F框/WD-40域蛋白11对三阴性乳腺癌细胞增殖、迁移的影响

视频导读乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,迄今为止,探索三阴性乳腺癌(TNBC)的靶向治疗始终是医学研究的热点。TNBC是一种特殊分子亚型的乳腺癌类型,因其侵袭性强、转移复发风险高且缺乏有效治疗靶点,导致患者预后差,严重威胁女性健康,是临床亟待解决的治疗难题。本文研究FBXW11对TNBC生物学功能活性的影响,将进一步探讨FBXW11影响TNBC功能潜在作用机制,以便为TNBC的靶向治疗提供新的理论依据。

胃癌组织中F框/WD-40域蛋白7和CyclinE蛋白的表达

目的:研究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)和CyclinE蛋白在胃癌组织中的表达。方法:应用免疫组化SP法检测75例胃癌和25例癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白的表达。结果:胃癌、癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ2=10.606和7.692,P=0.001和0.006)。FBXW7蛋白的表达与胃癌的分化程度(χ2=7.440,P=0.006)、淋巴结转移(χ2=4.688,P=0.030)、TNM分期(χ2=4.601,P=0.032)有关;CyclinE蛋白的表达与胃癌的浸润深度(χ2=4.902,P=0.027)、淋巴结转移(χ2=4.601,P=0.032)、TNM分期(χ2=4.408,P=0.036)有关。胃癌组织中FBXW7与CyclinE蛋白的表达呈负关联(rP=-0.459,P<0.001)。结论:FBXW7和CyclinE可能在胃癌的发生发展中起重要作用。

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、细胞周期相关蛋白1、F框/WD-40域蛋白7在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法选择78例脑胶质瘤患者和20例因外伤或脑出血行颅内减压治疗的患者,分别作为观察组和对照组,分别收集两组患者的脑胶质瘤组织和正常脑组织。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况,比较不同临床特征脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况。结果观察组患者的MGMT和CAPRIN1蛋白阳性表达率分别为52.56%和74.36%,分别明显高于对照组的5.00%和30.00%,差异均有统计学意义(P﹤0.01);观察组患者的FBXW7蛋白阳性表达率为28.21%,明显低于对照组的85.00%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。死亡脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT蛋白的阳性表达率为86.67%,明显高于生存患者的44.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CAPRIN1蛋白的阳性表达率为89.19%,明显高于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的60.98%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中FBXW7蛋白的阳性表达率为10.81%,明显低于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的43.90%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MGMT和CAPRIN1蛋白表达上调,而FBXW7蛋白表达下调,其中MGMT蛋白可能与患者预后有关,而CAPRIN1和FBXW7蛋白与病理分级有关。

