胃癌组织中F框/WD-40域蛋白7和CyclinE蛋白的表达

目的:研究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)和CyclinE蛋白在胃癌组织中的表达。方法:应用免疫组化SP法检测75例胃癌和25例癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白的表达。结果:胃癌、癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ2=10.606和7.692,P=0.001和0.006)。FBXW7蛋白的表达与胃癌的分化程度(χ2=7.440,P=0.006)、淋巴结转移(χ2=4.688,P=0.030)、TNM分期(χ2=4.601,P=0.032)有关;CyclinE蛋白的表达与胃癌的浸润深度(χ2=4.902,P=0.027)、淋巴结转移(χ2=4.601,P=0.032)、TNM分期(χ2=4.408,P=0.036)有关。胃癌组织中FBXW7与CyclinE蛋白的表达呈负关联(rP=-0.459,P<0.001)。结论:FBXW7和CyclinE可能在胃癌的发生发展中起重要作用。

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、细胞周期相关蛋白1、F框/WD-40域蛋白7在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法选择78例脑胶质瘤患者和20例因外伤或脑出血行颅内减压治疗的患者,分别作为观察组和对照组,分别收集两组患者的脑胶质瘤组织和正常脑组织。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况,比较不同临床特征脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况。结果观察组患者的MGMT和CAPRIN1蛋白阳性表达率分别为52.56%和74.36%,分别明显高于对照组的5.00%和30.00%,差异均有统计学意义(P﹤0.01);观察组患者的FBXW7蛋白阳性表达率为28.21%,明显低于对照组的85.00%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。死亡脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT蛋白的阳性表达率为86.67%,明显高于生存患者的44.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CAPRIN1蛋白的阳性表达率为89.19%,明显高于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的60.98%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中FBXW7蛋白的阳性表达率为10.81%,明显低于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的43.90%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MGMT和CAPRIN1蛋白表达上调,而FBXW7蛋白表达下调,其中MGMT蛋白可能与患者预后有关,而CAPRIN1和FBXW7蛋白与病理分级有关。

F框／WD-40域蛋白7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测F框／WD-40域蛋白7（FBXW7）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）组织中的表达及临床意义，初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食管上皮内瘤变组织中的表达情况，采用Western blot法及半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中FBXW7蛋白和mRNA表达水平，分析FBXW7表达与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌组织、癌旁正常组织、食管低级别上皮内瘤变组织和高级别上皮内瘤变组织中，FBXW7蛋白的阳性表达率分别为40．0％（36／90）、85．0％（17／20）、77．3％（17／22）和33．3％（6／18），差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7蛋白表达水平分别为0．283±0．055和0．657±0．091，差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7 mRNA相对表达水平分别为0．863±0．962和1．813±0．512，差异有统计学意义（P〈0．05）。单因素分析显示，FBXW7蛋白表达与肿瘤TNM分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关（均P〈0．05）。Cox多因素分析显示，仅淋巴结转移为食管鳞癌患者的独立预后因素（P〈0．05）。90例患者中，FBXW7蛋白阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为67．6％和39．3％，差异有统计学意义（P=0．01）。结论FBXW7mRNA及其蛋白在食管鳞癌组织和食管高级别上皮内瘤变组织中的表达显著减低，且其低表达与食管鳞癌患者的不良预后密切相关。作为一种肿瘤抑制基因，FBXW7可能对食管鳞癌的发生、发展和转移起重要作用，有可能成为反映食管鳞癌患者病情严重程度及判断其预后的重要分子生物学标志物。

