野马追水提物质量标准研究

目的制备野马追饮片水提取物,开展以出膏、浸出物、含量等为指标的质量标准研究。方法参考配方颗粒技术要求中相关的各项规定,制备10批次不同产地的野马追水提物,并研究了水提物的出膏率、含量及特征图谱测定方法。结果对10个批次野马追饮片水提取物的相关检测结果进行分析,建立了以黄酮类成分为指标的特征图谱分析方法,同时对共有色谱峰中的4个成分进行了色谱峰定位并指认,10批次野马追饮片水提物的出膏率为14.20%~19.60%,醇溶性浸出物:21.50%~34.61%,金丝桃苷转移率为:23.99%~35.74%。结论该方法精密度、稳定性和重复性良好,能客观反映野马追水提取物质量,为野马追的后续科研工作提供参考。

野马追化学成分及其抗炎活性

目的研究野马追Eupatorium lindleyanum DC.化学成分及其抗炎活性。方法野马追水提物通过大孔吸附树脂精制后的乙酸乙酯萃取部位,采用硅胶、C18柱、重结晶进行分离纯化,根据波谱数据对所得化合物结构进行鉴定,再采用ELISA法评价其抗炎活性。结果从中分离出9个化合物,分别鉴定为浙贝素(1)、梣皮树脂醇(2)、salicifoliol(3)、5-羟基-3,4-二甲基-5-戊基-2(5H)-呋喃酮(4)、3-(2-羟基-4-甲基丁基)-4-甲氧基苯乙酮(5)、松柏醇(6)、对羟基苯甲醛(7)、3-(羟甲基)-1,14,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-13-乙酸酯(8)、3-羟甲基-1,13,15-三羟基-7,11,15-三甲基-2,6,10-十六碳共轭三烯-14-乙酸酯(9)。化合物1~3在40μmol/L浓度时可抑制IL-6生成,抑制率分别为41.6%、74.7%、35.0%,其中化合物2的IC50值为1.17μmol/L。结论化合物1~7为首次从泽兰属植物中分离得到,而且化合物1~3具有抗炎活性,并以2最强。

中药野马追的研究进展

菊科植物野马追主产于江苏省盱眙县,具有化痰、止咳、平喘的功效,用于治疗慢性气管炎、支气管炎等呼吸系统疾病。本综述通过系统地查阅关于野马追的国内外相关文献,对野马追药材的分布与利用、药材质量标准、化学成分、药理作用与临床应用等方面的研究进行了阐述,希望能够让科研工作者全面而系统地认识野马追,并为其进一步深入的研究提供参考。

野马追的化学成分及其解热作用研究

从野马追(Eupatorium lindleyanum DC.)中分离得到6个化合物,通过波谱数据分析,分别鉴定为:香草酸(1)、正二十八烷酸(2)、β-谷甾醇(3)、胡萝卜苷(4)、蒙花苷(5)、5,8,4'-三羟基-7,3'-二甲氧基黄酮(6),其中化合物2、5和6为首次从该植物中分离得到。采用UPLC/Q-TOF-MS法,分析野马追乙醇提取物的化学成分,并考察野马追对LPS诱导的大鼠发热模型的解热作用及其机制。腹腔注射脂多糖(100μg/kg)法建立大鼠发热模型,记录灌胃给药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、7、8 h大鼠的体温变化,绘制体温曲线;测定8 h大鼠肝组织髓过氧化酶活性和血清中肿瘤坏死因子-α和白介素-6含量。研究发现模型组大鼠体温呈明显三相热变化趋势,在造模后4 h出现升温峰值(1.97℃),8 h后体温恢复正常;野马追醇提物显著地降低了大鼠体温峰值;同时有效地抑制了肝组织中髓过氧化酶活性,降低了血清中肿瘤坏死因子-α、白介素-6含量。

