Apoptosis of human gastric carcinoma cells induced by Euphorbia esula latex

AIM: To investigate the effect of Euphorbia esula(E. esula) extract in inhibiting proliferation and inducing apoptosis in SGC-7901 cells.METHODS: E. esula extract at different concentrations was used to inhibit proliferation and induce apoptosis of human gastric carcinoma SGC-7901 cells. Inhibition of proliferation was detected with thiazolyl blue assay, and apoptosis was detected with fluorescence microscopy, transmission electron microscopy, and flow cytometry. The mechanisms were studied by measurement of caspase-3 and caspase-8 activities and Bax and Bcl2 m RNA expression.RESULTS: The thiazolyl blue assay showed that SGC-7901 cell viability and proliferation were inhibited significantly by E. esula extract in a timeand concentration-dependent manner. Fluorescence microscopy revealed that the cell nuclei showed the characteristic changes of apoptosis, such as uneven staining and chromatin marginalization. Some key features of apoptosis were also observed undertransmission electron microscopy, which included cellular shrinkage and the foaming or bubbling phenomenon. When the cells were analyzed by flow cytometry, a sub-G1 peak could be seen clearly. Spectrophotometric assay of caspase-3 and caspase-8 activities in the treated cells showed an approximately two-fold increase. Reverse transcriptase polymerase chain reaction showed that Bax m RNA expression was upregulated, while Bcl2 m RNA expression was downregulated.CONCLUSION: E. esula extract inhibited proliferation and induced apoptosis in SGC-7901 cells, in a caspasedependent manner, involving upregulation of Bax and downregulation of Bcl2.

乳浆大戟提取物对人肺癌细胞生长的影响

目的观察乳浆大戟提取物对体外培养的人肺癌细胞A549增殖的影响及其可能的作用机制。方法不同浓度的乳浆大戟提取物(0.2,0.4,0.8 g/L)作用于体外培养的A549细胞,MTT法观察乳浆大戟提取物对A549细胞增殖的影响;Hoechst33528和PI染色法观察细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术检测A549细胞的凋亡率变化;JC-1染色法观察细胞线粒体膜电位改变,RT-PCR检测bcl-2、bax的mRNA表达变化。结果乳浆大戟提取物抑制A549细胞的增殖,具有时间和剂量效应关系,0.8 g/L乳浆大戟提取物作用A549细胞48 h后抑制率为46.3%;流式细胞仪结果显示,乳浆大戟提取物作用48h后,可以诱导A549细胞凋亡,凋亡率可达48.4%;荧光显微镜下观察到线粒体膜电位下降;RT-PCR结果显示bcl-2的mRNA表达水平下调,bax的mRNA表达水平上调,其作用呈剂量效应关系。结论乳浆大戟提取物抑制A549细胞增殖是通过线粒体途径诱导A549细胞凋亡,可能的机制是上调bax及下调bcl-2的表达。

乳浆大戟抑制原代人胃癌多药耐药细胞增殖和诱导凋亡研究

目的:研究乳浆大戟抑制原代培养多药耐药人胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。方法:制备人胃癌多药耐药原代培养细胞,用不同稀释度的乳浆大戟提取液处理人胃癌多药耐药原代培养细胞,MTT实验观察细胞生长抑制现象,吖啶橙染色荧光显微镜观察凋亡细胞的核形态改变并测定凋亡指数,流式细胞术检测细胞凋亡率;以不加乳浆大戟提取液的细胞作对照。结果:乳浆大戟对人胃癌多药耐药原代培养细胞有增殖抑制作用,该作用有时间和浓度依赖性。乳浆大戟处理后的人胃癌多药耐药原代培养细胞,荧光显微镜下观察可见细胞核固缩、染色不均匀和核碎片等细胞凋亡的形态学改变,凋亡形态显示的凋亡指数和流式细胞术显示的凋亡率均明显上升,均有时间和浓度依赖性;以上作用与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:乳浆大戟提取液具有抑制人胃癌多药耐药原代培养细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用。

猫眼草提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞抑制作用的研究

目的:观察猫眼草提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用,为烧伤后增生性瘢痕的治疗提供实验依据。方法:体外培养烧伤后的人增生性瘢痕成纤维细胞,加入不同浓度的猫眼草提取物,24h后观察细胞形态学,以LDH为指标,观察细胞毒性,用MTT法检测其增殖活性。结果:不同浓度的猫眼草提取物均能改变成纤维细胞形态,抑制细胞增殖,浓度在500μg/mL以下无明显的细胞毒作用。结论:猫眼草提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制作用,并呈剂量依赖关系,具有防治增生性瘢痕的应用前景。

