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Emergence of truncated PB1-F2 protein of H3N2 influenza virus during its epidemic period in Jiangsu Province, China
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作者 Wei Pingmin Luo Pengfei +6 位作者 Li wei Zi Hairong Qi Xian Deng Fei Qin Yuanfang Wu Bin Tang Fenyang 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2014年第8期1487-1492,共6页
Background PB1-F2 protein has been proven to increase the pathogenicity of influenza A virus (IAV) strains in primary infection and in secondary bacterial infection. It can also regulate the activity of viral polyme... Background PB1-F2 protein has been proven to increase the pathogenicity of influenza A virus (IAV) strains in primary infection and in secondary bacterial infection. It can also regulate the activity of viral polymerase. However, it was shown in another retrospective study that a portion of IAVs do not express full-length PB1-F2 protein during virus development; different kinds of stop codons cause exits in the open reading frames and form PB1-F2 gene products with the corresponding genotypes. Truncated PB1-F2 in human H3N2 IAVs has long been detected in North America but its evolution in China is still unclear. Methods Influenza-like illnesses (ILls) from the whole of Jiangsu Province were collected and inspected to determine the type and subtype of the viruses. A portion of isolates collected in the epidemic period were selected as samples for later whole-genome sequencing, and the exact sequences were determined and analyzed. Results H3N2 influenza virus was one of the epidemical strains which had been prevalent during 2009-2010, in Jiangsu. Five H3N2 isolates with truncated PB1-F2 protein (25aa) were detected in influenza samples from Nanjing and Xuzhou, while seven similar H3N2 isolates were also reported in Niigata, Japan. Conclusion This emergence indicates the possibility that there has been transmission of the H3N2 virus between the two countries. 展开更多
关键词 H3N2 subtype influenza A virus PB1-f2 protein TRUNCATION
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新型甲型H7N9流感病毒PB1-F2蛋白基因进化和变异分析 被引量:5
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作者 资海荣 李伟 +4 位作者 周丹 李婕 宣杨 郭艳 卫平民 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2014年第4期416-421,共6页