F框WD40域蛋白7在胃癌组织的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化的影响

目的观察F框WD40域蛋白7(FBXW7)在胃癌中的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2016年3月到2019年3月郑州大学附属医院南阳中心医院经手术切除的154例胃癌组织和癌旁组织作为研究材料,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织中FBXW7蛋白表达水平。采用慢病毒在胃癌细胞SGC-7901中构建FBXW7过表达细胞株(FBXW7组)和对照细胞株(对照组)。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖水平;采用Western blot分析两组细胞EMT标记分子蛋白表达水平。采用含基质胶的Transwell分析细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织FBXW7蛋白表达水平(1.32±0.23)比较,肿瘤组织中FBXW7表达水平(0.52±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。与对照组(1.98±0.27)比较,FBXW7组细胞72 h增殖程度(1.21±0.18)显著下降,差异有统计学意义(t=2.615,P<0.05)。与对照组[(54.32±7.32)%]比较,FBXW7组细胞EdU阳性率[(20.98±4.89)%]显著下降,差异有统计学意义(t=3.111,P<0.05)。与对照组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(0.89±0.19、1.20±0.28、1.39±0.21、1.51±0.26)比较,FBXW7组细胞E-cadherin和ZO-1表达水平(1.98±0.27、2.59±0.31)显著增加,而N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(0.40±0.11、0.53±0.19)显著下调,差异均有统计学意义(t=2.094、2.812、2.458、2.931,P<0.05)。与对照组细胞侵袭数量[(152.69±20.14)个]比较,FBXW7组细胞侵袭数量[(81.44±12.10)个]明显下降,差异有统计学意义(t=4.259,P<0.05)。结论FBXW7在胃癌组织中呈低表达,参与了胃癌细胞的增殖和EMT。

结直肠癌中F框蛋白2的表达与Ki-67、血管内皮生长因子及预后的关系

目的探讨结直肠癌中F-box蛋白家族成员F框蛋白2(FBXO2)的表达与肿瘤增殖指标(Ki-67)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达及预后的关系。方法采用免疫组织化学MaxVision两步法检测105例结直肠癌组织标本中FBXO2、Ki-67及VEGF的表达情况,统计分析其与临床病理特征及预后的相关性。结果Ki-67、VEGF和FBXO2阳性表达率分别为53.3%(56/105)、51.4%(54/105)、44.7%(47/105)。Ki-67与结直肠癌的原发灶大小密切相关(P=0.017),VEGF与结直肠癌临床病理特征无明显相关性,FBXO2与结直肠癌患者的远处转移、AJCC临床分期密切相关(P=0.045、0.027)。Pearson相关分析提示,FBXO2与Ki-67、VEGF的表达呈显著相关(r=0.305、0.223,P=0.002、0.022),Ki-67与VEGF的表达无相关性(r=0.160,P=0.102)。多因素Cox比例危险模型分析提示,高表达的FBXO2是结直肠癌患者不良预后的独立影响因素(HR=2.183,95%CI=1.075~4.434,P=0.031)。生存分析显示,结直肠癌组织中Ki-67、VEGF及FBXO2高表达的患者生存时间明显低于低表达者,差异有统计学意义(P=0.019、0.036、<0.001)。结论FBXO2在结直肠癌的发生、发展中起到促癌的作用,是结直肠癌不良预后的独立影响因素,可能机制是通过泛素蛋白酶体途径参与调节结直肠癌的肿瘤增殖活性及新生血管形成。

叉头框F2在宫腔粘连中的表达及意义

目的:建立稳定的宫腔粘连细胞模型,检测叉头框F2(Fox F2)表达。方法:原代培养人子宫内膜基质细胞(HESCs),免疫荧光法进行细胞鉴定。用0、2.5、5和10ng/ml转化生长因子β1(TGF-β1)作用于HESCs 48h,10ng/ml TGF-β1作用于HESCs 12、24、48h和72h,PCR及Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原I(COLI)及Fox F2 m RNA和蛋白表达。结果:与0ng/ml组比较,2.5、5ng/ml和10ng/ml组α-SMA、COLI及Fox F2的m RNA和蛋白表达均逐渐增加。随着10ng/ml TGF-β1作用时间的延长,与12h组相比,24、48和72h组α-SMA、COLI和Fox F2的m RNA和蛋白表达逐渐增加。结论:TGF-β1可诱导HESCs发生纤维化改变,建立宫腔粘连细胞模型。随着TGF-β1作用时间的延长,作用浓度的增加,Fox F2在宫腔粘连中表达增加。

雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框F2表达的影响

目的探讨雌激素对宫腔粘连纤维化进程及叉头框(Fox)F2表达的影响。方法采用0.2%Ⅰ型胶原酶消化-筛网过滤-差时贴壁分离法获取原代人子宫内膜基质细胞(HESCs)并进行鉴定。采用10ng/ml转化生长因子β_1(TGF-β_1)作用于HESCs 48h建立宫腔粘连细胞模型。以0、10–6、10–8、10–10、10–12mol/L雌二醇(E2)作用于模型组48h,采用qPCR及Western blotting检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)及FoxF2的mRNA和蛋白表达。结果免疫细胞化学法检测显示HESCs波形蛋白阳性,角蛋白18阴性。模型组α-SMA、COLⅠ、FoxF2的mRNA和蛋白表达均高于对照组(P<0.05),模型构建成功。qPCR检测结果显示,与模型组相比,10^(–6)、10^(–8)、10^(–10)mol/L E_2组α-SMA、CO LⅠ、FoxF2的mRNA表达除10^(–10)mol/L E_2组COLⅠ表达无差异外,其余各组表达均下降(P<0.05),10^(–12)mol/L E2_组α-SMA及COLⅠmRNA表达上升,但差异无统计学意义(P>0.05),FoxF2 mRNA表达下降(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,与模型组相比,10^(–6)、10^(–8)、10^(–10)mol/L E_2组α-SMA、COLⅠ及FoxF2蛋白表达下降(P<0.05),10^(–12)mol/L E_2组α-SMA蛋白表达上升,但差异无统计学意义(P>0.05),COLⅠ及FoxF2蛋白表达下降(P<0.05)。结论 FoxF2在宫腔粘连中的表达增加。雌激素可在一定范围内逆转宫腔粘连的纤维化进程,并抑制FoxF2的表达。

喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系

目的探讨喉癌组织中F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)表达与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析83例喉癌患者资料,比较患者癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;分析FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理参数的关系;比较不同预后患者FBXW7、SCC-Ag表达的阳性率。结果患者癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%(P<0.05)。单因素分析显示,癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达具有密切联系(P<0.05);随访6个月内预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率(29.63%)高于预后不良患者(10.34%),癌组织SCC-Ag表达阳性率(62.96%)低于预后不良患者(89.66%)(P<0.05)。结论喉癌组织中FBXW7表达阳性率明显降低,SCC-Ag阳性表达率显著升高。喉癌患者癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况均与其癌组织FBXW7、SCC-Ag表达关系密切,且癌组织FBXW7、SCC-Ag表达对患者预后情况有一定的提示作用。

慢病毒介导叉头框转录因子F2过表达抑制子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移

目的:探讨慢病毒介导叉头框转录因子F2(FoxF2)过表达对子宫内膜癌RL95-2细胞增殖与迁移的影响。方法:将体外培养的RL95-2细胞随机分为3组:Control、Lv-NC组和Lv-expFoxF2组。分别采用FoxF2过表达的慢病毒颗粒(Lv-expFoxF2组)和空载体对照慢病毒颗粒(Lv-NC组)感染RL95-2细胞,检测各组细胞FoxF2的mRNA和蛋白表达水平和各组细胞的增殖活性、细胞周期及体外迁移能力。结果:与Control组比较,Lv-expFoxF2组RL95-2细胞中FoxF2 mRNA和蛋白表达水平显著上调(P<0.001)。与Control组比较,Lv-expFoxF2组的细胞存活率显著降低(P<0.05),G_0/G_1期细胞百分比明显增加,S期细胞百分比明显减少(P<0.05),体外迁移细胞数显著降低(P<0.05)。结论:慢病毒介导的FoxF2过表达可抑制子宫内膜癌RL95-2细胞的增殖和迁移,诱导细胞发生G_0/G_1期阻滞。

sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性分析

目的:分析可溶性程序性死亡受体-配体1(sPD-L1)、三结构域蛋白26(TRIM26)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)与脑胶质瘤术后复发的相关性。方法:回顾性分析2020年1月至2022年2月该院收治的80例脑胶质瘤患者的临床资料,设为研究组,另选取同期80名健康体检者,设为对照组。研究组均行脑胶质瘤切除术治疗,随访6个月后,脑胶质瘤术后复发21例。比较两组和不同病理特征患者术前、术后1个月血清s PD-L1、TRIM26、FBXW7水平,并采用Spearman相关性分析血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性及预测效能。结果:术后1个月,研究组血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平高于对照组,FBXW7水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月,未复发患者血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平低于复发患者,FBXW7水平高于复发患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平与脑胶质瘤术后复发均呈正相关(r>0,P<0.05);血清FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发呈负相关(r<0,P<0.05);术后1个月,受试者工作曲线(ROC)分析结果显示,血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平单项及联合检测预测脑胶质瘤术后复发的AUC分别为0.721、0.799、0.787、0.920,其中联合检测的预测价值最高。结论:血清sPD-L1、TRIM26mRNA与脑胶质瘤术后复发呈正相关,血清FBXW7与脑胶质瘤术后复发呈负相关;血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7单项检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值一般,联合检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值最高。

FBXW7过表达对棕榈酸诱导C2C12细胞萎缩及焦亡的作用及机制研究

目的 探究FBXW7对棕榈酸钠诱导C2C12细胞萎缩过程中焦亡通路的调节作用。方法 使用250μM棕榈酸钠干预C2C12细胞24 h构建肌少症性肥胖细胞模型。使用慢病毒构建FBXW7稳定过表达的C2C12细胞株。采用环己酰亚胺以及MG132检测蛋白半衰期,HE染色检测肌管直径,β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度,乳酸脱氢酶释放实验检测细胞焦亡水平,免疫荧光检测FBXW7及GSDMD的胞内分布,免疫印迹方法检测FBXW7、 NLRP3、 GSDMD、 CASP1、 ASC、 P65、 FBX32、 P21的表达水平。结果 棕榈酸钠干预C2C12细胞会引起肌管直径缩小、 β半乳糖苷酶活性增加、乳酸脱氢酶释放水平上升,且抑制FBXW7表达,延长焦亡相关蛋白的半衰期。然而,FBXW7过表达可改善以上情况。免疫荧光结果显示FBXW7与GSDMD存在共定位。结论 通过延长焦亡相关蛋白的半衰期,棕榈酸钠可以提高细胞的焦亡水平,而FBXW7过表达可以抑制以上过程。调控FBXW7表达可能是未来治疗肌少症性肥胖的潜在靶点。

叉头框转录因子F2小发夹RNA对人眼小梁网细胞外基质蛋白表达的抑制作用

目的探讨叉头框转录因子F2(FoxF2)对小梁网细胞外基质表达的调控作用。方法将培养人眼小梁网细胞(HTMCs)分为Scramble对照组和FoxF2小发夹RNA(shRNA)组,构建FoxF2重组干扰载体FoxF2 shRNA,应用FoxF2 shRNA慢病毒颗粒感染HTMCs,采用Western blot法检测FoxF2 shRNA的敲低效果及细胞外基质(ECM)蛋白的表达变化,利用Transwell计数实验分析HTMCs的迁移能力。结果体外培养的HTMCs呈长梭形,生长状态良好,形态符合HTMCs形态学特征。FoxF2 shRNA组FoxF2蛋白相对表达量为0.72±0.02,显著低于Scramble对照组的1.27±0.05,差异有统计学意义(t=16.68,P<0.01)。FoxF2shRNA组纤连蛋白(FN)、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)相对表达量分别为0.43±0.03、0.53±0.08和0.86±0.15,显著低于Scramble对照组的0.87±0.04、1.66±0.06和1.73±0.13,差异均有统计学意义(t=15.08、18.81、7.50,均P<0.01)。FoxF2 shRNA组HTMCs的迁移数量为117.30±11.41,显著低于Scramble对照组的251.00±10.37,差异有统计学意义(t=8.72,P<0.01)。结论成功制备可特异性敲低HTMCs内源性FoxF2表达的FoxF2 shRNA病毒,并证实FoxF2干扰对HTMCs中ECM的表达及细胞迁移具有抑制作用。

