生物炭配施化肥对圆齿野鸭椿果实产量及品质的影响

[目的]了解生物炭配施化肥对圆齿野鸦椿果实产量及品质的影响。[方法]选择4年生圆齿野鸦椿人工林,采用5因素3水平正交试验设计,测定生物炭配施氮肥、磷肥、钾肥、微肥对果皮产量、种子产量、含油率、总黄酮及总三萜含量的影响。[结果]18个处理中,T8处理(生物炭120 g·株^(-1)、氮肥54.5 g·株^(-1)、磷肥89.3 g·株^(-1)、钾肥33.0 g·株^(-1)、微肥稀释2000倍)的果皮产量、种子产量、总黄酮含量、总三萜含量、种子油产量均最高。极差分析表明,生物炭对总三萜含量影响较大,中等水平生物炭更有利于总三萜含量的提高。[结论]T8处理为本试验最适配施方案,对圆齿野鸦椿人工林高效培育具有参考意义。

生物炭配施氮磷钾与微肥对圆齿野鸦椿色原酮碳苷的影响

为探讨施肥对圆齿野鸦椿果皮高抗炎物质色原酮碳苷(5,7-二羟基-2-甲基-色原酮-8-c-β-d-葡萄糖苷和5,7-二羟基-2-甲基-色原酮-6-c-β-d-葡萄糖苷)含量的影响,采用L18(35)正交试验设计,选取4年生圆齿野鸦椿幼树,设置生物炭、氮、磷、钾元素肥与微肥施肥配比,并设空白对照组,共19个处理。经方差、相关性、线性回归和隶属函数等分析,结果表明:在本研究条件下,元素肥单施效果不明显,钾肥与微肥使isobiflorin(B1)和biflorin(B2)含量较大;配施时,B1、B2含量在T16处理时最大,分别为24.39、24.93 mg·g^(-1),与隶属函数分析结果一致;B1和B2含量相关性为0.999,显著度<0.001,一元线性回归方程为B2=-0.082+1.026×B1。综上,T16处理是色原酮高含量药用林培育的施肥方案,圆齿野鸦椿存在体内互相转换的可能。本研究为其科学培育与利用提供理论与技术支持。

涝渍胁迫对圆齿野鸦椿苗期生长及其叶片生理的影响

以1年生圆齿野鸦椿幼苗为试材,研究涝渍胁迫对圆齿野鸦椿苗期生长及其叶片生理的影响。结果表明:随着胁迫时间的延长,叶片相对含水量逐渐下降;质膜相对透性和可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛的含量均是先逐渐增大后减小;苗木总生物量呈下降趋势。

低温层积过程中圆齿野鸦椿种子的生理生化变化

通过对不同层积时间圆齿野鸦椿种子萌发及其生理生化变化情况的研究,得出种皮对圆齿野鸦椿种子萌发具有很强的机械障碍,仅通过低温层积不能完全解除种皮的机械障碍。低温层积配合60℃温水浸种能够有效解除休眠。同时通过实验发现,当采取播前温水处理打破种皮机械障碍时,以低温层积90~120d为宜,层积时间过长会导致萌发率降低。通过实验,对低温层积不同时间的圆齿野鸦椿种子生理生化变化情况进行测定,结果表明：随着层积时间增加,可溶性糖含量与G-6-PDH和6-PGDH联合酶活性波动上升,而淀粉含量波动下降。说明种子内含物质相互转化,逐步解除休眠,同时种子呼吸代谢中戊糖磷酸途径所占比重上升。POD活性先逐渐上升,在120d后活性下降,笔者认为这可能是导致层积120d后种子萌发率降低的主原因。

圆齿野鸦椿种子内含物的提取·分离以及生物测定

[目的]研究圆齿野鸦椿种子内含物的成分及作用。[方法]以圆齿野鸦椿种子为材料,对其内含物进行提取、分离,并进行白菜籽萌发试验。[结果]不同时期采集的圆齿野鸦椿种子的内、外种皮及胚含有不同种类及浓度的萌发抑制剂。[结论]圆齿野鸦椿种子外种皮、内种皮及胚中抑制萌发物质的存在是引起其休眠的原因之一。

