Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭

目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。

猪肠毒素大肠杆菌(ETEC)F18受体基因型检测报告

采用PCR-RFLP法检测了湖南境内大白、长白、杜洛克3品种共158头猪的E.coliF18受体基因型。结果表明,抗性基因型AA的频率为0.11,敏感型AG、GG的频率分别为0.35和0.54。

^(18)F-FDG PET/CT在弥漫大B细胞淋巴瘤免疫亚型诊断中的应用

目的探讨^(18)F-FDG PET/CT在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)免疫亚型诊断中的应用价值。方法回顾性分析69例在本院初诊DLBCL患者的^(18)F-FDG PET/CT表现。观察生发中心B细胞样(GCB)和非生发中心(non-GCB)的^(18)F-FDG PET/CT表现特征;分析不同免疫亚型PET/CT影像指标[标准化摄取最大值(SUV_(max))、病灶数]、临床特征(Ann Arbor分期、临床症状、性别、年龄)及核抗原Ki-67的差异。结果 ^(18)F-FDG PET/CT显示,单发病灶12例(12/69,17.39%),多发病灶57例(57/69,82.61%)。DLBCL病灶SUVmax为11.80(8.80)。不同免疫亚型的病灶SUV_(max)(Z=-0.03)、Ki-67(t=0.03)、PET/CT病灶数(χ~2=0.06)、Ann Arbor分期(χ2=3.48)、临床症状(χ~2=0.49)、性别(χ~2=1.62)、年龄(r=-0.21)比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。SUV_(max)与Ki-67呈正相关(r=0.38,P<0.05)。结论 ^(18)F-FDG SUV_(max)可预测DLBCL的增殖情况及侵袭程度。

^(18)F-FDG PET/CT检测^(131)I-治疗剂量全身显像阴性而甲状腺球蛋白阳性分化型甲状腺癌复发和转移

目的观察^(18)F-FDG PET/CT显像对^(131)I-治疗剂量全身显像(^(131)I-RxWBS)阴性且甲状腺球蛋白(Tg)阳性分化型甲状腺癌(DTC)复发或转移的诊断价值及对治疗方案的影响。方法对72例接受^(131)I清除残留甲状腺并接受大剂量^(131)I治疗后随访中发现Tg阳性而^(131)I-RxWBS阴性DTC术后患者行^(18)F-FDG PET/CT显像,将显像结果与手术病理或6~36个月临床随访结果进行对照,评价^(18)F-FDG PET/CT显像对Tg升高而^(131)I-RxWBS阴性DTC复发或转移的诊断效能。结果^(18)F-FDG PET/CT诊断Tg升高而^(131)I-RxWBS阴性的DTC复发或转移的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83.33%(60/72)、89.47%(34/38)、76.47%(26/34)、80.95%(34/42)和86.67%(26/30)。^(18)F-FDG PET/CT显像改变了35例(35/72,48.61%)患者的治疗方案,其中23例(23/35,65.71%)接受手术者在临床随访中均未见甲状腺癌复发及转移,其余12例(12/35,34.29%)随访期内均显示病情进展。结论对于^(131)I-RxWBS阴性而Tg阳性的DTC患者,^(18)F-FDG PET/CT有助于诊断和定位复发及转移病灶,指导后续治疗。

18F-FDG PET显像在分化型甲状腺癌患者随访中的应用

分化型甲状腺癌(Differentiated thyroid carinoma,DTC)在其病程演变过程中,分化程度较低的复发或转移灶摄^(131)Ⅰ能力降低而对^(18)F-脱氧葡萄糖(Fluonxleoxyglucose,FDG)摄取增多。因此,依赖于^(131)Ⅰ和FDG显像的两种不同机制,正电子发射型断层成像(Positron Emission Tomography,PET)探测非功能性DTC复发或转移灶兼具定位诊断、敏感性及特异性都高的优点。因此,DTC患者随访期间,对甲状腺球蛋白阳性(Thyroglobulin positive,TG+)(在促甲状腺激素刺激作用下TG＞10μg/L或在促甲状腺激素被抑制作用下TG＞2μg/L)或TG阴性(TG negative,TG-)但TgAb＞200U/mL,且131Ⅰ-诊断剂量全身显像阴性(Diagnostic whole-body scanning negative,dWBS-)的高危患者(Ⅲ期或Ⅳ期患者)是进行^(18)F-FDG PET显像的指征。同机融合显像设备PET/CT、PET/MRI具有更高的敏感性和分辨率,为病灶的定性和定位,提供更准确的信息。

