FBXW7/MCM7信号轴介导肝癌细胞增殖的研究

目的 探讨FBXW7靶向调控MCM7表达对肝癌细胞增殖的影响。方法 采用免疫共沉淀法(CoIP)和免疫荧光染色法(IF),分析肝癌细胞系MHCC-97H中FBXW7与MCM7的互作关系;通过慢病毒感染过表达FBXW7和(或) MCM7,小干扰RNA技术下调FBXW7和(或) MCM7的表达;采用Western blot检测FBXW7对MCM7蛋白表达的影响,CCK-8实验检测肝癌细胞的增殖活性,EdU细胞增殖检测分析肝癌细胞的增殖能力,平板克隆实验分析肝癌细胞的集落形成能力。结果 在MHCC-97H细胞中,FBXW7与MCM7存在互作关系:过表达FBXW7抑制了MCM7的蛋白表达水平、并抑制了肝癌MHCC-97H细胞的增殖(P <0.05),在过表达FBXW7的基础上增加MCM7的表达后,细胞增殖能力提高(P <0.05);下调FBXW7后细胞中MCM7表达增加、细胞增殖能力增强(P <0.05),而下调FBXW7的同时干扰MCM7表达后,细胞增殖能力减弱(P <0.05)。结论 FBXW7能抑制肝癌细胞增殖,其机制与负向调节肝癌细胞中促癌蛋白MCM7的表达水平有关。

胃癌组织中F框/WD-40域蛋白7和CyclinE蛋白的表达

目的:研究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)和CyclinE蛋白在胃癌组织中的表达。方法:应用免疫组化SP法检测75例胃癌和25例癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白的表达。结果:胃癌、癌旁正常胃组织中FBXW7和CyclinE蛋白阳性表达率差异有统计学意义(χ2=10.606和7.692,P=0.001和0.006)。FBXW7蛋白的表达与胃癌的分化程度(χ2=7.440,P=0.006)、淋巴结转移(χ2=4.688,P=0.030)、TNM分期(χ2=4.601,P=0.032)有关;CyclinE蛋白的表达与胃癌的浸润深度(χ2=4.902,P=0.027)、淋巴结转移(χ2=4.601,P=0.032)、TNM分期(χ2=4.408,P=0.036)有关。胃癌组织中FBXW7与CyclinE蛋白的表达呈负关联(rP=-0.459,P<0.001)。结论:FBXW7和CyclinE可能在胃癌的发生发展中起重要作用。

转甲状腺素蛋白介导STAT4/miR-223-3p/FBXW7通路对高糖诱导的人视网膜内皮细胞新生血管生成的影响

目的分析转甲状腺素蛋白(TTR)介导信号转导和转录激活因子4(STAT4)/miR-223-3p/F-box WD重复蛋白7(FBXW7)通路对高糖(HG)诱导的人视网膜内皮细胞(hRECs)新生血管生成的影响。方法将hRECs分为对照组、HG组、HG+TTR组、HG+NC mimic组、HG+miR-223-3p mimic组和HG+TTR+miR-223-3p mimic组。生物信息学分析STAT4与miR-223-3p的靶向关系,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。ELISA检测细胞中TTR水平,RT-PCR检测miR-223-3p水平,CCK-8法检测细胞增殖,血管生成实验分析血管生成率,Western blot检测血管内皮生长因子(VEGF)、TTR、STAT4和FBXW7蛋白表达。结果与对照组相比,HG组hRECs中TTR水平升高(P<0.05)。培养24 h时,与HG组相比,HG+TTR组细胞活力明显下降(P<0.05)。与HG组血管生成率(38.12±4.91)%相比,HG+TTR组hRECs血管生成率[(19.46±2.12)%]明显较小(P<0.05)。与HG+NC mimic组相比,HG+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p表达上调,细胞活力增加(均为P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比,HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p表达下调,细胞活力下降(均为P<0.05)。与HG+NC mimic组血管生成率(40.11±4.10)%相比,HG+miR-223-3p mimic组hRECs血管生成率[(61.52±6.25)%]增多(P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比,HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs血管生成率[(42.24±4.33)%]减少(P<0.05),且与HG+NC mimic组比较差异无统计学意义(P>0.05)。生物信息学分析结果显示,STAT4与miR-223-3p启动子区域相互作用。与HG组相比,HG+TTR组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均降低,FBXW7和VEGF蛋白表达均升高(均为P<0.05);与HG+TTR组相比,HG+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均升高,FBXW7和VEGF蛋白表达均降低(均为P<0.05);与HG+miR-223-3p mimic组相比,HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、STAT4蛋白表达均降低,FBXW7和VEGF蛋白表达均升高(均为P<0.05);与HG+TTR组相比,HG+TTR+miR-223-3p mimic组hRECs中miR-223-3p、VEGF、STAT4和FBXW7蛋白表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论TTR可能通过调节STAT4/miR-223-3p/FBXW7通路抑制HG诱导的hRECs的血管生成。

