利用伊文思蓝的荧光显示肾上腺素诱发的血脑屏障开放

本文采用伊文思蓝静脉注射，在荧光显微镜下观察了不同剂量的肾上腺素诱发的大鼠血脑屏障开放状况，结果发现：（1）伊文思蓝在血脑屏障开放局部呈现出鲜艳明亮的荧光斑；（2）随着肾上腺素剂量加大，光斑数量增加；（3）光斑在实验组全脑的分布，以下丘脑、丘脑、小脑和尾壳核内密度最高。上述结果表明利用伊文思蓝的荧光染料性质观察血脑屏障的开放具有简便易行、灵敏度高等优越性．

核酸水解产物中腺嘌呤的荧光猝灭法测定及机理研究

研究了腺嘌呤猝灭伊文思蓝（Evans blue）的荧光猝灭机理并建立了测定腺嘌呤的新方法。当用253am激发，伊文思蓝的最大发射波长位于387nm，腺嘌呤对伊文思蓝的荧光具有猝灭作用。线性回归方程为：p（mg／L）：1.836×10^3I^-1F-9.110，相关系数为0.9997，线性范围为0.20-20.0mg／L，检出限为0.18mg／L，相对标准偏差（RSD）为5.6％。试验了pH、干扰离子、放置时间等对测定的影响，该方法可用于核酸水解产物中腺嘌呤的测定。

伊文思蓝作荧光探针研究牛血清白蛋白与氨苄青霉素之间的竞争反应

用伊文思蓝(Evans blue,EB)作荧光探针研究了氨苄青霉素(Ampicillin,A)对牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)的竞争反应.伊文思蓝与牛血清白蛋白作用,使牛血清白蛋白荧光发生猝灭,根据Stern-Volmer方程及荧光寿命研究了荧光猝灭的类型及机理.结果表明,猝灭类型为静态猝灭,即伊文思蓝和牛血清白蛋白形成了一种稳定的复合物.伊文思蓝与牛血清白蛋白的结合常数KBSA-EB=1.122×106L/mol,结合点数n=0.9935,并确定了EB和BSA之间的热力学常数及作用力类型.当加入氨苄青霉素后,牛血清白蛋白的相对荧光强度恢复.这表明氨苄青霉素与伊文思蓝对牛血清白蛋白发生了竞争反应.探讨了该竞争反应的相关机理,求出了伊文思蓝与氨苄青霉素的结合常数为K=7.131×105L/mol.

尿嘧啶的荧光猝灭法测定与机理研究

研究了尿嘧啶猝灭伊文思蓝（Evans blue）的荧光猝灭机理，并根据尿嘧啶对伊文思蓝荧光的猝灭作用，建立了测定尿嘧啶的新方法。当用253nm激发时，伊文思蓝的最大发射波长位于387nm，线性回归方程为：c=11．85IO／IF-12．30，相关系数为0．9990，线性范围为0．2～20mg／L，检出限为0．14mg／L，相对标准偏差（RSD）为3．6％。求得伊文思蓝与尿嘧啶的形成常数为K=4．88×10^3L／mol，试验了pH、干扰离子、放置时间、核酸水解产物等对测定的影响。

荧光猝灭法测定次黄嘌呤及机理研究

研究了次黄嘌呤猝灭伊文思蓝的荧光猝灭机理并根据次黄嘌呤对伊文思蓝荧光的猝灭作用建立了测定次黄嘌呤的新方法。线性回归方程为：P=6．292×10^3F^-1-26．49，相关系数为0．9990，线性范围为0．20～20．0μg/mL，检出限为0．14μg／mL，相对标准偏差（RSD）为2．5％。求算了伊文思蓝与次黄嘌呤的形成常数K=2．63×10^2L／moL，实验了pH、放置时间、干扰离子等对测定的影响。

伊文思蓝荧光法在动脉粥样硬化研究中的应用

该文报告了应用活体荧光染料伊文蓝（EvansBlue）研究家克实验性动脉粥样硬化（AS）的荧光显微实验方法和结果，经与传统的苏丹Ⅱ染色光镜检查法比较，结果表明本法在AS研究中研究斑块大小、厚度、脂质沉着程度、内皮完整性与坏死程度等客观指标方面均优于苏丹染料法，有些指标苏丹法无法观测。

伊文思蓝作荧光探针研究牛血清白蛋白与红霉素之间的竞争反应

用伊文思蓝(EB,Evans blue)作荧光探针研究了红霉素(erythromycin,EM)对牛血清白蛋白(BSA,bo-vine serum albumin)的竞争反应。根据Stern-Volmer方程研究了荧光猝灭的类型及机理,伊文思蓝与牛血清白蛋白作用,使牛血清白蛋白荧光发生静态猝灭,即伊文思蓝和牛血清白蛋白形成了一种稳定的复合物。伊文思蓝与牛血清白蛋白的结合常数KBSA-EB=1.122×106L/mol,结合点数n=0.9935。当加入红霉素后,牛血清白蛋白的相对荧光强度恢复,表明红霉素与牛血清白蛋白发生了竞争反应,探讨了相关机理,得到了伊文思蓝与红霉素的结合常数KEB-EM=1.950×104L/mol。