目的:对新型甲型H7N9流感病毒PB1-F2蛋白基因的进化和变异进行分析,为进一步研究致病性禽流感的致病机制和毒力因子奠定基础。方法:从IRD数据库中下载2013年2月19日至2013年10月31日的H7N9流感病毒PBl基因序列63条,运用MEGA5.2.1... 目的:对新型甲型H7N9流感病毒PB1-F2蛋白基因的进化和变异进行分析,为进一步研究致病性禽流感的致病机制和毒力因子奠定基础。方法:从IRD数据库中下载2013年2月19日至2013年10月31日的H7N9流感病毒PBl基因序列63条,运用MEGA5.2.1软件进行序列分析,用邻接法构建基因进化树;通过氨基酸序列分析PB1基因95~367片段的PB1-F2蛋白氨基酸位点变化;应用Excel表格对氨基酸构成进行计算;运用Predictive Analytics Software(PASW)18.0软件对氨基酸构成改变进行统计分析。结果:63株甲型H7N9毒株中有17株毒株的PB1-F2蛋白在其氨基酸序列第25位后发生断裂。新型甲型H7N9的进化主要分为两个系别,系别I主要由完整型PB1-F2蛋白毒株构成,系别Ⅱ主要由52aa截短型PB1-F2蛋白毒株构成。完整型PB1-F2蛋白与截短型PB1-F2蛋白各类氨基酸构成存在差异。结论:H7N9流感毒株中存在着截短型PB1-F2蛋白毒株,并且H7N9流感病毒毒株PB1-F2蛋白断裂位点均在25位氨基酸后,这将成为H7N9流感毒株进化过程中重要的特征。完整型PB1-F2蛋白与截短型PB1-F2蛋白氨基酸构成的差异对于甲型H7N9流感病毒致病性的影响有待进一步研究。 展开更多
关键词 甲型H7N9流感病毒 截短型PB1-f2 PB1-f2蛋白的变异 氨基酸构成
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GST pull-down验证流感病毒PB1-F2蛋白与热休克蛋白40的相互作用 被引量:2
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作者 侯佩莉 关振宏 +2 位作者 张茂林 李影 段铭 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期202-207,共6页
为体外验证流感病毒PB1-F2与热休克蛋白Hsp40相互作用,通过两个方向的GST pull-down试验验证PB1-F2与Hsp40的相互作用。构建GST-多肽融合蛋白原核表达载体pGEX-6P-1-PB1-F2和pGEX-6P-1-Hsp40,并在大肠杆菌(E.co-li)BL21中诱导表达;构建... 为体外验证流感病毒PB1-F2与热休克蛋白Hsp40相互作用,通过两个方向的GST pull-down试验验证PB1-F2与Hsp40的相互作用。构建GST-多肽融合蛋白原核表达载体pGEX-6P-1-PB1-F2和pGEX-6P-1-Hsp40,并在大肠杆菌(E.co-li)BL21中诱导表达;构建真核表达载体pLEGFP-Hsp40及pCAGGS-PB1-F2,并分别转染293T细胞使其表达Hsp40及PB1-F2融合蛋白,然后进行GST pull-down试验验证二者的相互作用。成功地构建了两种蛋白的各种表达载体,经表达、纯化获得了可溶性的GST-多肽融合蛋白,GST pull-down试验正反两方向都证实了PB1-F2与Hsp40的相互作用,初步证实了流感病毒PB1-F2在体外能与Hsp40发生相互作用。 展开更多
关键词 GST pull-down 流感病毒PB1-f2蛋白 热休克蛋白40 蛋白质相互作用
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大肠杆菌Rosetta(DE3)表达的呼吸道合胞病毒F2蛋白免疫学特性(英文) 被引量:1
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作者 井申荣 曾韦锟 +2 位作者 黄芬 王钰宁 岳婷婷 《昆明理工大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2012年第2期54-60,共7页
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体,目前还没有安全有效的疫苗问世,因此有必要采取不同的策略加快研发预防性疫苗.本研究将RSV融合蛋白(F)的F2肽段基因插入到载体pGEX-6P-1谷... 呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)是引起5岁以下儿童下呼吸道感染的主要病原体,目前还没有安全有效的疫苗问世,因此有必要采取不同的策略加快研发预防性疫苗.本研究将RSV融合蛋白(F)的F2肽段基因插入到载体pGEX-6P-1谷胱甘肽-S-还原酶(GST)融合标签下游,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot鉴定表达产物GST-F2,融合蛋白纯化后免疫昆明种小鼠三次,ELISA测定小鼠血清抗体.结果表明免疫后的小鼠可以产生高滴度IgG、IgA(p<0.05)抗体,IgG1/IgG2a比值显著高于对照组,但在小鼠呼吸道粘灌洗液中没有产生sIgA(p>0.01)抗体.因此F2蛋白具有良好的免疫原性,引起Th2型免疫应答,是RSV疫苗的候选蛋白. 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 免疫学特性 f2蛋白