结肠癌组织microRNA-223、FBXW7的表达及与其临床病理参数和预后的关系

目的研究结肠癌组织中microRNA-223(miR-223)、FBXW7的表达及其与临床病理参数和预后的关系。方法收集2015年1月—2017年4月钦州市第一人民医院146例经手术切除的结肠癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结肠癌组织中mi R-223、FBXW7表达。通过在线网站预测miR-223与FBXW7存在结合位点。Pearson法分析两者表达的相关性及其与临床病理参数的关系。根据结肠癌组织中miR-223、FBXW7表达的均值分为miR-223高表达组与miR-223低表达组,FBXW7高表达组与FBXW7低表达组。用Kaplan-Meier法绘制不同mi R-223、FBXW7表达结肠癌患者的生存曲线。多因素Cox回归分析结肠癌患者预后的影响因素。结果结肠癌组织miR-223 m RNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05),FBXW7mRNA相对表达量低于癌旁组织(P<0.05)。病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织mi R-223mRNA相对表达量高于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移(P<0.05);病理分期Ⅲ期、有淋巴结转移结肠癌组织FBXW7mRNA相对表达量低于Ⅰ、Ⅱ期和无淋巴结转移(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤大小、分化程度及有无侵犯浆膜结肠癌组织miR-223、FBXW7mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关系数分析显示,结肠癌组织miR-223表达与FBXW7表达呈负相关(r=-0.679,P<0.05)。术后随访8~60个月,随访期间死亡35例,总生存率为76.03%(111/146)。miR-223高表达组总生存率低于mi R-223低表达组(P<0.05)。FBXW7高表达组总生存率高于FBXW7低表达组(P<0.05)。单因素Cox回归分析结果显示,侵犯浆膜[HR=1.454(95%CI:1.086,1.947)]、病理分期Ⅲ期[HR=1.744(95%CI:1.070,2.840)]、淋巴结转移[HR=2.896(95%CI:1.114,7.531)]、miR-223≥4.76[HR=2.196(95%CI:1.085,4.445)]为结肠癌患者预后的危险因素(P<0.05),FBXW7≥1.23[HR=0.388(95%CI:0.172,0.875)]为保护因素(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,侵犯浆膜[HR=1.490(95%CI:1.154,1.924)]、病理分期Ⅲ期[HR=1.979(95%CI:1.132,3.460)]、淋巴结转移[HR=2.401(95%CI:1.015,5.677)]、miR-223≥4.76[HR=2.140(95%CI:1.063,4.309)]为结肠癌患者预后的危险因素(P<0.05),FBXW7≥1.23[HR=0.625(95%CI:0.475,0.823)]为保护因素(P<0.05)。结论结肠癌组织mi R-223高表达、FBXW7低表达与结肠癌患者病理分期、淋巴结转移及预后有关。

O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶、细胞周期相关蛋白1、F框/WD-40域蛋白7在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义