F框/WD-40域蛋白7在乳腺癌预后预测中的价值及功能研究

目的探究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在乳腺癌(BC)发生发展中的临床意义及功能。方法利用免疫组织化学技术对BC组织芯片中FBXW7的表达进行检测,受试者工作特征曲线(ROC)曲线确定FBXW7表达的阈值,使用Kaplan-Meier生存分析和比例风险回归模型(COX)预测FBXW7表达与患者预后的关系。向BC细胞系MCF7和MDA-MB-231转染pcDNA3-FBXW7wt质粒,实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)验证过表达效率。通过噻唑蓝(MTT)法和集落形成实验检测细胞增殖;可穿透性细胞培养小室检测细胞迁移。统计学方法分别采用独立样本t检验和方差分析。结果FBXW7在BC组织中的表达低于癌旁正常组织(8.537±0.536比9.619±0.360,t=21.080,P<0.05),低表达与BC患者预后差相关(104.143比133.714,χ^(2)=6.146,P<0.05),且在年龄≥60岁(90.333比113.615,χ^(2)=4.747,P<0.05)、右乳为病灶部位(107.150比137.727,χ^(2)=4.685,P<0.05)、病理T2(92.700比114.760,χ^(2)=4.063,P<0.05)、有淋巴结转移(104.083比132.211,χ^(2)=4.124,P<0.05)、TNMⅢ期(87.062比130.333,χ^(2)=5.494,P<0.05)、雌激素受体(ER)阳性(97.381比133.478,χ^(2)=4.902,P<0.05)和人表皮生长因子受体2(Her-2)阳性(93.181比131.727,χ^(2)=6.219,P<0.05)的BC人群中,FBXW7低表达患者的总生存期明显短于FBXW7高表达患者。单因素[比值比(OR):3.374;95%可信区间(CI):1.213~9.382,P<0.05]和多因素COX分析(OR:3.335;95%CI:1.062~10.476;P<0.05),结果显示FBXW7是BC患者生存状态的危险因素。MCF7和MDA-MB-231细胞FBXW7过表达效率分别为67.129倍[(0.998±0.055)比(66.972±0.423),t=78.560,P<0.05]和39.523倍[(0.998±0.050)比(39.456±0.210),t=54.640,P<0.05]。过表达FBXW7可显著抑制BC细胞系MCF7和MDA-MB-231细胞的增殖[MCF7组第4天为(1.639±0.045)比(1.141±0.842),t=10.400,P<0.05;MDA-MB-231组第2天为(0.519±0.030)比(0.410±0.025),t=5.447,P<0.05;第3天为(1.416±0.68)比(1.129±0.022),t=7.939,P<0.05;第4天为(1.910±0.071)比(1.247±0.069),t=13.310,P<0.05]、克隆形成[(211.333±7.039)比(92.667±3.681),t=21.120,P<0.05;(133.000±7.348)比(28.333±3.858),t=17.830,P<0.05]和迁移能力[(286.333±8.993)比(82.000±7.257),t=25.000,P<0.05;(176.000±5.099)比(65.333±6.649),t=18.680,P<0.05]。结论FBXW7可作为BC患者预后预测的指标,在BC中发挥抑癌基因的作用。

F框／WD-40域蛋白7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测F框／WD-40域蛋白7（FBXW7）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）组织中的表达及临床意义，初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食管上皮内瘤变组织中的表达情况，采用Western blot法及半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中FBXW7蛋白和mRNA表达水平，分析FBXW7表达与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌组织、癌旁正常组织、食管低级别上皮内瘤变组织和高级别上皮内瘤变组织中，FBXW7蛋白的阳性表达率分别为40．0％（36／90）、85．0％（17／20）、77．3％（17／22）和33．3％（6／18），差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7蛋白表达水平分别为0．283±0．055和0．657±0．091，差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7 mRNA相对表达水平分别为0．863±0．962和1．813±0．512，差异有统计学意义（P〈0．05）。单因素分析显示，FBXW7蛋白表达与肿瘤TNM分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关（均P〈0．05）。Cox多因素分析显示，仅淋巴结转移为食管鳞癌患者的独立预后因素（P〈0．05）。90例患者中，FBXW7蛋白阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为67．6％和39．3％，差异有统计学意义（P=0．01）。结论FBXW7mRNA及其蛋白在食管鳞癌组织和食管高级别上皮内瘤变组织中的表达显著减低，且其低表达与食管鳞癌患者的不良预后密切相关。作为一种肿瘤抑制基因，FBXW7可能对食管鳞癌的发生、发展和转移起重要作用，有可能成为反映食管鳞癌患者病情严重程度及判断其预后的重要分子生物学标志物。

FBXW7及c-Myc蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的相关性分析

目的分析F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)及c-Myc蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征的相关性。方法回顾性收集102例胃癌临床手术标本,每份标本均取其正常胃黏膜组织(A组)、癌旁组织(B组)与癌组织(C组)。通过免疫组织化学法对三种组织FBXW7及c-Myc蛋白的表达水平进行检测,进而分析其与胃癌临床病理特征的相关性。结果相比A组与B组,C组中的FBXW7蛋白表达水平显著降低(P<0.05),而c-Myc蛋白的表达水平明显升高(P<0.05);而B组中的FBXW7、c-Myc蛋白表达水平均显著低于A组(P<0.05)。FBXW7、c-Myc蛋白的表达水平与患者年龄、性别及肿瘤部位均无显著相关性(P>0.05),但与胃癌分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期均显著相关(P<0.01)。结论胃癌患者中FBXW7蛋白表达水平明显降低,而cMyc蛋白表达明显升高,二者表达水平可能与肿瘤分化程度、浸润深度及发生淋巴结转移等存在密切联系,FBXW7与c-Myc可能成为早期诊断与评估胃癌浸润及淋巴结转移的重要生物学指标。

