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变形链球菌临床株F-ATPase亚基基因uncEBF在mRNA水平的表达 被引量:4
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作者 杨德琴 刘天佳 +3 位作者 亓庆国 付春华 庄姮 李颂 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期737-741,共5页
目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系。方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18株来自不同... 目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系。方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18株来自不同基因型和不同耐酸力变链菌的uncEBF基因表达水平进行评价,以SPSS11.0软件分析和比较mRNA表达的差异。结果:不同基因型及不同耐酸力菌株un-cEBF的mRNA表达水平不同(P<0.05),表现为A基因型uncEBF表达高于B基因型,高耐酸力菌株un-cEBF表达高于低耐酸力菌株。结论:变链菌不同基因型uncEBF基因的表达水平不同,表达水平高低与菌株的耐酸力相关。 展开更多
关键词 变形链球菌 f-atpase 半定量 RT-PCR 基因表达
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三疣梭子蟹F型ATP酶β亚基(F-ATPaseβ)基因的克隆、组织表达及在家系近交中的变化 被引量:4
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作者 王竹青 任宪云 +4 位作者 高保全 刘萍 张小辉 张杰 于旋 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2018年第1期97-106,共10页
采用RACE技术(c DNA末端快速扩增技术)克隆获得三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)F型ATP酶b亚基(F-ATPaseβ)基因,命名为pt F-ATPaseβ。该基因c DNA全长为1965 bp,5¢和3¢非编码区分别为571 bp和341 bp,开放阅读框为1053 bp,推测... 采用RACE技术(c DNA末端快速扩增技术)克隆获得三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)F型ATP酶b亚基(F-ATPaseβ)基因,命名为pt F-ATPaseβ。该基因c DNA全长为1965 bp,5¢和3¢非编码区分别为571 bp和341 bp,开放阅读框为1053 bp,推测编码350个氨基酸,预测分子量为37.9 k Da,理论等电点为4.86。pt F-ATPaseβ氨基酸序列含有F1-ATPaseβ标志性蛋白结构域、AAA结构域和ATP-synt-ab-C结构域。同源性及系统分析显示,pt F-ATPaseβ氨基酸序列与斑节对虾(Penaeus monodon)、凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)同源性高达89%。实时荧光定量PCR显示,pt F-ATPaseβ基因在肝胰腺、肌肉、心脏、鳃、胃、肠、精巢和卵巢中均有表达,其中,在肝胰腺和心脏中表达量最高,在肠中最少。随着近交系数的增加,各代pt F-ATPaseβ基因的表达量在肝胰腺和心脏中均下降且显著低于F_0代(P<0.05)。酶活检测结果显示,心脏中的ATP合酶活性从F6代开始出现下降且显著低于F_0代(P<0.05),但肝胰腺中ATP合酶活性无显著变化。本研究结果表明,近交造成了三疣梭子蟹pt F-ATPaseβ基因表达及ATP合酶活力的衰退。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 f-atpaseβ 基因克隆 表达分析 近交
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Construction of Recombinant Plasmid Containing S.Mutans F-ATPase β Subunit Gene
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作者 YU Dan-ni JIANG Li 《Chinese Journal of Biomedical Engineering(English Edition)》 2005年第4期169-175,共7页
objective: construct a homologous recombinant plasmid which was expected to be transformed into S.mutans Methods: a region at the 5’terminus of the S.mutans F-ATPase β subunit gene was amplified by PCR, the PCR prod... objective: construct a homologous recombinant plasmid which was expected to be transformed into S.mutans Methods: a region at the 5’terminus of the S.mutans F-ATPase β subunit gene was amplified by PCR, the PCR product was inserted into vector pVA891,yielding recombinant plasmid.Results: the DNA sequence of the recombinant plasmid was identified correct in whole by restriction endonuclease and DNA sequence techniques.Conclusion: the recombinant plasmid of S.mutans DNA was cloned in effect,it may assist in construction of homologues recombinant mutant. 展开更多
关键词 S。mutans f-atpase PLASMID
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变异链球菌F-ATPase亚基β基因多态性及表达研究 被引量:2
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作者 杨德琴 刘天佳 +3 位作者 肖晓蓉 亓庆国 付春华 刘建国 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期725-729,共5页
目的研究变异链球菌(Streptococcus mutans,简称变链菌)临床分离株耐酸因子F-AT- Pase亚基β结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异,探讨其与细菌耐酸力的关系。方法实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株,以特异引物从... 目的研究变异链球菌(Streptococcus mutans,简称变链菌)临床分离株耐酸因子F-AT- Pase亚基β结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异,探讨其与细菌耐酸力的关系。方法实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncD,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较;应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件,对20株不同基因型和不同耐酸力变链菌uncD基因的mRNA表达水平进行评价和比较。结果Alu I-RFLP产生A、B基因型,测序证实导致多态出现的基因变异不在uncD的功能区和催化结构域;这两种基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P<0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncD的检出高于低耐酸力菌株。不同耐酸力菌株uacD的mRNA表达水平不同(P<0.05),但A、B两基因型菌株uncD的mRNA表达差异没有统计学意义(P>0.05)。结论F-ATPase的β亚基基因具有明显的遗传多态性,基因型和mRNA表达水平的多态性与菌株的耐酸力有一定的关系,虽然β亚基基因功能区高度保守,但在酸耐受适应中,仍表现为F-ATPase较活跃上调的亚基基因。 展开更多
关键词 变异链球菌 f-atpase 耐酸性 基因多态性 半定量RT-PCR
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敲低F-ATPase促进变形链球菌感染人牙髓成纤维细胞成骨/成牙本质分化的研究 被引量:2
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作者 李亚 熊洁 《临床口腔医学杂志》 2021年第3期136-141,共6页
目的:研究敲低耐酸因子F-ATPase促进变形链球菌感染人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,HDPFs)成骨/成牙本质分化的作用。方法:培养HDPFs并采用免疫荧光染色、流式细胞术进行鉴定,而后分为对照组、感染组、感染+si-NC组、... 目的:研究敲低耐酸因子F-ATPase促进变形链球菌感染人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,HDPFs)成骨/成牙本质分化的作用。方法:培养HDPFs并采用免疫荧光染色、流式细胞术进行鉴定,而后分为对照组、感染组、感染+si-NC组、感染+si-F-ATPase组、感染+si-F-ATPase+NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3)激动剂(NIG)组。比较各组间白介素(IL)-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(Runx2)以及成骨诱导分化后茜素红染色OD540nm值、碱性磷酸酶(ALP)活力的差异。结果:感染组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均高于对照组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均低于对照组;感染+si-F-ATPase组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均低于感染组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均高于感染组;感染+si-F-ATPase+NIG组HDPFs中IL-1β、IL-18、TNF-α的含量,NLRP3、ASC、Cleaved caspase-1的表达量均高于感染+si-F-ATPase组,OCN、Runx2表达量及成骨诱导后的OD540nm水平、ALP活力均低于感染+si-F-ATPase组。结论:敲低F-ATPase能够促进变形链球菌感染HDPFs的成骨/成牙本质分化,抑制NLRP3炎症小体介导的炎症反应是可能的分子机制。 展开更多
关键词 龋病 变形链球菌 f-atpase 炎症反应 成骨分化 NLRP3炎症小体
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