周围型肺癌的^(18)F-FDG PET/CT显像

目的探讨周围型肺癌18F-FDG PET/CT显像特点及其最大标准摄取值(SUVmax)与肺癌的病理类型及病灶大小的相关性。方法回顾性分析50例经病理证实的周围型肺癌的18F-FDG PET/CT及螺旋CT资料,分析肺癌病理类型、病灶大小与SUVmax的相关性。结果以SUVmax≥2.5作为判断恶性的标准,本组18 F-FDG PET/CT阳性率为92.00%(46/50)。鳞癌的SUVmax明显高于腺癌(P<0.05);病灶大小与SUVmax呈正相关(r=0.674,P<0.001)。结论 18F-FDG PET/CT显像对诊断周围型肺癌有很高价值,结合螺旋CT形态学特点,能初步判断肺癌的病理类型。

慢性肿块型胰腺炎的^18F-FDG PET/CT影像学表现

目的探讨慢性肿块型胰腺炎18F-FDG PET/CT影像学表现。方法回顾性分析6例经手术病理证实的慢性肿块型胰腺炎的18F-FDG PET/CT影像资料和临床资料。结果 6例共检出6个病灶,3个位于胰头,3个位于胰尾;平均大小3.0cm×2.7cm。CT平扫6个病灶呈均匀等密度,未见钙化灶,平均CT值约为36HU;增强扫描全部病灶呈延迟期强化。全部病灶18F-FDG摄取呈局灶性增高,最大标准摄取值(SUVmax)1.6～5.3,平均SUVmax3.92±1.49,高于正常胰腺组织的2.05±0.39(t=-3.648,P=0.015)。3例病灶累及胰头,胆总管及胰管不同程度扩张,呈双管征,胰体尾部轻度萎缩;3例病灶累及胰尾,胆总管及胰管未见扩张,胰体尾部未见萎缩。病灶邻近的主要血管均未受侵。全部病例胰周及腹膜后淋巴结未见18F-FDG局灶性摄取增高,未见远处脏器或(和)组织转移。结论 18 F-FDG PET/CT对诊断慢性肿块型胰腺炎具有一定价值。

miR-30a-5p靶向E2F7阻滞A549细胞周期并抑制其增殖

目的探究miR-30a-5p靶向E2F7调控非小细胞肺癌细胞周期和增殖的机制。方法通过荧光定量(qRT-PCR)验证miR-30a-5p在非小细胞肺癌A549细胞与人正常肺上皮细胞BEAS-2B中的相对表达水平。在线软件预测了miR-30a-5p的靶基因及其靶向结合位点,双荧光素酶报告基因实验进一步验证miR-30a-5p和E2F7 mRNA 3’UTR区域的靶向关系。其次在A549细胞中分别转染miR-30a-5p模拟物(miR-30a-5p mimics)和miR-30a-5p抑制剂(miR-30a-5p inhibitor),应用CCK-8细胞计数试剂盒检测A549细胞增殖情况,流式细胞术检测A549细胞凋亡和细胞周期。qRT-PCR和免疫印迹检测细胞周期相关基因和肺腺癌相关基因的mRNA和蛋白表达水平。结果miR-30a-5p在A549细胞中表达水平低于BEAS-2B,且miR-30a-5p靶向结合与E2F7 mRNA 3’UTR 514-520位点,抑制E2F7表达。转染miR-30a-5p mimics抑制A549细胞增殖,并促进A549凋亡。将A549细胞周期阻滞在G 1期。调控肺腺癌相关基因TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达水平。结论非小细胞肺癌A549细胞中miR-30a-5p通过靶向负调控E2F7的表达,调控TFDP3、CDK1、E2F8、CCNA2和CDC6的mRNA和蛋白表达,抑制A549细胞增殖和细胞周期。