FBXW7和RhoA/Rho激酶蛋白表达参与糖尿病大鼠心肌纤维化

目的探究F框/含蛋白7 WD-40域蛋白(FBXW7)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)的表达与糖尿病心肌纤维化的关系。方法将SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,采用一次性ip链脲佐菌素60 mg·kg^(-1)建立1型糖尿病大鼠模型,分别于2,4,8,12和16周进行检测。HE染色观察大鼠心脏组织形态变化;Masson染色和测定心肌羟脯氨酸(HYP)含量观察心肌胶原沉积程度;ELISA法检测血清中FBXW7,转化生长因子β_1(TGF-β_1)和结缔组织生长因子(CTGF)的含量;Western蛋白印迹和免疫组化法检测心肌中FBXW7,RhoA和ROCK1蛋白的表达。结果显微镜下可见糖尿病模型组大鼠心肌不同程度局灶性心肌细胞变性、坏死和纤维组织增生等。与正常对照组相比,4～16周时,模型组大鼠心肌组织中胶原沉积面积和胶原含量显著升高(P<0.05,P<0.01),呈递增趋势;2～4周时,大鼠血清中FBXW7含量显著增加(P<0.01),第8周时降低,但仍显著高于正常对照组(P<0.01);8～16周时,大鼠血清中TGF-β_1和CTGF含量逐渐升高(P<0.01)。Western蛋白印迹和免疫组化结果显示,模型组大鼠心肌RhoA和ROCK1蛋白表达在各时间点均显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);2～12周模型组大鼠心肌FBXW7表达较正常对照组显著升高(P<0.01,P<0.01),第4周表达最高,8～16周表达下降,与时间呈负相关(r=-0.988,P<0.05),但仍高于正常对照组(P<0.01)。结论 FBXW7和RhoA/Rho激酶参与糖尿病大鼠心肌纤维化的发生发展,可能成为治疗糖尿病心肌病的靶点。

喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达与临床病理参数及预后的关系

目的探讨喉癌组织中F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)表达与临床病理参数及预后的关系。方法回顾性分析83例喉癌患者资料,比较患者癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC-Ag表达阳性率;分析FBXW7、SCC-Ag表达与患者临床病理参数的关系;比较不同预后患者FBXW7、SCC-Ag表达的阳性率。结果患者癌组织FBXW7表达阳性率为22.89%,低于癌旁组织的90.36%;癌组织SCC-Ag表达阳性率为72.29%,高于癌旁组织的20.48%(P<0.05)。单因素分析显示,癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况与喉癌组织中FBXW7、SCC-Ag表达具有密切联系(P<0.05);随访6个月内预后良好患者癌组织FBXW7表达阳性率(29.63%)高于预后不良患者(10.34%),癌组织SCC-Ag表达阳性率(62.96%)低于预后不良患者(89.66%)(P<0.05)。结论喉癌组织中FBXW7表达阳性率明显降低,SCC-Ag阳性表达率显著升高。喉癌患者癌肿病理分期、分化程度、淋巴结转移情况均与其癌组织FBXW7、SCC-Ag表达关系密切,且癌组织FBXW7、SCC-Ag表达对患者预后情况有一定的提示作用。

F框WD40域蛋白7在胃癌组织的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化的影响

目的观察F框WD40域蛋白7(FBXW7)在胃癌中的表达变化及对细胞增殖和上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法选取2016年3月到2019年3月郑州大学附属医院南阳中心医院经手术切除的154例胃癌组织和癌旁组织作为研究材料,采用蛋白质印迹法(Western blot)分析肿瘤组织和癌旁组织中FBXW7蛋白表达水平。采用慢病毒在胃癌细胞SGC-7901中构建FBXW7过表达细胞株(FBXW7组)和对照细胞株(对照组)。采用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和细胞计数试剂盒(CCK-8)分析两组细胞增殖水平;采用Western blot分析两组细胞EMT标记分子蛋白表达水平。采用含基质胶的Transwell分析细胞的侵袭能力。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织FBXW7蛋白表达水平(1.32±0.23)比较,肿瘤组织中FBXW7表达水平(0.52±0.12)显著下调,差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。与对照组(1.98±0.27)比较,FBXW7组细胞72 h增殖程度(1.21±0.18)显著下降,差异有统计学意义(t=2.615,P<0.05)。与对照组[(54.32±7.32)%]比较,FBXW7组细胞EdU阳性率[(20.98±4.89)%]显著下降,差异有统计学意义(t=3.111,P<0.05)。与对照组细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白-1(ZO-1)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平(0.89±0.19、1.20±0.28、1.39±0.21、1.51±0.26)比较,FBXW7组细胞E-cadherin和ZO-1表达水平(1.98±0.27、2.59±0.31)显著增加,而N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平(0.40±0.11、0.53±0.19)显著下调,差异均有统计学意义(t=2.094、2.812、2.458、2.931,P<0.05)。与对照组细胞侵袭数量[(152.69±20.14)个]比较,FBXW7组细胞侵袭数量[(81.44±12.10)个]明显下降,差异有统计学意义(t=4.259,P<0.05)。结论FBXW7在胃癌组织中呈低表达,参与了胃癌细胞的增殖和EMT。

sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性分析

目的:分析可溶性程序性死亡受体-配体1(sPD-L1)、三结构域蛋白26(TRIM26)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)与脑胶质瘤术后复发的相关性。方法:回顾性分析2020年1月至2022年2月该院收治的80例脑胶质瘤患者的临床资料,设为研究组,另选取同期80名健康体检者,设为对照组。研究组均行脑胶质瘤切除术治疗,随访6个月后,脑胶质瘤术后复发21例。比较两组和不同病理特征患者术前、术后1个月血清s PD-L1、TRIM26、FBXW7水平,并采用Spearman相关性分析血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发的相关性及预测效能。结果:术后1个月,研究组血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平高于对照组,FBXW7水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月,未复发患者血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平低于复发患者,FBXW7水平高于复发患者,差异有统计学意义(P<0.05);血清sPD-L1、TRIM26 mRNA水平与脑胶质瘤术后复发均呈正相关(r>0,P<0.05);血清FBXW7水平与脑胶质瘤术后复发呈负相关(r<0,P<0.05);术后1个月,受试者工作曲线(ROC)分析结果显示,血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7水平单项及联合检测预测脑胶质瘤术后复发的AUC分别为0.721、0.799、0.787、0.920,其中联合检测的预测价值最高。结论:血清sPD-L1、TRIM26mRNA与脑胶质瘤术后复发呈正相关,血清FBXW7与脑胶质瘤术后复发呈负相关;血清sPD-L1、TRIM26、FBXW7单项检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值一般,联合检测在脑胶质瘤术后复发中的预测价值最高。

FBXW7过表达对棕榈酸诱导C2C12细胞萎缩及焦亡的作用及机制研究

目的 探究FBXW7对棕榈酸钠诱导C2C12细胞萎缩过程中焦亡通路的调节作用。方法 使用250μM棕榈酸钠干预C2C12细胞24 h构建肌少症性肥胖细胞模型。使用慢病毒构建FBXW7稳定过表达的C2C12细胞株。采用环己酰亚胺以及MG132检测蛋白半衰期,HE染色检测肌管直径,β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度,乳酸脱氢酶释放实验检测细胞焦亡水平,免疫荧光检测FBXW7及GSDMD的胞内分布,免疫印迹方法检测FBXW7、 NLRP3、 GSDMD、 CASP1、 ASC、 P65、 FBX32、 P21的表达水平。结果 棕榈酸钠干预C2C12细胞会引起肌管直径缩小、 β半乳糖苷酶活性增加、乳酸脱氢酶释放水平上升,且抑制FBXW7表达,延长焦亡相关蛋白的半衰期。然而,FBXW7过表达可改善以上情况。免疫荧光结果显示FBXW7与GSDMD存在共定位。结论 通过延长焦亡相关蛋白的半衰期,棕榈酸钠可以提高细胞的焦亡水平,而FBXW7过表达可以抑制以上过程。调控FBXW7表达可能是未来治疗肌少症性肥胖的潜在靶点。

