过表达叉头盒F1对肝癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及机制实验研究

目的:探讨过表达叉头盒F1(FOXF1)对肝癌细胞增殖、周期和凋亡的影响,并初步探究其分子机制。方法:选取肝癌细胞(MHCC-97H和Huh7细胞)为实验细胞,分别设立vector组(转染空白载体)和ov-FOXF1组(转染FOXF1过表达载体)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western bolt检测转染后FOXF1 mRNA及蛋白表达。采用MTT法检测肝癌细胞增殖。采用流式细胞术检测肝癌细胞周期和细胞凋亡。采用Western bolt检测Wnt5a/β-catenin信号通路相关蛋白表达。结果:ov-FOXF1组Huh7和MHCC-97H细胞FOXF1 mRNA和蛋白表达量高于vector组(均P<0.05)。转染后48、72 h,ov-FOXF1组Huh7和MHCC-97H细胞增殖受到抑制(均P<0.05)。与vector组比较,ov-FOXF1组Huh7和MHCC-97H细胞G_(0)/G_(1)期细胞比例升高,S期细胞比例降低(均P<0.05)。ov-FOXF1组G_(2)/M期Huh7细胞比例较vector组降低(P<0.05)。MHCC-97H细胞两组G_(2)/M期细胞比例比较差异无统计学意义(均P>0.05)。ov-FOXF1组Huh7和MHCC-97H细胞凋亡比例高于vector组(均P<0.05)。与vector组比较,ov-FOXF1组FOXF1、active Caspase-3蛋白表达增加,Wnt5a、β-catenin、c-myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:FOXF1过表达能够抑制肝癌细胞的增殖及周期进展,促进细胞凋亡,其机制可能与调控Wnt5a/β-catenin通路及细胞周期相关蛋白等有关。

LncRNA GAS5通过miR-182-5p/FOXF2轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织,体外培养人口腔上皮细胞系HOEC及人OSCC细胞系CAL-27、HSC-3、SCC-25,qRT-PCR检测组织、细胞中LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2的表达;择细胞株CAL-27分为ctrl组、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+miR-NC组及pcDNA-GAS5+miR-182-5p mimics组,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western Blot检测癌细胞中FOXF2、bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及E-cadherin蛋白表达,双萤光素酶报告实验验证miR-182-5p与LncRNA GAS5、FOXF2的关系。结果与癌旁组织相比,OSCC组织中LncRNA GAS5、FOXF2 mRNA表达降低,miR-182-5p表达升高(P<0.05);CAL-27、HSC-3、SCC-25细胞与HOEC相比,LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2表达趋势与OSCC组织内一致,且在CAL-27表达最明显,选择其作为后续实验的细胞株;与ctrl组、pcDNA组比较,pcDNA-GAS5组CAL-27细胞中GAS5、FOXF2 mRNA、细胞凋亡率及BAX、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-182-5p表达、细胞增殖、迁移和侵袭数及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);上调miR-182-5p可减弱过表达LncRNA GAS5对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,也可抑制癌细胞凋亡;LncRNA GAS5靶向负调控miR-182-5p表达,miR-182-5p靶向负调控FOXF2表达。结论上调GAS5可能通过抑制miR-182-5p来增加FOXF2表达,进而抑制CAL-27细胞增殖、迁移及侵袭,促进CAL-27细胞的凋亡。

肌肉萎缩盒F蛋白和肌肉特异性环指蛋白1对慢性肾脏病患者骨骼肌萎缩的调控机制

胰岛素抵抗、酸中毒、炎症状态等可导致慢性肾脏病患者骨骼肌萎缩,其主要原因可能与泛素溶酶体系统活性亢进有关。泛素溶酶体系统发挥作用需要3种成分:(1)E1连接酶,起活化泛素的作用;(2)E2连接酶,将活化的泛素转运到需要降解的蛋白质分子上;(3)E3连接酶,发挥将泛素准确转运到靶蛋白的调节作用。肌肉特异性环指蛋白1(MuRF1)和肌肉萎缩盒F蛋白(MAFbx/atrogin-1)是两种重要的骨骼肌特异性E3连接酶,其作用可受多种因子影响。探讨MuRF1、MAFbx/atrogin-1与其调控因子之间的相互作用可为骨骼肌萎缩的防治提供很好的思路。