两种不同荧光示踪剂神经追踪效果比较

目的比较两种荧光示踪剂伊文思蓝(EB)与DiI的追踪效果,为神经示踪研究提供实验依据。方法利用脑立体定位仪,将EB和DiI分别注入大鼠海马,大鼠存活72h后,心脏灌注固定,冰冻切片,荧光显微镜观察脑桥荧光标记情况,设未含示踪剂的对照组。结果注射72h后,两种示踪剂在脑桥腹侧正中裂外侧均可见红色荧光标记细胞,DiI的荧光标记强度和EB相比有显著性差异(P<0.01),但荧光标记细胞数量无显著性差异(P>0.05)。结论海马注射EB和DiI在脑桥部均可看到荧光标记细胞,但DiI的神经示踪效果优于EB。

海洛因急性中毒大鼠血脑屏障的改变

目的:探讨海洛因急性中毒血脑屏障通透性的变化。方法:雌性SD大鼠20只,随机分为生理盐水对照组和海洛因模型组。模型组采用快速递增法大鼠皮下注射海洛因,人为建立海洛因急性中毒动物模型。对照组用同样方式注射不含海洛因的生理盐水。模型组注射纳洛酮催瘾,动物出现戒断症状,应用Maldonado评分标准判断成瘾强度。2组大鼠麻醉后经右股静脉给予示踪剂伊文思蓝(Evans Blue,EB),用荧光显微镜观察血脑屏障的完整性。结果:海洛因急性中毒模型组大鼠荧光显微镜下额叶、顶叶、海马、间脑、小脑、脑干各部位红色荧光光斑明显增多,每10个高倍镜视野EB光斑数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:大鼠海洛因急性中毒后血脑屏障通透性增大,破坏了脑组织内环境的稳定,阻碍了脑组织与外周组织的物质及信息传递,导致脑细胞水肿、变性、坏死。

脱落酸对伊文思蓝的荧光猝灭机理研究及其含量测定

利用荧光光谱研究了脱落酸(Abscisic acid)与伊文思蓝(Evans blue)的相互作用。用266 nm激发光激发时,伊文思蓝的最大发射波长为396 nm。伊文思蓝与脱落酸相互作用,使伊文思蓝发生荧光猝灭,根据Stern-Volmer方程研究了荧光猝灭的类型及机理,实验证明脱落酸与伊文思蓝发生的静态猝灭,即脱落酸和伊文思蓝形成了一种稳定的复合物。伊文思蓝的相对荧光强度与脱落酸的浓度线性相关,线性方程为F0/F=0.78153+3.9153×104c,线性相关系数为0.9976。通过实验求算了脱落酸与伊文思蓝的结合点常数KABA-EB=1.838×105L/mol和结合点数n=1.171,由此建立了测定植物中脱落酸的新方法。

斑马鱼肌肉坏死模型的伊文思蓝活体成像:一种新的研究坏死亲和性对比剂的平台

目的探讨制作斑马鱼肌肉坏死模型的可行性,并应用此模型进行伊文思蓝(EBD)活体成像以研究其坏死亲和特性。方法采用显微注射泵注射10 nL无水酒精于3~7 d斑马鱼幼鱼卵黄囊背部肌肉处以制作斑马鱼肌肉坏死模型。肌肉坏死模型组和对照组于心脏大静脉处注射0.1%EBD 5 nL后0、4、24、48 h行荧光及激光共聚焦显微镜拍摄,动态观察两组斑马鱼体内EBD的分布情况,定量分析肌肉坏死区域和正常肌纤维区域EBD的荧光强度、范围及比值。结果斑马鱼肌肉坏死模型的制作成功率高。荧光及激光共聚焦显微镜显示,肌肉受损区域有大量EBD的红色荧光积聚,同明场下肌肉受损区域相一致;动态观察发现,随时间推移,红色荧光强度逐渐增强,于24 h达到峰值后逐渐减退;肌肉坏死区域同正常肌纤维区域之间荧光强度的差异具有统计学意义(P<0.05),4 h和24 h时荧光强度差异最明显,分别为58.30±5.14、17.36±1.16和54.20±4.25、15.96±0.79。不同时间点的坏死亲和性比率的差异无统计学意义(P>0.05)。结论无水酒精诱导的斑马鱼肌肉坏死模型制作简捷经济,可作为一种新的研究坏死亲和性物质的实验平台。本研究初步证实EBD可选择性积聚于肌肉坏死区域,是一种潜在的坏死亲和性对比剂。

乌司他丁对脓毒症大鼠脑组织的保护作用

目的 观察乌司他丁对脓毒症大鼠血脑屏障及脑细胞凋亡的影响.方法 清洁级雄性SD大鼠52只,随机（随机数字法）分为6组.假手术（Sham）6 h组、24h组,每组6只;脓毒症（CLP）及乌司他丁（UTI）6 h组、24h组,每组10只.Sham组只开腹后关腹,CLP组及UTI组用盲肠结扎穿孔法（CLP）建立脓毒症模型,UTI组建模后1h股静脉注射乌司他丁50 000U/kg,其他组注射等容量生理盐水.各组在建模后6h、24 h断脑取材,取材前进行神经功能缺损评分,取材后HE染色、称量脑干湿质量、伊文思蓝渗透法测定血脑屏障通透性,TUNEL免疫荧光检测脑细胞凋亡.应用SPSS 13.0软件统计学分析,多组比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验.结果 UTI组大鼠神经功能评分低于Sham组（P＜0.05）,高于CLP组（P＜0.05）.光镜下CLP组大鼠神经细胞变性、坏死、水肿较UTI组明显.CLP 24 h组大鼠血脑屏障通透性较UTI 24 h组显著升高（P＜0.05）.CLP组大鼠脑细胞凋亡数较UTI组显著增多（P＜0.05）.结论 乌司他丁通过减轻血脑屏障损伤,抑制脑细胞凋亡,对脓毒症大鼠脑组织起保护作用.