夜香树提取物体内抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察夜香树提取物小鼠体内抗肿瘤作用。方法:以S180肉瘤H22肝癌作为实验瘤株,观察夜香树提取物中正丁醇部位、多糖部位对S180小鼠肉瘤抑瘤率,对H22腹水型肝癌进行肿瘤生存期试验。结果:夜香树提取物正丁醇部位和多糖部位明显抑制S180和H22小鼠体内肿瘤的发生和发展,剂量30、20、15 mg/kg的抑瘤率分别为52.30%、46.75%、42.28%和43.19%、37.96%、31.82%;夜香树提取物正丁醇部位和多糖部位能显著提高H22腹水瘤小鼠的生命延长率,生命延长率分别达到116.43%、44.52%、20.54%和109.52%、112.61%、115.01%。夜香树提取物正丁醇部位抑瘤作用与剂量呈正相关关系,而多糖部位抑瘤效果与剂量关系不明显。结论:夜香树提取物体内试验能延缓荷瘤小鼠的瘤体生长,明显延长荷瘤小鼠的生存期。

夜香树提取物体外抗肿瘤作用的实验研究

为探讨夜香树(CN)不同提取物体对体外培养的肿瘤细胞的作用,采用系统溶剂法提取CN皂苷和多糖,采用MTT法、细胞集落形成法、生长曲线法观察CN皂苷和多糖对宫颈癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404的生长抑制情况,结果发现CN皂苷和多糖对人胃癌细胞株SGC7901、宫颈癌细胞株Hela、肝癌细胞株Bele7404、等3种肿瘤细胞均有明显的抑制作用:在终浓度为62.5μg/mL范围,CN皂苷和多糖对上述3种肿瘤细胞的抑制率均大于80%,细胞抑制率均有明显的剂量依赖性,IC50均小于20μg/mL。CN皂苷和多糖对宫顶癌细胞株Hela、人胃癌细胞株SGC7901、人肝癌细胞株Bele7404细胞有显著的抗增殖作用,其抗增殖作用呈明显的剂量依赖关系。

夜香树花甾体皂苷诱导K562细胞凋亡机制研究

目的研究夜香树花甾体皂苷对人白血病细胞K562的增殖抑制作用和凋亡诱导影响。方法用MTT法检测夜香树花甾体皂苷对K562细胞的增殖抑制作用;Wright's染色观察细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。Annexin V/PI双标记法、TUNEL法检测细胞凋亡特点;采用Western blotting法检测Caspase-3、线粒体和胞浆中细胞色素C表达。结果夜香树花甾体皂苷对K562细胞生长具有显著的抑制作用,并呈剂量-时间依赖性,夜香树花甾体皂苷可阻滞K562细胞周期于G0/G1期,经夜香树花甾体皂苷处理后的K562细胞Annexin V+/P-细胞显著增加,TUNEL细胞涂片可见强烈荧光效应。夜香树花甾体皂苷可诱导K562细胞线粒体细胞色素C释放和Caspase-3活化。结论夜香树花甾体皂苷可有效抑制K562细胞增殖,诱导K562细胞凋亡,与作用剂量和作用时间呈正相关,这一过程可能与夜香树花甾体皂苷损伤线粒体和激活Caspase-3有关。

夜香树叶甾体皂苷的体外抗肿瘤活性

目的分离并鉴定夜香树叶的甾体皂苷并测试其抗肿瘤活性。方法运用反复硅胶柱层析的方法对夜香树叶正丁醇部位进行分离纯化,以LC-MS光谱数据确定其结构;采用MTT法评估分离物对3种肿瘤细胞株的毒性。结果从夜香树叶的正丁醇部位中分得3个化合物,化合物1为spirost-5-ene-23-diol[2α,3β,25R]3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosyl{(3→1)-β-D-xylopyranosyl}(1→4)-β-D-galactopyranoside;化合物2为spirost-5-ene-3-diol[3β,25R]3-O-[{α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)}-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)]-β-D-glucopyranoside;化合物3为spirost-5-ene-23-diol[2α,3β,25R]3-O-[β-D-glucopyranosyl-(1→3)-β-D-xylopyr-anosyl}(1→4)-β-D-galactopyranoside。3种皂苷均可以抑制肿瘤细胞BEL7404、HeLa和A549细胞的生长,并呈现一定剂量依赖关系和时间依赖关系。结论夜香树甾体皂苷体外对3种肿瘤细胞的抑制作用强度可能取决于鼠李糖苷和吡喃葡萄糖苷的数量与甾体皂苷3号碳上的连接方式。