目的探讨O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、细胞周期相关蛋白1(CAPRIN1)、F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)在脑胶质瘤组织中的表达情况及临床意义。方法选择78例脑胶质瘤患者和20例因外伤或脑出血行颅内减压治疗的患者,分别作为观察组和对照组,分别收集两组患者的脑胶质瘤组织和正常脑组织。采用免疫组织化学染色法检测两组患者中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况,比较不同临床特征脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT、CAPRIN1、FBXW7蛋白的表达情况。结果观察组患者的MGMT和CAPRIN1蛋白阳性表达率分别为52.56%和74.36%,分别明显高于对照组的5.00%和30.00%,差异均有统计学意义(P﹤0.01);观察组患者的FBXW7蛋白阳性表达率为28.21%,明显低于对照组的85.00%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。死亡脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中MGMT蛋白的阳性表达率为86.67%,明显高于生存患者的44.44%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中CAPRIN1蛋白的阳性表达率为89.19%,明显高于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的60.98%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。病理分级为Ⅲ~Ⅳ级脑胶质瘤患者脑胶质瘤组织中FBXW7蛋白的阳性表达率为10.81%,明显低于病理分级为Ⅰ~Ⅱ级患者的43.90%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论脑胶质瘤组织中MGMT和CAPRIN1蛋白表达上调,而FBXW7蛋白表达下调,其中MGMT蛋白可能与患者预后有关,而CAPRIN1和FBXW7蛋白与病理分级有关。

泛素连接酶FBW7的肿瘤抑制作用和机制

泛素-蛋白酶体系统是一个主要的蛋白质降解调节通路,在细胞分裂过程中发挥着重要作用,其成员在肿瘤中频繁存在着表达异常现象.FBW7又名AGO、hCDC4、FBXW7和SEL-10,是一种拥有7串联WD40重复结构域的F-box蛋白,可作为SCF型泛素连接酶(E3)复合物的底物识别亚基发挥作用.FBW7是一种肿瘤抑制蛋白,其基因在多种肿瘤包括直肠癌、胃癌、卵巢癌和白血病中存在着基因突变或缺失.FBW7可直接结合和靶向作用多种转录激活因子或原癌基因,如周期蛋白E、c-Myc、c-Jun、Notch、MCL1、KLF5和mTOR等并对其进行泛素化修饰和随后的26S蛋白酶体降解.肿瘤抑制蛋白FBW7的研究对肿瘤发生机制的理解具有重要意义,同时也为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点.本文综述了FBW7的特征、肿瘤抑制作用及机制.

UO-126对HeLa细胞增殖及对FBW7表达的影响

目的:观察UO-126对人类宫颈癌细胞株HeLa细胞增殖及对F-盒和含蛋白7的WD重复结构域FBW7表达的影响。方法:采用MTT法观察不同浓度的UO-126对HeLa细胞增殖的影响;免疫荧光法检测FBW7在HeLa细胞中的定位和表达;RT-PCR、Western blot检测FBW7 mRNA及蛋白在UO-126阻断丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nases,MAPK)信号通路前后的表达情况。结果:MTT结果显示各浓度UO-126具有抑制HeLa细胞增殖的作用,且具有剂量依赖性和时间依赖性(P<0.05)。免疫荧光检测显示UO-126处理HeLa细胞后FBW7阳性表达增强。RT-PCR及West-ern blot结果显示,UO-126作用后HeLa细胞FBW7 mRNA及蛋白表达水平较未处理HeLa细胞明显增高(P<0.05)。结论:MAPK信号通路阻断剂UO-126抑制HeLa细胞增殖,FBW7位于MAPK信号通路的下游。

下调miR-27a表达对三阴乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的·探讨下调mi R-27a表达对三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-453增殖、迁移和侵袭的影响。方法·采用实时荧光定量PCR方法检测68例TNBC患者癌组织及癌旁组织标本的miR-27a表达,分析miR-27a表达与患者临床特征的关系;并检测TNBC细胞系MDA-MB-453及正常乳腺上皮细胞MCF-10A中miR-27a表达的差异。在MDA-MB-453细胞中转染miR-27a抑制物(miR-27a inhibitor),采用CCK-8实验、Transwell小室法检测miR-27a inhibitor转染组(mi R-27a inhibitor组)与mi R-27a阴性对照片段转染组(NC组)TNBC细胞增殖、迁移和侵袭能力的差异。蛋白质印迹法检测转染mi R-27a抑制物对MDA-MB-453细胞泛素连接酶FBW7(F-box and WD repeat domain-containing 7)及Egl 9同源物2(Egl nine homolog 2,EGLN2)蛋白表达的影响。结果·TNBC组织中mi R-27a表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);并且mi R-27a表达与患者组织学分级、临床分期、淋巴结转移以及肿瘤最大直径相关(均P<0.05),与患者年龄、是否绝经以及细胞增殖核抗原Ki-67指数无明显相关性。与MCF-10A细胞相比,MDA-MB-453细胞系中mi R-27a表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。转染mi R-27a抑制物后,MDA-MB-453细胞增殖与NC组相比明显减弱(P<0.05)。在细胞迁移和侵袭实验中,mi R-27a inhibitor组穿膜细胞均少于NC组(均P<0.05)。下调mi R-27a表达后mi R-27a inhibitor组较NC组FBW7蛋白表达显著升高,而EGLN2蛋白表达明显下降(均P<0.05)。结论·mi R-27a在TNBC组织及细胞株中表达升高;下调mi R-27a表达可以抑制TNBC细胞MDA-MB-453的增殖、迁移和侵袭能力,这可能与其下调后FBW7蛋白表达增加、EGLN2蛋白表达减少有关。

FBXW7在糖尿病心肌病中的表达

目的:检测含F框/WD重复域蛋白7(FBXW7)在1型糖尿病大鼠心肌中的表达,探究其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法:实验将大鼠分为非糖尿病组(ND组)及糖尿病4、8和12周模型组(DM组),采用链脲佐菌素(60 mg/kg)一次性腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型。HE染色法观察心肌病理结构变化,Western blot和免疫组化法检测心肌中FBXW7蛋白的表达变化。结果:显微镜下可见糖尿病组大鼠心肌局灶性心肌细胞变性、坏死。Western blot和免疫组化结果均显示,4周、8周及12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对于ND组显著增加(P <0. 01),但是相比于4周和8周DM组,12周DM组大鼠心肌中的FBXW7表达相对下降(P <0. 05)。结论:随着糖尿病病程的延长,FBXW7在糖尿病心肌病大鼠心肌组织中的表达呈现先升高后降低的趋势,提示其在糖尿病心肌病发生发展中发挥了一定的作用。

FBW7通过促进NOX1降解抑制ox-LDL诱导的颗粒细胞凋亡

目的:探讨含F框及WD重复结构域蛋白7(F-box and WD repeat domain containing protein 7,FBW7)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipopretion,ox-LDL)诱导的颗粒细胞(granulosa cells,GCs)损伤的影响,并分析其机制。方法:收集从不同肥胖程度育龄期女性分离的GCs、从高脂饮食(high-fatty diet,HFD)喂养大鼠分离的GCs及ox-LDL处理的大鼠GCs,用Western blot法检测FBW7的表达。用编码FBW7的腺病毒载体(Ad-FBW7)感染大鼠GCs后,再用ox-LDL(80 mg/L)处理细胞48 h,分别用CCK-8法、Annexin V/PI染色法、光泽精化学发光法和Western blot法检测细胞活力、细胞凋亡、NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)活性和NOX关键亚基的蛋白表达。用环己酰亚胺(cycloheximide,CHX)追踪法评估过表达FBW7对NOX1降解的影响。结果:在肥胖育龄期女性的GCs、HFD喂养大鼠的GCs和ox-LDL处理的GCs中FBW7低表达(P<0.05)。过表达FBW7能抑制ox-LDL诱导的GCs损伤、NOX活性和NOX1表达(P<0.05)。CHX追踪法实验结果显示,在ox-LDL存在的条件下,过表达FBW7能加速NOX1的降解(P<0.05)。结论:过表达FBW7可通过加快NOX1降解而减弱NOX活性,从而减轻ox-LDL导致的GCs损伤。

