半夏莪术消痞汤治疗脾胃湿热型慢性非萎缩性胃炎临床研究及对胃肠激素水平的影响

目的探讨半夏莪术消痞汤治疗脾胃湿热型慢性非萎缩性胃炎(chronic non-atrophic gastritis,CNAG)的效果及对胃肠激素水平的影响。方法选取2021年1月—2021年7月该院320例脾胃湿热型Hp感染CNAG患者,随机数字表法分为观察组与对照组,每组各160例患者,对照组给予常规西医治疗,观察组在对照组的基础上给予半夏莪术消痞汤,两组均持续治疗14d,比较两组临床疗效、Hp清除率、内镜积分及病理组织学积分、胃肠激素及氧化应激指标水平。结果观察组临床治疗有效率90.00%(144/160)高于对照组81.88%(131/160)(P<0.05);观察组Hp转阴率76.88%(123/160)高于对照组64.38%(103/160)(P<0.05);观察组治疗后内镜检查黏膜红斑、黏膜糜烂、黏膜出血积分以及病理组织学慢性炎症、活动性炎症积分低于对照组(P<0.05);观察组治疗后胃脘疼痛、脘腹痞胀、口黏且苦、泛恶、纳呆、身重困倦、大便黏滞不爽证候积分低于对照组(P<0.05);观察组治疗后血浆胃动素(MOT)、促胃液素(GAS)、胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及PGⅠ/PGⅡ比值水平高于对照组(P<0.05);观察组治疗后丙二醇(MDA)水平低于对照组,超氧化物歧化酶(SOD)水平高于对照组(P<0.05)。结论在常规西医治疗的基础上,联合使用半夏莪术消痞汤治疗CNAG可有效减轻患者临床症状,提高Hp清除率,调节胃肠激素水平,减轻氧化应激。

莪术对黑色素瘤细胞转移相关能力的影响

目的:研究中药莪术对小鼠黑色素瘤高转移细胞B16-BL6转移相关能力的影响。方法:分别采用cck-8法、细胞粘附实验、重组基底膜侵袭实验、趋化性运动能力实验以及小鼠黑色素瘤自发性转移模型,观察莪术对B16-BL6细胞生长、粘附、侵袭、运动及转移能力的影响。结果:莪术水提液在较高浓度下能显著抑制B16-BL6的增殖;显著抑制B16-BL6对LN的粘附能力,侵袭性及趋化性运动能力,显著抑制黑色素瘤的在体生长及肺转移。结论:莪术水提液能够抑制黑色素瘤高转移细胞株B16-BL6的转移,可能与其能够抑制B16-BL6与细胞外基质的粘附以及降低B16-BL6的侵袭性和运动能力有关。

“三棱-莪术”组分配伍对大鼠子宫肌瘤的影响

目的：研究＂三棱-莪术＂组分配伍（三棱总黄酮、莪术挥发油配伍）对实验性子宫肌瘤大鼠的作用及其机制。方法：采用肌肉注射黄体酮和灌胃已烯雌酚片法造成大鼠子宫肌瘤模型。结果：三棱-莪术组分配伍（2：1）组10g生药/kg、三棱莪术组分配伍（1：1）组6.67g生药/kg、三棱莪术组分配伍（1：2）组10g生药/kg能明显减小子宫肌瘤大鼠的子宫系数、子宫分角下及分角根部横径;能够抑制子宫肌瘤大鼠子宫平滑肌肥大、减小平滑肌细胞增生程度;三棱莪术组分配伍（1：1）组6.67g生药/kg、三棱莪术组分配伍（1：1）组3.33g生药/kg、三棱-莪术组分配伍（2：1）组10g生药/kg、三棱莪术组分配伍（1：2）组10g生药/kg显著降低子宫肌瘤大鼠血清雌二醇（E2）、孕酮（P）水平;三棱莪术组分配伍（1：1）组6.67g生药/kg、3.33g生药/kg、三棱莪术组分配伍（1：2）10g生药/kg、三棱莪术组分配伍（2：1）10g生药/kg能够明显抑制大鼠子宫肌层中c-myc、wnt5b基因蛋白产物的表达;三棱莪术组分配伍（1：1）组1.67g生药/kg能够明显抑制大鼠子宫肌层中wnt5b基因蛋白产物的表达;三棱莪术组分配伍（1：1）组6.67g生药/kg能够明显抑制大鼠子宫肌层中β-catenin基因蛋白产物的表达。其起效剂量及剂量范围分别为：三棱莪术组分配伍3.33g生药/kg,3.33~10.0g生药/kg。结论：＂三棱-莪术＂组分配伍对实验性大鼠子宫肌瘤病有明显的防治作用,其作用机理主要是通过改变肌瘤子宫的结构、调节内分泌激素水平、改善病理组织学、降低雌二醇、孕酮的含量和抑制子宫肌层中c-myc、wnt5b、β-catenin基因蛋白产物的表达。

