曼月乐对子宫内膜异位症患者在位内膜增殖与凋亡的影响

目的:从增殖与凋亡的角度探讨左炔诺孕酮宫内节育系统(曼月乐)防治子宫内膜异位症的作用机理。方法:采集中、重度子宫内膜异位症患者放置曼月乐前后的在位内膜,以透射电镜观察细胞形态,TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫组化法检测Ki-67的表达。结果:放置曼月乐后,在位内膜腺体细胞Ki-67表达为阴性,凋亡率由24.4±35.0%升高至51.0±37.8%(P=0.027);间质细胞Ki-67的免疫组化HSCROE评分由2.0±1.2降至1.5±0.9(P=0.001),凋亡率由35.3±30.2%升高至76.4±11.2%(P=0.008)。结论:曼月乐能显著抑制内异症患者在位内膜的增殖并诱导凋亡,从而减少通过经血逆流进入腹腔的活性细胞数量,达到防止异位种植的效果。

GnRHa对子宫腺肌病在位内膜细胞凋亡及VEGF分泌的影响

目的:探讨促性腺激素释放激动剂(GnRHa)对子宫腺肌病(AM)在位内膜细胞凋亡及血管内皮生长因子(VEGF)分泌的影响。方法:取32例AM患者在位内膜细胞及20例对照组正常子宫内膜细胞进行体外培养,并予不同浓度GnRHa处理细胞,分别作用24、48、72 h后,用末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;采用ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF的含量。结果:(1)镜下可见两组部分细胞固缩、漂浮、核浓缩、碎裂,呈典型的凋亡小体;(2)不含GnRHa培养的AM在位内膜细胞凋亡率在各时间点均低于对照组,且两组都随时间的延长凋亡率增加(P<0.01);(3)GnRHa作用后,两组的凋亡率高于作用前,且均随浓度的增加而增加,且实验组各时间点、各浓度AM在位内膜细胞凋亡率均显著高于同时间、同浓度的对照组(P<0.01);(4)VEGF在AM在位内膜细胞中的分泌高于正常子宫内膜细胞(P<0.05),且GnRHa呈剂量依赖方式抑制AM在位内膜细胞及正常子宫内膜细胞VEGF的分泌。结论:(1)在位内膜细胞凋亡率异常可能是AM发病机制之一。GnRHa可能以自分泌或旁分泌机制直接作用于在位内膜细胞,提高了AM在位内膜细胞的凋亡率。(2)VEGF可能与子宫腺肌病的发生发展有关。GnRHa对子宫内膜细胞有直接作用,可能通过抑制VEGF的分泌,阻碍血管生成,从而达到抑制子宫内膜在子宫肌层内异位种植和生长的目的。

药物治疗对子宫内膜异位症患者在位内膜凋亡的影响

目的探讨药物治疗,包括左炔诺孕酮宫内节育系统(LNG-IUS)、口服甲羟孕酮(MPA)或注射促性腺激素释放激素类似物(GnRHa)对子宫内膜异位症患者在位内膜凋亡的的影响。方法采集中、重度子宫内膜异位症患者术前以及放置LNG-IUS、口服MPA或注射GnRHa后的在位内膜,以末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率,透射电镜观察细胞形态,RT-PCR检测内膜中凋亡相关蛋白Bax、Fas和Fas-LmRNA的表达。结果放置LNG-IUS后,在位内膜腺体细胞凋亡率由(24.4±35.0)%升高至(51.0±37.8)%(P=0.027),间质细胞凋亡率由(35.3±30.2)%升高至(76.4±11.2)%(P=0.008)。电镜下的凋亡状况,按程度由强至弱依次为:注射Gn-RHa、放置LNG-IUS、口服MPA。子宫内膜异位症患者在位内膜中Fas-LmRNA的表达率显著高于正常对照(P<0.05),但药物治疗前后3种凋亡相关蛋白mRNA的表达差异均无显著性。结论药物治疗可促进在位内膜凋亡,其诱导内膜细胞凋亡的作用由强至弱依次为:注射GnRHa、放置LNG-IUS、口服MPA。

细胞凋亡与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)发病原因尚未明了。EMs是妇科常见良性疾病,但却有增生、浸润、转移及复发等恶性行为,对其预防和治疗仍是目前难点。凋亡是基因控制的程序性细胞自我消亡过程,对机体维持自身稳态和组织器官正常生理功能至关重要。近年有资料表明,凋亡异常可促进EMs的发生发展。综述细胞凋亡途径,凋亡相关基因及凋亡在正常子宫内膜与EMs的在位、异位内膜中的不同表达,期望能操控细胞程序性死亡并应用于EMs的预防和治疗中。