胶质瘤中叉头框蛋白N2与F2的表达及意义

目的 观察叉头框蛋白N2(FOXN2)与叉头框蛋白F2(FOXF2)在正常脑组织和各级别胶质瘤中的表达情况,探讨两者与胶质瘤级别的关系,推测其在胶质瘤发生发展中的作用,为胶质瘤的治疗寻找可能的药物治疗靶点。方法 从皖南医学院弋矶山医院病理科调取36例2016年1月~2020年12月脑胶质瘤患者手术切除的胶质瘤组织标本,双盲法进行免疫组织化学和免疫荧光染色检测FOXN2、FOXF2的表达情况;采用SPSS 18.0统计学软件进行分析,以P<0.05为差异有统计学意义。再对2020年1月~2021年1月皖南医学院弋矶山医院神经外科手术中获取的新鲜正常脑组织、低级别胶质瘤组织和高级别胶质瘤组织进行Western blotting、Real-time PCR实验(正常脑组织均来自外伤手术患者)。结果 免疫组织化学与免疫荧光结果表明,胶质瘤级别越高FOXN2与FOXF2的表达越低(P<0.05);Western blotting实验显示,正常脑组织及低级别胶质瘤中FOXN2和FOXF2表达都高于高级别胶质瘤组(P<0.05);Real-time PCR结果显示,正常脑组织中FOXN2和FOXF2的表达同样高于高级别胶质瘤组(P<0.01)。结论 FOXN2和FOXF2在正常脑组织中有表达,在胶质瘤中低表达且呈级别依赖性,提示FOXN2和FOXF2与胶质瘤的级别及不良预后有关,增强FOXN2和FOXF2的表达有望成为胶质瘤治疗的靶点。

FBXW7及c-Myc蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的相关性分析

目的分析F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)及c-Myc蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的相关性。方法回顾性收集102例胃癌临床手术标本,每份标本均取其正常胃黏膜组织(A组)、癌旁组织(B组)与癌组织(C组)。通过免疫组织化学法对三种组织FBXW7及c-Myc蛋白的表达水平进行检测,进而分析其与胃癌临床病理特征的相关性。结果相比A组与B组,C组中的FBXW7蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而c-Myc蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);而B组中的FBXW7、c-Myc蛋白表达水平均显著低于A组(P<0.05)。FBXW7、c-Myc蛋白的表达水平与患者年龄、性别及肿瘤部位均无显著相关性(P>0.05),但与胃癌分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(P<0.01)。结论胃癌患者中FBXW7蛋白表达水平明显降低,而cMyc蛋白表达明显升高,二者表达水平可能与肿瘤分化程度、浸润深度及发生淋巴结转移等存在密切联系,FBXW7与c-Myc可能成为早期诊断与评估胃癌浸润及淋巴结转移的重要生物学指标。