莪术含药血清调控大鼠肝星状细胞Shh和SFRP1的机制研究

目的:研究莪术含药血清调控大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)中Hedgehog(Hh)信号通路分泌性信号糖蛋白配体(Sonic Hedgehog,Shh)和Wnt信号通路负调节因子分泌型卷曲相关蛋白1(Secreted Frizzled-Related Proteins-1,SFRP1)表达的机制。方法:大鼠50只随机分为空白组、莪术1组(3.75 g/kg)、莪术2组(6.25 g/kg)、莪术3组(8.75 g/kg)、秋水仙碱组,分别制备含药血清。MTT法预实验筛选莪术最佳大鼠灌胃剂量及莪术含药血清最佳作用浓度,根据预实验结果进行正式实验。正式实验中,体外培养的大鼠HSCs分为8组:空白组、模型(瘦素)组、Hh通路抑制剂(环巴胺)组、莪术最佳剂量浓度组、环巴胺+莪术最佳剂量浓度组、Hh通路激动剂(Purmorphamine)组、Purmorphamine+莪术最佳剂量浓度组、秋水仙碱组。除空白组外,其余各组经瘦素(0.1μg/ml)诱导及相应含药血清干预24 h后,MTT法检测HSCs增殖,RT-PCR法检测Shh mRNA和SFRP1 mRNA表达,Western-blot及免疫荧光法检测Shh和SFRP1蛋白表达。结果:预实验得出莪术最佳大鼠灌胃剂量为6.25 g/kg,莪术含药血清最佳作用浓度为10%。正式实验结果提示,用瘦素活化HSCs后,Shh mRNA和蛋白表达显著上调,SFRP1 mRNA和蛋白表达显著下调。环巴胺(20μmol/L)、10%莪术含药血清(6.25 g/kg)、秋水仙碱(100μg/kg)干预后,Shh mRNA和蛋白表达显著下调,SFRP1 mRNA和蛋白表达显著上调。莪术含药血清与环巴胺协同干预后,Shh mRNA和蛋白表达显著下调,SFRP1 mRNA和蛋白表达显著上调。Purmorphamine(1μmol/L)干预后,Shh mRNA和蛋白表达显著上调,SFRP1 mRNA和蛋白表达显著下调。用莪术含药血清干预Purmorphamine组后,Shh mRNA和蛋白表达显著下调,SFRP1 mRNA和蛋白表达显著上调。结论:Shh和SFRP1涉及Hh和Wnt通路的异常调控,在瘦素诱导活化的HSCs中存在负相关关系;莪术含药血清可通过调控瘦素诱导活化的HSCs中Shh和SFRP1的表达,参与Hh和Wnt信号通路抑制HSCs的活化和增殖。

基于网络药理学研究三棱-莪术药对抗子宫内膜癌的作用机制及实验验证

目的:利用网络药理学、分子对接技术,探讨三棱-莪术药对抗子宫内膜癌的作用机制,并通过人子宫内膜癌细胞ISK进行体外试验验证重要信号通路。方法:在TCMSP平台筛选出三棱-莪术药对主要活性成分;通过TCMSP数据库和Swiss Target Prediction得到活性成分的靶点;在GeneCards等数据库检索疾病的作用靶点;利用Cytoscape3.7.2软件建立可视化药物-活性成分-关键靶点调控网络及PPI网络;用Metascape数据库和OmicShare tools对关键靶点进行GO富集与KEGG分析;并通过PDB数据库与Discovery Studio 2016软件对活性成分和核心靶点进行分子对接。最后通过ISK细胞对重要信号通路进行验证。结果:从三棱-莪术药对筛选出活性成分11个,包括去氢木香内酯、芒柄花黄素、豆甾醇、反式甘多酸、谷固醇、秦皮甲素、β-榄香烯、双去甲氧基姜黄素、莪术醇、异莪术烯醇、温金素,药物与疾病共同的关键靶点92个,核心靶点6个,包括RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、原癌基因酪氨酸蛋白激酶Src、丝裂原激活的蛋白激酶1、雌激素受体、热休克蛋白HSP 90-alpha、丝裂原激活的蛋白激酶8。GO富集与KEGG分析三棱-莪术药对活性成分主要参与癌症的途径、癌症中的蛋白聚糖、PI3K-AKT信号通路等。分子对接提示芒柄花黄素、双去甲氧基姜黄素、温金素三个活性成分与核心靶蛋白结合能力较好。CCK8结果表明,与空白对照组比较,双去甲氧基姜黄素能显著抑制ISK细胞的增殖(P<0.01);在显微镜下可观察到,双去甲氧基姜黄素3、6、9μg/mL组ISK细胞数量明显减少,Western blot结果显示,与空白对照组比较,双去甲氧基姜黄素9μg/mL组能明显下调PI3K、AKT蛋白的表达(P<0.05)。结论:三棱-莪术药对可能主要通过芒柄花黄素、双去甲氧基姜黄素、温金素调节细胞代谢、细胞增殖与凋亡等途径发挥抗子宫内膜癌作用。