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流感病毒PB1-F2蛋白通过激活ERK1/2激酶刺激AP-1转录因子的活化 被引量:1
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作者 金新 于洪敏 +3 位作者 张茂林 段铭 李影 关振宏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期681-685,共5页
为探索A型流感病毒PB1-F2蛋白对转录因子AP-1信号通路的调控机制,本研究通过荧光素酶报告基因试验检测PB1-F2蛋白的表达对AP-1转录活性的调控,利用荧光定量PCR和免疫印迹方法检测PB1-F2对c-Fos/AP-1的m RNA转录和ERK1/2磷酸化水平的影响... 为探索A型流感病毒PB1-F2蛋白对转录因子AP-1信号通路的调控机制,本研究通过荧光素酶报告基因试验检测PB1-F2蛋白的表达对AP-1转录活性的调控,利用荧光定量PCR和免疫印迹方法检测PB1-F2对c-Fos/AP-1的m RNA转录和ERK1/2磷酸化水平的影响,并以ERK通路特异性抑制剂U0126抑制ERK1/2的活性后,以验证PB1-F2调控AP-1是否通过ERK1/2激酶介导。结果显示:A549和293T细胞中表达PB1-F2蛋白后,AP-1的转录活性均显著升高,并且c-Fos/AP-1的m RNA转录水平呈现显著上调;过表达PB1-F2蛋白同样能够显著上调磷酸化ERK1/2水平;以U0126抑制ERK1/2激活后,PB1-F2上调AP-1转录活性的作用显著下降。本研究表明,流感病毒PB1-F2蛋白能够通过激活ERK1/2激酶诱导AP-1转录因子的活化,为进一步研究PB1-F2蛋白参与调控炎症反应的机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 A型流感病毒 PB1-f2蛋白 ERK1/2信号通路 AP-1转录因子
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酵母双杂交筛选人白细胞文库中与A型流感病毒PB1-F2相互作用的蛋白 被引量:3
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作者 崔雨明 侯佩莉 +3 位作者 张茂林 李鸿梅 黄飞 关振宏 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第3期1-5,共5页
利用酵母双杂交技术筛选白细胞文库中与A型流感病毒PB1-F2相互作用的宿主蛋白,为研究PB1-F2蛋白的功能提供依据。构建pGBKT7-PB1-F2诱饵重组载体,在证实诱饵蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛选人白细胞文库中与PB1-F2... 利用酵母双杂交技术筛选白细胞文库中与A型流感病毒PB1-F2相互作用的宿主蛋白,为研究PB1-F2蛋白的功能提供依据。构建pGBKT7-PB1-F2诱饵重组载体,在证实诱饵蛋白不具有自激活作用的前提下,以酵母双杂交系统筛选人白细胞文库中与PB1-F2相互作用的细胞蛋白。对阳性克隆进行测序和生物信息学分析,并在酵母细胞内验证蛋白的相互作用。Western blot结果表明,酵母表达载体pGBKT7-PB1-F2在酵母中成功表达PB1-F2融合蛋白。酵母双杂交筛选并验证,获得了8个与流感病毒PB1-F2蛋白相互作用的宿主蛋白。本研究有助于在分子水平上探索PB1-F2蛋白的新功能,为揭示流感病毒的致病机理奠定基础。 展开更多
关键词 酵母双杂交 A型流感病毒 PB1-f2蛋白 蛋白质相互作用
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A型流感病毒PB1-F2蛋白的结构与功能研究进展 被引量:1
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作者 王清艳 王靖飞 《动物医学进展》 CSCD 2007年第11期82-84,共3页
PB1-F2蛋白是一种流感病毒蛋白,蛋白通过诱导巨噬细胞凋亡降低宿主的免疫反应。PB1-F2蛋白介导的细胞杀伤作用通过阻碍专职抗原递呈细胞对后天免疫的调节而增加继发细菌感染的可能性,从而使病毒的致病性增加。现就PB1-F2蛋白结构与功能... PB1-F2蛋白是一种流感病毒蛋白,蛋白通过诱导巨噬细胞凋亡降低宿主的免疫反应。PB1-F2蛋白介导的细胞杀伤作用通过阻碍专职抗原递呈细胞对后天免疫的调节而增加继发细菌感染的可能性,从而使病毒的致病性增加。现就PB1-F2蛋白结构与功能方面的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 A型流感病毒 PB1-f2蛋白 结构与功能
