樱桃远缘杂交种离体叶片再生植株的研究

在F14培养基蔗糖浓度由原来2%增加到8%培养下,F8继代试管苗增殖倍数由2-3增加到15-20,叶片由黄绿色变为浓绿油亮,保持天数由原来的15d增加到70d。经过4步骤程序培养可以获得小叶片再生,即:①将普通继代试管苗接入F14(附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA30.2mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L,pH5.8)继代培养30d,获得小叶型高分化试管苗。②剪取苗顶端未展开小叶片并且横切至叶中脉2-3刀后将小叶片,先在0.1%VC无菌水中浸泡5到30m in,然后接入MS或F14或WPM(附加6-BA2.0mg/L+2,4-D2.0mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L,pH5.8)进行光照培养3-4d,获得剪切口组织脱分化的小叶片。③转接1/2大量元素的WPM培养基(附加6-BA2.0mg/L+IAA2.0mg/L+蔗糖4%+琼脂7.0g/L,pH5.8)及在环境控制(15h/24h光周期变化,光照2000 lx,温度20℃;黑暗,温度15℃)下培养20-30d,得到诱导出红色愈伤组织(含有花色苷)的小叶片。④转接F14培养基(附加6-BA0.5mg/L+IBA0.05mg/L+GA32.0mg/L+蔗糖6%+琼脂7.0g/L,pH5.8)培养20d后得到由红色愈伤组织中萌发出不定芽,同时颜色变淡。小叶片再生不定芽率可达87.1%。