紫茎泽兰对乳浆大戟的化感作用研究

【目的】为防除乳浆大戟提供理论参考,也为紫茎泽兰新型仿生农药先导化合物的开发和利用奠定基础。【方法】以化感性强的紫茎泽兰和乳浆大戟为供、受体材料,利用培养皿滤纸法研究不同部位和不同浓度紫茎泽兰水浸提液对乳浆大戟种子萌发和幼苗生长的影响。【结果】紫茎泽兰水浸提液对乳浆大戟种子的萌发和幼苗生长均有显著抑制作用,其对种子萌发的抑制作用与水浸提液浓度和生长部位无关;紫茎泽兰水浸提液对乳浆大戟种子萌发幼苗的影响是抑制其胚根和胚芽生长,且对胚根的抑制作用明显强于对胚芽。【结论】乳浆大戟种子萌发和幼苗生长受紫茎泽兰影响较大,需通过进一步对紫茎泽兰水溶物化学成分进行分析,并找出影响乳浆大戟的物质成分及浓度,实现"以草治草"的目的。

乳浆大戟提取物诱导HeLa细胞凋亡及其机制研究

目的研究乳浆大戟提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用及其分子机制。方法采用MTT法和克隆形成实验检测乳浆大戟提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖抑制作用;利用Annexin V-FITC/PI双染和DAPI细胞核染色法检测乳浆大戟提取物诱导细胞凋亡情况;线粒体膜电位检测凋亡细胞的线粒体膜电位变化情况;流式细胞仪和Westernblot法分别分析细胞周期及细胞周期蛋白变化情况。结果①乳浆大戟提取物以时间和剂量依赖的方式显著抑制宫颈癌HeLa细胞的生长和增殖;②乳浆大戟提取物能使宫颈癌HeLa细胞线粒体膜电位显著降低,诱导细胞发生凋亡性细胞死亡;③乳浆大戟提取物能够显著阻滞宫颈癌HeLa细胞在G0/G1期,降低Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达水平,增加P21的表达水平。结论乳浆大戟提取物通过下调Cyclin D1、Cyclin E和CDK4的表达和上调P21的表达,使HeLa细胞阻滞在G0/G1期,进而显著抑制宫颈癌HeLa细胞生长和增殖,诱导细胞依赖线粒体通路的凋亡性死亡。

江苏3种大戟属野生植物总脂含量及脂肪酸组分分析

利用索氏抽提法提取并采用气相色谱法测定了大戟属能源植物续随子的江苏野生近缘种甘肃大戟、乳浆大戟和钩腺大戟不同组织总脂含量、种子中总脂的脂肪酸组成及GC含量。结果表明,其茎、叶、种皮、种子及块根中,种子的总脂含量最高,在3个物种中分别为37.29%、24.50%和24.85%,其次是叶和茎,种皮含量最小;甘肃大戟种子的总脂含量高达37.29%,具有较好的开发潜力;3种植物种子总脂的脂肪酸组成中二十碳以下(多数为十八碳)的脂肪酸总和均为90%以上,甘肃大戟种子的总脂中二十碳以下的脂肪酸的总和甚至超过99%,在碳链长度上与理想的生物柴油组分接近,但3种大戟种子的总脂中亚麻酸比例在53%以上,生产出的生物柴油稳定性较差。

乳浆草药材质量标准的建立

目的:建立乳浆草药材的质量标准。方法:采用薄层色谱法对乳浆草药材进行定性鉴别;采用HPLC法测定乳浆草药材中槲皮素含量,色谱柱为Alltima^(TM)C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(30∶70),流速为1.0 ml·min^(-1),检测波长为360 nm,柱温为35℃。结果:TLC色谱中,供试品溶液在与对照药材色谱相同的位置上显相同颜色的斑点。HPLC法中槲皮素浓度在3.194~102.208μg·ml^(-1)范围内时与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为99.0%,RSD=1.68%(n=6)。结论:该方法快速、简便,结果准确,可用于乳浆草药材的质量控制。

中药猫眼草抗癌活性成分研究

目的:基于"风痰入里成瘤说"理论探究中药猫眼草的抗癌作用及物质基础,研究中药猫眼草提取物的化学成分,为进一步研究其抗癌的活性成分提供依据。方法:采用正相硅胶柱、C18反相柱、高效液相色谱、SephadexLH-20等多种色谱手段对猫眼草95%乙醇提取物进行化学成分分离,并根据理化性质和波谱数据鉴定各化合物的结构。对分离所得化合物,采用HONE-1(未分化型人鼻咽癌细胞)、MCF-7(人乳腺癌细胞)和MGC-803(人胃癌细胞)进行抗癌活性评价。结果:从猫眼草中分离鉴定得到6个化合物,分别为:esulone A(1)、mesulones C(2)、kanesulone B(3)、supinenolone E(4)、supinenolone E acetate(5)和cycloart-(23Z)-ene-3β,25(6)。化合物4、5和6为首次从大戟属植物中分离得到。结论:三萜类化合物4、5和6具有潜在的抗鼻咽癌和乳腺癌活性(10μmol/L时的抑制率大于50%),其中化合物6活性最好,对HONE-1和MCF-7细胞抑制增殖活性分别为5.2μmol/L和6.6μmol/L。

