白术多糖提取分离工艺研究

目的优选白术多糖的提取分离工艺。方法比较氯仿-正丁醇Sevage法去蛋白与不去蛋白白术多糖含量。以吸附率和解吸率为考察指标,优选AB-8型、D101型、LX-38型3种大孔吸附树脂。通过吸附时间、解吸时间、上样流速、上样浓度、洗脱剂用量、洗脱剂浓度和洗脱流速研究AB-8型大孔树脂纯化白术多糖工艺。结果未去蛋白的多糖含量为(5.582±1.4480)%、(5.407±0.7668)%、(5.155±0.7214)%,Sevage法去蛋白后的多糖含量为(4.658±0.1558)%、(4.247±0.0742)%、(4.610±0.1734)%。AB-8型大孔树脂较其他两种树脂,其吸附率及解吸率可达(18.40±0.0300)%,(91.73±0.0781)%,纯化工艺为吸附时间3 h、解吸时间3 h、上样流速1 BV/h、上样浓度0.75 mg/mL、洗脱剂用量4 BV、洗脱剂浓度15%乙醇、洗脱流速3 BV/h。结论本试验为白术多糖的提取分离提供了试验依据,为白术多糖的工业化生产提供了参考。

白术多糖提取分离、结构表征及生物活性研究进展

白术作为我国一味补虚中药材在临床上应用广泛,现代研究发现其主要含挥发油、多糖、内酯类、氨基酸等化学成分,其中白术多糖含量较高,具有广泛的药物开发和研究价值。近年来,针对白术多糖开展了大量研究,包括白术多糖提取、分离、结构鉴定以及药理作用等。目前,白术多糖含量测定方法主要有蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法,提取多糖的方法可采用煎煮法、超声辅助提取法、复合酶提取法、微波辅助提取法等;分离方法主要有柱色谱分离法、乙醇分步沉淀法、超滤法等。且发现其提取、分离、测定方法不同对白术多糖含量具有较大影响。此外,白术多糖结构研究尚处于起步阶段,仅解析了部分精制多糖结构,大部分结构尚未明确。目前发现的白术多糖的生物活性主要有抗肿瘤活性、免疫调节活性、神经保护作用、胃肠功能调节作用、肝脏保护作用以及生长促进等作用,这些研究只存在于简单的药效学评价,具体的作用机制和构效关系的研究还未广泛地展开。研究就近10年来有关白术多糖的提取分离方法、化学结构研究及其主要生物活性研究相关文献进行梳理总结,为其进一步的研究、开发、利用提供参考。

半夏白术天麻汤4种方法提取液指纹图谱比较

对半夏白术天麻汤4种方法提取液的HPLC指纹图谱中特征峰面积进行比较,并以SBEE液为标准图谱,计算不同提取液的共有峰重叠率、特征峰检出率、相似度、总差异率,以比较半夏白术天麻汤4种方法提取液HPLC指纹图谱的异同.结果发现,半夏白术天麻汤4种方法提取液指纹图谱的特征峰总面积以SBEE液最大,重叠率和特征峰检出率都为100%,但相似度和总差异率不同,SBE液与SBEE液差异最小.因此,半夏白术天麻汤4种方法提取液所含化学成分种类基本相同,但含量不同,以SBEE法提取率最高.

半夏白术天麻汤4种方法≤1000Da小分子混合物对高血压大鼠血管紧张素Ⅱ、一氧化氮和内皮素含量的影响

目的比较半夏白术天麻汤不同提取方法对大鼠血浆中一氧化氮、血管紧张素Ⅱ和内皮素含量的影响。方法选用高血压大鼠,随机分为正常对照组、空白对照组、半仿生酶组(Semi-Bionic Enzyme Extraction,SBEE)、半仿生组(Semi-Bionic Extraction,SBE)、水提组(Water Extraction,WE)、醇提组(Alcohol Extraction,AE),分别灌胃相应提取液,每鼠每天1m L(浓度2.83g·m L^(-1))。喂养4W,分别测定血清中一氧化氮、血管紧张素Ⅱ和内皮素含量。结果4种方法提取液均可提高模型大鼠血清中一氧化氮含量,降低模型大鼠血清中血管紧张素Ⅱ和内皮素含量;差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论经过4周的喂养,半夏白术天麻汤四种方法提取液均可提高模型大鼠血清中一氧化氮的含量,降低血清中血管紧张素Ⅱ和内皮素的含量,加入酶解过程的SBEE提取方法效果显著。