^(18)F-FDGPET/CT检测Tg阳性而^(131)I-诊断剂量全身显像阴性分化型甲状腺癌患者复发和转移

目的探讨18F-FDG PET/CT显像对甲状腺球蛋白(Tg)阳性而131I-诊断剂量全身显像(131I-Dx-WBS)阴性的分化型甲状腺癌(DTC)患者复发或转移的诊断价值及对治疗方案的影响。方法对33例接受甲状腺全切或次全切术并进行大剂量131I治疗后随访中发现Tg阳性而131I-Dx-WBS阴性的DTC患者行18F-FDG PET/CT显像,将显像结果与手术病理或6~36个月的临床随访结果进行对照,评价18 F-FDG PET/CT显像对Tg升高而131I-Dx-WBS阴性的DTC患者复发或转移的诊断效能。结果 18F-FDG PET/CT诊断Tg升高而131I-Dx-WBS阴性的DTC患者复发或转移的灵敏度和阳性预测值分别为85.71%(18/21)和90.00%(18/20)。18F-FDG PET/CT显像对血清Tg≥47.59ng/ml的DTC患者诊断复发或转移的灵敏度(100%)明显高于对血清Tg<47.59ng/ml的DTC患者(66.67%)。18 F-FDG PET/CT显像改变了15例(15/33,45.45%)患者的治疗方案,其中4例(4/15,26.67%)再次接受手术治疗,11例(11/15,73.33%)再次接受大剂量131I治疗。结论 18F-FDG PET/CT显像对诊断Tg升高而131I-Dx-WBS阴性的DTC患者有无复发或转移是一种有价值的方法,同时可用于指导后续治疗。

双时相^(18)F-FDGPET/CT代谢参数对结直肠癌分期的诊断价值

目的探讨双时相^(18)F-FDG PET/CT代谢参数与结直肠癌患者临床病理特征的相关性及代谢参数对T4分期、N分期、M分期的诊断价值。方法根据纳入标准、排除标准,回顾性分析了46例治疗前行PET/CT检查同时经病理确诊的结直肠癌患者,测量代谢参数并收集患者的临床病理资料,将肿瘤代谢体积(MTV)、MTV2.5(SUVmax=2.5为阈值勾画的ROI统计分析)、糖酵解总量(TLG)、TLG2.5对淋巴结转移进行受试者工作特征(ROC)曲线分析,选取最优代谢参数,将代谢参数与病理特征进行相关性分析,用ROC曲线预测代谢参数对T4分期、淋巴结转移、M分期的诊断价值。结果MTV、TLG对淋巴结转移的曲线下面积(AUC)值大于MTV2.5、TLG2.5(0.752vs.0.737,0.802vs.0.787)。最大标准摄取值(SUVmax)、峰值标准摄取值(SUVpeak)、最大去脂肪标准摄取值(SUL)与T分期、淋巴结转移、肿瘤长径呈正相关(r值分别为0.335、0.409、0.297,0.319、0.376、0.297,0.299、0.401、0.332,P均<0.05),SUL与肿瘤长径的相关系数高于SUVmax。MTV、TLG与T4分期、淋巴结转移、M分期呈正相关(r值分别为0.584、0.436、0.349,0.598、0.521、0.366,P均<0.05),且TLG的相关系数最高。SUVmax、SUVpeak、肿瘤与肝脏标准摄取值比值(TLR)与肿瘤分化程度呈负相关(r值为-0.395、-0.298、-0.328,P均<0.05)。TLG对于T4分期、淋巴结转移、M分期的预测价值较高,AUC值分别为0.688、0.802、0.716。结论MTV、TLG比MTV2.5、TLG2.5对淋巴结转移更有意义。双时相PET/CT代谢参数与临床病理特征相关,TLG对于术前结直肠癌分期有更重要的预测作用。

大肠杆菌F18菌毛E亚单位基因克隆与序列分析

根据已发表的F18ab菌毛E亚单位的基因序列(fedE/ab),设计1对引物,利用PCR技术从10株大肠杆菌(F107/86、YCED1、YCED2、C、D、E、12F、2134P、8199、8813)中分别扩增到1个片段,并克隆至pGEM-T载体,获得重组质粒TF107E、TYCED1E、TYCED2E、TCE、TDE、TEE、T12FE、T8813E、T8199E、T2134PE。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,这10个片段大小均为516 bp。通过与已发表的fedE/ab序列进行比较,发现这10个菌株的fedE序列高度同源,其中F107/86、YCED2、C、D、E、8813、8199、2134P的fedE序列完全相同,只有YCED1株在第45位碱基处存在1个G→A转换、12F株在第316位碱基处存在1个G→转换。这说明F18ab和F18ac菌毛的fedE基因相同,fedE是F18菌毛的保守性亚单位。