对夜来香生物活性的研究

[目的]为研制和开发夜来香源绿色农药、夜来香多功能产品提供依据。[方法]采用超声波提取获得夜来香乙醇提取液,研究提取液对果蝇的熏蒸作用、驱避作用和触杀作用。[结果]果蝇在夜来香乙醇提取液和夜来香稀溶液中经过1 h的熏蒸,全部死去,说明夜来香乙醇提取液和夜来香稀溶液对果蝇有较好的驱避作用,30 min内驱避效果达100%。夜来香稀溶液和夜来香乙醇提取液对果蝇的触杀作用都很弱,触杀效果仅为10%。在受到夜来香乙醇提取液和夜来香稀溶液的熏蒸时,果蝇有局促不安的症状,并渐渐失去活力直至死亡,30 min内熏蒸效果达100%。[结论]夜来香对果蝇有较好的熏蒸作用和驱避作用,但触杀作用较弱。

两种香花植物叶、花提取物抑菌活性的研究

研究桂花、夜来香两种校园常见香花植物叶、花乙醇提取物对不同微生物的抑菌作用,结果表明:桂花、夜来香花提取样品的抑菌效果均要比叶的好,它们对不同微生物种类的抑菌能力强弱不同。总体上,夜来香叶、花不同提取样品对不同菌种的抑菌效果要强于桂花。

夜香树提取物Nocturnoside B对阿霉素诱导的大鼠心肌损伤的保护作用及机制研究

目的观察夜香树提取物Nocturnoside B对阿霉素诱导大鼠心肌损伤的的保护作用及可能的作用机制。方法从夜香树叶和嫩枝用正丁醇提取、分离并鉴定化合物Nocturnoside B。用阿霉素诱导建立大鼠的心肌损伤模型后,把大鼠分为4组,分别为对照组、阿霉素组、Nocturnoside B大、小剂量组。通过观察大鼠一般状态、腹水以及大鼠死亡率情况,观察Nocturnoside B对大鼠血清心功酶的影响,用透射电镜观察各组大鼠心肌的超微结构;用TUNEL法检测心肌组织细胞凋亡率、ELISA法检测心肌组织中凋亡相关基因蛋白激酶B(Akt)和糖原合成激酶3β(GSK-3β)的表达。结果 Nocturnoside B可以改变阿霉素致心肌损伤的一般状态。Nocturnoside B组动物死亡率和腹水量明显减少,高剂量组血清乳酸脱氢酶(LDH)水平比阿霉素组明显降低,电镜下Nocturnoside B组大鼠心肌细胞结构基本完好,肌节排列基本正常,心肌细胞凋亡指数明显减少(P<0.01),与对照组相比,阿霉素组Akt明显增高,GSK-3β明显降低;与模型组组相比,Nocturnoside B组Akt明显降低,GSK-3β明显增高。结论 Nocturnoside B对阿霉素致心肌损伤具有保护作用,其机理可能通过作用于Akt/GSK-3β信号通路抑制心肌细胞凋亡来实现的。

夜香树提取物对小鼠白血病L1210细胞生长的抑制作用

目的探讨夜香树不同提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制作用及机制。方法采用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、平板集落法和Hoechst33258荧光染色法观察夜香树提取物对L1210细胞的生长抑制和凋亡的影响。结果夜香树提取物中正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞有浓度依赖性的细胞毒性作用,在终浓度为62.5μg.ml-1范围,其正丁醇提取物和多糖提取物对L1210细胞的抑制率大于90%,IC50均小于10μg.ml-1,夜香树正丁醇和多糖提取物能抑制L1210细胞集落形成,并可诱导L1210细胞发生凋亡。结论夜香树提取物对小鼠白血病细胞株L1210细胞的增殖抑制可能通过诱导L1210细胞发生凋亡而发挥作用。

一类新型高效驱蚊复方精油的研究

[目的]为新型驱蚊产品的开发、生产与应用提供理论依据和试验数据。[方法]对夜来香挥发油提取物中驱蚊成分进行分离与提纯,并对其产品开发进行研究。[结果]从夜来香提取到15.92 g挥发油,提取率为3.16%。夜来香挥发油对蚊虫有较好的杀伤效果。复方精油具有高效的驱蚊性,具有良好的市场应用价值。复方精油可以直接涂于皮肤上,对皮肤无刺激作用。[结论]新型复方精油可制成固体空气清新剂。

夜来香花提取物对肝癌H_(22)荷瘤小鼠肿瘤生长及凋亡的影响

【目的】研究夜来香花提取物对肝癌H_(22)荷瘤小鼠肿瘤生长及凋亡的影响。【方法】接种H_(22)瘤细胞悬液于小鼠左前支腋窝皮下进行造模,设生理盐水为阴性对照组、环磷酰胺为阳性对照组,治疗组为夜来香花提取物小剂量组、中剂量组、大剂量,共设5个组,连续灌胃给药,处死荷瘤小鼠,剥出小鼠右腋下的瘤块,称量瘤块重量,计算瘤块抑制率;采用流式细胞检测仪检测其对肝癌H_(22)细胞周期和细胞凋亡的影响。【结果】夜来香花提取物小剂量组、中剂量组、大剂量组的抑瘤率分别达到29.10%、40.17%、50.85%,差异均有统计学意义,抑制肿瘤生长作用与剂量呈正相关;大剂量组对肝癌H_(22)细胞周期影响明显,凋亡率较高,为33.5%,可能是通过阻断H_(22)细胞由G_(0)/G_(1)期进入S期,从而诱导细胞凋亡。【结论】夜来香花提取物可有效抑制小鼠肝癌H_(22)细胞的生长增殖,并诱导其凋亡。