微小RNA-27a在子宫颈癌中的表达变化及作用机制

目的探讨微小RNA(miR)-27a靶向调控F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)对子宫颈癌细胞的增殖、凋亡及侵袭的影响。方法30例宫颈癌组织和癌旁组织、30例正常宫颈组织新鲜标本用于实验。Real-time PCR检测宫颈癌、癌旁组织、正常宫颈组织以及宫颈癌细胞(SiHa、Caski、He La、HCC94)、子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8中miR-27a的表达。应用脂质体转染法将miR-27a抑制剂(inhibitor)及其阴性对照转染至SiHa细胞,CCK-8法、流式细胞术、Transwell法分别检测miR-27a对SiHa细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率和侵袭能力的影响。生物学信息法预测miR-27a的靶向基因,双荧光素酶报告基因实验结合Western bloting验证miR-27a对FBXW7的靶向调控作用。结果与癌旁组织和正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中miR-27a高表达(P<0.05);与子宫颈鳞状上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌细胞SiHa、Caski、He La、HCC94中miR-27a高表达(P<0.05)。抑制SiHa细胞中miR-27a的表达,能够明显降低细胞的增殖活性(P<0.05),提高G0/G1期细胞比例(P<0.05),降低S期和G2/M期细胞比例(P<0.05),提高细胞凋亡率(P<0.05),抑制细胞的侵袭能力(P<0.05)。生物学信息法预测FBXW7可能是miR-27a的靶向调控基因;双荧光素酶报告基因实验显示,miR-27a可以与FBXW7基因的3’UTR区特异性结合(P<0.05),并负调控FBXW7蛋白的表达(P<0.05)。结论MiR-27a在宫颈癌的发生发展中起着癌基因的作用,抑制miR-27a表达能够明显抑制宫颈癌细胞的恶性生物学行为,其机制可能与靶向调控FBXW7的表达有关。

BRWD3对乳腺癌淋巴结转移的影响

目的探讨溴结构域和WD重复蛋白3(BRWD3)对乳腺癌淋巴结转移的影响及其作用机制。方法采用体外细胞侵袭实验探究BRWD3对乳腺癌细胞系侵袭能力的调控作用。采用裸鼠淋巴结转移和肺转移模型探究BRWD3对裸鼠乳腺癌淋巴结转移和肺转移的调控作用。通过cBioPortal数据库检索BRWD3共表达基因,进行生物功能及通路的聚类分析,构建BRWD3分子调控网络,并用Western blotting进行部分验证。采用公共数据库数据和KMPLOT平台分析BRWD3在乳腺癌中的表达情况及其与乳腺癌预后的关系。结果体外实验结果显示,敲除BRWD3促进了乳腺癌细胞系的侵袭(P<0.01)和迁移,但未促进乳腺癌细胞增殖。裸鼠淋巴结转移模型显示,敲除BRWD3能够明显促进乳腺癌淋巴结转移;肺转移模型显示,BRWD3未影响乳腺癌的肺转移能力。GO功能分析显示,BRWD3共表达基因主要富集于基因表达调控、DNA损伤修复、染色体的组织与修饰、蛋白质泛素化等生物学功能。KEGG富集分析显示,BRWD3共表达基因主要参与蛋白质泛素化、氧化磷酸化、MAPK等信号通路。Western blotting检测证实,敲除BRWD3促进了ERK1/2的磷酸化。BRWD3在发生淋巴结转移乳腺癌患者中的表达量明显低于未发生淋巴结转移的患者。KMPLOT分析结果显示,BRWD3低表达患者的预后较差,其生存期明显短于BRWD3高表达患者。结论 BRWD3能够调控乳腺癌的侵袭和体内淋巴结转移,BRWD3低表达患者预后较差。BRWD3可能亦具有调控蛋白质泛素化、氧化磷酸化、MAPK通路等功能。该发现为乳腺癌淋巴结转移相关分子标志物的研究和应用提供了新的理论基础。

CHD4、FBXW7和SPOP基因在子宫内膜癌中表达的研究现状

近年来,子宫内膜癌在国内的发病率明显升高,导致该类恶性肿瘤发生、发展的遗传因素很多。色素域解旋酶DNA结合蛋白4(CHD4)、F框/WD40域蛋白7(FBXW7)和SPOP基因是最新发现的三个遗传驱动基因,它们在人类细胞周期的进展及细胞的生长、分化中起着重要的作用,可引起恶性肿瘤的发生、发展及变化,使不良预后增加。该文就联系这三个基因各自的结构与作用机制,及其在子宫内膜癌中的表达现状进行综述。