FBXW7在非小细胞肺癌治疗耐药中的研究进展

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一。NSCLC治疗耐药严重影响了预后,研究NSCLC治疗耐药的分子机制非常必要。泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)能够通过选择性降解短期蛋白调节细胞内重要过程,如周期调控、转录调控、信号转导、凋亡和分化等,其表达的异常影响肿瘤的发生、发展及预后。F-box家族蛋白是UPS的重要组成部分,而F框/WD-40域蛋白7(F-box and WD-40 domain protein 7,FBXW7)是F-box家族蛋白中研究的经典蛋白之一。研究表明FBXW7与NSCLC耐药有关,主要机制是FBXW7突变减少其下游蛋白的泛素化降解,导致NSCLC患者药物治疗耐药,其下游蛋白包括Snail蛋白、骨髓细胞白血病因子1(myeloid cell leukemia sequence 1,MCL-1)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)、卷曲螺旋结构域6(coiled-coil-domain containing 6,CCDC6)。雷帕霉素、组蛋白脱乙酰酶抑制剂MS-275及冬凌草素对治疗耐药的FBXW7突变的NSCLC患者有效。

Calreticulin、VRK1、Fbxw7在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及诊断价值研究

目的探究弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中钙网蛋白(Calreticulin)、牛痘相关激酶1(VRK1)、F框/WD40域蛋白7(Fbxw7)的表达及诊断价值。方法选取2019年3月到2021年3月在秦皇岛第一医院病理科保存60例DLBCL组织以及瘤旁组织标本为DLBCL组,选取同期保存的正常的淋巴组织为正常组。采用荧光定量RT-PCR检测Calreticulin、Fbxw7,免疫组织化学法检测组织中VRK1表达。结果弥漫大B细胞淋巴瘤组织Calreticulin、VRK1表达高于瘤旁组织和正常组织,Fbxw7表达低于瘤旁组织和正常组织(P<0.05)。瘤旁组织Calreticulin、VRK1表达高于正常组织,Fbxw7表达低于正常组织(P<0.05)。随着临床分期程度加重、分化程度越低,Calreticulin、VRK1在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达不断升高,Fbxw7不断降低(P<0.05);结外病灶个数>2、LDH升高、有淋巴结转移者Calreticulin、VRK1的表达量高于无淋巴结转移、结外病灶个数≤2、LDH正常者;而Fbxw7则相反(P<0.05)。ROC分析Calreticulin、VRK1、Fbxw7预测弥漫大B细胞淋巴瘤的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.650、0.659、0.711、0.731。结论Calreticulin、VRK1在弥漫大B细胞淋巴瘤组织高表达,Fbxw7在弥漫大B细胞淋巴瘤组织中低表达,三者联合对弥漫大B细胞淋巴瘤患者的诊断价值显著。

FBXW7、SCC在喉癌组织中表达及预后分析

目的分析喉癌组织F框/WD40域蛋白7(FBXW7)、鳞状细胞癌抗原(SCC)表达特点及其与预后的关系。方法采集84例喉鳞癌患者癌组织标本及20份癌旁组织标本,免疫组化链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(S-P)法测定癌组织及癌旁组织FBXW7、SCC表达,探究两者表达与喉癌病理特点的关系,Kaplan-Meier法分析不同FBXW7、SCC表达喉癌患者预后差异,Cox回归分析筛选预后影响因素。结果喉癌患者癌组织FBXW7阳性率低于癌旁组织,SCC阳性率高于癌旁组织(P<0.05);临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、病理分化程度为低分化、伴淋巴结转移、浸润深度为T3~T4期的喉癌患者癌组织FBXW7阳性率低于临床分期为Ⅰ+Ⅱ期、病理分化程度为中高分化、不伴淋巴结转移、浸润深度为T1~T2期的喉癌患者(P<0.05),SCC阳性率高于以上喉癌患者(P<0.05);喉癌患者累积3年生存率为51.19%,FBXW7阴性患者中位生存时间短于阳性患者,Log-rank检验差异无统计学意义(P>0.05);SCC阳性患者中位生存时间短于阴性患者,Log-rank检验差异无统计学意义(P>0.05);Cox回归分析显示:临床分期、病理分化程度、淋巴结转移、浸润深度、FBXW7、SCC均为影响喉癌生存率的相关因素(P<0.05)。结论喉癌癌组织FBXW7呈低表达、SCC呈过表达,两者均参与喉癌病理进展过程,且与不良预后有关。