菊科植物林泽兰三萜化学成分的分离提取与结构

研究了菊科植物林泽兰(Eupatorium lindleyanum DC.)中丰富的三萜类化学成分,采用溶剂萃取和各种正反相色谱技术分离纯化,利用高分辨质谱,一维及二维核磁共振等技术鉴定其结构。共分离鉴定得到8个三萜类化合物,其中一个新三萜类化合物:eucalyptic acid(Ⅰ)、eucalyptic acid B(Ⅱ)、eucalyptolic acid(Ⅲ)、麦珠子酸(al-phitolic acid,Ⅳ)、桦木酸(betulinic acid,Ⅴ)、3β,30-二羟基-羽扇豆醇酸(3β,30-dihydroxyiup-20(29)-en-28-oic acid,Ⅵ)、3β-羟基-30-降羽扇豆烷-20-酮-28-酸(platanic acid,Ⅶ)、山楂酸(maslinic acid,Ⅷ)。所有化合物均为首次从该种植物中分离得到。

野马追类黄酮清除DPPH自由基活性研究

2,2-二苯基-1-苦肼基自由基（2,2-diphenyl-1-picry-hydrazyl radical,DPPH）分析法是一种筛选自由基清除剂的简便方法,本实验首先采用超声提取野马追类黄酮后,然后采用DPPH自由基分析法测定了野马追类黄酮清除自由基作用的强弱,用以评价实验样品的抗氧化能力。结果表明,野马追类黄酮对DPPH自由基有很强的清除活性且清除率与浓度之间有量效关系。在反应的前5m in,清除效果较快,之后变缓,30-50m in后达到平衡。DPPH自由基半清除剂量IC50为10.922μg/mL。

野马追类黄酮的超声提取及其抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上,采用Box-Behnken试验设计优化超声提取野马追类黄酮的最佳工艺参数,并研究野马追类黄酮对DPPH自由基的清除效果,最后与其他提取方法进行比较。结果表明:超声提取野马追类黄酮的最佳工艺参数为液料比11.3:1(mL/g)、超声温度58℃和超声时间29min,此时得率为1.142%;当野马追类黄酮质量浓度在6.556～32.78μg/mL范围内,其对DPPH自由基的清除率为46.90%～61.06%,且存在明显的量效关系。与其他提取方法比较,超声提取时间短、得率高。

超声-微波协同提取野马追中抗氧化活性成分

为了提高野马追提取物中抗氧化活性物质提取率,采用单因素和正交试验法,对超声-微波协同萃取野马追中抗氧化活性成分提取工艺条件进行了优化。结果表明:其最佳工艺参数为超声开启时,以体积分数20%的乙醇为溶剂,提取时间30 min,料液比(g/mL)为1∶30,微波功率为50 W。在优化条件下提取获得的野马追提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH.)清除作用IC50值为73.9 mg/mL,其总酚含量与抗氧化活性之间存在很强的相关性(R2=0.952 3)。与其他方法相比,超声-微波协同萃取法具有节省时间、节约能量、抗氧化活性成分收率高等优点。

野马追倍半萜内酯精制工艺的优化

目的优化野马追Eupatorium lindleyanum DC.倍半萜内酯精制工艺。方法以野马追内酯A、B含有量为指标,动态吸附及解吸附试验优化大孔树脂吸附工艺;以夹带剂(无水乙醇)用量、萃取压力、萃取温度为影响因素,倍半萜内酯提取率为评价指标,响应面法优化CO_2超临界萃取工艺。结果最优精制工艺条件为采用AB-8型大孔树脂,提取液以40 m L/min体积流量通过树脂柱,将吸附后的树脂依次用水、20%、40%、60%、80%乙醇各3 BV洗脱,收集60%~80%部分;最优CO_2超临界萃取工艺条件为夹带剂用量30%,萃取压力35 MPa,萃取温度45℃,萃取时间2 h,CO_2体积流量40 m L/min,野马追内酯A、B总含有量由0.56%增加到39.07%。结论该方法简单可行,可用于精制野马追倍半萜内酯。

