究微波法提取扶芳藤多糖的最佳工艺。方法:考察了固液比(A)、微波功率(B)、提取时间(C)、提取次数(D)4个因素的影响。结果:微波提取优化工艺条件是A1B1C3D3。即微波功率30W,固液比1∶50,提取时间14 m in,提取次数为4次,此时多糖提取率为10.56%。结论:微波方法可较好地应用于扶芳藤多糖的提取,同时具有提取速率快、能量消耗小等特点。

气相色谱法测定不同产地扶芳藤中卫矛醇含量

应用气相色谱法测定不同产地扶芳藤(Euonymus fortunei(Turcz.)Hand.-Mazz.)中卫矛醇的含量.该方法的线性范围是0.05～5.08μg,平均回收率98.158%,r=0.9991,RSD＝2.90%.本方法简便准确,重现性、分离度好,可以用于扶芳藤药材的质量控制.

星点设计-效应面法优选碧血草中卫矛醇的水提工艺

目的:用星点设计-效应面法优选碧血草中卫矛醇的水提取工艺。方法:以溶剂水(倍)量和煎煮时间为自变量,卫矛醇提取量为因变量对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,用效应面法选择较佳工艺条件,并进行预测分析。结果:确定最优提取工艺为溶媒用量12倍,提取时间1.5h,提取2次,提取量预测值与理论值偏差为-5.37%,二项式拟合复相关系数r=0.9515。结论:星点设计-效应面法优选碧血草中卫矛醇的水提取工艺,方法简便,预测性良好。

不同遮荫处理对几种扶芳藤光合特性影响的研究

研究在0%(CK)、24%、48%、78%遮荫条件下对4个扶芳藤品种光合特性的影响。结果表明:长期适应于不同光照水平的各扶芳藤品种光响应过程呈明显的梯度变化,而且各遮荫处理中4个扶芳藤品种净光合速率的总体变化规律具有一致性;随着遮荫梯度的增加,暴露在强光下时,各品种光抑制现象加重。4个品种扶芳藤在全光照下和不同遮荫条件下,其光补偿点变化趋于一致;同一种扶芳藤,在不同遮荫条件下,其光补偿点总比全光照下要低,但不同品种扶芳藤,在不同的遮荫条件下比全光照下光补偿点下降的程度不同,在各种遮荫条件下,除了78%遮荫时B1、B2品种光补偿点高于X1品种外,其它各遮荫处理中X1品种的光饱和点始终高于其它品种;而B3品种始终在各遮荫条件下光补偿点始终处于较低水平。随着遮荫强度的增加,各品种光饱和点一直呈下降趋势;在各种遮荫条件下,除了78%遮荫时B3品种光饱和点高于B1品种外,其它各遮荫处理中B1品种的光饱和点始终高于其它品种。X1品种光补偿点与光饱和点变化比较明显,说明X1品种具有较广泛的光适应能力。遮荫降低了4个扶芳藤品种的光合速率,可证明4个扶芳藤品种都是喜光的阳生植物,光照强度不足对其光合速率的影响较大。

扶芳藤水分胁迫适应性研究

本文在0%(对照CK)、5%、15%和25%PEG-6000模拟水分胁迫下研究了不同水分胁迫处理下扶芳藤光合和其他生理指标。结果表明,各处理光合速率显著下降,而水分利用效率比对照均有所提高。各处理的扶芳藤光合速率和水分利用效率都呈明显的双峰曲线,这与扶芳藤特性和环境因子的日进程密切相关。综合各处理光合与其他生理指标,25%PEG处理,第3天,扶芳藤植株受到水分胁迫影响较大,致使其生理机能受到伤害,而5%PEG、15% PEG处理至第5天仍表现出对干旱的适应。