子宫动脉阻断后腺肌病在位及病灶内膜组织凋亡现象观察

目的:观察子宫动脉阻断后腺肌病病灶内膜及在位子宫内膜凋亡现象;揭示子宫动脉阻断术治疗子宫腺肌病的治疗机制。方法:选择同济大学附属杨浦医院收治的子宫腺肌病患者10例,均行腹腔镜下双侧子宫动脉阻断术,子宫动脉阻断前及阻断后30min分别取子宫腺肌病病灶及在位子宫内膜组织标本各10g,子宫动脉阻断前标本为对照组。运用日本电子电镜观察组织细胞线粒体等亚细胞器结构变化,并采用Real-time PCR、Western blot法检测比较子宫动脉阻断前后子宫内膜及腺肌病组织中凋亡相关分子(Bcl-2、Bax、cyt-c、AIF、caspase-3、caspase-4、caspase-8、caspase-9、Endo-G、apf-1、GRP78、CHOP和TRADD)的表达情况。结果:电镜显示,子宫动脉阻断后子宫腺肌病病灶及在位子宫内膜出现了线粒体内嵴模糊、消失,线粒体肿胀明显,空泡样改变。核染色质边移,细胞膜反折;胞质浓缩,形成凋亡小体等凋亡改变。与子宫动脉阻断前比较,阻断后腺肌病病灶和在位子宫内膜组织中线粒体及内质网途径相关凋亡因子均出现显著性变化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫动脉阻断后可诱导腺肌病病灶及在位子宫内膜发生凋亡。缺氧所致细胞凋亡主要为线粒体途径,内质网途径协同参与。缺氧诱导细胞凋亡可能是子宫动脉阻断治疗子宫腺肌病的主要机制。

茜草炭复合提取物对子宫内膜异位症模型大鼠在位内膜增殖、凋亡及内膜组织VEGF、NF-κB的影响

目的探讨茜草炭复合提取物(QCS)对子宫内膜异位症模型大鼠在位内膜增殖、凋亡及内膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)、核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法采用自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型;将造模成功的大鼠随机分为假手术组、模型组、孕三烯酮组、QCS低剂量组、QCS中剂量组、QCS高剂量组。干预4周后,观察并记录各组异位病灶体积变化;免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA),TUNEL技术检测在位内膜细胞的增殖、凋亡;免疫组化法检测VEGF及NF-κB蛋白的表达,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测NF-κB mRNA的表达。结果治疗后病灶体积减小,孕三烯酮组及QCS中、高剂量组均较模型组显著降低(P<0.05),且高剂量组效果显著优于孕三烯酮组(P<0.05);孕三烯酮及QCS中、高剂量均能显著促进在位内膜细胞凋亡,抑制增殖(P<0.05),且高剂量组效果显著优于孕三烯酮组(P<0.05);孕三烯酮组及QCS中、高剂量组在位内膜VEGF、NF-κB蛋白及mRNA的表达显著下调(P<0.05),且高剂量组下调效果显著优于孕三烯酮组(P<0.05)。结论茜草炭复合提取物能通过促进在位内膜凋亡、抑制其增殖及下调内膜组织中VEGF、NF-κB蛋白及mRNA的表达等机制治疗子宫内膜异位症。

雷公藤多苷上调KISS-1表达对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞增殖和凋亡的影响

目的研究雷公藤多苷对子宫内膜异位症(EMs)在位内膜间质细胞(ESC)增殖和凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法运用细胞计数试剂盒(CCK-8)和集落形成实验检测雷公藤多苷对EMs ESC细胞增殖的影响。流式细胞术检测细胞凋亡。实时荧光定量PCR检测KISS-1 mRNA表达量。蛋白质印记(Western Blot)检测Ki67、半胱氨酸蛋白酶3前体(Pro-Caspase3)、裂解的Caspase3(Cleaved-Caspase3)和B细胞淋巴瘤相关x蛋白(Bax)表达量。转染KISS-1小干扰RNA至EMs ESC细胞,检测干扰KISS-1表达对雷公藤多苷处理的EMs ESC细胞增殖和凋亡的影响。结果雷公藤多苷处理后EMs ESC细胞活力、克隆形成数、Ki67和Pro-Caspase3蛋白表达显著降低,凋亡率、Cleaved-Caspase3和Bax蛋白表达显著升高,KISS-1 mRNA表达显著升高(P<0.05)。干扰KISS-1表达后,雷公藤多苷处理的EMs ESC细胞活力、克隆形成数、Ki67和Pro-Caspase3蛋白表达显著升高,凋亡率、Cleaved-Caspase3和Bax蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论雷公藤多苷可抑制EMs ESC细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与上调KISS-1表达有关。

诱导子宫内膜异位症患者子宫内膜上皮细胞调亡研究

目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHα)对子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜蛋白表达的影响,为EMs的治疗提供依据。方法:94例EMs患者随机分为两组,每组47例,均实施腹腔镜手术治疗,对照组未给予药物治疗,观察组给予曲普瑞林皮下注射,28日/次,注射3次,术中及治疗三个月后观察组分别用取内膜器取少量子宫内膜组织标本,采用免疫组化法法、TUNEL染色法和Western blot检测组织内Bcl-2、Caspase3、GRP78等表达情况,并观察治疗效果。结果:治疗后观察组疼痛视觉模拟评分(VAS)为(2.13±0.69)分,低于对照组的(2.62±0.71)分(P<0.05);观察组1年内妊娠率及总妊娠率分别为38.30%、51.06%,均高于对照组的19.15%、29.79%(P<0.05);治疗后观察组Bcl-2、Caspase3表达量分别为(1.54±0.28)、(3.20±0.65),均高于对照组的(1.38±0.15)、(1.24±0.27)(P<0.05);治疗后观察组GRP78表达量为(0.46±0.17),低于对照组的(0.61±0.24)(P<0.05)。结论:GnRHα可缓解EMs患者下腹痛、痛经、性交痛等症状,提高妊娠率,其机制可能与GnRHα调控上皮细胞Bcl-2、Caspase3、GRP78等的表达有关。