野马追不同药用部位的质量初步评价

目的 对野马追 (Eupatorium lindleyanum DC.)不同药用部位进行初步质量评价。方法 采用HPL C法 ,测定野马追不同药用部位中槲皮素、山萘素、棕矢车菊素的含量。结果 一年生花、茎、叶中槲皮素、山萘素、棕矢车菊素的含量分别为 0 .735 m g/ g、0 .0 0 7m g/ g、0 .930 m g/ g;二年生花、茎、叶中槲皮素、山萘素、棕矢车菊素的含量分别为 0 .6 36 mg/ g、0 .0 2 2 mg/ g、1.12 7m g/ g;三年生花、茎、叶中槲皮素、山萘素、棕矢车菊素的含量分别为 1.134mg/ g、0 .0 6 3m g/ g、1.5 86 m g/ g。结论 槲皮素、山萘素、棕矢车菊素类成分主要分布在野马追的花和叶中 ,茎中含量较低 。

野马追中总黄酮的测定

采用冷浸法、加热回流法和超声法 3种提取方法提取了野马追中的总黄酮 ,用芦丁作为对照品 ,硝酸铝———亚硝酸钠紫外———可见分光光度法测定野马追中总黄酮含量 .在选定的实验条件下 ,芦丁的浓度和吸光度呈良好的线性关系 ,标准曲线的相关系数为 0 9999,测定的相对标准偏差为 1 2 7%～ 1 63 %,平均回收率为 98 2 0 %.该方法简便、快速、灵敏度高 ,并具有较好的精密度与准确度 ,适合中药总黄酮含量的测定 .结果显示 :野马追中含大量黄酮类化合物 ,含量在 2 %左右 ;不同提取方法比较 。

纤维素酶辅助提取野马追总黄酮的工艺研究

建立纤维素酶辅助野马追总黄酮的最佳提取工艺。以野马追为原料,首先研究了pH、液料比、酶浓度、酶解温度和酶解时间对得率的影响。在此单因素实验基础上,优化出了纤维素酶辅助提取野马追总黄酮的最佳工艺参数:pH 5.5、液料比12:1(mL/g)、酶浓度0.4%、酶解温度40℃和酶解时间1.5h,此时总黄酮的得率为1.436%。然后将纤维素酶辅助提取法与其它提取方法进行了对比,实验结果表明:纤维素酶辅助提取法的得率比水煎煮法高96.4%,比乙醇回流提取法高37.8%,且提取时间仅为1.5h,相比乙醇回流提取法缩短了1h。该方法效率高,耗能低,省时省材料,具有较高的实用价值。

过滤分离技术应用于中药提取液的实验研究

针对中药提取液固液分离的特点,以野马追提取液为研究对象,测定了药液与过滤有关的基本物性,得到了药液的粘度—温度变化趋势以及药渣的比阻与可压缩性系数,表明药液的粘度随温度的变化较大;形成的滤饼具有高可压缩性,因此过滤压力不宜过高。通过10种纸板过滤性能的测定,筛选出适合于本药液的过滤介质;并通过对比过滤前后药液的有效成分,证明选择合适的过滤介质与加压过滤不仅能够明显降低药液中杂质含量,还能保证其有效成分在过滤后有较高的保留率。为减少药液存放后沉淀的析出,实验中还加入极少量允许添加的生物酶,减少了沉淀的析出。这些实验结果优化了野马追提取液的分离工艺操作参数,对其他中药提取液的澄清也有一定的借鉴作用。

ICP-AES法测定盱眙野马追的微量元素

研究了用电感耦合等离子体原子发射光谱 (ICP -AES)同时测定野马追全草和花蕾中微量元素的方法。采用干法和湿法消解 :干法是先将样品 60 0℃高温灰化 ,再用浓硝酸溶解 ;湿法是用HNO3-HClO4 直接消解。结果表明 ,盱眙野马追中含有Fe、Al、Si等多种微量元素 ,其中Fe、Cu、Mn、Zn、Sr、Ni、Cr等是人体必需微量元素。对干法和湿法的测定结果进行了比较 ,得出用ICP -AES法测定野马追中的微量元素具有简单、快速、准确度高的优点。