^(18)F-FDG PET/CT在小细胞肺癌分期和预后评估中的价值

目的探讨18F-FDG PET/CT在初诊小细胞肺癌(SCLC)分期及预后评估中的价值。方法收集15例经病理证实的初诊SCLC患者作为研究对象,随访其生存期。将患者按经典临床分期分为局限期与广泛期,并测定原发灶最大标准摄取值(SUVmax),以其中位数为界将患者分为两组,分析经典临床分期及SUVmax与生存期之间的关系。结果 15例患者中,18F-FDG PET/CT诊为局限期8例,广泛期7例,与经典临床分期方法相比,改变了3例(3/15,20.00%)的分期,其中2例分期提高,1例分期降低。局限期患者生存期高于广泛期(中位生存期分别为24和11个月,P=0.004);以SUVmax中位数12.40为界,高值组(SUVmax≥12.40)与低值组(SUVmax<12.40)患者生存期差异无统计学意义(中位生存期分别为20和14个月,P=0.343)。结论 18F-FDG PET/CT对于初诊SCLC的精确分期、指导治疗和评估预后有重要价值;SUVmax在SCLC患者预后评估中的价值仍需进一步研究。

^(18)F-FDG PET/CT诊断原发性肝癌和肝转移瘤的价值

目的探讨18F-FDG PET/CT在原发性肝癌和肝转移瘤诊断中的应用价值。方法回顾性分析108例肝脏肿瘤患者临床资料、常规影像(超声、增强CT和MRI)及PET/CT资料,病灶18F-FDG浓集水平高于周围正常肝组织为诊断恶性标准。结果 108例肝脏肿瘤各种影像检查共检出194个病灶,70个肝细胞癌病灶18 F-FDG PET/CT发现34个,最大标准摄取值(SUVmax)为4.95±3.86;23个胆管细胞癌病灶PET/CT发现22个,SUVmax为7.65±3.88;101个肝内转移瘤病灶PET/CT发现97个,SUVmax为9.65±5.34。18 F-FDG PET/CT对肝转移瘤和胆管细胞癌的阳性检出率(96.04%和95.65%)均高于肝细胞癌(48.57%),差异均有统计学意义(P均<0.05);肝转移瘤与肝细胞癌、胆管细胞癌与肝细胞癌之间SUVmax的差异均有统计学意义(P均<0.05)。不同原发肿瘤来源的肝转移灶的SUVmax值差异无统计学意义(F=2.07,P>0.05)。结论 18F-FDG PET/CT对原发性肝癌和肝转移瘤的病灶检出率不同,病灶的SUVmax值亦存在差异;在肝脏肿瘤诊断与分期时需科学合理应用18F-FDG PET/CT。

^(18)F-FDG PET/CT在肾脏肿瘤诊疗中的应用

目的评价18F-FDG PET/CT在肾脏肿瘤诊断和治疗中的价值。方法对30例CT或MRI确诊或怀疑肾脏肿瘤的患者行18F-FDG PET/CT显像,22例患者行延迟显像。所有肾脏肿瘤均经手术或穿刺活检后病理确诊。评价18F-FDG PET/CT对患者治疗方案的影响。结果 30例中,肾细胞癌(RCC)24例,肾神经内分泌肿瘤1例,淋巴瘤3例,肺癌肾转移1例,肾脏炎性病变1例。PET/CT诊断肾脏肿瘤的灵敏度为89.66%(26/29),特异度为100%(1/1),准确率为90.00%(27/30),阳性预测值为100%(26/26),阴性预测值为25.00%(1/4)。PET/CT检出肾癌伴肾门淋巴结转移2例,远处转移5例。8例(RCC 4例、肾淋巴瘤3例及肾转移癌1例)接受PET/CT后治疗方案发生改变。显像阳性肾癌患者Fuhrman分级高于阴性患者(P<0.05),显像阳性肾癌平均直径大于阴性者(P<0.05)。22例肾癌早期最大标准摄取(SUVmax)值与延迟显像SUVmax值差异无统计学意义(P>0.05)。结论 18F-FDG PET/CT可准确显示肾肿瘤患者局部病变及远处转移。对可疑肾淋巴瘤及肾转移瘤患者应行18F-FDG PET/CT显像,以明确分期并寻找原发灶。