F框／WD-40域蛋白7在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的检测F框／WD-40域蛋白7（FBXW7）在食管鳞状细胞癌（简称食管鳞癌）组织中的表达及临床意义，初步探讨其与患者临床病理特征和预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测FBXW7蛋白在90例食管鳞癌和20例相应的癌旁正常组织及40例食管上皮内瘤变组织中的表达情况，采用Western blot法及半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中FBXW7蛋白和mRNA表达水平，分析FBXW7表达与食管鳞癌患者临床病理特征及预后的关系。结果在食管鳞癌组织、癌旁正常组织、食管低级别上皮内瘤变组织和高级别上皮内瘤变组织中，FBXW7蛋白的阳性表达率分别为40．0％（36／90）、85．0％（17／20）、77．3％（17／22）和33．3％（6／18），差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7蛋白表达水平分别为0．283±0．055和0．657±0．091，差异有统计学意义（P〈0．001）。40例食管鳞癌组织和癌旁正常组织中，FBXW7 mRNA相对表达水平分别为0．863±0．962和1．813±0．512，差异有统计学意义（P〈0．05）。单因素分析显示，FBXW7蛋白表达与肿瘤TNM分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关（均P〈0．05）。Cox多因素分析显示，仅淋巴结转移为食管鳞癌患者的独立预后因素（P〈0．05）。90例患者中，FBXW7蛋白阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为67．6％和39．3％，差异有统计学意义（P=0．01）。结论FBXW7mRNA及其蛋白在食管鳞癌组织和食管高级别上皮内瘤变组织中的表达显著减低，且其低表达与食管鳞癌患者的不良预后密切相关。作为一种肿瘤抑制基因，FBXW7可能对食管鳞癌的发生、发展和转移起重要作用，有可能成为反映食管鳞癌患者病情严重程度及判断其预后的重要分子生物学标志物。

口腔鳞状细胞癌患者预后相关基因标志物的生物信息学分析

目的通过生物信息分析方法筛选口腔鳞状细胞癌与癌旁组织之间的差异表达基因,初步确定潜在生物标志物。方法从基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中下载口腔鳞状细胞癌相关芯片数据集GSE23558、GSE37991、GSE30784,利用GEO在线分析工具筛选差异表达基因,并对其进行基因本体、京都基因与基因组百科全书分析。利用STRING在线数据库,构建差异基因蛋白互作(protein⁃protein interaction,PPI)网络,并通过Cytoscape筛选关键基因。进而使用Kaplan Meier在线软件对差异表达基因进行预后分析,并使用GEPIA(http://gepia.cancer⁃pku.cn/)验证其表达情况。结果共筛选出212个差异表达基因,进一步分析发现16个核心基因,其中与预后相关的核心基因包括:极光激酶A(aurora kinase A,AURKA)、极光激酶B(aurora kinase B,AURKB)、细胞凋亡抑制因子5(baculoviral IAP repeat containing 5,BIRC5)、细胞分裂周期蛋白6(cell division cycle 6,CDC6)、E2F转录因子7(E2F transcription factor 7,E2F7)、泛素样含PHD和环指域蛋白1(ubiquitin⁃like with PHD and ring finger domains 1,UHRF1),这些关键基因与癌旁组织相比在口腔鳞状细胞癌组织呈高表达并且患者生存时间均较短,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论AURKA、AURKB、BIRC5、CDC6、E2F7和UHRF1可作为口腔鳞状细胞癌患者预后潜在的标志物。

稻瘟菌WD重复功能域中SSR的变异及其对蛋白结构的影响

含WD重复功能域的蛋白能够参与信号传导、转录调控、RNA剪切、细胞的凋亡等多种功能,在病原菌与寄主植物蛋白互作的过程中扮演着重要的角色。本研究分析了稻瘟病菌基因组中94个WD功能域基因编码区和调控区中SSR的组成、分布,并检测了7个蛋白编码区中SSR的变异及其对蛋白二级结构的影响。结果表明,WD功能域基因的编码区和调控区中都含有大量的SSR,但是SSR在这些基因的外显子区、内含子区、5'-UTR和3'-UTR区中SSR的组成和分布均不相同;编码区中三碱基和六碱基SSR分布较多,这些SSR基序大都表现为GC含量较高和其所编码的亲水性氨基酸出现的频率远远高于疏水性氨基酸的特点。且检测的7个WD功能域基因的编码区中的SSR位点均具有丰富的多态性,通过Antheprot(DPM)软件预测发现:SSR的变异对蛋白的二级结构有一定影响。这暗示着SSR的变异对致病相关基因的变异起着十分重要的作用。