FBXW7和RhoA/Rho激酶蛋白表达参与糖尿病大鼠心肌纤维化

目的探究F框/含蛋白7 WD-40域蛋白(FBXW7)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)的表达与糖尿病心肌纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,采用一次性ip链脲佐菌素60 mg·kg^(-1)建立1型糖尿病大鼠模型,分别于2,4,8,12和16周进行检测。HE染色观察大鼠心脏组织形态变化;Masson染色和测定心肌羟脯氨酸(HYP)含量观察心肌胶原沉积程度;ELISA法检测血清中FBXW7,转化生长因子β_1(TGF-β_1)和结缔组织生长因子(CTGF)的含量;Western蛋白印迹和免疫组化法检测心肌中FBXW7,RhoA和ROCK1蛋白的表达。结果显微镜下可见糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞变性、坏死和纤维组织增生等。与正常对照组相比,4～16周时,模型组大鼠心肌组织中胶原沉积面积和胶原含量显著升高(P<0.05,P<0.01),呈递增趋势;2～4周时,大鼠血清中FBXW7含量显著增加(P<0.01),第8周时降低,但仍显著高于正常对照组(P<0.01);8～16周时,大鼠血清中TGF-β_1和CTGF含量逐渐升高(P<0.01)。Western蛋白印迹和免疫组化结果显示,模型组大鼠心肌RhoA和ROCK1蛋白表达在各时间点均显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);2～12周模型组大鼠心肌FBXW7表达较正常对照组显著升高(P<0.01,P<0.01),第4周表达最高,8～16周表达下降,与时间呈负相关(r=-0.988,P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论 FBXW7和RhoA/Rho激酶参与糖尿病大鼠心肌纤维化的发生发展,可能成为治疗糖尿病心肌病的靶点。

FBXW7在糖尿病心肌病中的表达

目的:检测含F框/WD重复域蛋白7(FBXW7)在1型糖尿病大鼠心肌中的表达,探究其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法:实验将大鼠分为非糖尿病组(ND组)及糖尿病4、8和12周模型组(DM组),采用链脲佐菌素(60 mg/kg)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型。HE染色法观察心肌病理结构变化,Western blot和免疫组化法检测心肌中FBXW7蛋白的表达变化。结果:显微镜下可见糖尿病组大鼠心肌局灶性心肌细胞变性、坏死。Western blot和免疫组化结果均显示,4周、8周及12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对于ND组显著增加(P <0. 01),但是相比于4周和8周DM组,12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对下降(P <0. 05)。结论:随着糖尿病病程的延长,FBXW7在糖尿病心肌病大鼠心肌组织中的表达呈现先升高后降低的趋势,提示其在糖尿病心肌病发生发展中发挥了一定的作用。

FBXW7在非小细胞肺癌治疗耐药中的研究进展

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一。NSCLC治疗耐药严重影响了预后,研究NSCLC治疗耐药的分子机制非常必要。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)能够通过选择性降解短期蛋白调节细胞内重要过程,如周期调控、转录调控、信号转导、凋亡和分化等,其表达的异常影响肿瘤的发生、发展及预后。F-box家族蛋白是UPS的重要组成部分,而F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)是F-box家族蛋白中研究的经典蛋白之一。研究表明FBXW7与NSCLC耐药有关,主要机制是FBXW7突变减少其下游蛋白的泛素化降解,导致NSCLC患者药物治疗耐药,其下游蛋白包括Snail蛋白、骨髓细胞白血病因子1(myeloid cell leukemia sequence 1,MCL-1)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)、卷曲螺旋结构域6(coiled-coil-domain containing 6,CCDC6)。雷帕霉素、组蛋白脱乙酰酶抑制剂MS-275及冬凌草素对治疗耐药的FBXW7突变的NSCLC患者有效。

Calreticulin、VRK1、Fbxw7在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及诊断价值研究