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A型流感病毒PB1-F2蛋白与蛋白激酶R相互作用研究
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作者 于洪敏 金新 +2 位作者 张茂林 段铭 关振宏 《动物医学进展》 北大核心 2017年第5期1-5,共5页
为研究A型流感病毒的重要毒力因子PB1-F2对蛋白激酶R(PKR)的调控机制,通过纯化GST-PB1-F2融合蛋白,利用GST pull-down试验证实了PB1-F2与PKR发生相互作用;采用免疫荧光试验进一步验证了二者的相互关系;实时荧光定量PCR表明PB1-F2能负调... 为研究A型流感病毒的重要毒力因子PB1-F2对蛋白激酶R(PKR)的调控机制,通过纯化GST-PB1-F2融合蛋白,利用GST pull-down试验证实了PB1-F2与PKR发生相互作用;采用免疫荧光试验进一步验证了二者的相互关系;实时荧光定量PCR表明PB1-F2能负调控PKR及IL-6的mRNA水平;采用siRNA干扰PKR基因的表达后,PB1-F2抑制IL-6的mRNA转录作用更显著。进一步运用蛋白免疫印迹方法检测了PB1-F2对PKR及其底物eIF-2α蛋白磷酸化水平的影响,显示过表达PB1-F2后,PKR及eIF-2α的磷酸化表达水平明显下调。本研究表明PB1-F2与PKR相互作用而抑制PKR磷酸化活化,并通过PKR调控IL-6的表达,为探索PB1-F2的未知生物学功能提供了重要信息。 展开更多
关键词 A型流感病毒 PB1-f2 蛋白激酶R 蛋白磷酸化
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胶质瘤中叉头框蛋白N2与F2的表达及意义
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作者 张佳 罗潇潇 +2 位作者 郭忻然 吴锋 郑兰荣 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期160-165,共6页
目的 观察叉头框蛋白N2(FOXN2)与叉头框蛋白F2(FOXF2)在正常脑组织和各级别胶质瘤中的表达情况,探讨两者与胶质瘤级别的关系,推测其在胶质瘤发生发展中的作用,为胶质瘤的治疗寻找可能的药物治疗靶点。方法 从皖南医学院弋矶山医院病理... 目的 观察叉头框蛋白N2(FOXN2)与叉头框蛋白F2(FOXF2)在正常脑组织和各级别胶质瘤中的表达情况,探讨两者与胶质瘤级别的关系,推测其在胶质瘤发生发展中的作用,为胶质瘤的治疗寻找可能的药物治疗靶点。方法 从皖南医学院弋矶山医院病理科调取36例2016年1月~2020年12月脑胶质瘤患者手术切除的胶质瘤组织标本,双盲法进行免疫组织化学和免疫荧光染色检测FOXN2、FOXF2的表达情况;采用SPSS 18.0统计学软件进行分析,以P<0.05为差异有统计学意义。再对2020年1月~2021年1月皖南医学院弋矶山医院神经外科手术中获取的新鲜正常脑组织、低级别胶质瘤组织和高级别胶质瘤组织进行Western blotting、Real-time PCR实验(正常脑组织均来自外伤手术患者)。结果 免疫组织化学与免疫荧光结果表明,胶质瘤级别越高FOXN2与FOXF2的表达越低(P<0.05);Western blotting实验显示,正常脑组织及低级别胶质瘤中FOXN2和FOXF2表达都高于高级别胶质瘤组(P<0.05);Real-time PCR结果显示,正常脑组织中FOXN2和FOXF2的表达同样高于高级别胶质瘤组(P<0.01)。结论 FOXN2和FOXF2在正常脑组织中有表达,在胶质瘤中低表达且呈级别依赖性,提示FOXN2和FOXF2与胶质瘤的级别及不良预后有关,增强FOXN2和FOXF2的表达有望成为胶质瘤治疗的靶点。 展开更多
关键词 叉头框蛋白N2 叉头框蛋白f2 胶质瘤 免疫组织化学 免疫荧光 免疫印迹法 实时定量聚合酶链反应
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苗期叶面喷施大丽花轮枝孢激活蛋白(VdAL)对黄瓜商品苗贮藏质量的影响 被引量:26
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作者 孙风清 李娟起 +1 位作者 齐俊生 高丽红 《中国蔬菜》 北大核心 2016年第3期48-52,共5页