多效唑与截干高度对圆齿野鸦椿矮化效果的影响

以3年生圆齿野鸦椿为试验材料,探索不同含量多效唑(0、250、500、750、1 000 mg·L^-1)对圆齿野鸦椿不同截干高度(30、55、80 cm)的矮化效果及观赏性的影响.结果表明,30 cm截干,随着多效唑含量的提高,圆齿野鸦椿幼树株高、节间距和枝条矮化显著;55、80 cm截干,多效唑含量为750、1 000 mg·L^-1时矮化效果显著;30、80 cm截干,叶绿素、可溶性蛋白、可溶性糖含量随着多效唑含量的提高均呈先升高后降低的趋势,且均高于对照;500 mg·L^-1多效唑处理,叶绿素和可溶性蛋白含量达到最大值;30 cm截干,丙二醛含量均显著高于对照,500、1 000 mg·L^-1多效唑处理时MDA含量降至最低;500 mg·L^-1多效唑处理下超氧化物歧化酶含量最高.综合考虑圆齿野鸦椿的生长特性和观赏价值,截干30 cm,1 000 mg·L^-1多效唑处理可通过调节圆齿野鸦椿幼树的生物量分配、细胞渗透性和抗氧化等,有效改善其生长和生理状况,得到株型娇小、观赏价值高的植株.

圆齿野鸦椿叶及枝化学成分初步研究

目的:采用系统预试法对圆齿野鸦椿叶及枝条可能的化学成分进行预试验,初步探索圆齿野鸦椿叶及枝条的化学成分。方法:采用试管反应法、纸反应法,对圆齿野鸦椿叶及枝条水、无水乙醇提取物进行初步研究,通过多种指示剂和显色剂的颜色反应或沉淀反应,对圆齿野鸦椿叶及枝条可能含有的化学成分进行初步研究。结果:圆齿野鸦椿叶及枝条可能含有生物碱、皂苷、醌类、黄酮类、酚类、香豆素、多糖、鞣质以及甾体和三萜类等化学成分。结论:初步确定圆齿野鸦椿叶及枝条含有多种有效成分,为圆齿野鸦椿叶及枝条的进一步开发利用提供了试验基础。

基质与植物生长调节剂对圆齿野鸦椿扦插生根的影响

2016年在福建省洋口国有林场来舟管护站堆头苗圃,以圆齿野鸦椿当年生半木质化枝条为插穗,研究扦插基质与植物生长调节剂种类、浓度、浸泡时间对圆齿野鸦椿扦插生根质量的影响。结果表明:扦插基质是影响扦插生根率、≥5 cm的Ⅰ级侧根数、最长Ⅰ级侧根根长的最主要因素;植物生长调节剂种类与浓度对扦插生根率、最长Ⅰ级侧根根粗影响显著;植物生长调节剂浸泡时间主要影响扦插生根率。依据生根质量指数筛选出2个适宜圆齿野鸦椿扦插生根基质与植物生长调节剂组合方案:以黄心土∶素沙(2∶1)为基质,ABT 50 mg·L^(-1)溶液浸泡插穗180 min;以黄心土为基质,NAA 50 mg·L^(-1)溶液浸泡插穗360 min。生根率、≥5 cmⅠ级侧根数、最长Ⅰ级侧根长、最长Ⅰ级侧根根粗分别在65.5%、3.73条、4.36 cm、1.48 mm以上。

圆齿野鸦椿营养器官的解剖学观察

圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata)为省沽油科野鸦椿属常绿小乔木,对圆齿野鸦椿根、茎、叶等营养器官的显微结构进行了解剖学观察,结果表明,圆齿野鸦椿的根为三原型;茎由表皮、皮层、维管柱组成,表皮的厚角组织细胞3～4层,这对扦插生根有一定影响;叶柄组织类似茎的初生结构;叶脉两面突起、韧皮扇形。