莪术、白术挥发油提取及包合工艺考察

目的:研究莪术、白术挥发油提取及包合的最佳工艺条件。方法:采用单因素考察法,以挥发油得量为指标,考察药材粉碎度、加水量、浸泡时间、提取时间对挥发油的提取影响,优选提取工艺;采用正交试验法,以挥发油利用率、包合物含油率、包合物收率综合评分为指标,考察挥发油与β-环糊精的用量比、包合时间、包合温度对挥发油包合的影响,优选出最佳工艺。结果:最佳提取工艺为过20目筛粗粉,加6倍量水,不浸泡,提取6 h;最佳包合工艺为挥发油与β-环糊精的用量比1:6,包合120 min,包合温度为50℃。结论:该提取方法可较完全地提取莪术、白术挥发油,经β-环糊精包合后,性质稳定,包合工艺简单可行。

正交法优化参苓白术散总黄酮的提取工艺

目的为深入研究参苓白术散现代临床功效,以确保药效的发挥,本试验进行参苓白术散总黄酮质量分数测定,正交试验筛选最佳提取方案。方法设计单因素试验,以乙醇的质量分数、用量和提取时间为优化条件,测定参苓白术散中黄酮的质量分数,并对提取工艺进行优化。结果参苓白术散总黄酮的最优试验提取工艺:乙醇质量分数为50%,提取时间2 h,乙醇用量25 mL。

半夏白术天麻汤≤1000Da小分子混合物含药血清指纹图谱研究

目的对4种不同提取方法的提取液中≤1000 Da小分子混合物进行含药血清指纹图谱研究。方法以分子量≤1000 Da小分子混合物为最终产物,采用高效液相色谱(HPLC)法比较半仿生-酶法(semi-bionic-enzymatic extraction,SBEE)、半仿生提取法(semi-bionic extraction,SBE)、水提法(water extraction,WE)、醇提法(alcohol extraction,AE) 4种方法对半夏白术天麻汤进行提取,分析4种提取液的大鼠含药血清指纹图谱,并评价提取方法对成分吸收的影响。结果 SBEE液、SBE液、AE液、WE液的含药血清指纹图谱特征指纹峰分别为19、16、16、17个; SBE液、WE液、AE液含药血清指纹图谱特征峰总面积与SBEE液的含药血清指纹图谱特征峰总面积比值分别为0. 8984、0. 5236、0. 8495。结论与SBE法、AE法、WE法比较,SBEE法提取液的含药血清指纹图谱的特征峰最多,总峰面积最大,SBEE法更有利于机体吸收半夏白术天麻汤提取液中的成分。

半夏白术天麻汤加减联合银杏叶提取物注射液治疗突发性耳聋临床观察

目的:观察半夏白术天麻汤加减联合银杏叶提取物注射液对突发性耳聋患者血清高迁移率族蛋白-1 (HMGB1)、过氧化脂质(LPO)水平变化及听力改善的影响。方法:选取突发性耳聋患者93例,均为单侧发病。对照组46例予以银杏叶提取物注射液治疗,研究组47例予以半夏白术天麻汤加减联合银杏叶提取物注射液治疗,均治疗2周。分析比较2组治疗前后血清HMGB1、LPO、一氧化氮(NO)水平、血液流变学及生活质量(SF-36)变化情况,统计比较2组听力改善、不良反应发生的情况。结果:治疗后,研究组听力改善情况优于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);研究组血清HMGB1、LPO、NO水平情况优于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05);研究组血浆黏度、全血低切黏度、全血高切黏度均低于对照组,差异均有统计学意义(P <0.05);不良反应总发生率研究组14.89%,与对照组8.70%比较,差异无统计学意义(P> 0.05);研究组SF-36评分高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:运用半夏白术天麻汤加减联合银杏叶提取物注射液治疗突发性耳聋,与单纯采用银杏叶提取物注射液治疗比较,可明显改善患者听力、血液流变学及血清HMGB1、LPO、NO水平,提高预后,且安全性较高。