为了探究大丽花轮枝孢激活蛋白(Verticilliam dahliae Allergen Asp f2-like,VdAL)干粉制剂对黄瓜商品苗贮藏质量的影响,以黄瓜幼苗为试验材料,在育苗期进行了3次不同浓度叶面喷施处理,分析贮藏前与贮藏4 d后黄瓜幼苗质量相关指标以及... 为了探究大丽花轮枝孢激活蛋白(Verticilliam dahliae Allergen Asp f2-like,VdAL)干粉制剂对黄瓜商品苗贮藏质量的影响,以黄瓜幼苗为试验材料,在育苗期进行了3次不同浓度叶面喷施处理,分析贮藏前与贮藏4 d后黄瓜幼苗质量相关指标以及定植后3~6 d恢复生长指标。结果表明:1.25 g·L^(-1)大丽花轮枝孢激活蛋白处理可以显著增强黄瓜幼苗的耐贮运性,与其他处理相比,该处理浓度贮藏过程中叶绿素含量稳定,定植后恢复生长快,表明育苗期叶面喷施适宜浓度的大丽花轮枝孢激活蛋白,有利于提高黄瓜商品苗的贮藏质量。 展开更多
关键词 黄瓜幼苗 植物激活蛋白 大丽花轮枝孢激活蛋白(VdAL) 贮藏质量
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高蛋白大豆杂交F_2代与亲本蛋白质含量的相关分析 被引量:6
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作者 王新风 富健 +1 位作者 孟凡刚 马巍 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2008年第2期42-44,共3页
以8个蛋白质含量不同的大豆品种或品系为亲本进行杂交,获得杂种F2代相关资料,从而分析杂种F2代蛋白质含量与亲本的相关关系。结果表明,双亲蛋白质含量差异大,F2代蛋白质含量变异程度也大;双亲蛋白质含量高,F2代蛋白质含量高;F2代蛋白质... 以8个蛋白质含量不同的大豆品种或品系为亲本进行杂交,获得杂种F2代相关资料,从而分析杂种F2代蛋白质含量与亲本的相关关系。结果表明,双亲蛋白质含量差异大,F2代蛋白质含量变异程度也大;双亲蛋白质含量高,F2代蛋白质含量高;F2代蛋白质含量与母本及双亲中亲值呈极显著正相关,与产量呈负相关,与百粒重呈正相关;F2代蛋白质含量与亲本熟期差异呈负相关。 展开更多
关键词 大豆 高蛋白质含量 亲本 f2 相关性
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鸡γ-干扰素与新城疫病毒F蛋白抗原表位融合基因的构建与表达 被引量:1
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作者 刘雪兰 戴银 +3 位作者 程宝艳 彭明义 王骏俊 余为一 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第7期3862-3864,共3页
[目的]研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)的免疫佐剂功能,构建ChIFN-γ与新城疫F蛋白抗原表位(NDV F2-3)的融合基因,并进行原核表达。[方法]以头尾相连的方式构建鸡γ-干扰素基因与NDVF2-3的pET-32a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重... [目的]研究鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)的免疫佐剂功能,构建ChIFN-γ与新城疫F蛋白抗原表位(NDV F2-3)的融合基因,并进行原核表达。[方法]以头尾相连的方式构建鸡γ-干扰素基因与NDVF2-3的pET-32a重组质粒,经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后,重组子在E.coliBL21细胞进行IPTG诱导融合蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot方法分别检测表达的产物。[结果]获得了726 bpChIFN-γ与NDVF2-3融合基因,经原核表达,融合蛋白分子量约为35 000,能与相应的抗体结合。[结论]ChIFN-γ与NDVF2-3串联基因在原核细胞中能有效表达,且融合蛋白具有一定的免疫活性。 展开更多
关键词 鸡IFN-γ NDVf2-3 融合蛋白
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HSP70对大鼠TNF-α性发热及下丘脑中PGE_2含量的影响 被引量:1
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作者 李妍 吴晓岚 +2 位作者 刘利丹 曹宇 赵书芬 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第4期223-225,229,共4页
目的探讨HSP70是否参与热限作用及可能的机制。方法通过热应激刺激大鼠HSP70表达,观察HSP70对TNF-α性发热时的体温的影响,并用放射免疫法检测下丘脑中PGE2含量的变化。结果HS+TNF-α组的体温变化最大值△Tmax(0.78±0.45)℃、TRI8... 目的探讨HSP70是否参与热限作用及可能的机制。方法通过热应激刺激大鼠HSP70表达,观察HSP70对TNF-α性发热时的体温的影响,并用放射免疫法检测下丘脑中PGE2含量的变化。结果HS+TNF-α组的体温变化最大值△Tmax(0.78±0.45)℃、TRI8为4.86±2.15、下丘脑PGE2含量为(595.1±143.56)分别低于TNF-α组的△Tmax(1.85±0.46)℃、TRI8(10.41±2.66)、下丘脑PGE2含量(816.99±105.44)。两组相比上述各指标差异均有显著(P<0.01)。结论HSP70的高水平表达可降低TNF-α性发热程度,此作用可能与抑制下丘脑PGE2的生成有关。 展开更多
