F1-ATPase转动马达的随机动力学研究

通过建立物理模型研究了马达F1-ATPase转动的过程,得到理想条件下马达F1-ATPase转动的角速度随ATP浓度、摩擦系数的变化规律.同时,在热涨落环境下,计算了马达F1-ATPase向前和向后转动的概率之比,修正了理想条件下马达的转动模型,得到与实验吻合的结果.

利用F_0F_1-ATPase分子马达生物传感器检测食品中的副溶血性弧菌

利用载色体上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器对副溶血性弧菌检测快速检测。在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-toxR探针,将待测副溶血性弧菌标准菌株和阴性对照分别与生物传感器结合后,比较其催化ATP合成30min后的ATP产生量,可以对副溶血性弧菌的DNA进行检测。ATP合成的多寡可以通过环境中H+的量进行测量,而H+的多寡通过F-DHPE所体现的荧光强度大小来获得。结果表明,chro toxR的质量浓度在0.156mg/mL,副溶血性弧菌DNA质量浓度在40ng/mL时为最适检出条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及聚合酶链式反应检测方法对照,具有良好的符合性。

利用F_0F_1-ATPase分子马达技术检测志贺氏菌

利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体,合成生物素化宋内氏志贺氏菌IpaH探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-IpaH探针,将待测宋内氏志贺氏菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成10 min后的ATP产生量,进而对宋内氏志贺氏菌DNA进行检测。ATP合成的量可以通过luciferase-luciferin检测试剂所体现的荧光强度大小标定。结果表明,chroIpaH(连接在载色体chro上的IpaH探针)的浓度在0.031 mg/mL,宋内氏志贺氏菌DNA浓度在50 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。

F_0F_1-ATPase分子马达技术对单核细胞增生李斯特菌检测的研究

利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中快速检测方法。首先从嗜热菌中提取载色体后,标记荧光探针F-DHPE,合成生物素化单增李氏菌prfA探针,在已标记F-DHPE的载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-prfA探针,将待测单核细胞增生李斯特菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,通过环境H+量测定ATP产生量,进而对单核细胞增生李斯特菌DNA进行检测。结果表明,chroprfA(连接在载色体chro上的prfA探针)的浓度在0.052mg/mL,单核细胞增生李斯特菌DNA浓度在40ng/mL为最适检测条件。通过传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。

F_0F_1-ATPase分子马达技术对阪崎肠杆菌检测的研究

本研究建立了应用F0F1-ATPase分子马达生物传感器快速检测阪崎肠杆菌的方法。自嗜热菌中提取载色体后,合成针对阪崎肠杆菌的生物素化ITS探针,在载色体ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ITS探针,将待测阪崎肠杆菌标准菌株和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP产生量,进而对阪崎肠杆菌DNA进行检测。结果表明,chro ITS探针浓度0.019mg/mL,阪崎肠杆菌DNA浓度40ng/mL为最适检测条件。通过与传统检测方法及PCR检测方法对照,本方法具有良好的检测符合性。

利用分子马达技术检测霍乱弧菌

利用载色体chromatophore上的F0F1-ATPase分子马达生物传感器,建立了应用在食品检测中的快速检测方法。首先在ATP合酶的ε亚基上连接ε亚基抗体-生物素-链霉亲和素-生物素-ompW探针,将待测霍乱弧菌和阴性对照分别与此生物传感器结合,比较其催化ATP合成30 min后的ATP产生量,进而对霍乱弧菌的DNA进行检测。ATP合成的量可以通过环境H+的量进行测定,H+的量通过F-DHPE所体现的荧光强度大小标定。结果表明,Chro ompW的浓度在0.078 mg/mL,单核增生李斯特菌DNA浓度在40 ng/mL为最适检测条件。通过与实际检测样品的传统检测方法及PCR检测方法对照,具有良好的检测符合性。