乳浆大戟提取物对人肺癌细胞A549增殖的影响

目的观察乳浆大戟提取物对体外培养的人肺癌细胞A549增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法将0、0.2、0.4、0.8 g/L的乳浆大戟提取物作用于体外培养的人肺癌细胞A549,采用MTT法观察乳浆大戟提取物对A549细胞增殖的影响;PI染色法观察凋亡细胞的形态;流式细胞仪检测A549细胞的凋亡率。结果乳浆大戟提取物对体外培养的A549细胞增殖有抑制作用,并具有浓度依赖关系。0、0.2、0.4、0.8 g/L乳浆大戟提取物作用A549细胞48 h的凋亡率分别是5.33%±0.67%、15.53%±0.15%、21.42%±1.01%、46.57%±1.76%,三者间两两比较,P均<0.05。结论乳浆大戟提取物可通过诱导A549细胞凋亡而抑制细胞增殖。

乳浆大戟抑制人宫颈癌细胞增殖迁移和诱导细胞凋亡的研究

目的研究乳浆大戟抑制人宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭和诱导细胞凋亡的作用并初步探讨其作用机制。方法用不同稀释度的乳浆大戟提取液处理人宫颈癌Si Ha细胞,MTT实验观察细胞生长抑制现象,吖啶橙染色荧光显微镜观察凋亡细胞的核形态改变并测定凋亡指数,流式细胞术检测细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力和侵袭能力,用分光光度法检测caspase-3和caspase-9的表达情况。结果乳浆大戟对人宫颈癌Si Ha细胞有增殖抑制作用,该作用有时间和浓度依赖性。乳浆大戟处理后的人宫颈癌Si Ha细胞,凋亡指数和凋亡率均显著上升,均有时间和浓度依赖性。Transwell法检测显示,乳浆大戟提取液处理后的Si Ha细胞,迁移能力和侵袭能力显著下降。分光光度法检测发现,乳浆大戟处理后的Si Ha细胞中,caspase-3和caspase-9均表达增强。结论乳浆大戟提取液具有抑制人宫颈癌Si Ha细胞增殖和诱导细胞凋亡的作用,其作用通路有caspase-3和caspase-9的参与。

乳浆大戟增加多药耐药胃癌细胞对化疗药敏感性的研究

目的研究乳浆大戟增加人胃癌多药耐药细胞对化疗药物敏感性的作用。方法用MTT实验研究乳浆大戟对阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞生长抑制作用的影响,并与SGC7901细胞作比较;测定乳浆大戟作用下阿霉素和紫杉醇对SGC7901细胞和SGC7901/ADR细胞的IC50,并作比较。结果乳浆大戟能增加阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞的生长抑制作用(P<0.01),作用具有浓度依赖性(P<0.05)。乳浆大戟对阿霉素和紫杉醇抑制SGC7901细胞的IC50没有显著性的影响(P>0.05),但能够显著性地降低阿霉素和紫杉醇对SGC7901/ADR细胞的IC50(P<0.01),该作用亦具有浓度依赖性(P<0.05)。结论乳浆大戟提取物能够增加人胃癌多药耐药细胞SGC7901/ADR对化疗药物阿霉素和紫杉醇的敏感性。

乳浆大戟中黄酮类化学成分研究

研究乳浆大戟Euphorbia esula L.的化学成分。利用色谱技术进行分离、纯化,通过波谱解析结合理化性质鉴定化合物的结构。从乳浆大戟乙酸乙酯提取物分离得到3个单体化合物,分别鉴定为槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(1)、山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、槲皮素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)。

辽宁内蒙乳浆大戟草天敌的调查研究

乳浆大戟是北美大平原地区的重要害草。1987年在辽宁、内蒙进行的中美联合考察发现,该草在辽宁生长矮小,分布零散,天敌群落不丰富,而在内蒙则较粗壮,形成灌丛,有较丰富的天敌群落。在内蒙发现5种重要的昆虫天敌及2种具有应用前景的锈病菌,有可能成为控制北美乳浆大戟为害的有效天敌。这是首次中外科学家在我国合作进行杂草生防调查研究。