子宫内膜癌中ATP结合盒基因超家族F2表达的临床意义

目的分析三磷酸腺苷(adenosine-triphosphate,ATP)结合盒基因超家族F2(ABCF2)与子宫内膜癌临床病理学特征的关系。方法选择北京大学人民医院2000年1月至2008年12月收治的资料完整的子宫内膜腺癌94例,正常子宫内膜20例,免疫组织化学方法检测ABCF2在这些组织中的表达,分析其与年龄、临床期别、病理学级别、肌层浸润深度、淋巴结转移状态及ER、PR、P53、PTEN表达的关系。结果ABCF2在子宫内膜癌Ⅲ期及以上,患者中的表达明显高于在Ⅱ期及以下患者中的表达(P<0.05)。而ABCF2的表达与年龄、病理学分级、肌层浸润深度、淋巴结转移及ER、PR、P53、PTEN表达无明显相关性(P>0.05)。结论ABCF2可能与子宫内膜癌的进展有关,其作用需进一步研究。

调控叉头盒转录基因F1表达对非小细胞肺癌细胞上皮间质转化、迁移和侵袭的作用

目的通过慢病毒介导的shRNA敲低人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株PC9中叉头盒转录基因F1(forkhead box-F1,FOXF1)的表达,研究FOXF1对细胞生长及侵袭迁移等能力的影响及可能的分子机制。方法慢病毒介导的shRNA敲低FOXF1的表达,采用实时荧光定量qRTPCR实验及Western Blot技术检测细胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表达变化,平板克隆实验及CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell实验检测FOXF1基因表达对迁移及侵袭的影响,Western Blot检测上皮间充质转化相关蛋白的表达。结果慢病毒介导的shRNA感染PC9细胞后,有效下调了PC9细胞中FOXF1 mRNA和蛋白的表达水平(P <0.05),细胞的增殖能力受到抑制,细胞体外迁移及侵袭能力明显降低;Western Blot结果显示,抑制FOXF1表达后β-Catenin、N-cadherin、Vimentin、Snail表达下调,E-cadherin、ZO-1表达上调。结论下调FOXF1表达可抑制非小细胞肺癌PC9细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能通过调控上皮—间充质转化相关蛋白的表达来实现。

“金字塔”会唱歌——爱国者彩音盒F529音乐播放器

作为国内著名的IT品牌，爱国者将数字家庭的概念引入到了旗下的诸多产品中，彩音盒F529就是由法国工业设计大师Antonio Parker在欧式建筑和欧式家具的灵感启发下设计而在，它将科技与流线完美结合，锥形的结构像一个金字塔，

结直肠癌组织中FBXO45的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌组织中F盒蛋白45(FBXO45)的表达及临床意义。方法采用GEPIA数据库分析FBXO45在结直肠癌组织中的表达及与预后的关系。收集本院2016年1月至2018年6月经病理确诊的87对结直肠癌组织和配对癌旁组织,采用实时定量PCR检测上述组织中FBXO45水平,分析FBXO45表达与结直肠癌临床病理特征(性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、分化程度、浸润深度和淋巴结转移)的关系。结果GEPIA数据库分析显示结肠癌和直肠癌组织中FBXO45水平均高于正常组织(P<0.05);预后上,结直肠癌全组及亚组分析显示FBXO45表达与总生存期和无复发生存期均无关。结直肠癌组织中FBXO45水平为2.168±0.857,高于癌旁组织的1.087±0.543(P<0.05)。FBXO45表达与性别和年龄无关(P>0.05),而与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、分化程度和TNM分期有关(P<0.05)。结论FBXO45在结直肠癌组织中高表达且与肿瘤恶性程度相关参数有关,参与结直肠癌的发生发展,在结直肠癌的诊治中有一定价值。

宫颈癌组织中FBW7和c-Myc的表达及相关性分析

目的:检测F盒/WD40重复域蛋白7(FBW7)和c-Myc在宫颈癌组织中的表达情况及临床意义,并分析两者表达的相关性。方法:收集我院2008年1月～2012年12月病理科存档的宫颈癌和正常宫颈组织标本70例,采用免疫组化SP法分别检测46例宫颈癌及24例正常宫颈组织中FBW7及cMyc的表达情况。结果:FBW7和c-Myc在宫颈癌组织中的阳性表达率分别为30.4%(14/46)和69.6%(32/46),在正常宫颈组织中的阳性表达率分别为66.7%(16/24)和25.0%(6/24),两组比较差异有统计学意义(χ2=8.454,P=0.004;χ2=12.622,P=0.000)。FBW7表达与宫颈癌临床分期(P=0.036)和病理学分级(P=0.023)显著相关,c-Myc表达与宫颈癌临床分期(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.003)和病理学分级(P=0.003)也显著相关。宫颈癌组织中FBW7与c-Myc蛋白表达呈显著负相关(r=-0.667,χ2=6.694,P=0.010)。结论:宫颈癌组织中FBW7低表达,且与c-Myc表达呈负相关,提示FBW7可能通过调控c-Myc泛素化降解参与肿瘤发生、发展。