截留相对分子质量1000的超滤膜优选半夏白术天麻汤方药半仿生法提取药材组合方式

目的截留相对分子质量≤1 000提取物,优选半仿生法提取半夏白术天麻汤方药的较佳方药组合方式。方法将方中6味中药排列组合成15组,用优选的半仿生法工艺条件提取,以天麻素、甘草次酸、总黄酮、高效液相色谱总面积、相对分子质量≤1 000提取物为指标进行综合评判。结果 6个指标综合评价值以ABCD为最大。结论半夏白术天麻汤方药以半夏、天麻、茯苓、橘红、白术与甘草合并提取为佳。

复方白术提取物对高脂血症大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响

目的观察复方白术提取物(CBE,白术精提取物、红曲提取物)对高脂血症模型大鼠脂质代谢、血液流变学和微循环的影响。方法采用高糖高脂饲料递增酒饮建立SD大鼠高脂血症模型,造模4周后分别灌胃给予高、中、低剂量(36、24、16 mg/kg)复方白术提取物,依折麦布作为阳性药。每2周测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和动脉粥样硬化指数(AI)水平;给药7周后测定大鼠尾部微循环血流量;给药10周后,测定大鼠血液流变学指标及血清卵磷脂胆固醇酯酰基转移酶(LCAT)水平,以及肝脏中TC、TG水平和羟甲戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、脂肪酸合成酶(FAS)、酯酰辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)水平。结果复方白术提取物3组大鼠的血清TC、LDL-C、AI及肝脏TG、HMGCR、ACAT水平降低,血清LCAT水平及尾部微循环血流量升高,血液流变学指标明显改善;复方白术提取物高剂量组血清HDL-C水平升高及肝脏TC、FAS水平降低;中剂量组血清HDL-C水平升高;低剂量组肝脏FAS水平降低。结论复方白术提取物通过抑制胆固醇、脂肪酸合成和促进胆固醇转化来调节脂质代谢,从而改善血液的流变性和微循环。

于术挥发油成分的GC/MS分析

目的:于潜产白术挥发油的化学成分研究。方法:采用水蒸气蒸馏法提取白术挥发油,通过气相色谱-质谱联用技术分析其成分,以离子流色谱峰面积归一化法计算各成分的百分含量。结果:共检测出41个色谱峰,鉴定出其中37个化合物,占挥发油总量的90%。其中含量高于1%的共有12个,并以苍术酮的含量最高(26.302%)。结论:于潜产白术挥发油中主要成分为苍术酮,这与已报道市售白术、湖南白术、河北白术挥发油中化学成分有一定差异。本研究为不同产地白术的开发应用研究奠定基础。

多指标正交试验优选白术芍药散提取工艺

白术芍药散是中医传统名方,临床对于腹泻有确切的治疗效果。然而,目前有关白术芍药散的提取工艺报道较少。该试验利用正交试验的方法,以复方中10个指标性成分和浸出物的含量作为指标,采用综合加权评分法处理数据,对提取工艺中乙醇浓度、溶剂倍量、浸泡时间、提取时间4个因素进行考察,以优化白术芍药散提取工艺。结果得出白术芍药散的最佳提取工艺为加入12倍量70%乙醇,浸泡1 h,提取2次,每次2 h。其中提取时间有显著影响。优化后的提取工艺稳定可靠,可为进一步开发利用该处方提供参考。

七味白术散及提取物对小鼠肠道菌群失调腹泻IL-8表达的影响

目的探讨七味白术散及七味白术散提取物对肠道菌群失调小鼠小肠黏膜IL-8的表达和血清中IL-8含量的影响。方法用头孢曲松钠和林可霉素联合中药番泻叶药液灌胃造模,观察小鼠大便性状、腹泻次数和粪便细菌培养结果确立造模成功后,将小鼠分成4组分别为模型组[MG,造模成功后不给予任何治疗又称自然恢复组(ZFG)],七味白术散组(QG),七味白术散提取物组(QTG),并设正常对照组(NG)。各治疗组给予相应药物0.4 m L/(只·次·d)灌胃,模型组、正常组小鼠给予等量的蒸馏水灌胃。分别于造模的第3天、7天、9天、11天和13天心脏采血处死小鼠,取血清采用ELISA法测IL-8的含量,取小肠行病理切片,采用免疫组织化学法观测小肠黏膜上皮细胞IL-8的阳性表达。结果血清IL-8含量变化与肠黏膜上皮细胞IL-8阳性表达变化趋势相一致:先升高后逐渐下降。模型组在造模3 d时IL-8表达明显升高,与正常对照组小鼠比较(P<0.05),7、9、11和13 d表达逐渐下降,但仍然高于正常和各治疗组(P<0.05);七味白术散组与提取物组IL-8的表达两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),两组各个时间点IL-8的表达均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05),在7、9 d时高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05),11、13 d时逐渐恢复正常,与正常组小鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论七味白术散及其提取物均能降低肠道菌群失调小鼠IL-8的表达,从而抑制肠道炎症反应,减少肠道黏膜的免疫损伤。