比较三种勾画^18F-FDGPET／CT图像中肺癌放疗靶区的方法

目的比较三种勾画肺癌18F-FDG PET/CT放疗定位图像肺原发病灶大体肿瘤体积(GTV)边界的方法,寻找适合临床应用的肺癌GTV勾画方法。方法选择14例在18 F-FDG PET/CT的CT图像上边界清晰的肺癌病例,在18 F-FDG PET图像上分别用40%阈值法(GTV40)、SUV=2.5勾画法(GTV2.5)、公式法(GTV公式)对肺癌原发病灶GTV靶区进行勾画,然后与CT肺窗体积(GTVCT)进行比较。结果 14例肺癌的GTV公式与GTVCT的平均差值小于GTV40与GTVCT体积的平均差值,但差异无统计学意义(P=0.185);GTV公式与GTVCT的平均差值明显小于GTV2.5与GTVCT的平均差值(P=0.0289)。14例肺癌中,12例GTV40小于GTV公式,但二者平均GTV差异无统计学意义(P=0.466)。结论公式法及40%阈值法均可用于勾画18F-FDG PET/CT放疗定位图像中肺原发病灶的GTV边界,而以SUV=2.5为边界阈值不适合SUV较低的病灶。

^(18)F-FDG PET/CT诊断原发性肺淋巴瘤

目的探讨原发性肺淋巴瘤(PPL)的18F-FDG PET/CT表现。方法回顾性分析11例经病理证实的PPL的18F-FDG PET/CT影像表现,并测量病灶的最大标准化摄取值(SUVmax)。结果 11例患者中,结节硬化型霍奇金病2例,非霍奇金病9例,包括支气管黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)7例、弥漫性大B细胞淋巴瘤1例、血管内大B细胞淋巴瘤1例;其中3例MALT淋巴瘤合并淋巴细胞性间质性肺炎(LIP)。6例病变累及双肺,3例累及右肺,2例累及左肺;共有7例累及右肺中叶。病灶形态表现为单发肿块(结节)4例,肺炎样实变3例,多发结节3例,混合型1例。6例实变或较大肿块病灶中可见充气支气管征,其中的3例可见跨叶分布征。合并LIP的3例患者可见双肺广泛分布的磨玻璃影和多发含气空腔影。大多数病灶表现为放射性浓聚影。结论 18F-FDG PET/CT可以准确地显示PPL病灶的分布、形态和肿瘤活性,其影像表现具有一定的特征性,能够为PPL的诊断提供帮助。

18F-FDG PET/CT诊断肝细胞癌及肝内胆管细胞癌

目的探讨18F-FDG PET/CT诊断肝细胞癌(HCC)及肝内胆管细胞癌(ICC)的应用价值。方法回顾性分析133例HCC患者(HCC组)和55例ICC患者(ICC组)的18 F-FDG PET/CT资料,记录病灶最大标准化摄取值(SUVmax),以病灶18F-FDG浓集水平高于周围正常肝组织为诊断恶性标准,比较2组原发灶18 F-FDG PET/CT阳性率、SUVmax值、胆管扩张发生率、癌栓发生率、淋巴结转移发生率、远处转移发生率以及淋巴结转移、远处转移不同区域的发生率差异。结果ICC组18F-FDG PET/CT阳性率(χ~2=13.887)、SUVmax值(t=-4.139)、胆管扩张发生率(χ~2=126.441)、淋巴结转移发生率(χ~2=32.727)、远处转移发生率(χ~2=30.964)、在各区域淋巴结转移及远处转移发生率均较HCC组高(P均<0.05),而癌栓发生率与HCC组差异无统计学意义(χ~2=0.054,P=0.815)。结论 18 F-FDG PET/CT鉴别诊断HCC与ICC具有重要价值。HCC的SUVmax值低于ICC。ICC较HCC更易出现病灶周围胆管扩张、发生远处转移及合并淋巴结转移。

^(18)F-FDG PET/CT诊断多发性骨髓瘤

目的探讨18F-FDG PET/CT对多发性骨髓瘤(MM)的诊断价值。方法MM患者20例,均于治疗前进行18F-FDG PET/CT全身显像。所有PET、CT及PET/CT融合图像均通过融合软件进行帧对帧对比分析。肿瘤病灶根据穿刺活组织病理学检查、多种影像学检查和临床随访结果诊断。结果19例18F-FDG PET/CT检出阳性病灶(95.00%),SUV为2.81±0.98(1.30~6.00),共检出病灶303处,其中PET有222处表现为18F-FDG摄取增高(73.27%),CT检出268处灶状溶骨性改变(88.45%)。PET和CT同时检出的病灶为187处(61.72%);PET检出而同机CT未检出的病灶35处(11.55%);同机CT检出而PET未检出病灶81处(26.73%)。结论18F-FDG PET/CT对于MM的诊断及评价全身累及范围具有一定价值。