关键词 发热 热休克蛋白70 肿瘤坏死因子α PGE2 大鼠
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甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与宿主蛋白的相互作用的初步研究 被引量:1
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作者 冯发深 何霞 +4 位作者 王铸 徐霖 张定梅 关琳琳 曹开源 《热带医学杂志》 CAS 2012年第6期657-660,F0004,共5页
目的利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据。方法以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2... 目的利用酵母双杂交技术研究甲型H3N2流感病毒截短型PB1-F2蛋白与人类宿主蛋白的相互作用,为该病毒蛋白的功能研究和致病机制提供理论依据。方法以本实验室分离和鉴定的甲型H3N2流感病毒A/Guangdong/7028/2010为模版,构建pGBKT7-PB1-F2重组载体,利用Y2HGold酵母双杂交系统,从人类通用cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白。结果成功构建含诱饵蛋白基因的pGBKT7-PB1-F2重组载体,转化酵母自激活和毒性实验显示为阴性;酵母双杂交实验显示Y2HGold和Y187酵母的结合率为5.22%,符合实验要求;经筛选和验证后,得到3个与截短型PB1-F2蛋白有相互作用的阳性克隆,分别为钾/钠ATP酶β1亚基、热休克蛋白40和白介素-2受体γ亚基。结论初步推断截短型H3N2流感病毒PB1-F2蛋白可能影响流感病毒在宿主细胞中的复制功能和凋亡调控。 展开更多
关键词 甲型H3N2流感病毒 截短型PB1-f2蛋白 酵母双杂交 相互作用
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呼吸道合胞病毒F2蛋白与结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6蛋白的融合表达及纯化 被引量:1
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作者 岳婷婷 井申荣 +1 位作者 曾韦锟 黄芬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期324-327,共4页
目的在大肠杆菌中融合表达呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)F2蛋白与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)早期分泌抗原靶6(Early secretory antigenic target-6,ESAT-6)蛋白,并进行纯化。方法分别从MTB标准菌... 目的在大肠杆菌中融合表达呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)F2蛋白与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)早期分泌抗原靶6(Early secretory antigenic target-6,ESAT-6)蛋白,并进行纯化。方法分别从MTB标准菌株H37Rv及含F蛋白全长基因的pMD18-T-f质粒中扩增esat-6-f2基因,插入原核表达载体pET-30a中,构建重组表达质粒pET-30a-esat-6-f2,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,经镍离子亲和层析柱纯化。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;重组融合蛋白ESAT-6-F2相对分子质量约为21 000,主要以包涵体形式表达,可与小鼠抗His单克隆抗体特异性结合;纯化的融合蛋白纯度可达90%以上。结论成功在大肠杆菌中表达并纯化了重组融合蛋白ESAT-6-F2,为进一步研究其免疫原性和免疫保护性奠定了基础。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 f2蛋白 分枝杆菌 结核 早期分泌抗原靶6蛋白 融合蛋白 表达 纯化
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A型流感病毒PB1-F2蛋白与MOAP-1的相互作用