七味白术散及提取物对肠道菌群失调小鼠小肠黏膜上皮IFN-α,IL-4,IL-10表达的影响

目的:探讨七味白术散及七味白术散提取物对肠道菌群失调小鼠小肠黏膜干扰素-α(IFN-α),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)表达的影响。方法:取ICR小鼠,采用头孢曲松钠和林可霉素联合中药番泻叶药液ig造模,观察小鼠大便性状、腹泻次数和粪便细菌培养结果确立造模成功后,将小鼠分成4组分别为模型组,七味白术散组(5.2 g·kg-1),七味白术散提取物组(0.94 g·kg-1),并另设正常组。各治疗组给予相应药物0.4 m L/只,每天ig 1次,正常组、模型组小鼠给予等量的蒸馏水ig。分别于造模的第3,7,9,11,13天心脏采血处死小鼠,取小肠行病理切片,采用免疫组织化学法观测小肠黏膜上皮细胞IFN-α,IL-4,IL-10的阳性表达。结果:与正常组比较,模型组IFN-α在3,7 d时表达增高(P<0.05),9,11,13 d表达逐渐下降,但仍然高于正常和各治疗组(P<0.05);七味白术散组与提取物组IFN-α的表达两组之间比较无统计学意义,但两组在各个时间点IFN-α均低于模型组(P<0.05);小鼠小肠黏膜IL-4,IL-10表达模型组明显低于正常组、低于各治疗组(P<0.05),七味白术散组和提取物组小鼠小肠黏膜IL-4,IL-10表达在第9天时明显增高,13 d时与正常组比较,差别无统计学意义,提取物组与七味白术散组比较差别无统计学意义。结论:七味白术散及其提取物均有降低肠道菌群失调小鼠小肠黏膜IFN-α,提高IL-4,IL-10的表达,从而抑制肠道炎症反应,减少免疫损伤作用。

半夏白术天麻汤方药用半仿生提取法工艺条件优选

目的:用均匀设计优选半夏白术天麻汤的半仿生提取工艺。方法:采用UL(91×33)均匀试验设计表,以天麻素、甘草次酸、HPLC总面积、总黄酮、相对分子质量≤1 000的提取物为指标综合评判,优选半夏白术天麻汤半仿生提取的工艺条件。结果:3煎用水的pH依次为2.00,6.56,8.73;3煎总计时间为4.92 h。结论:结合生产实际,确定3煎用水的pH依次为2.0,6.5,8.5;提取时间依次为2.0,1.5,1.5 h。

半夏白术天麻汤提取液的血清指纹图谱研究

目的比较半夏白术天麻汤4种方法提取液的血清指纹图谱。方法取大白兔,ig半仿生-生物酶提取(SBEE)液,采集不同时刻的血样,分离含药血清,用HPLC法和UV法测定,将HPLC色谱峰数目、峰总面积以及紫外吸光度平均值标准化处理,加权求和后得综合评判Y值,以Y值大者为较佳采血时刻;然后对4种方法提取液此时刻的含药血清进行指纹图谱比较。结果给药后2 h的含药血清综合评判Y值最大;4种方法提取液2 h含药血清以SBEE液综合评判Y值最大。结论 SBEE液含药血清较水提法、醇提法、SBE法提取液含药血清中成分量高。

半夏白术天麻汤4种提取液对高血压痰湿壅盛型大鼠的影响

目的:用主要药效学实验验证半夏白术天麻汤用优选的半仿生-生物酶法(SBEE法)提取工艺进行提取的科学性和合理性。方法:建立高血压痰湿壅盛型大鼠模型,对半夏白术天麻汤4种方法提取液(SBEE法、SBE法、WE法、AE法)作对模型大鼠的11个指标影响的比较。结果:半夏白术天麻汤对高血压痰湿壅盛型大鼠的11个指标的影响,以SBEE法提取液综合评价RA值最大,分析半夏白术天麻汤提取方法以SBEE法效果较好。结论:半夏白术天麻汤以SBEE法提取为佳。