冠心病患者血清miR-144和FOXF1表达及与冠状动脉病变严重程度的关系

目的探讨冠心病患者血清miR-144和叉头盒蛋白F1(FOXF1)表达与冠状动脉病变严重程度的关系。方法选择2018年1月至2020年3月收治的108例冠心病患者(冠心病组)和100例年龄、性别相匹配的体检志愿者(对照组)。采用RT-PCR法检测2组受试者miR-144和FOXF1表达,冠心病组行冠状动脉造影术评估冠脉病变支数、冠脉狭窄程度和冠脉病变程度。比较不同冠脉病变患者血清miR-144和FOXF1表达差异,Pearson或Spearman秩相关分析miR-144和FOXF1相关性以及miR-144、FOXF1和冠脉病变支数、冠脉狭窄率、SYNTAX积分的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-144、FOXF1诊断重度病变的价值。结果冠心病组血清miR-144表达高于对照组(P<0.05),FOXF1表达低于对照组(P<0.05)。血清miR-144表达随着冠脉病变支数增加,冠脉病变程度加重而增高(P<0.05),FOXF1则降低(P<0.05),冠脉狭窄Ⅲ度~Ⅳ度组血清miR-144表达高于Ⅰ度~Ⅱ度组(P<0.05),FOXF1表达低于Ⅰ度~Ⅱ度组(P<0.05)。miR-144表达与冠脉病变支数、冠脉狭窄率、SYNTAX积分呈正相关(r/rs值分别为0.745、0.812、0.842,P<0.05),FOXF1表达与冠脉病变支数、冠脉狭窄率、SYNTAX积分呈负相关(r/rs值分别为-0.739、-0.806、-0.859,P<0.05),miR-144表达与FOXF1表达呈负相关(r=-0.927,P<0.05)。联合miR-144、FOXF1诊断重度病变的曲线下面积为0.932,高于单独miR-144、FOXF1(Z=2.412、2.569,P<0.05)。结论冠心病患者血清miR-144表达上调,FOXF1表达下调,miR-144、FOXF1均与冠脉病变程度有关,miR-144可能通过负性调控FOXF1表达参与冠脉病变过程。检测miR-144、FOXF1有助于鉴别冠脉病变程度。

艾康恶性疟/间日疟免疫层析检测试剂盒效果评价

目的评价艾康恶性疟/间日疟(P．f/P．v)胶体金免疫层析检测试剂盒诊断疟疾效果。方法以镜检法为金标准,采用盲法实验室测试疟疾阳性和阴性血样。结果共测试331例血样,其中疟疾血样121例。对疟疾的灵敏性和特异性分别为92．56％和98．57％,与镜检符合率为96．38％；其中恶性疟的灵敏性和特异性分别为100．00％和98．57％,重复性为100．00％；对间日疟的灵敏性和特异性分别为86．96％和100．00％,恶性疟和间日疟之间无交叉反应。结论艾康P．f/P．v胶体金免疫层析检测试剂盒诊断疟疾具有快速、简便、准确、直观以及不需要特殊仪器优点,能同时诊断单纯恶性疟和单纯间日疟,但不能鉴别诊断混合感染。

MuRF1和MAFbx/Atrogin-1的研究进展

骨骼肌萎缩是多种疾病的并发症之一,其机制可归因于蛋白质降解增加与合成受阻。近年来,人们发现蛋白质降解增加与肌肉环状指基因1(MuRF1)和肌肉萎缩盒F基因(MAFbx,atrogin-1)的表达增加有关。本文就这两个基因的研究进展作一综述。