乳浆大戟植物杀虫水乳剂对枸杞蚜虫的毒力测定及田间防效

[目的]评价新型植物源农药乳浆大戟植物杀虫水乳剂对枸杞蚜虫的室内杀虫活性和田间防治效果。[方法]分别采用浸叶法和常规喷雾法进行室内毒力测定和田间药效试验。[结果]乳浆大戟植物杀虫水乳剂对枸杞蚜虫24h的LC50值为0.3977mg/L;在剂量为3000、6000ga.i./hm2时,药后1、3、5、7d,防效分别超过了72.0177%、59.953 9%、61.934 3%、65.016 1%。[结论]乳浆大戟植物杀虫水乳剂对枸杞蚜虫表现出很高的毒杀活性和良好的田间防治效果,且对作物和天敌安全。

大戟天牛对乳浆大戟生物控制的研究

大戟天牛是专食乳浆大戟的天敌昆虫，幼虫以蛀食大戟茎杆的木髓部为食，引起茎杆的枯黄死亡，减少根部的贮存物，最终导致植株的全部死亡；对地上部分枯黄死亡的大戟植株检查发现，６８％是由大戟天牛幼虫蛀食造成。该虫专食性强，耐饥能力高，寿命也长。

乳浆大戟的化学成分(英文)

目的:研究乳浆大戟(Euphorbia esula)地上部分的化学成分。方法:利用反复硅胶和凝胶LH-20柱层析进行分离和纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果:分离并鉴定出3个二萜化合物,分别为3,20-dibenzoyloxyingenol(1),3,16-dibenzoyloxy-20-deoxyingenol(2)和3,13,16-tribenzoyloxy-20-deoxyingenol(3)。结论:化合物1为新二萜化合物,3为本植物中首次报道,2和3对Namalwa细胞显示弱的细胞毒活性。

乳浆大戟提取物的杀虫抑菌活性研究

生物农药开发前景广阔,乳浆大戟作为一种中草药,分布广、资源丰富,可利用其自身的毒性开发生物农药。以75%乙醇加热萃取法提取乳浆大戟中的活性成分,进行了杀虫抑菌生物活性试验,为乳浆大戟开发为新型生物农药提供科学依据。试验结果表明:提取物对果蝇及桃蚜具有良好的毒杀活性,提取物对果蝇的半致死量LC50为75.51 mg/m L,果蝇死亡率与提取物浓度呈正相关,对桃蚜毒性的半致死量LC50为9.35mg/m L,当提取物浓度为50 mg/m L时对桃蚜的校正死亡率为85.59%;提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌均有一定的抑菌作用,其中对枯草芽孢杆菌抑制作用较强,最大抑菌圈直径为1.53 cm;25mg/m L的提取物对玉米大斑病菌落扩展有明显抑制作用,抑菌率45.28%,对盆栽玉米苗大斑病的防治效果为36.63%。

中药乳浆大戟抑制人胃癌多药耐药细胞增殖迁移侵袭和诱导凋亡的研究

本文旨在研究中药乳浆大戟抑制多药耐药人胃癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用,以及诱导细胞凋亡的作用及其作用通路。用不同浓度的乳浆大戟提取液处理人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,MTT试验观察细胞增殖抑制情况,Hochest33528染色荧光显微镜观察凋亡细胞核形态并测定凋亡指数,流式细胞术测定细胞凋亡率,Transwell法检测细胞迁移能力和侵袭能力,分光光度法检测caspase-3和caspase-9的酶活性表达,Western blotting检测细胞色素c的亚细胞分布。结果发现,乳浆大戟提取液对人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞有明显的增殖抑制作用,该作用具有时间和浓度依赖性。乳浆大戟提取液处理的人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞,凋亡指数和凋亡率均比对照组显著升高,并有时间和剂量依赖性;但添加了caspase酶抑制剂的细胞,凋亡指数没有明显上升。Transwell法检测显示,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞,迁移能力和侵袭能力显著下降。分光光度法检测发现,乳浆大戟提取液处理后的SGC7901/ADR细胞中,caspase-3和caspase-9表达均增加,与对照组有明显差异。Western blotting检测显示,细胞色素c在线粒体中的分布下降,在细胞质中的分布上升(即细胞色素c从线粒体向细胞质逸出)。研究表明,乳浆大戟提取液具有抑制人胃癌多药耐药SGC7901/ADR细胞增殖、抑制细胞迁移侵袭和诱导细胞凋亡的作用;乳浆大戟提取液诱导细胞凋亡的作用有细胞色素c、caspase-9和caspase-3的参与,提示内源性或线粒体凋亡通路。