目的探究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中钙网蛋白(Calreticulin)、牛痘相关激酶1(VRK1)、F框/WD40域蛋白7(Fbxw7)的表达及诊断价值。方法选取2019年3月到2021年3月在秦皇岛第一医院病理科保存60例DLBCL组织以及瘤旁组织标本为DLBCL组,选取同期保存的正常的淋巴组织为正常组。采用荧光定量RT-PCR检测Calreticulin、Fbxw7,免疫组织化学法检测组织中VRK1表达。结果弥漫大B细胞淋巴瘤组织Calreticulin、VRK1表达高于瘤旁组织和正常组织,Fbxw7表达低于瘤旁组织和正常组织(P<0.05)。瘤旁组织Calreticulin、VRK1表达高于正常组织,Fbxw7表达低于正常组织(P<0.05)。随着临床分期程度加重、分化程度越低,Calreticulin、VRK1在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达不断升高,Fbxw7不断降低(P<0.05);结外病灶个数>2、LDH升高、有淋巴结转移者Calreticulin、VRK1的表达量高于无淋巴结转移、结外病灶个数≤2、LDH正常者;而Fbxw7则相反(P<0.05)。ROC分析Calreticulin、VRK1、Fbxw7预测弥漫大B细胞淋巴瘤的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.650、0.659、0.711、0.731。结论Calreticulin、VRK1在弥漫大B细胞淋巴瘤组织高表达,Fbxw7在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中低表达,三者联合对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的诊断价值显著。

结肠癌组织FOXF1基因甲基化检测及其临床意义

目的研究结肠癌组织中叉头框F1基因(FOXF1)启动子区甲基化状态及其临床意义,探讨其在结肠癌发生发展中的作用。方法应用甲基化特异性PCR检测62例结肠癌标本中FOXF1基因启动子区甲基化状态,并分析其与结肠癌患者临床病理特征的关系。采用实时荧光定量PCR检测结肠癌标本中FOXF1基因mRNA表达水平,并分析FOXF1基因甲基化与其mRNA表达间的关系。结果结肠癌组织中FOXF1基因启动子区甲基化率为64.5%(40/62),显著高于正常黏膜组织的4.8%(3/62),差异具有统计学意义(P<0.01),低分化组中FOXF1甲基化率为82.6%(19/23),高于高中分化组的53.8%(21/39),差异具有统计学意义(P<0.05)。结肠癌组织中FOXF1基因mRNA相对表达量为1.453±0.385,显著低于正常黏膜组织的3.648±1.228,差异具有统计学意义(P<0.01)。结肠癌组织中FOXF1基因甲基化状态与FOXF1基因mRNA表达呈负相关(rs=-0.438,P<0.01)。结论 FOXF1基因启动子异常甲基化及其mRNA表达下调是结肠癌中的频发分子事件;也是导致FOXF1基因mRNA表达下调的机制之一;FOXF1基因在不同分化程度的结肠癌患者中甲基化率不同,提示FOXF1基因甲基化状态有可能成为评价结肠癌恶性程度的辅助指标,FOXF1基因也可能成为结肠癌靶向治疗的潜在靶点。

干扰FBXO2表达对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移及EMT的影响

目的:探讨F框蛋白2(F-box only protein 2,FBXO2)基因在人胃癌细胞系中表达及其对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的影响。方法:选择胃癌细胞系MGC-803、AGS、SGC-7901、MKN-28以及正常胃黏膜上皮细胞株GES-1,qPCR法检测细胞中FBXO2 mRNA表达水平。设计靶向抑制FBXO2表达的特异siRNA,并瞬时转染MGC-803细胞,转染siRNA无义序列的为阴性对照。qPCR法检测转染48 h后MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达水平;用MTT法、细胞划痕愈合法、Transwell小室法检测降低FBXO2表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,WB法检测细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达。结果:4种胃癌细胞中FBXO2 mRNA表达水平显著高于胃黏膜上皮细胞GES-1(P<0.05或P<0.01)。与阴性对照组相比,siRNAFBXO2组MGC-803细胞中FBXO2 mRNA表达下调(P<0.01),该细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到显著抑制(P<0.05或P<0.01),E-cadherin蛋白表达明显升高(P<0.01),N-cadherin、vimentin蛋白表达显著降低(均P<0.01)。结论:低表达的FBXO2可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,该抑制作用可能与EMT过程有关。