化学计量学结合信息熵赋权优选半夏白术天麻汤提取工艺

目的建立化学计量学与信息熵赋权相结合的提取工艺优化方法,并将其应用于半夏白术天麻汤水提工艺优化,以充分保证经典名方的有效性和质量一致性。方法以半夏白术天麻汤为模型药物,采用HPLC法建立指纹图谱,对共有峰峰面积进行主成分分析(PCA),以PCA总因子得分、指纹图谱相似度及干膏收率为评价指标,采用L9(34)正交设计法考察加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数对提取效果的影响,信息熵赋权法确定各指标的客观权重,优化水提工艺参数。结果通过中药色谱指纹图谱相似度评价系统匹配26个共有峰,并确定其中7个化合物。根据综合评分结果,确定最佳提取工艺为12倍加水量,煎煮2次,每次1 h。3批验证综合评分均值为0.4180,RSD为3.32%。结论优选后的工艺提取率高、稳定性和重复性好,适用于半夏白术天麻汤经典名方制剂的工业化生产。

半夏白术天麻汤方药4种提取液及其含药血清对大鼠离体胸主动脉环舒张作用

目的:用实验大鼠离体胸主动脉环舒张作用验证半夏白术天麻汤用一定规格超滤膜截留相对分子质量≤1 000 Da提取物为最终产物的半仿生-酶法(SBEE法)提取工艺进行提取的科学性和合理性。方法:制备Wistar大鼠离体胸主动脉环,比较半夏白术天麻汤4种方法≤1 000 Da提取液[半仿生-酶提取法(SBEE法)、半仿生提取法(SBE法)、醇提法(AE法)、水提法(WE法)]含药血清对离体胸主动脉环舒张作用的影响。结果:半夏白术天麻汤对离体胸主动脉环舒张作用的影响,以SBEE法提取液综合评价值最大,分析半夏白术天麻汤提取方法以SBEE法效果较好。结论:半夏白术天麻汤以SBEE法提取为佳。

白术提取物对db/db小鼠降血糖作用及机制研究

目的:研究白术提物对2型糖尿病db/db小鼠的治疗作用及其与GLP-1R可能的相关机制。方法:50只db/db小鼠随机分为模型对照组、白术提取物50、100、200 mg/kg组、二甲双胍150 mg/kg组,另取10只db/m小鼠作为正常对照组,各组小鼠分别灌胃给予相应的药物,给药第18 d测定口服葡萄糖耐量(OGTT),第21 d检测小鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等指标,计算血糖曲线下面积(AUC)、胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察肝脏细胞的病理改变情况,油红O染色观察肝细胞脂滴形成情况;Western blotting法检测小鼠肝组织中胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、叉头盒蛋白O1(FOXO1)与胰腺和十二指肠同源盒1(PDX-1)的蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组小鼠体质量增长显著增加(P<0.01),血清TG、TC、FBG、FINS、IL-1β和TNF-α含量显著升高(P<0.01),AUC和HOMA-IR显著升高而ISI显著降低(P<0.01),肝脏细胞明显病变,脂滴积聚,肝组织GLP-1R、p-PI3K和PDX-1蛋白表达显著下调,FOXO1的蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组相比,白术提取物100、200 mg/kg组小鼠体质量增长明显降低(P<0.05或P<0.01),血清TG、TC、FBG、FINS、IL-1β和TNF-α含量显著降低(P<0.01),AUC和HOMA-IR显著降低(P<0.01),ISI显著升高(P<0.01),小鼠肝脏细胞病变程度明显改善,肝脏脂滴积聚减少,肝脏GLP-1R、p-PI3K和PDX-1蛋白表达显著上调,FOXO1的蛋白表达显著下调(P<0.01)。结论:白术提取物明显调节自发性2型糖尿病小鼠的糖脂代谢紊乱,增强胰岛素敏感性,改善炎症水平,缓解肝脏损伤和脂质沉积,其机制可能与上调肝组织GLP-1R的蛋白表达相关。