ABCF2在卵巢癌组织中的阳性表达及其与化疗耐药的关系

目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运蛋白F2（ATP binding cassette transporter protein F2,ABCF2）在卵巢癌组织中的阳性表达及其与化疗耐药的关系。方法 选取91例卵巢癌患者切除标本,同时选取42例距肿瘤5cm癌旁组织作为正常对照,采用免疫组化染色法检测各标本ABCF2表达情况,分析ABCF2阳性表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系。结果 卵巢癌组织ABCF2阳性表达率为68.13%,明显高于正常卵巢组织9.52%,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;ABCF2阳性表达与卵巢癌患者年龄、组织类型无关;Ⅲ期～Ⅳ期患者ABCF2阳性表达率为86.54%,明显高于Ⅰ期～Ⅱ期43.59%,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;化疗耐药患者ABCF2阳性表达率为88.89%,明显高于化疗敏感患者59.38%,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;Logistic回归分析结果显示ABCF2阳性表达是卵巢癌耐药的独立影响因素（OR=4.586,95%CI：1.121～3.392,P〈0.05）。结论 ABCF2在卵巢癌组织中高表达,其可能与卵巢癌患者发生化疗耐药有关。

肾透明细胞癌中X染色体生殖同源盆基因F1(Rhox F1)表达及其甲基化状态研究

目的:探讨人肾透明细胞癌组织中X染色体生殖同源盒基因F1(Rhox F1)启动子CpG岛甲基化及其mRNA表达情况,分析MTHFR C677T不同基因型Rhox F1甲基化及mRNA的表达情况。方法:收集我院手术切除的38例肾透明细胞癌组织(肾癌组)及其配对的癌旁正常肾脏组织区(正常组)标本。采用实时PCR和甲基化特异PCR(MSP)技术分别检测肾癌组和正常组的Rhox F1 mRNA的表达和甲基化状态。采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)技术分别检测MTHFR基因677(C→T)多态性,分析MTHFR C677T不同基因型Rhox F1启动子去甲基化率及mRNA表达情况。结果:正常组中Rhox F1基因mRNA阳性表达率36.8%明显低于肾癌组的89.5%,差异有统计学意义(χ~2=22.619,P<0.001)。正常组中Rhox F1基因启动子甲基化率为78.9%,显著高于肾癌组的18.4%(χ~2=27.861,P<0.001)。34例Rhox F1 mRNA阳性表达的肾癌组织[MTHFR 677(C→T)]中TT基因型患者25例,CT基因型患者5例,CC基因型患者4例,Rhox F1 mRNA表达水平差异具有统计学意义(F=80.201,P<0.001),且TT基因Rhox F1 mRNA表达水平(0.91±0.01)显著高于CT基因型(0.33±0.03)和CC基因型(0.26±0.03),差异均有统计学意义(均P<0.001)。TT基因型中有24例Rhox F1启动子去甲基化(96.0%);CT基因型中有2例(40.0%);CC基因型中有1例(25.0%)。TT、CT、CC三组基因Rhox F1启动子去甲基化率差异具有统计学意义(P<0.001),其中TT基因Rhox F1启动子去甲基化率显著高于CT基因型和CC基因型(P=0.009,P=0.004)。结论:Rhox F1 mRNA在肾癌组织中高表达,Rhox F1启动子去甲基化率在肾癌组织中较高。MTHFR基因677(C→T)中TT基因型肾癌患者Rhox F1 mRNA表达水平和启动子去甲基化阳性率高于CT和CC基因型。

S100钙结合蛋白A12、叉头盒蛋白F1、胰高血糖素样肽-1水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病严重程度的关系

目的:探讨血清S100钙结合蛋白A12(S100A12)、叉头盒蛋白F1(FOXF1)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)水平与老年冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者疾病严重程度的关系。方法:本研究为病例对照研究,选取2020年10月至2022年10月河南宏力医院健康管理中心收治的145例老年CHD患者为CHD组,男89例,女56例,年龄(68.56±3.97)岁,年龄范围为60~77岁。根据1∶1原则,另选取河南宏力医院健康管理中心同期145名健康体检者为健康体检组,所有受检者均行超声心电图、血液检查及冠状动脉造影等检查。比较两组纳入者、CHD组患者不同病变程度及不同病变支数的血清S100A12、FOXF1、GLP-1的水平,并分析与Gensini评分、病变支数的相关性。结果:CHD组血清S100A12水平[(273.51±85.24)ng/L]高于健康体检组[(203.67±72.04)ng/L],血清FOXF1(0.94±0.31)、GLP-1水平[(12.87±0.16)pmol/L]低于健康体检组[(2.46±0.63)、(19.42±0.19)pmol/L],差异有统计学意义( P<0.05)。CHD组不同病变程度患者血清S100A12水平比较,轻度病变<中度病变<重度病变,血清FOXF1、GLP-1水平比较,轻度病变>中度病变>重度病变;不同病变支数患者血清S100A12水平比较,单支病变<双支病变<三支病变,血清FOXF1、GLP-1水平比较,单支病变>双支病变>三支病变,差异均有统计学意义( P<0.05)。CHD组患者血清S100A12水平与Gensini评分、病变支数呈正相关( P<0.001),血清FOXF1、GLP-1水平与Gensini评分、病变支数呈负相关( P<0.001)。 结论:血清S100A12、FOXF1、GLP-1水平与老年CHD患者病情严重程度密切相关,可为临床评估病情提供可靠参考。