圆齿野鸦椿果皮成分及抑菌活性研究

为探究圆齿野鸦椿(Euscaphis konishii Hayata)果皮提取物对瓜果霉腐菌的抑制作用,本研究依据生物活性追踪法,并结合多种色谱分离技术与波谱鉴定手段从活性部位中分离鉴定18个化合物,分别为(7 S,8 R)-二氢脱氢二松柏醇9-O-D-吡喃葡萄糖苷(1)、楝叶吴萸素B(2)、(7 R,8 R)-threo-7,9,9′-三羟基-3,3′-二甲氧基-8-O-4′-新木脂素4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、illiciumlignan B(4)、异鼠李素(5)、山奈酚(6)、槲皮素(7)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(8)、异鼠李素3-O-β-D-芸香糖苷(9)、夏佛托苷(10)、木樨草素-6-C-β-D-葡萄糖苷-8-C-α-吡喃阿拉伯糖苷(11)、对羟基苯甲醛(12)、香草酸(13)、[R-(R^*,R^*)]-(1 R)-3-[(4 R)-4-羟基-2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-基]-1-甲基丙基-β-D吡喃葡萄糖苷(14)、(3 E)-4-[(3 R,4 R,5 R)-4-(β-D-吡喃葡糖氧基)-3,5-二羟基-2,6,6-三甲基-1-环己烯-1-基]-3-丁烯-2-酮(15)、长春花苷(16)、1-(4-乙基苯基)-1,2-乙二醇(17)、黑麦草内酯(18)。其中,除化合物6~8和12~13外,均为首次从该属植物中分离得到。此外,化合物1、9、10、11对瓜果霉腐菌具有较好的抑制作用,其EC 50在56.06~123.94μM之间。其中,化合物9对瓜果霉腐菌菌丝抑制的EC 50值为56.06μM,与阳性对照药丁子香酚活性相当。本研究首次发现圆齿野鸦椿果皮提取物对瓜果霉腐菌具有较好的抑制作用,并说明了黄酮碳苷类化合物是该植物的重要成分。

圆齿野鸦椿醇提物抗肝癌作用研究

目的:探讨圆齿野鸦椿醇提物的抗肝癌活性。方法:制备圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子的乙醇提取物,采用MTT法体外检测这4种醇提物对人肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和BEL-7404的增殖抑制作用,流式细胞法检测上述4种醇提物体外诱导HepG2细胞凋亡的情况,采用小鼠肝癌H22移植瘤模型进行体内抑瘤实验,探讨圆齿野鸦椿各部位醇提物的抗肝癌效果。结果:圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子的乙醇提取物处理细胞48 h后,发现果皮醇提物对HepG2、SMMC-7721和BEL-7404肝癌细胞的抑制效果最好,其半数抑制浓度IC50可分别达到108.34、106.94、114.79μg·m L-1。采用质量浓度为200μg·m L-1的圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子醇提物,处理HepG2细胞48 h,均可诱导HepG2细胞凋亡,其中以果皮醇提物的效果最好。体内实验以圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子醇提物200 mg·kg-1对H22移植瘤小鼠灌胃给药14 d,其抑瘤率可分别达到47.8%、44.9%、42.5%和40.6%。结论:圆齿野鸦椿的乙醇提取物具有良好的抗肝癌作用。

圆齿野鸦椿枝条化学成分及其抗炎活性研究

对圆齿野鸦椿枝条化学成分进行研究,从中分离得到15个化合物,通过理化性质与波谱分析分别鉴定为1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-2[4-(4′-羟丙基)-2′-甲氧基苯氧基]-1,3-丙二醇(1),acernikol(2),罗汉松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(3),罗汉松脂素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(4), 2-[4-(1-羟丙基)-3-甲氧基苯氧基]-1,3-丙二醇(5), 5,7-二羟基-2-甲基色原酮(6), 5,7-二羟基-2-甲基色原酮-6-C-β-D-葡萄糖苷(7), 5,7-二羟基-2-甲基色原酮-8-C-β-D-葡萄糖苷(8),槲皮素-3-O-α-L-阿拉伯糖(9),没食子酸(10), 4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(11),硬脂酸(12), 19α-羟基熊果酸(13),β-谷甾醇(14)和胡萝卜苷(15)。除化合物7、8、14和15外,其他化合物均为首次从该属植物中分离得到。抗炎活性评价结果显示:当浓度为10μmol/L时,化合物2和4对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞白介素-6的分泌抑制率分别为(63.4±7.1)%和(58.6±4.6)%,显示中等抑制活性,略低于阳性对照药地塞米松的(85.8±5.3)%。

圆齿野鸦椿朔果着色及呈色分析

为探讨圆齿野鸦椿朔果果皮色素的变化及其呈色过程,以不同发育时期圆齿野鸦椿的果皮为试材,首先进行果实颜色的数字化描述,然后对叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮和花青素含量进行测定及分析。结果表明:圆齿野鸦椿果实逐渐变红与典型色域的CMYK模式中M(洋红)、Y(黄色)值关系密切,M值与叶绿素和类胡萝卜素含量呈显著负相关,而与花青素含量呈显著正相关;在果实发育过程中,叶绿素和类胡萝卜素的含量均呈逐渐下降的趋势,且两者呈显著正相关;花青素则出现逐渐上升的趋势,与其它色素含量呈负相关;类黄酮含量出现降升降的S型变化趋势,与叶绿素和类胡萝卜素均呈显著正相关,而与花青素呈负相关。综上所述,圆齿野鸦椿果实由绿转红的过程中,伴随着叶绿素、类胡萝卜素的降解和花青素的积累。

圆齿野鸦椿醇提物抗炎、镇痛作用的研究

目的:探讨圆齿野鸦椿醇提物的抗炎、镇痛活性。方法:制备圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子的乙醇提取物,采用小鼠二甲苯致耳廓肿胀法和醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加法,观察圆齿野鸦椿醇提物的抗炎作用;采用小鼠热板法和冰醋酸扭体法,观察圆齿野鸦椿醇提物的镇痛作用。结果:与对照组比较,圆齿野鸦椿果皮、枝条、叶片和种子的乙醇提取物均可显著抑制二甲苯致小鼠的耳肿胀和醋酸所致的毛细管通透性增加,并能缓解由热板法和冰醋酸所致的疼痛(P<0.05),其中圆齿野鸦椿果皮醇提物的效果最好。结论:圆齿野鸦椿的乙醇提取物具有良好的抗炎、镇痛作用。

圆齿野鸦椿果实总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用

探讨圆齿野鸦椿果实总黄酮(TFEP)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞炎症反应的抑制效果.利用一氧化氮(NO)试剂盒检测不同浓度TFEP对LPS诱导RAW264.7细胞释放NO含量的变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定PGE2、白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌物的表达;实时定量逆转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α和IL-6 mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(western blot)检测炎症NF-κβ/Stat3信号通路相关蛋白的表达.结果表明,TFEP对细胞产生NO的半数抑制浓度(IC50)为78.47μg·mL^-1,且各试验浓度下对RAW264.7细胞增殖均无明显抑制作用,表现出低毒性和强抗炎活性.与LPS模型组相比,TFEP能显著降低LPS诱导的NO的分泌;抑制iNOS、TNF-α和IL-6 mRNA的表达,抑制炎症NF-κβ/Stat3信号通路的激活.因此,圆齿野鸦椿果实总黄酮对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应有良好的抑制作用.

野鸦椿酸对人肝癌细胞的抑制作用及机理研究

探讨圆齿野鸦椿中野鸦椿酸(EA)对人肝癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制研究。从圆齿野鸦椿果皮中提取得到EA,通过培养人肝癌细胞Hep G2细胞,以MTT法分析EA对Hep G2细胞增殖的影响,流式细胞术评价不同浓度(20、40、80μmol/L)的EA对Hep G2细胞的凋亡状态和周期分布情况,细胞划痕、Transwell小室实验考察对Hep G2细胞侵袭转移能力的变化,用Western blot法和荧光定量PCR法检测野鸦椿酸对上皮-间质转化(EMT)相关标志物E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9的蛋白和mRNA表达的影响。结果显示,EA抑制人肝癌细胞Hep G2细胞的增殖,24、48、72 h的IC50分别为32. 16±4. 58、26. 45±3. 79、和16. 76±4. 01μmol/L。随EA浓度的增大,细胞的凋亡率逐渐升高,且发生显著的G0/G1期阻滞。EA可降低Hep G2细胞的侵袭和迁移能力,上调E-Cadherin的蛋白和mRNA的水平,下调N-Cadherin、Vimentin、MMP-2和MMP-9的蛋白和mRNA表达。EA抑制人肝癌细胞增殖和侵袭转移能力,可能与其调控EMT相关信号通路有关。