扶芳藤总三萜对衰老小鼠血清及组织T-AOC、CAT、GSH-PX表达的影响及意义

目的探索扶芳藤总三萜对D-半乳糖诱导的小鼠衰老模型抗氧化作用。方法取健康清洁级雄性昆明小鼠75只,以皮下注射D-半乳糖(D-galactose)方法建立衰老小鼠模型;并将小鼠以单纯随机抽样法分为阳性药物组、模型组、扶芳藤总三萜高、低剂量组及正常对照组,每组15只,各组每天按预设方案给药连续21 d后,检测小鼠血清、心脏、肝脏及骨骼肌组织总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)三项抗氧化指标。结果与对照组比较,高、低剂量组小鼠的血清T-AOC及GSH-Px水平均升高,其中低剂量组的TAOC水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC及GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠心脏组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高、低剂量组的T-AOC水平明显高于对照组,高剂量组CAT水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC、CAT、GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠肝脏组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高剂量组的CAT水平明显高于对照组,高剂量组的GSH-Px水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但其他各组的T-AOC、CAT、GSH-Px水平升高不明显,差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组比较,高、低剂量组小鼠骨骼肌组织的T-AOC、CAT、GSH-Px水平均升高,其中高、低剂量组的T-AOC水平明显高于对照组,高剂量组的CAT水平明显高于对照组,高剂量组的GSH-Px水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),但低剂量组的CAT水平和GSH-Px水平升高均不明显,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论扶芳藤总三萜可提高衰老小鼠抗氧化能力,具有抗衰老功效。

爬行卫矛化学成分的研究

本文对卫矛科爬行卫矛Euonymus fortunei(Turcz.)Hand.-Mazz.的化学成分进行了研究,从中分得八个结晶性化合物,经理化性质和光谱分析,证明其中七个分别为正三十三烷(1-tr-itriacontane),卫矛醇(dulcitol),木栓酮(3-friedelanone),表木栓醇(3-epifriedelanol),三十二烷醇(dotriacontanol),木栓醇(3-friedelanol)和β—谷甾醇(β-sitosterol)。木栓酮和表木栓醇为抗炎有效分分。

扶芳藤对血液流变学及凝血功能影响的研究

目的观察扶芳藤对血液流变学及凝血功能的影响。方法对正常大鼠、小鼠分别用扶芳藤浸膏灌胃,测定大鼠凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、优球蛋白溶解时间(ELT),小鼠出血时间和凝血时间,观察扶芳藤对凝血功能的影响。结果扶芳藤低剂量组可显著降低大鼠全血比黏度(P<0.05),高、中、低剂量组可显著降低大鼠血浆黏度(P<0.05);低剂量组可显著减小血小板最大聚集率(P<0.01);高、中、低剂量组可显著低剂量组可显著缩短大鼠APTT(P<0.01),低剂量组可显著低剂量组可显著缩短大鼠ELT(P<0.05);中剂量组可显著显著延长小鼠出血时间(P<0.05),低剂量组可显著缩短小鼠凝血时间(P<0.05)。结论扶芳藤可改善血液流变学、改善凝血功能。

不同氮肥追施量对扶芳藤保护酶活性的影响

通过研究不同氮肥追适量对扶芳藤保护酶活性的影响规律,以期为其苗木繁育和造林中科学合理施用氮肥提供理论依据。试验以两年生营养繁殖苗木为试材,氮肥施用量设置Z1(CK)、Z2(6 g/株)、Z3(12 g/株)、Z4(18 g/株)、Z5(24g/株)5个处理,小区试验设计,3次重复。结果表明:Z4在5-8月份SOD活性分别比对照提高了45.05%、69.36%、87.19%、105.09%,差异显著,5-7月Z5与Z4之间无显著差异,8月显著低于Z4处理;POD活性在6月份达到最高值,7-8月份表现出降低的变化,Z4在6-8月分别比对照提高了151.05%、133.48%、134.95%,差异显著;PPO活性表现为随着生育期延后而一直升高的变化趋势,8月份达到最高值,Z4比对照提高了89.46%,差异显著,Z5低于Z4处理4.98 U/g,无显著差异。综合分析认为,Z4处理对提高扶芳藤保护酶活性效果最佳。

