持续性根尖周炎根外生物膜的研究进展

持续性根尖周炎是指通过反复根管治疗后仍迁延不愈的慢性根尖周炎,根外感染阻止了根尖周病变的愈合,根外生物膜是根外感染的主要形式之一。本文就近年来根外生物膜和持续性根尖周炎的关系,以及其形态结构、微生物组成和清除方法等方面的研究现状作一综述。

持续性根尖周炎患牙根管外细菌定植状态的观察

目的了解根管外细菌在持续性根尖周炎患牙根尖区根面上的定植状态,以探讨根管外生物膜在持续性根尖周感染致病机制中的意义。方法采用扫描电镜与组织病理学染色相结合的方法,观察正畸拔除牙（5例）和持续性根尖周炎（10例）患牙根尖区根管外生物膜的分布和结构。拔牙和根尖外科手术过程获得的根尖样本经洗涤、固定和冷冻干燥后,用扫描电镜（无损伤性）观察根尖区外表面的超微结构。同样的样本再经过脱钙和横断面连续组织切片后,进行细菌Brown＆Brenn染色观察。结果在扫描电镜下,正畸拔除牙的根尖区结构无异常。所有持续性根尖周炎患牙的根尖区呈现病变状态,根尖区几乎没有胶原纤维的覆盖,牙骨质暴露和吸收,其表面观察到根管外生物膜结构。细菌Brown＆Brenn染色结果显示,根管外生物膜由大量基质成分包裹的红染的革兰阴性菌和呈紫色的革兰阳性菌相互交织排列形成,其厚度约为18～30μm。结论根管外细菌以生物膜形式定植在持续性根尖周炎患牙根尖区外表面,根管外生物膜的存在有可能是导致持续性根尖周感染的重要因素之一。

利用激光共聚焦扫描显微镜观察根管外细菌的分布和活性

目的 :利用激光共聚焦扫描显微镜观察慢性根尖周炎患牙根尖区根管外细菌的分布范围和活性。方法:临床采集10例需拔除的伴有慢性根尖周炎的单根牙(实验组)和5例因正畸需要拔除的健康单根牙(对照组)。所有样本首先经LIVE/DEAD禄R Bac LightTM死活菌染色试剂盒染色,各样本包埋后由根尖向冠方切取5张1 mm厚的切片。每张切片上随机选择3个视野,用激光共聚焦扫描显微镜观察每张切片上根管外细菌的分布情况和细菌的活性。结果:对照组中,牙骨质有较弱的荧光信号,通过设定观察条件,以对照组切片上无荧光信号为基线进行观察。实验组10例样本中,8例样本的根尖区切片的牙根外表面可观察到由显示绿色荧光信号的活菌和显示红色荧光信号的死菌共同构成的根管外生物膜。根管外细菌主要分布于距根尖2~3 mm范围内的根面牙骨质上。在68%的被观察视野中,活菌的绿色荧光的强度强于死菌的红色荧光。结论:根管外生物膜由活菌和死菌共同构成,分布于部分慢性根尖周炎患牙的根尖区牙骨质外表面上。

持续性根尖周炎根尖区微生物群落多样性分析

目的:了解持续性根尖周炎患牙根尖段微生物群落的组成和多样性。方法:在根尖外科手术过程中采集13例持续性根尖周炎患牙根尖段样本,提取样本中微生物群落的总DNA。采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析其微生物群落组成的多样性。对DGGE图谱上的条带进行割胶测序。结果:根尖段微生物群落为多菌种组成的细菌群落。但各样本间的相似度不高,菌群组成存在一定的差异。从DGGE凝胶上共获得26条可辨认的条带,检出菌种包括兼性厌氧菌、专性厌氧菌和需氧菌。其中,口腔放线菌属和口腔丙酸菌属的检出率较高,分别是84.6%和61.5%。结论:持续性根尖周炎患牙根尖段微生物群落为由多菌种组成的细菌群落。口腔放线菌属和口腔丙酸菌属有可能是持续性根尖周炎的条件致病菌。

持续性根尖周炎根管内外生物膜特性的研究进展

持续性根尖周炎又称为难治性根尖周炎,其与细菌在根管内和根外形成的生物膜有关,是临床研究的热点。持续性根尖周炎根管内外生物膜虽相邻,但形态学及细菌构成等方面均有所区别,本文就近年来持续性根尖周炎根管内生物膜与根外生物膜的形态结构及细菌组成方面的异同,及其依存关系等方面的研究现状作一综述。

根尖生物膜清除方法的研究进展

根尖生物膜是指存在于感染根管牙根表面牙骨质上的生物膜,常见于难治性根尖周炎或持续性根尖周炎,可导致根尖周病变迁延不愈。因其存在位置隐匿且附着牢固,难以清除干净,给感染控制带来了巨大挑战。如何有效清除根尖生物膜是临床关注的重点和热点问题。本文就清除根尖生物膜方法的基础和临床研究进展作一综述。