F小体检测奶牛XY精子纯度

为了建立F小体检测奶牛精子纯度的方法,试验采用正交设计检测精子F小体不同的胰酶消化时间(40 min,60 min,80 min)、喹吖因染色浓度(0.4%,0.5%,0.6%)和染色时间(10 min,20 min,30 min)的优化方案,并且对分选X、Y精子及常规精液的F小体进行染色检测,评价分选X、Y精子的纯度。结果显示分选X、Y精子及常规精液在0.25%胰酶消化20 min后0.5%喹吖因染色10 min的条件下,纯度分别为92.7%、92.5%、48.3%与对应精子的理论纯度(93.3%,93.7%,50%)差异均不显著(P>0.05)。因此本实验建立的F小体检测法可用于XY精子纯度的检测。

牛精子F小体的检测

采用改良的蛋白酶消化方法，选择新鲜或冷冻牛精液，经Ｑ－Ｍ染色法检测牛精子Ｆ小体。结果发现：酶消化处理后随着染色时间延长（３０ｍｉｎ，６０ｍｉｎ，１２０ｍｉｎ），Ｆ小体检测率递增（２３．３±ｌ．３，４３．２±１．６，４６．６±１．０）；而未经蛋白酶处理者，Ｆ小体的检测率很低。资料表明，在牛部分精子头部能检测到Ｆ小体，可能与酶对精子膜的消化有关。消化后质膜对染料的通透性增高，高度螺旋状态的ＤＮＡ分子解聚，Ｙ染色体上的显色基团得以暴露。

Identification of Myosinon the Surface of Wheat Mitochondria

Itwasdemonstratedthatmyosinwasassociatedwiththesurfaceofmitochondriainwheat (Triticum aestivumL .) .AssaysofpolyacrylamidegelelectrophoresisandWesternblottinghaveshownthatapolypeptide withmolecularweightof2 10kDcouldberecognizedbyapolyclonalantibodyagainsthumanmusclemyosin .It wasfoundthattheATPaseactivityofmitochondrialsuspensioncouldbestimulatedbyF_actinisolatedfrom chickenmuscle ,whichindicatedthattherewasmyosinonthesurfaceofwheatmitochondria .Thisresultwas confirmedbyelectronmicroscopicobservation :mitochondriatreatedwithN_ethylmaleimide (NEM)couldbe wrappedbytheF_actin .

酸诱导分离家兔X、Y精子研究

利用X精子在酸性环境条件下的运动活性比Y精子强的原理,通过酸诱导,用王氏管分离法(实时精子分离技术)分离家兔X、Y精子,同时利用体视显微镜评定所分离精子的活率,并用喹吖因染色法进行鉴定。结果表明,在稀释液pH为5．5时分离效果最好,分离后目的精液精子活率平均达(91±1．4)％,较分离前平均精子活率(82±1．3)％提高了9．1％,两者差异极显著(P<0．01);分离后的精液中,X精子的比例为(73．3±1．0)％,Y 精子的比例为(26．7±1．0)％,与分离前精液中X、Y精子各占50％的比例差异均极显著(P<0．01),表明酸诱导条件下的王氏管分离法是X、Y精子分离简单有效的方法。