长链非编码RNA BDNF-AS和FBXW7在伴冲动暴力行为精神分裂症中的表达及作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子(BDNF)-AS和F框WD40域蛋白7(FBXW7)在伴冲动暴力行为精神分裂症中的表达及作用。方法选取118例伴冲动暴力行为的精神分裂症患者(患者组)、100名健康体检者(对照组)作为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测血清lncRNA BDNF-AS,酶联免疫吸附测定法检测血清FBXW7,阳性与阴性症状量表(PANSS)评估精神症状,分析lncRNA BDNF-AS和FBXW7诊断价值及与PANSS相关性。结果患者组lncRNA BDNF-AS相对表达水平和PANSS评分高于对照组,FBXW7水平低于对照组(P<0.05)。经Pearson相关性分析显示,患者组血清lncRNA BDNF-AS与FBXW7呈负相关(P<0.001);lncRNA BDNF-AS与PANSS呈正相关(P<0.001),FBXW7与PANSS呈负相关(P<0.001)。血清lncRNA BDNF-AS和FBXW7诊断伴冲动暴力行为精神分裂症曲线下面积分别为0.851、0.744,临界值分别为1.47、188.26,敏感性分别为79.95%、96.17%,特异性分别为79.83%、57.34%。结论伴冲动暴力行为精神分裂症患者血清中lncRNA BDNF-AS水平升高,FBXW7水平下降,均与患者精神症状相关,或可作为临床诊断潜在指标。

miR-338-3p靶向FBXW7调控ox-LDL诱导的内皮细胞氧化应激和凋亡

目的探讨微小RNA-338-3p(miR-338-3p)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化应激和凋亡的影响及作用机制。方法HUVECs细胞分为空白组、ox-LDL组(50 mg/L ox-LDL诱导细胞)、ox-LDL+anti-miR-338-3p组(ox-LDL诱导转染miR-338-3p抑制剂的细胞)、ox-LDL+anti-miR-con组(ox-LDL诱导转染miR-338-3p抑制剂阴性对照序列的细胞)、ox-LDL+anti-miR-338-3p+si-F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)组(ox-LDL诱导共转染miR-338-3p抑制剂与FBXW7小干扰RNA的细胞)和ox-LDL+anti-miR-338-3p+si-con组(ox-LDL诱导共转染miR-338-3p抑制剂与乱序无意义阴性序列的细胞)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-338-3p和FBXW7 mRNA表达水平,蛋白印迹(Western blot)法检测FBXW7和活化的半胱天冬酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达水平,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量及细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)的活力,流式细胞仪检测细胞凋亡。双荧光素酶报告基因实验验证miR-338-3p与FBXW7调控关系。结果与空白组比较,ox-LDL组miR-338-3p水平、MDA和LDH含量、细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),FBXW7 mRNA和蛋白水平、GSH-PX和SOD活力降低(P<0.05)。与ox-LDL+anti-miR-con组比较,ox-LDL+anti-miR-338-3p组MDA和LDH含量、凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),GSH-PX和SOD活力升高(P<0.05)。与ox-LDL+anti-miR-338-3p+si-con组比较,ox-LDL+anti-miR-338-3p+si-FBXW7组MDA和LDH含量、细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),GSH-PX和SOD活力降低(P<0.05)。miR-338-3p在HUVECs细胞中靶向负调控FBXW7表达。结论抑制miR-338-3p表达通过靶向上调FBXW7来抑制ox-LDL诱导的HUVECs细胞氧化应激和凋亡,保护细胞损伤。

CHD4、FBXW7和SPOP基因在子宫内膜癌中表达的研究现状

近年来,子宫内膜癌在国内的发病率明显升高,导致该类恶性肿瘤发生、发展的遗传因素很多。色素域解旋酶DNA结合蛋白4(CHD4)、F框/WD40域蛋白7(FBXW7)和SPOP基因是最新发现的三个遗传驱动基因,它们在人类细胞周期的进展及细胞的生长、分化中起着重要的作用,可引起恶性肿瘤的发生、发展及变化,使不良预后增加。该文就联系这三个基因各自的结构与作用机制,及其在子宫内膜癌中的表达现状进行综述。

