生物被膜对鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌耐药表型的影响

探讨鸡源肠外致病性大肠埃希氏菌(ExPEC)生物被膜(BF)形成能力及BF与耐药性之间的相关性,采用96孔微量板法和正交试验测定10株鸡源ExPEC的BF形成能力和BF强阳性菌株的最佳成膜条件,使用二倍倍比稀释法测定β-内酰胺类抗生素对生物被膜态与浮游态鸡源ExPEC的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,10株鸡源ExPEC的BF阳性率为90%,E-26、E-28、E-43为弱阳性菌株(+);E-27、E-30、E-42为中等阳性菌株(++),E-39、E-40、E-41为强阳性菌株(+++),E-20为阴性菌株;3株强阳性菌株BF最佳成膜条件不相同;3株BF强阳性鸡源ExPEC的BF形成后,对β-内酰胺类抗生素耐药性有不同程度增加,同种抗生素对不同菌株的MIC变化可能不同,不同抗生素对同一菌株变化也不同。因此,鸡源ExPEC的BF阳性率较高,但各菌株形成BF的能力存在差异,不同菌株形成BF所需的条件不完全相同,BF形成会使鸡源ExPEC对抗生素的耐药水平增强,但同为BF阳性鸡源ExPEC,形成BF后β-内酰胺类抗生素耐药水平变化存在差异。

不同地区101个禽源性大肠杆菌分离株的致病性试验

从国内１８个省、市、自治区大肠杆菌病疑似病禽中分离并鉴定出大肠杆菌５９５株，鉴定出其中４４０个分离株的血清型。采用Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ氏报道的方法，测定了来自不同地区的６０个优势血清型分离株对ＳＰＦ鸡、３０个其他常见血清型及１１个国内少见血清型分离株对普通易感鸡的致病性。结果表明：所测定的１０１个分离株均为致病株，且９０％以上属高、中度致病株。

河南省鸡致病性大肠杆菌血清型、耐药性的研究

对河南省3个不同地区的38株鸡致病性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定、15种抗生素药物的耐药性试验。结果表明：河南省鸡致病性大肠杆菌的血清型种类众多,以O78,O1,O2为优势血清型,分别占定型菌株的35.29%,23.53%,17.65%;耐药图谱复杂,可以分为21种耐药类型,菌株耐药种类4-14种;不同来源的菌株其血清型、耐药性一般不同;相同来源的菌株,其耐药图谱相同或相似,但血清型有多种。

不同省区鸡源大肠杆菌耐药性调查与系统进化群分析

为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17.0软件进行差异显著性分析。结果显示:低致病群B1(38.13%)和非致病群A(34.02%)菌株分布相对较多,其次是高致病群D(21.23%)和B2(6.16%);鸡源大肠杆菌耐药严重,12种药物的耐药率在50%以上,多重耐药问题突出,多重耐药率高达98.86%;不同省区鸡源大肠杆菌菌株的耐药程度存在差异,个别药物(如奥格门丁、头孢噻呋等)差异显著;高致病群B2和D群菌株的耐药程度较B1和A群菌株严重,其中氧氟沙星、庆大霉素、大观霉素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、复方新诺明、奥格门丁等7种药物差异显著(P<0.05)。试验表明,我国鸡源大肠杆菌高致病菌株检出率高,且耐药程度相对严重,在适宜条件下更易导致鸡群发病且较难控制。

鸡大肠杆菌病的流行病学研究

对来源于河南省32个县市的93株鸡致病性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定、16种抗生素药物的耐药性试验和耐药性质粒的检测分析．结果表明：河南省鸡致病性大肠杆菌的血清型种类众多，以O78、O1、O2为优势血清型，分别占定型菌株的35．14％、18．92％、13．51％；耐药图谱复杂，可以分为58种耐药类型，菌株耐药种类3—14种；质粒图谱复杂，可分为49种质粒图谱，质粒条带1—6条．

恩诺沙星与磺胺间甲氧嘧啶联合药敏试验

为研究氟喹诺酮类药物和磺胺类药物在治疗鸡大肠杆菌病时的相互作用,本试验采用肉汤稀释棋盘法,用恩诺沙星和磺胺间甲氧嘧啶对鸡致病性大肠杆菌进行了体外联合药敏试验。单药恩诺沙星和磺胺间甲氧嘧啶的最小抑菌浓度(MIC)分别为32、256μg/mL;联合用药的MIC分别为8μg/mL和32μg/mL,经计算FIC指数为0.375。结果表明,恩诺沙星与磺胺间甲氧嘧啶联合用药对大肠杆菌呈现协同抗菌作用。

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验。结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6%。

