心肌纤维化的发病机制及其研究进展

心肌纤维化是以心脏间质成纤维细胞过度增殖、胶原过度沉积及异常分布为特征的心脏间质重构。其与高血压病、慢性心力衰竭、肥厚型心肌病、扩张型心肌病、病毒性心肌炎等多种心血管疾病有密切关系,并且是心源性猝死的潜在危险因素。目前对心肌纤维化的具体发病机制并不十分明确,主要认为多与肾素-血管紧张素-醛固酮系统、调控性细胞因子、氧化应激、炎性因子、内皮功能障碍、细胞内钙离子等存在密切关系。这些因素通过相同或者不同的传导通路影响着心肌纤维化的发生发展。

人脐带血间充质干细胞对人胃癌MGC80-3细胞生物学行为的影响

目的:研究人脐带血间充质干细胞(HUCB-MSC)对人胃癌MGC80-3细胞体外细胞外基质成分的影响,探讨其对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:原代培养人脐带血间充质干细胞,流式细胞仪进行细胞表型鉴定。采用流式细胞仪半定量检测基质金属蛋白酶-7(MMP-7)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)蛋白水平。逆转录-聚合酶链反应半定量测定MMP-7和TIMP-1的表达情况。结果:各实验组中MMP-7表达的蛋白荧光指数(FI)均低于空白对照组,各实验组中TIMP-1表达的蛋白荧光指数(FI)均高于空白对照组。MMP-7表达的分子水平随MSC-CM浓度增加而逐渐降低,TIMP-1表达的分子水平随MSC-CM浓度增加而逐渐增高。各实验组与空白对照组比较均有统计学意义(P<0.05)。结论:MSC-CM可下调MMP-7、上调TIMP-1,这可能是HUCB-MSC抑制胃癌MGC80-3细胞迁移能力的机制之一。

液态心肌细胞外基质心肌内注射改善大鼠急性心肌梗死后心功能的实验研究

目的探讨对心肌梗死区注射液态心肌细胞外基质能否改善大鼠急性心肌梗死后的心功能。方法制备液态心肌细胞外基质,采用开胸结扎的方法制备大鼠急性心肌梗死模型,将制备成功的模型随机分为3组:Ⅰ组为液态心肌细胞外基质组(n=25),Ⅱ组为骨髓间充质干细胞组(n=25),Ⅲ组为生理盐水对照组(n=25),并对各组予以相应处理。在心梗6周后采用超声心动图评价各组大鼠心功能,而后处死大鼠取出心脏,采用组织学方法检测各组大鼠心室重构情况。结果液态心肌细胞外基质组的超声及组织学指标均优于对照组,但与骨髓间充质干细胞组无差异。结论液态心肌细胞外基质心肌内注射可明显改善大鼠急性心肌梗死后的心功能,其结果与移植骨髓间充质干细胞相当。

液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松改善大鼠急性心肌梗死后心功能的实验研究

目的研究液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松对大鼠急性心肌梗死后心功能的改善情况。方法制备液态心肌细胞外基质,结扎雄性Wistar大鼠冠状动脉左前降支制作急性心肌梗死模型,将制备成功的大鼠模型随机分为4组:Ⅰ组为液态心肌细胞外基质加地塞米松组(n=20);Ⅱ组为液态心肌细胞外基质组(n=20);Ⅲ组为地塞米松组(n=20);Ⅳ组为生理盐水对照组(n=20),并对各组予以相应处理。在大鼠心梗后6周用超声心动图评价各组动物的心功能,而后将动物处死取出心脏,用组织学及形态学方法观察各组动物心室重构的差异。结果液态心肌细胞外基质加地塞米松组大鼠心功能及心室重构情况优于其他各组。结论液态心肌细胞外基质心肌内注射联合应用地塞米松对大鼠急性心肌梗死后的心功能有明显的改善作用。