复盐胁迫对扶芳藤保护酶和MDA含量的影响

试验研究了复不同盐浓度下扶芳藤生理活性物质的变化情况,为分析其抗盐性提供理论依据。试验在田间条件下,设置复盐浓度分别为Y1(0%,CK)、Y2(0.2%)、Y3(0.4%)、Y4(0.6%)4个处理,随机区组试验设计,3次重复。结果表明:SOD活性Y2与对照之间无显著差异,Y4最高比对照提高了116.77%,差异显著;POD活性Y2、Y3、Y4与对照相比最高分别提高了42.93%、81.18%、128.66%,其中Y1与对照之间无显著差异,Y3、Y4显著高于对照;PPO活性在9月份达到最高值,与对照相比分别提高了27.62%、73.25%、109.79%,其中Y2与对照之间无显著差异;MDA含量Y2在整个试验期间与对照之间无显著差异,Y3、Y4均显著高于对照;所有复盐处理的电导率均高于对照,其中Y2与对照之间无显著差异。综合分析认为,复盐浓度在0.2%以下不会对扶芳藤的保护酶、MDA含量及电导率产生显著影响。

基于逆境效应的扶芳藤种植研究

通过干旱、光照、盐分三个逆境效应胁迫,研究不同逆境条件对扶芳藤[Euonymus fortunei(Turcz.)Hand.-Mazz]生长、产量及卫矛醇含量的影响。结果表明,腐叶肥与园土体积比为1∶1处理的扶芳藤产量为1.50 kg/m^(2)、卫矛醇含量为32.25 mg/g;夜间补以173~235 lx光照的扶芳藤产量为1.30 kg/m^(2)、卫矛醇含量为32.12 mg/g;用10 mL 0.5%NaCl灌根的扶芳藤产量为1.36 kg/m^(2)、卫矛醇含量为34.53 mg/g。正交试验最佳的逆境效应方案为:腐叶肥基质与园土体积比为1∶1,夜间补以173~235 lx光照,10 mL 0.5%NaCl灌根,在此逆境效应下得到的卫矛醇含量为32.97 mg/g。

扶芳藤对缺氧/复氧损伤后人心内膜微血管内皮细胞内皮素-1和一氧化氮水平的影响

目的:观察扶芳藤对缺氧/复氧(H/R)损伤后人心内膜微血管内皮细胞(HUMCE)内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的影响。方法:制备扶芳藤粗提取物;将试验用大鼠分为扶芳藤组、卡托普利组和空白组,采用中药药物血清法,制备含药大鼠血清干预实验细胞;建立HUMCE的H/R模型;实验随机分为:正常对照组、扶芳藤组、阳性对照组、模型对照组。通过Western blot法检测ET-1蛋白表达,硝酸还原酶法测定NO浓度。结果:与模型对照组比较,扶芳藤组、卡托普利组、正常组ET-1的蛋白水平显著降低(P<0.05),NO分泌显著增加(P<0.05);与扶芳藤组比较,卡托普利组ET-1蛋白水平显著升高(P<0.05),NO分泌显著减少(P<0.05)。结论扶芳藤可以上调H/R损伤后HUMCE的NO水平,下调ET-1蛋白表达,维持ET/NO平衡,从而保护HUMCE内皮功能。

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法分析扶芳藤叶挥发性成分

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法分析了扶芳藤叶挥发性成分,鉴定了90种化合物,主要挥发成分及其含量为:萜类(25种,45.82%)、酯类(20种,18.26%)、脂肪烃(20种,15.06%)、芳烃化合物(3种,7.31%)、酸酐(1种,4.91%)、酮类(4种,4.2%)、卤代烃类(7种,1.52%),为进一步开发和利用扶芳藤提供基础数据。