夜香树提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:观察夜香树提取物对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。方法:通过检测H22荷瘤小鼠碳粒廓清率、血清溶血素水平、白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量变化,观察夜香树95%乙醇提取物175,350,700 mg.kg-1 ig对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果:夜香树提取物可明显提高H22荷瘤小鼠廓清指数和吞噬指数,并能显著提高血清中IL-2和TNF-α的含量(P﹤0.05),但对血清溶血素水平影响不明显。结论:夜香树提取物可增强荷瘤小鼠细胞免疫功能。

夜香树叶正丁醇提取物中流份C6和C7对人胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡作用的影响

目的：研究夜香树（CN）叶正丁醇提取物中流份C6、C7对人胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响。方法：采用不同比例的氯仿-甲醇（1∶9、1∶7）对CN叶正丁醇部位梯度洗脱,得到流份C6和C7。将SGC7901细胞分为空白对照组和C6、C7组。分别用0（空白对照）、5、10、20、40、80μg/ml的C6、C7培养SGC7901细胞72 h后采用MTT法检测其对细胞的增殖抑制作用,计算增殖抑制率、半数抑制浓度（IC50）;用10μg/ml C6、C7培养SGC7901细胞72 h后,采用集落形成法检测其对细胞的集落形成能力的影响,计算集落形成率;瑞氏-姬姆萨混染法、Hoechst 33258/碘化丙啶（PI）染色法观察细胞形态学变化。结果：MTT结果显示,流份C6、C7对SGC7901细胞增殖有不同程度的抑制作用,抑制率分别为22.1%~80.0%、19.6%~79.7%,IC50分别16.4、18.05μg/ml。与空白对照组比较,C6和C7组细胞的集落形成率降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;给药组细胞凋亡细胞、死细胞更多。结论：CN叶正丁醇提取物中流份C6、C7可显著抑制SGC7901细胞增殖并诱导其凋亡。

夜香树多糖诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡作用的探讨

目的：探讨夜香树多糖对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡诱导作用并研究其可能的作用机制。方法：从夜香树叶中提取夜香树多糖,分别用终质量浓度为2.5,5,10 mg·L-1的夜香树多糖处理处于对数生长期的MG-63细胞,另设MG-63细胞为空白组;不同质量浓度夜香树多糖作用72 h后,采用MTT法检测MG-63细胞增殖抑制作用;不同质量浓度夜香树多糖作用46 h后,采用透射电镜观察经处理过的细胞超微结构的改变,采用流式细胞术检测夜香树多糖对MG-63细胞凋亡率的影响,Western blot法分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）,Caspase-8,Caspase-9和B细胞淋巴瘤-白血病2（Bcl-2）的蛋白表达水平。结果：夜香树多糖显著抑制人骨肉瘤细胞MG-63增生,在5~10 mg·L-1质量浓度显著抑制细胞增殖,并呈浓度和时间的依赖性;电镜下可发现夜香树多糖能诱导细胞凋亡,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,细胞表面绒毛减少;流式细胞仪检测表明,5 mg·L-1夜香树多糖可使MG-63细胞阻滞在G0/G1;夜香树多糖能剂量依赖诱导MG-63凋亡,浓度依赖性的降低MG-63细胞的Bcl-2蛋白表达和升高Caspase-8的蛋白表达（P〈0.05,P〈0.01）。结论：夜香树多糖能抑制MG-63细胞增殖,诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡,与作用剂量和作用时间呈正相关,这一过程可能与夜香树多糖下调Bcl-2和激活Caspase-8有关。

夜香树花提取物对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的观察夜香树花提取物对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。方法采用MTT法,研究夜香树花总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位对Con A和LPS诱导的脾淋巴细胞增殖的影响。结果夜香树花总提取物和正丁醇部位在浓度为20μg/ml时对Con A诱导状态下的脾T淋巴细胞增殖的促进效果最好,而95%乙醇部位在浓度为20μg/ml^40μg/ml之间增殖的促进效果最好;三者对LPS诱导状态下的脾B淋巴细胞增殖有较好的促进作用,且在浓度为10μg/ml^40μg/ml之间增殖的促进效果最好。结论夜香树花总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位对诱导状态下的脾淋巴细胞的增殖都具有一定的促进作用,可提高荷瘤小鼠细胞免疫功能,但其增殖效果在一定程度上与浓度有关。