淫羊藿次苷Ⅱ通过调节MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达抗自发性高血压大鼠心肌纤维化

目的观察淫羊藿次苷Ⅱ(icarisidⅡ,ICSⅡ)对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)心肌纤维化的干预作用,并探讨其对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase,MMP-2)、MMP-9及质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)的影响。方法将20只♂SHR大鼠随机分为模型(SHR)组、ICSⅡ低、中、高剂量组(ICSⅡ-L、ICSⅡ-M、ICSⅡ-H),♂WKY大鼠为阴性对照(WKY)组。ICSⅡ各剂量处理组持续灌胃12周后,检测大鼠收缩血压,处死大鼠分离左心室计算左心质量指数,Masson染色观察心肌胶原含量变化;real time PCR检测左心室组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达;Western blot检测左心室组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白的表达。结果 ICSⅡ(8、16 mg·kg^(-1))处理组胶原蛋白沉积明显减轻,收缩压和左心质量指数明显下降(P<0.05),左心室组织中MMP-2、MMP-9、CollagenⅠ和CollagenⅢ表达量明显减少(P<0.05),TIMP-1的表达量明显增加(P<0.05)。结论 ICSⅡ可改善SHR大鼠心肌纤维化,其机制可能与降低血压,下调MMP-2、MMP-9,上调TIMP-1的表达有关。

基质金属蛋白酶-9在心血管疾病中的研究进展

基质金属蛋白酶-9(MMP-9)又称明胶酶B,是MMPs家族中的一个重要成员,并且近年来受到国内外关注。在许多心血管疾病的发生、发展等病理过程中激活MMP-9,而导致其表达上调,继而引起心肌的重构及心血管系统损害,最终导致心功能改变。

吡格列酮改善糖尿病肾脏疾病肾小管间质纤维化病变的动物实验研究

目的探讨吡格列酮通过影响AMPK/PI3K/mTOR通路抑制糖尿病肾脏纤维化发生发展的分子机制。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(NC)、糖尿病组(DM)及吡格列酮治疗组(BG),每组各8只。DM组和BG组STZ腹腔注射复制T1DM模型,成模后第9周BG组予吡格列酮10mg/(kg·d)连续灌胃8周。16周末处死大鼠,取血清和处死前24 h尿液检测生化指标,观察肾脏组织病理改变,免疫组织化学法和Western blot检测目的蛋白的表达。结果与NC组比较,DM组FBG、UACR、TG、TC均升高(P<0. 05),与DM组比较,BG组UACR、TG和TC降低(P<0. 05)。与NC组比较,BG组肾小管间质纤维化增加,胶原阳性染色加重,胶原容积分数(CVF)[(17. 48±0. 59)%vs(36. 16±2. 09)%,P<0. 05],肾间质Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)[(0. 08±0. 02)vs(0. 26±0. 02),P<0. 05]沉积增加而上皮钙黏附蛋白(E-cadherin)减少[(0. 44±0. 01)vs(0. 19±0. 01),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα减少[(3. 42±0. 57)vs(0. 93±0. 05),P<0. 05],活化的Akt[(0. 27±0. 04)vs(0. 49±0. 06),P<0. 05]、m TOR[(0. 63±0. 15)vs(5. 28±0. 89),P<0. 05]及P70S6K[(0. 63±0. 09)vs(0. 97±0. 13),P<0. 05]增加,E-cadherin减少[(0. 45±0. 09)vs(0. 27±0. 06),P<0. 05],α-SMA表达增加[(0. 21±0. 04)vs(0. 51±0. 12),P<0. 05];与BG组比较,DM组肾脏纤维化病理改变减轻,胶原阳性染色减轻,CVF[(36. 16±2. 09)%vs(25. 24±2. 34)%,P<0. 05],肾间质Col-Ⅲ沉积减少[(0. 26±0. 02)vs(0. 18±0. 03),P=0. 005],E-cadherin增加[(0. 19±0. 01)vs(0. 31±0. 02),P<0. 05],肾组织活化的AMPKα增加[(0. 93±0. 05)vs(2. 64±0. 76),P<0. 05],活化的Akt[(0. 49±0. 06)vs(0. 29±0. 08),P<0. 05]、m TOR[(5. 28±0. 89)vs(1. 63±0. 71),P<0. 05]和P70S6K[(0. 97±0. 13)vs(0. 71±0. 09),P<0. 05]减少,肾组织E-cadherin蛋白表达增加[(0. 27±0. 06)vs(0. 42±0. 03),P<0. 05],α-SMA表达减少[(0. 51±0. 12)vs(0. 24±0. 05),P<0. 05]。结论吡格列酮可能通过增加AMPKα的活化,抑制PI3K/mTOR信号通路,缓解糖尿病大鼠肾脏纤维化病变。