圆齿野鸦椿不同部位类黄酮与总三萜含量的比较及采收

[目的]比较圆齿野鸦椿不同部位的类黄酮与总三萜含量,以筛选最佳药用部位与采收期。[方法]用超声法提取,并采用紫外分光光度计法测定叶片、根、果皮、种子和枝条中的类黄酮及总三萜含量。[结果]圆齿野鸦椿不同部位的类黄酮含量依次为:叶片>枝条>果皮>根>种子,总三萜含量依次为:叶片>果皮>种子>枝条>根,两者均以叶片含量最高。3—12月叶片类黄酮及总三萜测定表明,均以11月份含量最高,分别为17.68、37.73 mg·g^-1。[结论]圆齿野鸦椿叶片的类黄酮及总三萜含量最高,是利用的最佳部位,同时适宜采收期为10—12月,以11月份最佳。

圆齿野鸦椿籽油提取工艺及脂肪酸组分分析

为高效利用圆齿野鸦椿籽油,采用正己烷加热回流提取圆齿野鸦椿籽油,分别考察了提取时间、提取温度和正己烷-圆齿野鸦椿籽粉末比(液料比)对圆齿野鸦椿籽油提取得率的影响。以单因素试验的结果为依据,运用Design-Expert8.0.6软件进行Box-Behnken响应面设计及数据分析,进一步对回流提取圆齿野鸦椿籽油的工艺进行优化。研究结果表明:各因素影响提取得率的主次顺序为提取时间、提取温度、液料比;最佳提取工艺是加热回流提取时间62.04min,提取温度80.2℃,液料比10.14∶1(mL∶g),该条件下提取得率的预测值为5.84%,通过验证实验发现,提取得率实验值为(5.85±0.001)%,与预测值接近,两者的相对误差为0.17%,说明响应面优化的圆齿野鸦椿籽油提取工艺稳定、可行。同时,对圆齿野鸦椿籽不同部位提取得到的油脂进行分析,种仁出油率为(35.6±0.7)%,种皮出油率为(2.1±0.15)%,对籽油成分进行分析,检测出18种脂肪酸成分,其中不饱和脂肪酸达到65.52%,亚油酸的量最高,达45.64%。

圆齿野鸦椿果皮总三萜的提取工艺及其抗肿瘤活性

目的:探究圆齿野鸦椿果皮总三萜的提取工艺及其抗肿瘤活性。方法:利用超声提取法进行圆齿野鸦椿果皮总三萜的提取,通过单因素试验和响应面法对提取工艺进行优化,采用噻唑蓝比色法(MTT)检测果皮总三萜对肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞A549、乳腺癌细胞MCF-7和结肠癌细胞HCT-116的增值抑制作用。结果:圆齿野鸦椿果皮总三萜提取的最佳工艺条件为提取时间70 min、超声功率400 W、乙醇体积分数67%和液料比35∶1,此条件下的提取率可高达9.63%。圆齿野鸦椿果皮总三萜对HepG2、A549、HCT-116和MCF-7细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(87.56±1.35)、(92.38±0.96)、(89.95±1.64)、(97.30±1.27)μg·mL^-1。结论:采用响应面法获得圆齿野鸦椿果皮总三萜的最佳提取工艺条件,并以总三萜产物对多种肿瘤细胞进行体外抗肿瘤实验,发现圆齿野鸦椿果皮总三萜具有良好的抗肿瘤活性。

野鸦椿与圆齿野鸦椿HPLC指纹图谱比较研究

目的:建立野鸦椿、圆齿野鸦椿的HPLC指纹图谱,并进行化学计量学分析,为不同基原野鸦椿属植物的鉴别提供参考。方法:收集不同产地的野鸦椿和圆齿野鸦椿样品共21批,建立HPLC指纹图谱,并运用SPSS 19.0、SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析、主成分分析以及正交偏最小二乘判别分析。结果:建立了野鸦椿和圆齿野鸦椿的指纹图谱,标定了包括2号峰(没食子酸)、12号峰(异槲皮苷)、13号峰(鞣花酸)在内的15个共有峰以及22号峰(芹菜素)、23号峰(isobiflorin)、26号峰(biflorin)在内的15个特征差异峰。聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘判别分析均可以区分野鸦椿和圆齿野鸦椿。结论:建立的方法可有效区分不同基原的野鸦椿属植物,为野鸦椿、圆齿野鸦椿的品种鉴别及质量控制提供参考。