野马追总生物碱提取工艺研究

野马追生物碱是野马追中主要的药效物质之一。本文在野马追总生物碱分析方法建立的基础上，开展了野马追总生物碱提取工艺的实验研究。建立了以盐酸川芎嗪为标准品，酸性染料染色法测定野马追总生物碱含量的方法。通过单因素实验，探讨了提取介质、溶剂浓度、提取时间、液固比、提取次数对野马追总生物碱提取率的影响。得到的较佳提取条件为：0．5％乙酸、90％乙醇的稀酸醇溶液，提取时间1h，液固比为8：1，提取次数2次。在此条件下，野马追总生物碱的提取率达到0．52％。

高速逆流色谱法分离野马追乙酸乙酯萃取物中三种倍半萜烯内酯

建立了应用高速逆流色谱(HSCCC)从野马追乙酸乙酯萃取物中分离纯化3种倍半萜烯内酯的方法.采用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:4:2:3)作为两相溶剂体系,从900mg野马追乙酸乙酯萃取物中分离得到3β-Hydroxy-8β-[4′-hydroxytigloyloxy]-costunolide 6.5 mg,野马追内酯A28.5mg和野马追内酯B29.3 mg,其纯度分别为92.5%,91.7%和93.9%.3种化合物的结构通过ESI-MS和1H NMR进行了鉴定.

柱前衍生化RP-HPLC测定中药野马追中的氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP HPLC)测定了江苏地产药材野马追茎叶及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色谱仪,liozosphezeC18柱,pH=7.2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测器,波长为Ex=340nm、Em=450nm,样品中的氨基酸在30min内得到分离和检测。结果表明:野马追茎叶及其花蕾中含17种氨基酸,游离氨基酸17种,总氨基酸含量分别为2.40%和6.51%,游离氨基酸含量分别0.185%和0.508%,半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高,其中7种为人体必需氨基酸。

野马追提取物化学成分的GC/MS分析研究

以乙醇为溶剂,用冷浸法、加热回流法和超声法提取中药野马追中的有效成分,并对其有效成分进行了气相色谱质谱联用分析。结果表明:用加热回流法提取中药的有效成分浸出率最高,用气质联用法鉴定出26个有效成分。此方法简单、快速、稳定、可靠,重现性好,适用于中药有效成分的化学分析。

用ICP—AES法测定中药野马追的微量元素

用电感耦合等离子体原子发射光谱 ICP—AES同时测定了野马追中的 Fe、Al、Si等 2 0种元素 ,用干法对样品进行处理。干法是先将样品 60 0℃高温灰化 ,再用浓硝酸消解。将 ICP— AES法用于野马追微量元素的测定具有简单、快速。

9省市19个产地野马追中2种活性成分测定及相关性分析

目的测定9省市19个产地野马追Eupatorium lindleyanum DC.中金丝桃苷、醇溶性浸出物并分析其相关性。方法用热浸法测定野马追中醇溶性浸出物含有量。野马追甲醇提取物的分析采用Waters Xbridge C18柱(4. 6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0. 2%醋酸水;体积流量1. 0 m L/min;检测波长255 nm;柱温26℃。并考察其与生长性状、生境因子间的相关性,用SPSS23. 0软件进行方差分析与聚类分析。结果金丝桃苷在0. 010 9～0. 065 4 mg/m L范围内线性关系良好,R2=0. 999 6,平均加样回收率99. 49%～101. 61%,RSD1. 67%～2. 21%。醇溶性浸出物、金丝桃苷含有量与株高、茎粗、叶长、叶宽、叶长宽比、经度间呈正相关,与纬度呈负相关; 19个产地野马追分为3个类群,其中类群Ⅰ以江苏、浙江种质为主,该类群植株较高,茎秆粗壮,叶片大而多狭长,醇溶性浸出物与金丝桃苷含有量较高。结论该方法操作简便、重复性好、准确度高,可用于野马追药材质量评价。