转化生长因子-β1和纤维粘连蛋白在压力性尿失禁大鼠模型阴道前壁中的表达

目的：探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）和纤维粘连蛋白（FN）在压力性尿失禁（SUI）大鼠模型阴道前壁中的表达及意义。方法将30只健康雌性SD大鼠随机分为3组，A组作为对照组不做建模处理；B组仅行阴道扩张；C组行阴道扩张加卵巢切除。术后4周测定腹压漏尿点压（ALPP）及最大膀胱容量（MBC），评估模型建立是否成功。4周后处死大鼠，取阴道前壁组织用免疫组化法和实时荧光定量PCR检测TGF-β1和FN的表达。结果尿流动力学（ALPP、MBC）：B、C组较A组明显降低，且各组之间比较差异均有统计学意义（P〈0.001）；C组TGF-β1 mRNA与蛋白质的表达明显低于A、B组（P〈0.05），但A、B两组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）；C组FN mRNA及蛋白质的表达明显高于A、B组（P〈0.001），且A、B两组之间比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论 SUI大鼠阴道前壁中TGF-β1的低表达和FN的高表达可能与盆底支持结构的退行性病变密切相关。

基于生物信息学分析胃癌中RUNX1表达及其临床意义

目的研究Runt相关转录因子1(Runt-related transcription factor 1,RUNX1)在胃癌中的表达及其与胃癌患者临床病理特征、预后和肿瘤细胞侵袭能力之间的相关性。方法①数据库分析:应用TCGA和GEO数据库分析RUNX1在胃癌和癌旁组织中的表达差异;利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析RUNX1表达水平与胃癌患者生存预后的相关性;利用GO分析和KEGG通路富集分析RUNX1在胃癌中可能参与的功能和信号通路,并通过GEPIA数据库进行基因相关性验证。②临床病例验证:回顾性收集兰州大学第二医院在2018年6月至2019年12月期间收治的62例胃癌患者的癌组织和癌旁组织,进行免疫组织化学染色、HE染色和天狼星红染色,并探索RUNX1表达与患者临床病理特征和预后的关系。③细胞实验:利用小干扰RNA(si-001-RUNX1和si-002-RUNX1)进行RUNX1的敲减,并通过Transwell实验分析RUNX1与AGS和HGC27细胞侵袭能力的关系。结果①数据库分析:RUNX1在胃癌组织中高表达,并与胃癌患者的总生存时间(overall survival,OS)呈负相关(P<0.001);GO分析和KEGG通路富集分析结果提示,RUNX1不仅参与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中胶原的构建,而且在ECM-受体相互作用通路中显著富集;GEPIA数据库基因相关性分析结果显示,RUNX1与ECM-受体相互作用通路所涉及基因表达呈正相关(P<0.05)。②临床病例验证:免疫组织化学染色结果提示,RUNX1在胃癌组织中相对高表达,且RUNX1高表达是影响胃癌患者术后OS的危险因素(RR=5.074,P=0.034);且胃癌组织中RUNX1表达与天狼星红红色面积呈正相关关系(r=0.46,P<0.001)。③细胞实验:Transwell实验证实RUNX1敲减后,si-001-RUNX1和si-002-RUNX1组的AGS和HGC27侵袭细胞数量降低。结论RUNX1在胃癌中高表达且提示更差的生存预后,并且RUNX1促进胃癌发生发展有可能是通过激活ECM-受体相互作用通路实现的。