不同抗萎缩运动模式对泛素蛋白酶体亚基及基因表达的影响

骨骼肌萎缩是由于肌肉蛋白质降解或合成受阻,打破机体内肌蛋白平衡状态,从而引起泛素蛋白酶体亚基及基因表达量的变化,使肌肉环状指基因1、肌肉萎缩盒F基因表达升高,促进ATP-泛素-蛋白酶体途径的进一步激活,最终导致肌萎缩现象加重。研究发现,运动可通过调节泛素蛋白酶体相关因子的表达水平,进而抑制MuRF1、MAFbx/Atrogin-1 mRNA的表达,从而改善肌萎缩症状;而不同运动模式对于改善肌萎缩效果则不尽相同。本文主要通过对不同运动模式而产生的效果逐一进行分析,并对其中的关键性靶基因表达量的变化进行描述,对比分析不同运动模式的调节状况;同时对FOXO、Akt、AMPK等肌萎缩相关因子调控通路进行介绍。由此寻求最有效的运动介导模式,以对如何改善肌萎缩症状提供更有效的方式。

FBXO6介导的ERO1L泛素化降解对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用研究

目的探究F盒蛋白6(FBXO6)对膀胱癌细胞的作用及其作用机制。方法体外培养人正常膀胱上皮细胞株(SV-HUC-1)和人膀胱癌细胞株(T24)。用过表达载体阴性对照(oe-NC)、过表达FBXO6(oe-FBXO6)、过表达内质网氧化还原蛋白-1样蛋白(oe-ERO1L)及oe-FBXO6和oe-ERO1L慢病毒液(MOI=20)感染T24细胞。RT-qPCR检测细胞FBXO6和ERO1L mRNA表达;放线菌酮(CHX)蛋白合成抑制实验检测T24细胞ERO1L蛋白稳定性;免疫共沉淀(Co-IP)实验检测FBXO6对ERO1L泛素化调控;Western blot检测细胞FBXO6和ERO1L蛋白表达;CCK-8检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果与SV-HUC-1相比,T24细胞中FBXO6 mRNA(1.00±0.05比0.33±0.02)和蛋白表达(1.00±0.11比0.31±0.03)均降低(P均<0.05),而ERO1L mRNA(1.00±0.05比2.70±0.12)和蛋白表达(1.00±0.16比3.27±0.09)均升高(P均<0.05)。FBXO6可降低ERO1L蛋白稳定性并促进ERO1L泛素化。与空白对照和oe-NC相比,oe-FBXO6细胞中FBXO6 mRNA(1.00±0.06比3.74±0.18)和蛋白表达(1.00±0.10比2.25±0.06)均升高,ERO1L蛋白表达(0.99±0.08比0.21±0.03),细胞活力、克隆形成数[(78.00±3.00)比(41.67±2.52)个]、迁移[(150.67±5.03)比(91.67±5.51)个]和侵袭细胞数[(122.00±7.00)比(74.67±5.51)个]均降低(P均<0.05);与oe-NC相比,oe-ERO1L细胞中ERO1L蛋白表达(1.01±0.06比2.58±0.02)、细胞活力、克隆形成数[(78.00±3.00)比(121.67±7.64)个]、迁移[(150.67±5.03)比(230.33±12.01)个]和侵袭细胞数[(122.00±7.00)比(203.00±11.53)个]均升高(P均<0.05);与oe-FBXO6相比,oe-FBXO6+oe-ERO1L细胞中ERO1L蛋白表达(0.54±0.02比1.02±0.06),细胞活力、克隆形成数[(41.67±2.52)比(62.00±3.61)个]、迁移[(91.67±5.51)比(131.67±6.03)个]和侵袭细胞数[(74.67±5.51)比(102.67±7.51)个]均升高(P均<0.05)。结论FBXO6通过介导ERO1L泛素化降解抑制膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭。