Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9与TIMP-1表达的影响

目的:观察Exendin-4对2型糖尿病大鼠肾组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)表达的影响.方法:采用高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法,建立2型糖尿病大鼠模型.将成模大鼠随机分为糖尿病组,exendin-4低、中、高剂量组,并设立正常对照组.给药6wk后,采用免疫组化方法检测各组大鼠肾组织中MMP-9,TIMP-1的蛋白表达.结果:糖尿病组MMP-9,TIMP-1的表达较正常对照组明显增强(P<0.01);exendin-4各组较糖尿病组MMP-9,TIMP-1表达减弱(P均<0.01).结论:Exendin-4对2型糖尿病大鼠有一定的肾脏保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾组织MMP-9和TIMP-1的表达来实现的.

WGZ-35/39-9型锅炉水冷壁磨损的原因分析及改进

通过对鹤壁电厂锅炉喷燃器口对其附近水冷壁管的局部损伤,从而引发泄漏,甚至爆管造成停炉、停机事故的调查分析,采取了相应措施,保证了锅炉安全稳定运行。

Exendin-4修复周围神经损伤的转录组学研究

目的研究exendin-4促进周围神经损伤(peripheral nerve injury,PNI)后的再生作用及分子机制,为PN I提供新的治疗途径和潜在的治疗靶点。方法本研究使用高通量组学技术检测exendin-4治疗小鼠PNI后损伤远端坐骨神经的基因表达变化,并通过生物信息学方法筛选出差异基因,将筛选出的差异基因进行GO富集分析和PPI网络分析以得到关键基因和蛋白,并应用分子生物学进一步验证exendin-4在修复P N I的潜在机制。结果小鼠坐骨神经损伤后,共检测到180个具有显著表达差异的基因〔P<0.05,差异倍数(fold change,FC)≤0.5或>2〕。其中,146个上调,34个下调。基因本体(gene oncology,GO)富集分析显示,差异基因主要富集在组蛋白H 4乙酰化、组蛋白乙酰转移酶活性、组蛋白乙酰转移酶复合物、泛素特异性蛋白酶活性、泛素水解酶活性、泛素蛋白特异性蛋白酶活性和蛋白去泛素化。PPI网络分析结果显示,基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)富集程度最高,而MMP9是调控施万细胞生物活性的关键蛋白。体外实验结果显示,在施万细胞中加入外源性exendin-4后,施万细胞中MMP9的mRNA和蛋白质的表达量较对照组均显著提高(P<0.01)。结论本研究结果表明,exendin-4可能通过调控MMP9提高损伤后周围神经的再生能力,为临床上治疗PNI提供了新的途径和潜在靶点。

GLP-1R/SIRT1通路参与高糖诱导PC12细胞衰老

目的对胰高血糖素样肽（glucagon-like-peptide-1,GLP-1R）/沉默信息调节因子1（sirtuin1,SIRT1）信号通路参与高糖诱导PC12细胞衰老的机制进行了研究.方法培养大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤高分化PC12细胞用作神经元细胞模型,采用β-半乳糖苷酶染色评价PC12细胞衰老情况;Westernblot印迹检测SIRT1、GLP-1R表达.结果葡萄糖能剂量依赖性的诱导PC12细胞衰老,并抑制SIRT1和GLP-1的表达,且均在葡萄糖（30mmol·L^-1,48h）时效果最明显（1.67±0.17% vs8.09±1.96%,P〈0.05,）.SIRT1激动剂白藜芦醇（resveratrol,REV）10μmol·L-1能抑制高糖促进PC12细胞衰老的作用（4.58±0.29%,P〈0.01）,而SIRT1的特异性抑制剂Splitomicin（10μmol·L^-1）能阻断REV的作用.GLP1R的激动剂GLP-1（10nmol·L-1）能逆转高糖对SIRT1表达的抑制作用并缓解PC12细胞的衰老,而GLP-1R特异性拮抗剂Ex-endin-（9-39）则阻断了GLP-1的作用.结论GLP-1R/SIRT1信号通路参与了高糖诱导的神经细胞衰老的作用.

Exendin-4对糖尿病脑缺血再灌注大鼠脑组织中MMP-9表达的影响

目的:通过观察Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注后脑梗死体积百分比及脑组织中金属基质蛋白酶-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1的变化,探讨Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:选用SD大鼠,给予链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立糖尿病大鼠模型后,随机分为A组:糖尿病对照组(n=6);B组:模型组(n=6);C组:Exendin-4低剂量组(n=6);D组:Exendin-4中剂量组(n=6);E组:Exendin-4高剂量组(n=6)。常规喂养6周后,A组给予假手术处理,B、C、D及E组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血90 min再灌注模型,24 h后处死大鼠取脑组织,采用2,3,5一氯化三苯四唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色测算脑梗死体积百分比;同时分别采用Western Blot法及RT-PCR测量脑组织中的MMP-9及TIMP-1表达量。结果:脑缺血再灌注能致脑组织中MMP-9及TIMP-1表达量增高,各组与A组比较,有显著差异(P<0.05);给予Exendin-4处理后脑组织中MMP-9及TIMP-1表达增高程度及脑梗死体积百分比明显降低,与B组比较有显著差异(P<0.05)。结论:Exendin-4对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制MMP-9及TIMP-1的表达有关。

葛根素激活GLP?1R通路改善高脂诱导的HFD小鼠高血糖水平（英文）

目的探讨葛根素对高脂诱导的HFD小鼠高血糖水平的影响以及GLP-1R通路在葛根素降糖功效中的作用。方法以高脂诱导的HFD(High-fat-diet)糖尿病小鼠模型为对象,采用GLP-1受体拮抗剂Exendin 9-39(Ex 9-39)用以阻断GLP-1R通路的激活,通过动物体内实验进一步评价GLP-1R通路在葛根素降糖功效中的作用。结果葛根素能够有效降低HFD小鼠血糖水平并改善HFD小鼠口服葡萄糖耐受能力,而Ex 9-39显著抑制葛根素的降糖作用,并且葛根素促进小鼠胰岛素分泌的作用也被Ex 9-39所阻断。通过小鼠胰腺组织切片免疫荧光染色检测观察到,葛根素能够增加HFD小鼠胰岛β细胞中ki67的表达,提示其能够促进胰岛β细胞增殖,当Ex 9-39阻断GLP-1R通路激活时,葛根素的作用被抑制。结论本研究首次在糖尿病小鼠模型中,证实葛根素降糖及改善胰岛β细胞生存的作用依赖于GLP-1R通路的激活,为今后葛根降糖的潜在开发应用奠定实验基础。

HBV患者血清YKL-40、CA19-9、GP73水平与其病情相关性

目的分析HBV患者YKL-40、CA19-9、GP73水平差异及与患者病情轻重程度的相关性,探讨HBV患者病情的判定指标。方法选取2015年5月—2018年5月收治的100例HBV患者,其中慢性HBV感染组40例、慢性乙型肝炎组36例、HBV相关肝硬化组24例,同期选择我院健康体检的健康者50例作为健康对照组;检测患者血中YKL-40、CA19-9、GP73水平;分析HBV感染患者血清YKL-40、CA19-9、GP73水平与病情轻重程度的相关性。结果慢性HBV感染、慢性乙型肝炎及HBV相关肝硬化患者血中YKL-40水平分别为(36.38±4.19)ng/mL 、(49.02±4.32)ng/mL、(65.14±5.21)ng/mL ,CA19-9分别为(12.03±1.03)KU/L、(13.84±0.98)KU/L、(16.94±0.81)KU/L,GP73分别为(47.22±5.38)ng/mL 、(98.53±10.24)ng/mL 、(229.85±12.19)ng/mL,均明显高于对照组的(28.19±3.27)ng/mL 、(7.34±0.92)KU/L 、(30.93±3.89)ng/mL,均P=0.000 0。随着慢性HBV感染者、慢性乙型肝炎患者和不同HBV相关肝硬化患者肝脏炎症及纤维化程度加重,患者血中YKL-40、CA19-9和GP73也随之显著增加,均P=0.000 0;YKL-40、CA19-9和GP73均是影响HBV感染患者体内炎症坏死及肝脏纤维化的独立性影响因素,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBV感染患者血清中YKL-40、CA19-9、GP73水平是HBV感染患者病情轻重程度的独立性影响因素。

Selective oxidation of alcohols with H2O2 catalyzed by zinc polyoxometalate immobilized on multi-wall carbon nanotubes modified with ionic liquid

In this work,acid functionalized multi-wall carbon nanotubes（MWCNTs） were modified with imidazolium-based ionic liquids.The selective oxidation of various alcohols with hydrogen peroxide catalyzed by [PZnMo2W9O39]^5-,ZnPOM,supported on ionic liquids-modified with MWCNTs,MWCNTAPIB,is reported.This catalyst[ZnPOM@APIB-MWCNT],was characterized by X-ray diffraction,scanning electron microscopy（SEM） and FT-IR spectroscopic methods.This heterogeneous catalyst exhibited high stability and reusability in the oxidation reaction without loss of its catalytic performance.

艾塞那肽促进葛根素改善高脂饮食糖尿病模型小鼠糖代谢作用的研究

前期研究发现葛根素通过上调胰岛β细胞GLP-1R(GLP-1 receptor)的表达保护β细胞,但葛根素综合降糖作用是否受到GLP-1R激活调控,尚未验证。本文采用GLP-1R激动剂艾塞那肽(exendin-4,Ex4)与GLP-1R拮抗剂毒蜥外泌肽9-39(exendin 9-39,Ex9-39),以高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导小鼠糖尿病模型,实验分为对照组、高脂组、高脂/葛根素组(300 mg·kg^-1·d^-1)、高脂/葛根素/Ex9-39组(Ex9-39:10 nmol·kg^-1·d^-1)、高脂/葛根素/Ex4组(Ex4:10 nmol·kg^-1·d^-1)。动物实验已获得南京中医药大学附属中西医结合医院动物伦理委员会批准(AEWC-025)。葛根素灌胃给药,Ex9-39与Ex4腹腔注射给药。给药10天,考察小鼠空腹血糖及口服葡萄糖耐量(oral glucose toler-ance test,OGTT),测定血清胰岛素等指标,检测肝脏AKT及FOXO1的变化。与高脂组相比,葛根素组小鼠空腹血糖与OGTT均得到有效改善,血清胰岛素水平升高,而胰高血糖素、甘油三酯及总胆固醇均显著降低(P<0.05)。Ex4对葛根素综合降糖的多项指标具有显著增强作用,而Ex9-39明显抑制葛根素的作用(P<0.05),提示葛根素作用依赖于GLP-1R激活。Western blotting分析显示,葛根素有效激活肝组织中AKT分子,并抑制转录因子FOXO1活性,其作用同样被Ex4有效促进,而被Ex9-39显著抑制。本研究表明,葛根素可通过激活GLP-1R通路改善HFD糖尿病小鼠的糖代谢,为葛根素的开发应用提供实验支撑。