河南省鸡源致病性大肠杆菌耐药性的监测分析

对来源于河南省32个县市的93株鸡源致病性大肠杆菌进行了16种抗生素药物的药敏试验和菌株耐药性与质粒图谱间关系的分析研究。结果表明:93株鸡源致病性大肠杆菌均为多重耐药菌株,耐药种类3～14种,耐药图谱复杂,可以分为58种耐药类型,相同来源的大肠杆菌耐药图谱、质粒图谱相似,但菌株耐药种类与质粒图谱条带的多少无一定的相关性。

山东地区产CMY-2型β-内酰胺酶鸡源大肠杆菌的出现及相关特性研究

从山东省不同地区分离到126株鸡源大肠杆菌,利用PCR对CMY-2基因进行检测,其中15株呈CMY-2阳性;核苷酸序列分析结果表明,除JN10外,其余序列与GenBank中已发表的CMY-2序列完全相同;采用K-B法检测15株大肠杆菌对抗生素的敏感性,结果发现,菌株均耐头孢噻吩、头孢唑啉、头孢克洛、头孢克肟、氨苄西林、链霉素、四环素、氯霉素和甲氧苄啶/磺胺甲噁唑,其中3株(JN5、JN9和HZ9)耐头孢曲松和头孢他啶,但所有菌株对头孢吡肟敏感;改良三维试验证实,15株大肠杆菌均产AmpCβ-内酰胺酶,其中4株同时产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);接合试验表明,携带CMY-2基因的质粒能在大肠杆菌间传递;脉冲场凝胶电泳(PFGE)排除了所有菌株来源于同一大肠杆菌克隆的可能性。本研究为探讨和解决细菌耐药性问题提供了重要的理论依据和研究基础,同时对了解山东地区大肠杆菌的耐药状况和耐药性散播情况提供了重要的信息。

肠外致病性大肠埃希菌毒力因子研究进展

近年来,在人类饲养的伴侣宠物、猪、牛、羊、家禽以及林麝等动物体内均已分离到一种能够引发肠外组织感染的大肠埃希菌--肠外致病性大肠埃希菌(extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC)。ExPEC所具有的毒力特征使其能够在消化道以外的组织脏器中定殖增殖,在临床上能引起人和动物的严重感染甚至导致死亡。由于ExPEC导致的疾病存在治疗困难且易复发的特点,给医疗事业和畜牧业造成了巨大的经济损失。ExPEC较强的致病性与其携带的众多毒力因子密不可分。论文就已发现的ExPEC主要毒力因子研究进展进行分类阐述,并介绍了不同毒力因子在ExPEC感染宿主过程中的致病机制。

一株致猪肺炎大肠杆菌的分离鉴定及其耐药表型、耐药基因型分析

为了了解猪肠外致病性大肠杆菌的耐药性,试验采用菌落形态观察、小鼠毒力试验、回归动物试验和PCR等方法对1株引起猪肺炎的病原菌进行鉴定,并通过微量稀释法进行耐药性检测,在全基因组测序的基础上对耐药基因型进行分析。结果表明:该病原菌是肠外致病性大肠杆菌,呈多重耐药,其染色体基因组携带有外排调控基因Mar C、SoxR,外排泵基因MATE和ABC,耐药基因移动原件IS,四环素耐药基因tet,氟苯尼考耐药基因FloR及氯霉素乙酰转移酶基因等。

鸡致病性大肠埃希氏菌的感染试验

致病大肠杆菌E_(co2)F_3菌株经普通肉汤培养后,按每毫升活菌稀释成1亿、3亿、7.5亿、15亿,分别给予3～4周龄雏鸡经口滴入,试鸡脏器细菌分离率,与滴入细菌浓度成正比。对每只鸡以1亿个活菌经口滴入感染,肝、脾、肺、肾病变出现明显的规律,其中肝、脾较严重。

不同遗传谱系肠外大肠埃希菌毒力因子检测

目的通过检测肠外致病性大肠埃希菌（ExPEC）30种毒力因子了解其基因的检出情况及遗传谱系分型情况，并初步探讨两者关系，探究ExPEC的分子流行病学特点。方法210株分离自血液、尿液及其他部位的菌株参与研究，采用多重PCR方法检测临床分离菌株毒力因子基因的存在情况并进行遗传谱系分型，比较菌株遗传谱系分型各组间毒力因子基因的检出情况是否有差异。结果ExPEC中毒力基因fimH,fyuA、traT、iutA、kpsMTⅡ、PAI，的检出率较高；遗传谱系分型表明4组百分比分别为24％、11％、29％和36％。在各组之间进行毒力因子基因检出情况比较显示，毒力因子中有8种仅与B2组联系密切，4种仅与D组联系密切，6种与B2组和D组均有关。结论ExPEC遗传潜系分型主要属于B2组和D组，ExPEC毒力因子基因检出情况与菌株遗传谱系分型关系密切。