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作者 崔雨明 侯佩莉 +2 位作者 张茂林 段铭 关振宏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1122-1128,共7页
【目的】探讨A型流感病毒PB1-F2蛋白和人类凋亡调节因子1(MOAP-1)之间的相互作用。【方法】构建pACT2-MOAP-1重组质粒,与pGBKT7-PB1-F2质粒共转化酵母AH109,检测转化菌在四缺培养基的生长情况及β半乳糖苷酶报告基因的活性;利用GST pull... 【目的】探讨A型流感病毒PB1-F2蛋白和人类凋亡调节因子1(MOAP-1)之间的相互作用。【方法】构建pACT2-MOAP-1重组质粒,与pGBKT7-PB1-F2质粒共转化酵母AH109,检测转化菌在四缺培养基的生长情况及β半乳糖苷酶报告基因的活性;利用GST pull-down和免疫共沉淀(Co-IP)技术进一步验证PB1-F2与宿主细胞蛋白MOAP-1的相互作用;通过过表达PB1-F2和MOAP-1,检测PB1-F2对MOAP-1蛋白表达水平的影响。【结果】酵母双杂交结果表明,PB1-F2和MOAP-1可以在酵母细胞内特异性结合。GST pull-down和Co-IP实验也进一步证实了这两种蛋白的相互作用,而且PB1-F2可上调外源MOAP-1的蛋白水平。【结论】流感病毒PB1-F2与MOAP-1存在相互作用,PB1-F2可能通过与MOAP-1的相互作用参与调控细胞生长及凋亡过程。 展开更多
关键词 A型流感病毒 PB1-f2 MOAP-1 蛋白相互作用
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NGF蛋白及前列腺F2α受体与子宫腺肌病痛经的相关性研究 被引量:4
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作者 张细庆 陈文玲 +3 位作者 胡月娇 万萍 付婷婷 唐丽娟 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第11期2155-2158,2178,共5页
目的:研究NGF蛋白及前列腺F2α受体(PTGFR)与子宫腺肌病痛经的相关性。方法:选择我院2016年7月~2017年7月收治的36例子宫腺肌病痛经患者,按视觉模拟评分法(VAS)将痛经程度分为11例轻度组、14例中度组、11例重度组。同期选择36例月经正... 目的:研究NGF蛋白及前列腺F2α受体(PTGFR)与子宫腺肌病痛经的相关性。方法:选择我院2016年7月~2017年7月收治的36例子宫腺肌病痛经患者,按视觉模拟评分法(VAS)将痛经程度分为11例轻度组、14例中度组、11例重度组。同期选择36例月经正常者作为对照组。比较各组血清NGF蛋白和血浆PTGFR水平,分析二者和痛经评分之间的相关性及其单独和联合检测时诊断子宫腺肌病痛经的敏感性、特异性及受试者工作特征(ROC)曲线下面积。结果:子宫腺肌病痛经组血清NGF蛋白和血浆PTGFR水平均显著高于对照组(P<0.05)。轻度痛经组血清NGF蛋白及血浆PTGFR水平均显著低于中度组和重度组(P<0.05)。血清NGF蛋白和血浆PTGFR水平和子宫腺肌病痛经评分均呈显著正相关,r分别为0.812,0.884(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示血清NGF蛋白联合血浆PTGFR蛋白检测诊断子宫腺肌病痛经的ROC曲线下面积明显大于血清NFG蛋白及血浆PTGFR水平单独检测(P<0.05)。结论:NGF蛋白和PTGFR可能参与了子宫腺肌病痛经的发生和发展,二者联合检测有助于诊断子宫腺肌病痛经。血清NGF蛋白水平及血浆PTGFR蛋白水平和子宫腺肌病痛经程度呈正相关。 展开更多
关键词 子宫腺肌病 痛经 神经生长因子蛋白 前列腺f2α受体 相关性
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不同浓度大丽花轮枝孢激活蛋白对草莓产量和品质的影响
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作者 赵磊 孙海 +5 位作者 李小凤 王洪宇 王步云 魏肖楠 郑书恒 乔岩 《东北农业科学》 2024年第3期75-79,共5页
大丽花轮枝孢激活蛋白(VDAL)是一种新型植物免疫激活蛋白,叶面喷施后可调节植物激素的信号传导途径,通过调节植物钙调蛋白(CaM)、脂氧合酶2(LOX 2)等,激活植物自身的免疫机制,诱导植物产生系统抗性,促进植物生长发育。本试验进行了红颜... 大丽花轮枝孢激活蛋白(VDAL)是一种新型植物免疫激活蛋白,叶面喷施后可调节植物激素的信号传导途径,通过调节植物钙调蛋白(CaM)、脂氧合酶2(LOX 2)等,激活植物自身的免疫机制,诱导植物产生系统抗性,促进植物生长发育。本试验进行了红颜草莓叶面喷施不同浓度VDAL的研究,通过对果实数量、重量和畸形果数的调查和对营养成分含量的检测,评价VDAL对红颜草莓产量和品质的影响。结果表明,VDAL 3000倍液处理组与清水对照处理相比,草莓果实数量增加10.64%,产量提高6.85%,Vc含量提高29.66%,可溶性糖含量提高21.04%,畸形果率降低7.13%。红颜草莓自盛花期开始,连续叶面喷施VDAL 3次,每次间隔20 d,能增加草莓的果实数量和产量,提高Vc含量和可溶性糖含量,降低畸形果率。 展开更多