miR-27a促进胃癌细胞AGS增殖与侵袭及其机制探讨

目的:探究miR-27a对胃癌细胞AGS增殖与侵袭能力的影响,并进一步探讨能否靶向调控盐诱导激酶1(salt induce kinase 1,SIK1)和F框/WD_40域蛋白7(F-box and WD_40 repeat domain protein 7,FBXW7)。方法:利用TCGA数据库分析胃癌组织与邻近正常胃组织之间miR-27a表达水平的差异;利用脂质体Lipofectamine^(TM)2000将miR-27a mimics和miR-27a NC转入AGS细胞中,实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测miR-27a的表达,CCK-8实验检测细胞增殖活力,细胞平板克隆形成实验检测细胞克隆能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力。生物信息学预测miR-27a的靶基因,通过蛋白印迹实验验证miR-27a对SIK1的调控作用;通过双荧光酶素报告基因、Real-time PCR和蛋白印迹实验验证miR-27a对FBXW7的调控作用。利用TCGA数据库分析胃癌组织与邻近正常胃组织之间FBXW7 mRNA表达水平的差异,分析FBXW7 mRNA表达水平与胃癌患者5年生存率的关系。结果:TCGA数据库分析表明miR-27a在胃癌组织中的表达高于邻近正常胃组织。Real-time PCR表明miR-27a在模拟物组中的表达较对照组高,细胞功能实验表明过表达miR-27a能促进胃癌细胞的增殖与侵袭能力;TargetScan预测SIK1为miR-27a的潜在靶基因,蛋白印迹实验表明SIK1不能被miR-27a靶向负性调控。TargetScan预测FBXW7为miR-27a的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因结果表明miR-27a可抑制FBXW73’UTR双荧光素酶活性,突变其结合位点后抑制作用消失。Real-time PCR和蛋白印迹实验表明过表达miR-27a后FBXW7的蛋白与mRNA表达均明显下调。TCGA数据库分析表明胃癌组织中FBXW7 mRNA的表达较邻近正常胃组织明显下降,FBXW7 mRNA表达低的组胃癌患者5年生存率更低。结论:过表达miR-27a能增强胃癌细胞AGS的增殖与侵袭能力,可能是通过负性调控FBXW7发挥的促瘤作用。在胃癌细胞AGS中,SIK1不能被miR-27a负性调控,可能被FBXW7靶向介导泛素化降解。

miR-25在胃癌组织中的表达

目的分析胃癌组织中miR-25的表达及其靶基因预测。方法选取胃癌及配对癌旁正常组织标本30例,应用荧光定量PCR检测miR-25的表达水平,利用生物信息学软件、荧光素酶实验和Western blot预测和验证miR-25的靶基因。结果 miR-25在胃癌组织中的表达显著高于配对的癌旁正常组织(P<0.05)。荧光素酶实验和Western blot实验表明F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)是miR-25的靶基因。FBXW7在胃癌组织中表达显著下降(P<0.05)。结论 miR-25在胃癌组织中高表达,可能在胃癌的发病中发挥重要作用。

微小RNA-27a在子宫颈癌中的表达变化及作用机制

目的探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验。Real-time PCR检测宫颈癌、癌旁组织、正常宫颈组织以及宫颈癌细胞(SiHa、Caski、He La、HCC94)、子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8中miR-27a的表达。应用脂质体转染法将miR-27a抑制剂(inhibitor)及其阴性对照转染至SiHa细胞,CCK-8法、流式细胞术、Transwell法分别检测miR-27a对SiHa细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率和侵袭能力的影响。生物学信息法预测miR-27a的靶向基因,双荧光素酶报告基因实验结合Western bloting验证miR-27a对FBXW7的靶向调控作用。结果与癌旁组织和正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中miR-27a高表达(P<0.05);与子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌细胞SiHa、Caski、He La、HCC94中miR-27a高表达(P<0.05)。抑制SiHa细胞中miR-27a的表达,能够明显降低细胞的增殖活性(P<0.05),提高G0/G1期细胞比例(P<0.05),降低S期和G2/M期细胞比例(P<0.05),提高细胞凋亡率(P<0.05),抑制细胞的侵袭能力(P<0.05)。生物学信息法预测FBXW7可能是miR-27a的靶向调控基因;双荧光素酶报告基因实验显示,miR-27a可以与FBXW7基因的3’UTR区特异性结合(P<0.05),并负调控FBXW7蛋白的表达(P<0.05)。结论MiR-27a在宫颈癌的发生发展中起着癌基因的作用,抑制miR-27a表达能够明显抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向调控FBXW7的表达有关。