FBXW7和SRC-3在胃癌中的表达及临床意义

目的研究F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)和类固醇受体辅助活化因子3(SRC-3)在胃癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学法检测FBXW7和SRC-3在胃癌及正常黏膜组织中的表达。结果 FBXW7在胃癌和正常黏膜组织中的表达率分别为46.7%和90.0%,二者差异有统计学意义(P<0.01),且与胃癌的分化程度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);SRC-3在胃癌和正常黏膜组织中的表达率分别为48.3%和10.0%,二者差异有统计学意义(P<0.01),且与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05);FBXW7与SRC-3之间存在着负相关关系(r=-0.370,P=0.004)。结论 FBXW7和SRC-3有可能成为胃癌早期诊断、判断预后的新指标及治疗靶点。

新疆维吾尔族人群FBXW7和SREBPs基因多态性与冠心病的相关性研究

目的探讨F框/WD40域蛋白7(F-box and WD-40domain protein7,FBXW7)和胆固醇调节元件结合蛋白(sterol regulatory element binding proteins,SREBPs)基因多态性与新疆地区维吾尔族人群冠心病的相关性。方法 360例维吾尔族冠心病患者(冠心病组)和373例维吾尔族健康受试者(对照组),2组采用改良的多重高温连接酶检测反应基因分型技术分析FBXW7、SREBP-1和SREBP-2基因多态性位点,检测2组血压和血生化指标,比较2组基因频率分布情况,并采用多因素logistic回归分析冠心病的独立危险因素。结果冠心病组吸烟、饮酒比率,合并高血压、糖尿病、高脂血症发生率,空腹血糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平均高于对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇水平低于对照组(P<0.05);2组SREBP-1基因rs9902941位点基因型分布和隐性模型(TT/CT+CC)分布、SREBP-2基因rs7288536位点基因型分布及显性模型(TT/CT+CC)和相加模型(CT/TT+CC)分布、FBXW7基因rs10033601位点基因型分布和隐性模型(GG/AG+AA)分布比较差异均有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归校正性别、年龄、吸烟、饮酒、血压、血糖及血脂等影响因素后,SREBP-1基因rs9902941位点隐性模型、FBXW7基因rs10033601位点隐性模型及SREBP-2基因rs7288536位点相加模型为冠心病的独立危险因素(OR=1.900,95%CI:1.041~3.467,P=0.036;OR=1.670,95%CI:1.054~2.645,P=0.029;OR=1.578,95%CI:1.133~2.197,P=0.007)。结论在新疆维吾尔族人群中,FBXW7基因rs10033601多态性、SREBP-1基因rs9902941多态性和SREBP-2基因rs7288536多态性与冠心病发生具有相关性。

miR-10a通过FBXW7-ZEB2轴调控非小细胞肺癌肿瘤化疗耐药的动物实验研究

目的:通过动物实验,具体探讨微小RNA(mi R-10a)通过含F-框WD重复域蛋白7(FBXW7)-E盒锌指结合蛋白2(ZEB2)轴调控非小细胞肺癌的肿瘤化疗耐药作用。方法:非小细胞肺癌模型小鼠(n=42)随机平分为三组-模型组、mi R-10a组与环磷酰胺组,模型组给予生理盐水0.2 m L腹腔注射,环磷酰胺组给予环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,mi R-10a组给hsa-miR-10a mimics15 mg/kg联合环磷酰胺20 mg/kg腹腔注射,1次/d,持续给药14 d。结果:mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第7 d与第14 d的肿瘤体积低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的瘤体质量低于模型组,抑瘤率高于模型组,mi R-10a组与环磷酰胺组对比差异也有统计学意义(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的肿瘤细胞凋亡指数高于模型组,mi R-10a组高于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的血清FBXW7、ZEB2含量低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。mi R-10a组与环磷酰胺组治疗第14 d与第28 d的FBXW7、ZEB2 m RNA与蛋白相对表达水平低于模型组,mi R-10a组低于环磷酰胺组(P<0.05)。结论:过表达mi R-10a能抑制非小细胞肺癌小鼠的FBXW7-ZEB2轴的激活,抑制血清FBXW7、ZEB2的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡,改善肿瘤化疗耐药性,促进缩小肿瘤体积。