关键词 植物激活蛋白 大丽花轮枝孢激活蛋白(VDAL) 草莓产量 果实品质
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1968-2014年中国甲型H3N2流感病毒PB1基因进化分析 被引量:4
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作者 郭艳 颜文娟 +5 位作者 邓斐 余慧燕 王慎骄 汤奋扬 祁贤 卫平民 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期593-600,共8页
【目的】分析季节性H3N2流感病毒PB1基因序列的变异情况,揭示H3N2流感病毒PB1基因的分子特征与进化趋势。【方法】对1968-2014年中国地区82株人H3N2毒株、2012-2014年江苏省分离的81株甲型H3N2流感病毒、6株SIV和4株AIV H3N2亚型PB1、PB... 【目的】分析季节性H3N2流感病毒PB1基因序列的变异情况,揭示H3N2流感病毒PB1基因的分子特征与进化趋势。【方法】对1968-2014年中国地区82株人H3N2毒株、2012-2014年江苏省分离的81株甲型H3N2流感病毒、6株SIV和4株AIV H3N2亚型PB1、PB1-F2基因进行分子进化分析。【结果】1968-2014年中国H3N2流感毒株PB1核苷酸和氨基酸相似性分别为90.91%-100%和96.91%-100%。系统进化树分析,1968-2014年共173株H3N2流感病毒总体上分为4个分支,2002-2014年分离毒株位于第IV分支上,1968-1994年分离毒株位于第II和III分支;猪源H3N2亚型分布于第I、II、IV分支上;分子特征显示PB1氨基酸52、113、179、216、576、586、619、621、709位在2002年以后发生适应性改变,替换了原来的氨基酸;PB1-F2基因编码截断型蛋白长度有52、34、25、24、11 aa(猪源),PB1-F2蛋白毒力关键位点上未出现高致病性特征突变。【结论】自1968年起H3N2亚型PB1基因变异逐步趋于稳定,且PB1-F2截断型毒株正逐渐成为一类新的进化特征,但PB1基因与其他亚型之间发生重配以及关键毒力位点的变异仍应是监测的重点。 展开更多
关键词 H3N2流感病 PB1基因 PB1-f2蛋白 进化分析
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燃煤型氟中毒人群血清氧化应激产物水平比较 被引量:3
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作者 陈修文 万昌武 +3 位作者 张思雨 罗勇 齐晓岚 李毅 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期824-827,共4页
目的通过观察氟中毒病区中人群血清氧化应激产物水平,进一步探讨氟中毒时损伤的发生机制,并为筛选地方性氟中毒早期诊断提供依据。方法选取贵州省六盘水市陡箐乡氟暴露区165名儿童与成人为实验组,同市花嘎乡非病区90名儿童与成人作为对... 目的通过观察氟中毒病区中人群血清氧化应激产物水平,进一步探讨氟中毒时损伤的发生机制,并为筛选地方性氟中毒早期诊断提供依据。方法选取贵州省六盘水市陡箐乡氟暴露区165名儿童与成人为实验组,同市花嘎乡非病区90名儿童与成人作为对照组,采集清晨空腹血液、尿液,分别检测尿氟及血清中丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-oHdG)、8-异前列腺素F 2α(8-iso-PGF 2α)和晚期氧化蛋白产物(AOPPs)水平,分析其与氟斑牙及机体氟荷载的关系。结果病区成人血清8-oHdG(1.73±0.62)ng/mL、8-iso-PGF2α(256.29±105.95)pg/mL、AOPPs(61.10±27.33)μmol/L,均高于成人对照组(P<0.05),而在病区组儿童仅8-iso-PGF 2α(181.22±77.24)pg/mL高于对照组(P<0.05);结合氟斑牙程度的分析显示,血清8-iso-PGF 2α儿童在轻度氟斑牙(184.87±73.14)pg/mL时即明显高于对照组(P<0.05)。结论氟中毒人群存在脂质、蛋白、DNA多方面损伤,其中脂质损伤发生较早;血清8-iso-PGF 2α能较早反映机体的氧化应激状态,可作为筛选早期氟中毒病例的指标之一。 展开更多
关键词 氟中毒 氧化应激 8-iso-PGF 8-o HD G AOPPs
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